孙晨宇;王本忠;裴静;许骏;张一聪
目的:研究缬沙坦对人冠脉内皮细胞( HCAEC)氧化应激过程中gp91 Phox的影响。方法对照组:体外贴壁培养HCAEC,不进行其他干预;实验组:相同培养条件下加入缬沙坦(10μmol/L)培养24 h。应用Western blot法和细胞免疫荧光法测定两组细胞中gp91 Phox的水平,对两组结果进行统计分析并比较。结果实验组HCAEC中gp91 Phox的水平明显低于对照组,差异有统计学意义( P<0.01)。结论缬沙坦可以显著减少HCAEC中尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶亚基gp91Phox的表达,从而降低氧化应激水平。
作者:王成;韩卫星;吴继军;刘超;刘晓颖 刊期: 2014年第06期
目的:探讨冠状动脉三维可视化系统(V1.02)在冠心病介入诊疗中的应用效果。方法收集冠状动脉慢性完全闭塞病变( CTO)患者121例,根据是否使用三维可视化系统进行经皮冠状动脉介入治疗( PCI)分组,60例为对照组,单独采用冠状动脉介入影像定量分析系统辅助PCI。61例为观察组,结合三维可视化系统( V1.02)辅助PCI。分析比较两组患者介入术成功率,严重并发症发生情况和对医患X线辐射暴露时间的影响。结果观察组和对照组介入成功率分别为88.5%(54/61)和73.3%(44/60),差异有统计学意义(P<0.05);介入并发症发生率分别为3.3%(2/61)和16.7%(10/60),差异有统计学意义(P<0.05);手术时间分别为(75.9±9.2) min和(101.5±15.8) min,差异有统计学意义( P<0.01)。结论三维可视化系统( V1.02)应用于CTO介入诊疗中,可以明显提高手术成功率,减少冠状动脉痉挛、血管夹层及血管穿孔破裂等并发症,缩短医患X线辐射暴露时间,值得在临床上进一步推广。
作者:何云;晋军;成小凤;胡建波;何永铭 刊期: 2014年第06期
目的:探讨天麻素预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤( MIRI)作用的可能机制。方法健康SD大鼠60只,随机分为假手术组,MIRI组,天麻素低、中、高剂量组(0.1、0.2、0.4 g/kg),采用结扎大鼠左冠状动脉前降支30 min,再灌注120 min的方法制备MIRI模型,分别测定血清及心肌组织中肿瘤坏死因子-α( TNF-α)和白介素-6( IL-6)的变化以及心肌组织中肌浆网Ca2+-ATP酶( SERCA)的变化。结果0.2、0.4 g/kg 天麻素预处理后,血清及心肌组织中TNF-α和IL-6的含量均降低(P<0.05),心肌组织中SERCA的含量均升高( P<0.01)。结论天麻素预处理减轻大鼠MIRI的机制可能与减少炎症因子TNF-α和IL-6的释放以及增加SERCA含量有关。
作者:位凯;王飞;张瑾;李珍;沈兵;王烈成;孔德虎;胡金兰 刊期: 2014年第06期
目的:探讨金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)对巨噬细胞自噬的影响,并研究其在巨噬细胞吞噬病原微生物中的作用。方法以小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7为研究对象,以磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)为干预药物,空白处理作为对照组,金葡菌感染作为实验组,3-MA干预作为抑制组。金葡菌感染细胞后,Western blot检测自噬蛋白Beclin1、LC3以及吞噬相关蛋白Rac1的表达,激光共聚焦显微镜观察自噬、吞噬现象。结果金葡菌感染RAW264.71 h后,实验组LC3Ⅱ和PI3K蛋白表达强( P<0.05),抑制组Beclin1和LC3Ⅱ表达显著降低(P<0.05),自噬颗粒聚集显著减少( P<0.05), Rac1表达显著降低( P<0.05),同时,RAW264.7吞噬金葡菌数目显著减少(P<0.05)。结论金葡菌诱导的自噬增强了巨噬细胞吞噬能力,自噬抑制剂3-MA抑制PI3K活性的同时,减弱了巨噬细胞自噬吞噬金葡菌的能力。
作者:吕允相;吴惠梅;方磊;刘荣玉 刊期: 2014年第06期
养,每天取1块培养板用CCK-8检测其吸光度值( OD)。结果 CD45阴性表达,CD29、CD90、CD44阳性表达,3种完全培养基培养的BMSCs的表面标志物在前2代时差别较大,但在P3,P4时差别已较少,P4时均可以获得较纯的BMSCs;细胞周期结果显示,在同一时间点,G0/G1期:A、B、C 3组随着FBS浓度的增加,G0/G1期降低且差异无统计学意义;G2/M期:在培养后的24 h,A、B、C 3组差异有统计学意义( P<0.05,F=12.412),但随着时间的延长,差异消失;S期,3组均无差别;S+G2/M期随FBS浓度的增加而增高。细胞活力结果显示,在24 h时A、B、C 3组的OD值依次增大,差异有统计学意义(P<0.05,F=5.002),随时间的延长3组之间无明显差异。结论这3种培养基在 P4能获得较纯的BMSCs;细胞周期及活力结果显示,3种完全培养基均能促进BMSCs的增长,3组之间不存在差异。体积分数为0.10的FBS已满足BMSCs的分离和扩增,要想在短期内获得较纯的BMSCs,原代培养使用体积分数为0.15,传代用0.10 FBS的完全培养基。
作者:陈小丹;何家才 刊期: 2014年第06期
采用垂直双蒂结合腺体旋转蒂法,对7例乳房肥大患者行改良McKissock法切除乳房下方及两侧的乳腺组织,且保留乳头外上方部分腺体共同为蒂(蒂部保留了T4肋间神经外侧皮质深浅支),旋转折叠腺体,固定于乳晕下方。该组患者,除1例右侧乳房乳晕下术区血肿(经处理后恢复、无感觉丧失),其余患者术后乳房形态良好,乳头乳晕感觉正常或稍减退,色泽如常;切口均Ⅰ期愈合。
作者:李凤;曹东升;谢娟;李红红;陈增红;朱邦中;鲍琼 刊期: 2014年第06期
目的:探讨精神分裂症患者快感缺失与童年创伤经历的关系。方法采用中文版修订社会快感缺失量表(RSAS-C)、中文版修订躯体快感缺失量表(RPAS-C)和童年创伤问卷( CTQ)对198例精神分裂症患者和271例正常健康者进行评估,分析快感缺失与童年创伤间的关系。结果患者组RSAS-C评分(13.32±6.12)、RPAS-C评分(19.04±8.53)、CTQ总分(47.63±13.49)及其各因子分均显著高于正常组(分别为10.40±5.05,16.80±7.89,38.82±10.05),差异有统计学意义( P<0.05);患者组RSAS-C评分、RPAS-C评分与阳性与阴性症状量表( PANSS)总分及阴性症状分均呈正相关(rs =0.266~0.439,P<0.01);患者组RSAS-C评分(rs =0.419,P<0.01)和RPAS-C评分(rs =0.322,P<0.01)与CTQ总分呈正相关,控制PANSS总分后,快感缺失评分与童年创伤评分间的相关性仍存在。结论精神分裂症患者快感缺失程度较高,与童年创伤经历之间存在关联,提示早年的创伤经历可能会影响个体对躯体及社会交往快乐的体验能力。
作者:马玉婷;董毅;汪凯;赵菁;王龙;刘勇;张玉;李慧;耿峰;陈学全 刊期: 2014年第06期
选取神经外科住院患者147例为研究对象。利用Sysmex 4000全血细胞分析仪检测患者红细胞分布宽度( RDW)、血红蛋白( Hb)、白细胞计数( WBC)、红细胞平均体积( MCV)等指标,根据患者的各项生理参数和实验室检查结果的进行急性生理功能和慢性健康状况Ⅱ评分(A-PACHE-Ⅱ),同时运用受试者工作特征曲线( ROC曲线)评价RDW对重型颅脑损伤患者住院死亡率的预测价值。重型颅脑损伤患者RDW值随着APACHE Ⅱ评分和患者死亡率的增高而逐渐升高,且3组间RDW值差异有统计学意义(P<0.05)。 ROC曲线分析显示,当RDW和APACHE Ⅱ评分在预测重型颅脑损伤患者住院死亡率时的曲线下面积分别为0.68和0.61,两者联合曲线下面积为0.71。
作者:王宝凤;姚艳丽;杨凯;袁靖中 刊期: 2014年第06期
目的:研究葛根总黄酮对去势大鼠骨质疏松的保护作用。方法10周龄SPF级SD 雌性大鼠随机分为正常组、假手术组、去势模型组、替勃龙组(1.25 mg/kg)和葛根总黄酮(50、100、200 mg/kg)给药组。各给药组按上述剂量灌胃给药,每天1次,持续12周。12周后,双能X射线骨密度仪测定各组大鼠右股骨骨密度(BMD)和骨矿物含量(BMC),三点弯曲实验测左股骨生物力学的性能,左胫骨HE染色做组织形态学分析。 ELISA法测尿液的羟脯氨酸( HOP)、血清骨特异性碱性磷酸酶( BALP)、卵泡生成素( FSH)、黄体生成素(LH)和雌激素(E2)水平,RT-PCR法检测下丘脑促性腺激素释放激素( GnRH) mRNA的水平。结果葛根总黄酮(100、200 mg/kg)可显著增加去势大鼠右股骨BMD、左股骨生物力学性能,上调下丘脑GnRH mRNA表达,并可降低尿液HOP、血清BALP、FSH和LH的水平,减少骨吸收。结论葛根总黄酮对去势大鼠的骨质疏松有保护和预防性治疗的作用。
作者:陈冠儒;陈飞虎;葛金芳;王晓宇;詹侠;朱娇;武超 刊期: 2014年第06期
目的:考察儿茶素对实验性大鼠心力衰竭(简称心衰)模型的保护作用。方法采用腹主动脉结扎制备大鼠心衰模型;通过心衰大鼠血流动力学、心脏重量指数、血管紧张素Ⅱ( AngⅡ)、醛固酮( ALD)和心钠肽( ANP)含量水平评价儿茶素疗效。结果心衰大鼠血流动力学明显紊乱,心脏重量指数显著增加,同时AngⅡ、ALD和ANP浓度水平明显上升;儿茶素50、100 mg /( kg·d)连续2周治疗给药后能明显改善心衰大鼠血流动力学、降低心脏重量指数、下调AngⅡ、ALD和ANP的含量水平。结论儿茶素对大鼠心衰具有明显保护作用。
作者:章琦;胡立群;尹长森;陈萍;李红旗;孙新;严光 刊期: 2014年第06期
目的:观察基质金属蛋白酶1( MMP-1)及其抑制剂(TIMP-1)在白藜芦醇治疗佐剂性关节炎(AA)的滑膜组织和关节软骨中的表达,探讨MMP-1及TIMP-1的异常表达是否参与AA的发病机制。方法60只SD大鼠随机分为2组:正常组(10只),模型组(50只)。模型组弗氏完全佐剂注射诱导关节炎12 d后,在其足趾出现继发性免疫炎症反应时,又随机分成4组:模型对照组、白藜芦醇低剂量组(5 mg/kg)、白藜芦醇高剂量组(15 mg/kg)、阳性对照雷公藤多苷组(100 mg/kg)。大鼠每天均灌胃给予溶媒或药物,持续16 d后处死大鼠;免疫组化法检测滑膜组织MMP-1、TIMP-1表达;滑膜组织匀浆,Western blot法检测MMP-1、TIMP-1蛋白含量。结果白藜芦醇能明显抑制模型组大鼠病理损害程度,模型组滑膜组织MMP-1、TIMP-1高表达,白藜芦醇治疗组能抑制MMP-1、TIMP-1的高表达,在抗关节炎的作用上有相关性。结论白藜芦醇具有抑制AA大鼠的炎症作用,防止关节退变的病理变化,其机制与调节大鼠的基质金属蛋白酶在滑膜组织和关节软骨的表达有关。
作者:安梅;孙和炎;卢锦森;马中飞;纵何香;叶桂萍;郭利梅;何舒宁;陈晓宇 刊期: 2014年第06期
目的:检测热休克蛋白75( Mortalin)在肝细胞癌中的表达,探讨其与血管生成和上皮间质转化( EMT)的关系。方法收集100例原发性肝癌( HCC)患者的癌组织和癌旁组织及10例正常肝组织,采用免疫组织化学染色、Western blot和qPCR检测Mortalin的表达,分析Mortalin表达与肝癌临床病理特征之间的关系。同时分析100例HCC患者癌组织中Mortalin、波形蛋白( Vimentin)和微血管密度( MVD)的表达情况,判断Mortalin的表达与EMT、肿瘤血管生成之间的关系。结果免疫组织化学显示Mortalin主要表达在细胞质中。肝癌组织中高表达Mortalin的比率是77%,显著高于癌旁组织的19%和正常组织的10%(χ2=67.388,16.669;P<0.01)。 Mortalin的高表达与肝癌Edmondson分级、TNM分期、血管侵犯和淋巴结转移有关(P<0.05)。 Western blot和qPCR检测结果显示肝癌组织中Mortalin相对含量明显高于癌旁和正常组织( P<0.05)。免疫组织化学染色检查显示,肝癌组织中Mortalin的表达与Vimentin的表达存在正相关(r=0.235, P<0.05),而高表达Mortalin的肝癌组织比低表达的有更高的MVD的趋势,但差异无统计学意义( t=1.630, P>0.05)。结论 Mortalin不能促进肝癌血管形成,但可能通过诱导肝癌组织的 EMT而参与肝癌的侵袭和转移。
作者:陈静;李建生;刘文斌;荚卫东;许戈良;马金良;余继海;葛勇胜 刊期: 2014年第06期
目的:研究乳源抗菌-免疫调节融合肽( AIFP)对卵巢癌细胞增殖、凋亡的影响。方法采用MTT法测定AIFP对卵巢癌细胞株SKOV3细胞和原代培养的卵巢癌细胞增殖的影响;流式细胞术测定AIFP对SKOV3细胞和原代卵巢癌细胞凋亡、周期的影响;并用RT-PCR检测 AIFP 对 SKOV3细胞及原代癌细胞凋亡和周期相关基因表达水平的影响,以探讨其可能机制。结果 MTT法显示,AIFP对卵巢癌细胞的增殖具有抑制作用,且具有时间和剂量依赖性,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。流式细胞术检测结果显示,AIFP诱导卵巢癌细胞的凋亡,具有剂量和时间依赖性,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。 RT-PCR结果表明,AIFP可以影响细胞凋亡和细胞周期相关基因(Akt、CDC25C 和cyclinB1)的表达。结论 AIFP 上调卵巢癌细胞凋亡和周期相关基因 Akt、CDC25C和cyclinB1的表达,对卵巢癌细胞株SKOV3具有抑制增殖和促进凋亡的作用。
作者:唐宜桂;李小勤;刘琛;雷婷;秦宜德 刊期: 2014年第06期
对志愿者头颅部进行螺旋CT扫描,利用Mimics软件进行实体模型的重建,优化后导入Ansys 软件中赋值及网格划分,建立左侧下颌第一磨牙缺失的包含微型种植体、直丝弓托槽、牙列、牙周膜、牙槽骨的下颌三维有限元模型,实验模拟与临床基本相符。
作者:吴映燕;蒋勇;陈琳 刊期: 2014年第06期
目的:研究非诺贝特改善非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠的胰岛素抵抗是否与内质网应激( ERS)有关。方法采用高热量高胆固醇饮食( HCD )建立 NAFLD小鼠模型,非诺贝特40 mg/( kg·d)灌胃治疗2周,葡萄糖耐量试验( GTT)和胰岛素耐量试验( ITT)分析胰岛素抵抗的改善作用,检测血清血脂和丙氨酸氨基转移酶( ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)指标,HE及油红O染色观察肝脏组织的病理学变化,Real-time PCR和Western blot法检测过氧化物酶体增殖物激活受体α( PPARα)、ERS标志物葡萄糖调节蛋白78( GRP78)和转录因子 GADD153( CHOP )的表达。结果与正常饮食( SCD)组相比,HCD组小鼠胰岛素抵抗明显,血清三酰甘油( TG)、总胆固醇( TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)显著升高(P<0.01,P<0.05),高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显降低(P<0.01),肝细胞内有大小不等的脂滴形成,可见气球样变的肝细胞及炎性细胞浸润;PPARα、GRP78 mRNA 及蛋白表达显著降低, CHOP mRNA及蛋白表达显著升高。与 HCD 组相比, HCD +非诺贝特( HCF)组小鼠血清TG明显降低( P<0.05),肝细胞脂滴含量、变性肝细胞及浸润的炎细胞明显减少, PPARα、GRP78 mRNA及蛋白表达明显升高,CHOP mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论非诺贝特有明显的改善NAFLD小鼠胰岛素抵抗、降低TG的作用,这可能与激活PPARα及减轻ERS有关。
作者:沈馨茹;鲁云霞;章秋 刊期: 2014年第06期
目的:运用Meta分析方法评价中国人群中血清胸腺激酶1(TK1)与乳腺疾病的相关性。方法通过计算机检索中国知网( CNKI)、万方、维普、PubMed 数据库,结合文献追溯和采用公共搜索引擎( www. baidu. com; scholar. google. com)网上检索,收集所有关于中国人群中血清TK1与乳腺疾病的相关性的研究。以血清TK1与乳腺疾病的相关性的相对危险度(RR)值及标化均数差(SMD)值为效应指标,各资料间进行一致性检验,以确定采用固定或随机效应模型进行合并分析。发表偏倚通过漏斗图和Egger′s线性回归检验进行评估。统计分析应用RevMan5.1软件进行,Egger’ s线性回归检验选用STATA 10.0软件计算。结果共入选相关文献15篇, Meta分析显示血清TK1在乳腺癌患者与乳腺良性疾病患者及健康人群之间比较差异均有统计学意义(P<0.05);血清TK1在淋巴结转移及无转移组间以及不同分期间差异无统计学意义。结论血清TK1水平对乳腺癌及乳腺良性疾病的鉴别有一定的参考价值;而对预测及评估乳腺癌患者中是否存在淋巴结转移以及评估乳腺癌分期的参考价值较低。
作者:孙晨宇;王本忠;裴静;许骏;张一聪 刊期: 2014年第06期
肾性继发性甲状旁腺功能亢进( SHPT)是慢性肾脏病常见并发症之一,也是影响慢性肾脏病患者预后的重要因素,近年来成为研究热点。目前认为抗衰老蛋白α-Klotho与SHPT关系密切。现综述近年来α-Klotho对钙、磷代谢以及甲状旁腺激素的合成与分泌的影响,旨在进一步阐明α-Klotho蛋白在肾性SHPT发生、发展中的作用,进而为临床诊治提供科学依据。
作者:闫军放(综述);郝丽;张凌(审校) 刊期: 2014年第06期
目的:探讨非创伤性股骨头坏死局部组织中Ezrin表达的变化及其临床意义。方法采用免疫组化法和逆转录-聚合酶链反应( RT-PCR)对38例非创伤性股骨头坏死(实验组)和16例股骨颈骨折(对照组)组织中Ezrin的表达情况进行检测。结果实验组中Ezrin mRNA表达水平低于对照组,差异有统计学意义( P<0.01)。同时非创伤性股骨头坏死中Ezrin表达水平与性别、年龄、体重指数( BMI)、职业及病因无关,但与疾病分期有关。结论 Ezrin可能参与非创伤性股骨头坏死的发病过程,并可能起着重要调控作用。
作者:罗正亮;李旭;尚希福 刊期: 2014年第06期
目的:选用人巨细胞病毒( HCMV)抗原性强且亲水性较高片段构建融合抗原表达质粒,诱导其表达,纯化目的蛋白;并初步鉴定其免疫反应性。方法通过Protean软件分析了HCMV UL32、UL44、UL83序列,设计合理引物;各基因片段用Overlap方法连接,并引入BglⅡ、BamHⅠ酶切位点,使之可通过酶切与质粒pQE-80L连接。重组质粒转化入感受态BL21(DE3)菌株,经PCR、酶切鉴定目的基因后再诱导、表达、纯化,获得目的蛋白,采用Western blot法检测免疫反应性。结果诱导后的重组菌pQE80-L-UL32-UL44-UL83经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳( SDS-PAGE )证实蛋白表达在包涵体。纯化后获得大小约为52 ku的目的蛋白,采用Western blot法检测证实重组嵌合抗原能与HC-MV阳性血清有反应。结论构建了重组嵌合抗原表达质粒,并诱导、表达、纯化获得目的蛋白。 Western blot法鉴定嵌合抗原是HCMV特异性抗原且有免疫反应性。
作者:曾宪聪;汪小五;陈伟;王林定 刊期: 2014年第06期
目的:通过RNA干扰阻断T24细胞中Eg5基因的表达,研究Eg5基因对 T24细胞增殖和迁移的影响。方法T24细胞株分为3组:干扰组、空白对照组、阴性对照组。化学合成针对Eg5的小干扰RNA,通过脂质体转染至T24细胞中,应用Western blot法检测转染后T24细胞中Eg5蛋白表达,采用台盼蓝拒染实验检测细胞死亡率,用噻唑蓝( MTT)比色分析法和平板克隆形成实验检测细胞增殖抑制率,通过细胞划痕实验检测细胞的迁移能力。结果干扰组Eg5蛋白表达显著低于空白对照组和阴性对照组;干扰组细胞死亡率显著升高,与空白对照组及阴性对照组比较差异有统计学意义( P<0.05);干扰组的克隆形成率下降,与空白对照组和阴性对照组比较差异有统计学意义( P <0.05);MTT结果提示,干扰Eg5基因表达后,T24细胞的增殖率明显下降(P<0.05);划痕实验结果显示干扰组细胞迁移能力受到明显抑制(P<0.05)。结论 Eg5基因在膀胱移行细胞癌起重要作用,干扰Eg5基因能有效抑制T24细胞的增殖与迁移,促进细胞死亡,以Eg5为靶点有望成为膀胱癌基因治疗的新基因靶点。
作者:陈杰勋;于德新;张志强;王铮;谢栋栋;王毅;张涛 刊期: 2014年第06期