佘敦敏；章秋；邵宜波；杨洋
目的探索在体外诱导人骨髓间充质干细胞(hMSC)向心肌细胞分化的方法.方法以5-杂氮胞苷(5-Aza)对hMSC诱导,利用结蛋白抗体、房性利钠肽抗体以及闰盘蛋白抗体进行免疫组化染色,并进行超薄切片透射电镜观察.结果经反复多次传代后,细胞形态及抗原表达无改变,始终保持未分化状态和稳定扩增.利用5-Aza对其诱导后第2周始,免疫组化染色发现细胞结蛋白、闰盘蛋白以及房性利钠肽表达均为阳性,不同浓度5-Aza诱导组之间差异无显著性.电镜观察发现这些细胞具有心肌细胞的特点.结论在体外利用5-Aza可以诱导hMSC向心肌细胞分化.
作者：韩永生；褚俊；翟志敏；严激；周德存；胡闻；陈柯；严中亚 刊期： 2005年第02期
目的从Hep-2细胞(人喉鳞癌细胞)克隆人的FGF-2 cDNA,用于下一步构建携带hFGF-2cDNA的非复制型腺病毒载体.方法设计和合成引物,提取Hep-2细胞的总mRNA,通过RT-PCR扩增出目的cDNA,然后将其重组到pGEM-T Easy载体中送测序分析.结果经基因测序分析表明,从 Hep-2细胞克隆的hFGF-2 基因序列与已报告的序列,除在ATG后的第24位碱基发生无意突变外(由G→A),其他序列则完全一致.结论从Hep-2细胞的总mRNA中成功克隆出hFGF-2的基因片段.
作者：王帮河；何金生；汪春兰；赵宇；汪红俊；曹东升 刊期： 2005年第02期
目的引进单细胞凝胶电泳(SCGE)实验方法,用以检测小鼠胸腺细胞DNA链断裂.方法载有经紫外线和H2O2作用过的胸腺细胞和凝胶的玻片首先在pH10的弱碱性裂解液中作用1 h,在电泳缓冲液中解旋30 min,电泳30 min,胸腺细胞核用20 mg/L的EB染色5 min,用荧光显微镜和显微细胞图像分析系统观察和分析H2O2和紫外线在体外条件下对正常胸腺细胞的DNA损伤作用.结果紫外线和不同浓度H2O2 0.001、0.01、0.1、1.0 mmol/L均可导致小鼠胸腺细胞DNA损伤,且随着H2O2浓度的增加DNA损伤逐渐加重.结论 SCGE可用于检测小鼠胸腺细胞DNA链断裂,使用这一实验方法成功地检测出H2O2和紫外线引起的胸腺细胞DNA损伤.
作者：吴庆四；徐迎春；姬艳丽；杨媛媛；姚余有 刊期： 2005年第02期
目的探讨体外皮肤移植模型(VSEM)预测移植器官移植物抗宿主反应(GVHR).方法供、受鼠配对后移植卵巢,同时将受鼠淋巴结与供鼠脾淋巴细胞悬液混合培养6～7 d,再加入受鼠耳皮继续培养,制成VSEM.将第12、30天受鼠的移植卵巢、脾和VSEM按病理变化分级.结果第12天VSEM分别与移植卵巢、脾的GVHR相同等级达77%,而且三者浸润细胞类型、数量与受损形式大致相仿;第30天VSEM预测卵巢、脾的GVHR相同等级与第12天的差异无统计学意义.第30天VSEM与卵巢浸润炎性细胞数量、类型差异较大.结论 VSEM预测急性和慢性GVHR准确度相差不大,预测移植器官急性病理变化准确度较高.
作者：楼皖玲；潘家华 刊期： 2005年第02期
目的探讨自由臂三维超声成像技术的临床应用价值.方法采用自由臂三维超声成像方法对43例各种疾病的患者进行三维重建.结果三维图像重建满意者38例,成功率88%.三维图像形象逼真,形态直观,立体感强,空间关系明确.结论自由臂三维超声成像技术在临床应用是可行的,可以提供二维超声图像不能提供的病灶形态学信息.
作者：张超学；张新书；王玲；郑慧；姜凡；段开诚；刘芳 刊期： 2005年第02期
目的建立大鼠胚脑皮层神经干细胞体外培养及鉴定技术,探讨其增殖分化特性,为应用神经干细胞移植治疗神经疾病提供基础.方法采用含有丝分裂源表皮生长因子(EGF)的无血清培养基培养SD大鼠孕14.5 d的胚胎大脑皮层神经干细胞,应用免疫细胞化学方法了解其增殖分化特性; 以单细胞克隆实验及BrdU免疫标记证实神经干细胞自我增殖能力.结果培养细胞在EGF作用下可分裂增殖,并表达神经干细胞特异性抗原 nestin,分化细胞MAP2及GFAP抗原表达阳性.结论 SD大鼠胚脑皮层可分离培养出神经干细胞;并具有增殖、自我更新能力和多向分化潜能特性.
作者：任于果；陈先文；高宗良 刊期： 2005年第02期
目的探讨硅油填充术治疗复杂性视网膜脱离的效果及影响因素.方法对玻璃体切除联合硅油填充术治疗复杂性视网膜脱离49例(49眼)的临床资料进行分析.结果随访2～12个月,视网膜完全复位39眼(79.6%),部分复位8眼(16.3%),未复位2眼(4.1%).36眼术后视力≥0.01,占73.4%, 25眼术后视力≥0.05,占51.0%.结论玻璃体切除联合硅油填充术是治疗复杂性视网膜脱离的有效方法,合理使用硅油、及时处理并发症对术后视力的恢复为重要.
作者：张桦；张晓峰 刊期： 2005年第02期
目的探讨浸润性乳腺癌中整合素β1蛋白的表达及其与PTEN在乳腺癌侵袭转移中的关系.方法应用免疫组织化学S-P法检测98例浸润性乳腺癌组织整合素β1与PTEN蛋白的表达.结果腋淋巴结转移组中整合素β1阳性率显著高于无腋淋巴结转移组(P<0.01);组织学分级Ⅲ级者,整合素β1阳性率明显高于组织学分级Ⅰ、Ⅱ级者(P<0.01);整合素β1阳性率随肿瘤临床分期及肿瘤体积增加而升高,有显著性差异(P<0.05).整合素β1与PTEN蛋白表达呈显著负相关(P<0.01).PTEN蛋白高表达时,腋淋巴结转移组中整合素β1阳性率显著高于无腋淋巴结转移组(P<0.01),但PTEN蛋白低表达时,整合素β1阳性率在有无淋巴结转移组间无显著性差异(P>0.05).结论整合素β1蛋白是乳腺癌分化程度和转移的潜在生物学标志,其表达及其在乳腺癌侵袭转移中的作用可能部分地受到PTEN的调控.
作者：薛花；吴强；周隽；杨枫 刊期： 2005年第02期
目的探讨初孕年龄、产次与绝经后妇女骨密度(BMD)的关系.方法调查180名健康绝经后妇女年龄、初孕年龄、产次、绝经时间,并测量身高、体重、腰椎L2～4及左侧股骨近端(Neck、Ward三角、Troch)BMD.结果①初孕年龄≤20岁的绝经后妇女在L2～4及股骨近端各部位BMD值均低于初孕年龄在21～25岁者(Neck、Ward三角、Troch P<0.01,L2～4 P<0.05)和初孕年龄在26～30岁者(L2～4、Neck、Ward三角、Troch P<0.01),在L2～4、Neck、Ward三角部位低于初孕年龄>30岁者(Ward三角P<0.01,L2～4、Neck P<0.05).②随着产次的增加,股骨近端各部位BMD逐渐下降,产3次,产4次,产次≥5次各组BMD显著低于产1次和产2次组(P<0.01).③多因素分析显示:产次与股骨近端各部位BMD呈显著负相关,绝经年限与L2～4、Neck和Troch部位BMD呈显著负相关,初孕年龄与Neck和Troch部位BMD呈负相关.结论初孕年龄≤20岁的绝经后妇女腰椎和股骨近端BMD减低,产次影响绝经后妇女股骨近端各部位BMD.
作者：佘敦敏；章秋；邵宜波；杨洋 刊期： 2005年第02期
目的探讨采用蜕膜建立人子宫内膜异位症移植动物模型的可行性.方法将早孕期蜕膜组织种植于NOD-SCID鼠腹部皮下,随机分成4组,分别在2、4、6、8周,取出其皮下移植物送病理检查,并用免疫组织化学的方法观察其形态学、增殖活性方面有无改变.结果 16只小鼠均存活,有15只小鼠皮下病灶经HE染色可见明显的子宫内膜腺体和间质,成功率为93.75%.腺上皮细胞角蛋白、ki67染色均阳性,基质细胞波形蛋白染色阳性,8周移植物中一些基质细胞减少区域的腺上皮细胞波形蛋白染色阳性.结论采用人蜕膜建立NOD-SCID小鼠子宫内膜异位症模型成功率高,模型形状显著且稳定.
作者：王群华；凌斌；赵卫东；祝怀平；陈纲；陈柯；胡闻；朱园园；陈敏 刊期： 2005年第02期
目的探讨N-乙酰基转移酶1(NAT1)基因型检测方法及其基因多态性的分布.方法在140名汉族健康人的外周血中,应用聚合酶链反应(PCR)限制性片段长度多态性分析(RFLP)及多重PCR技术,进行NAT1等位基因分型研究.结果应用PCR-RFLP+多重PCR方法避免了多种限制性内切酶之间相互干扰,可准确区分NAT1基因型.在140名检测标本中,NAT1*3,NAT1*4,NAT1*10和NAT1*11的发生频率分别是8.2%、 49.6%、 40%和2.2%.NAT1*4发生率明显低于欧美人群,但高于东南亚人群;而NAT1*10的发生率高于欧美人群,NAT1*3和NAT1*11的发生率较低,与大多数亚洲人群基本一致.结论 PCR-RFLP+多重PCR方法检测NAT1基因型特异性高;NAT1基因型分布与其他国家检测情况有所差异.
作者：徐张巍；梅俏；许建明；胡乃中；胡咏梅 刊期： 2005年第02期
目的挑选出一种较为理想的体外受精(IVF)培养体系.方法 90例(91个周期)接受IVF/单精子胞浆内注射(ICSI)技术治疗的患者,卵母细胞的IVF及胚胎的体外培养分别采用GⅢ体系(A组,51周期,)和Quinn体系(B组,40周期).结果 A组和B组分别获得683枚和652枚卵母细胞,IVF后,受精率分别为63.25%(432/683)及66.41%(433/652),无显著性差异(P>0.05).体外培养24 h后,A组414枚受精卵发生卵裂,卵裂率为95.83%(414/432);B组397枚受精卵发生卵裂,卵裂率为91.69%(397/433) ,无显著性差异(P>0.05).继续培养,行第3天胚胎移植,A、B两组分别获得优质胚胎220及140枚(53.14%和35.26%).终,A组共有26例获得临床妊娠,B组15例获得临床妊娠,妊娠率为50.98%和37.5%,两者之间有显著性差异(P<0.05).另外,B组中受精率、卵裂率、优质胚胎率及临床妊娠率方面,IVF周期与ICSI周期之间无显著性差异(P>0.05),而A组中优质胚胎率及临床妊娠率方面,有显著性差异(48.97%和63.11%,45.71%和56.25%,P<0.05),受精率和卵裂率方面两周期之间无显著性差异(P>0.05).结论 Quinn系列似乎有助于卵母细胞的体外受精,而GⅢ体系更有利于胚胎的早期发育及后期的着床方面.对于GⅢ系列采取ICSI授精方式似乎更能提高试管婴儿的成功率.
作者：赵济华；曹云霞 刊期： 2005年第02期
目的观察瘦素在大鼠中枢神经系统的分布.方法采用HE和免疫组化SABC染色方法.结果在SD大鼠的大脑皮质、海马、下丘脑、杏仁体、丘脑、胼胝体、缰核和内囊等处可观察到瘦素免疫反应阳性细胞.结论瘦素广泛存在于大鼠大脑皮质、海马及杏仁体等与学习记忆密切相关部位.提示瘦素可能参与学习记忆活动.
作者：王盛花；贾雪梅；柯红林；吴学平；陈晓蓉 刊期： 2005年第02期
抗生素序贯疗法[1]:是指在感染早期阶段胃肠道外给予2或3 d的抗生素,待临床征象改善和基本稳定后就将抗生素改为口服用药的疗法.笔者对62例小儿细菌性肺炎患儿实施了抗生素序贯疗法,效果满意,现报道如下.
作者：杨武 刊期： 2005年第02期
目的探讨银杏叶提取物(EGB)对亚硝酸钠(NaNO2)小鼠记忆的影响.方法采用跳台实验观察EGB对跳台潜伏期(SDL)和跳台错误次数的影响;应用毛细管微量热沉法和毛细管微量法分别检测血液指标纤维蛋白原(Fib)含量和红细胞压积(HCT)数值.结果 EGB 25、50、100 mg/kg可明显延长SDL,EGB 50、100 mg/kg组小鼠跳台错误次数明显减少.EGB 25、50、100 mg/kg均可明显恢复降低的Fib含量;EGB 50 mg/kg可明显升高NaNO2小鼠的HCT数值.结论 EGB对NaNO2造成的小鼠记忆障碍有明显的改善作用,其机制可能与改善血液流变状态有关.
作者：周兰兰；明亮；左从文；马传庚 刊期： 2005年第02期
目的探讨胰岛素抵抗(IR)与高血压病左室肥厚及心力衰竭的关系.方法选择健康对照组30例,高血压病例120例(其中不伴靶器官损害组44例,伴左室肥厚组39例,伴心力衰竭组37例),根据UCG测定左室质量指数和射血分数,并根据公式计算IR指数,HOMA-IR=FINS×FPG/22.5.结果 Logistic回归分析显示:HOMA-IR是影响高血压病左室肥厚的危险因素(P<0.01),也是影响心力衰竭的危险因素(P<0.05).结论 IR随高血压病心脏损害的加重,呈逐步上升趋势,经多因素分析具有统计学意义.
作者：殷丽琼；吴继雄 刊期： 2005年第02期
目的探讨podocin在肾小球滤过膜中的定位及其在肾病综合征蛋白尿发生中的作用.方法制备大鼠阿霉素肾病模型(肾病组)与正常对照组.进行对比观察.4周后测尿蛋白的变化,同时处死大鼠取肾皮质应用免疫组织化学方法定位及半定量分析研究各组肾组织中足细胞蛋白podocin的异同.结果 podocin主要分布在肾小球上皮细胞足突裂隙隔膜的胞质面,小部分金颗粒偶可发现于离肾小球基底膜(GBM)稍远的足突细胞的表面,而在GBM、内皮细胞、系膜、包曼囊或肾小管均没有表达迹象.肾病组肾小球中 podocin表达较正常对照组明显减少(P<0.01).结论 podocin为肾小球上皮细胞裂孔隔膜上的主要结构蛋白;阿霉素肾病幼鼠肾小球podocin含量显著减少.
作者：胡旭；鹿玲；王明丽 刊期： 2005年第02期
目的探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患者p16基因的失活机制.方法从29例患者外周血提取白细胞基因组DNA,采用PCR、PCR-SSCP、MSP分析方法,对p16基因第二外显子的纯合性缺失、点突变及启动子区CpG岛的甲基化变异进行分析.结果 p16基因第二外显子的缺失率为27.6%(8/29),未见其点突变;p16基因启动子区CpG岛的甲基化率为13.8%(4/29).结论 p16基因的失活和ALL的发生发展有一定的关系.
作者：刘晓颖；汪惠园；周青；袁凌云；汪渊 刊期： 2005年第02期
DNA印迹是一种将电泳分离的DNA片段转移到固相支持物上用探针与靶DNA进行杂交的技术,又称Southern杂交.利用一种或多种限制内切酶酶切消化的基因组DNA[1],或经PCR获得扩增片段,经琼脂糖凝胶电泳,所得的DNA片段按分子大小分离,DNA片段经琼脂糖凝胶、变性,并将凝胶中的单链DNA片段转移到固相支持物上(多为硝酸纤维素膜,NC或尼龙膜),用放射性核素标记或非放射性核素(如地高辛)标记的探针与交联于NC膜上的DNA杂交,杂交斑点对X线底片曝光产生放射自显影图像或显色,有互补序列的DNA可通过形成特异的探针-靶序列复合物使靶序列可见.
作者：汪渊；左艳；左莉；刘虎；张素梅；熊江霞；卜丽佳；周青；桂淑玉 刊期： 2005年第02期
目的观察链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠下颌下腺超微结构变化.方法 SD雄性大鼠18只,随机分为对照组、实验组及治疗组,用STZ复制糖尿病动物模型,饲养12周后测体重和血糖,取材制片应用透射电镜观察其超微结构变化.结果与对照组体重[(367.33±26.73) g]和血糖[(6.49±0.79) mmol/L]比较:实验组体重[(156.50±10.13) g]减轻、血糖[(27.79±9.28) mmol/L]升高,有显著性差异(P<0.01);治疗组体重[(354.67±31.94) g]、血糖[(8.75±2.56) mmol/L]无显著性差异(P>0.05).与对照组比较,实验组下颌下腺电镜下主要变化为为:细胞核固缩,染色质致密;线粒体肿胀或空泡变性、嵴断裂;粗面内质网囊状扩张,断裂成短棒状,脱颗粒等.治疗组无明显改变.结论糖尿病可导致下颌下腺组织出现一系列超微病理改变,为进一步探讨糖尿病发生机制提供了形态学依据.
作者：吴学平；贾雪梅；王盛花；汪渊；张孝林；朱华庆；胡闻 刊期： 2005年第02期
安徽医科大学学报杂志
主管:安徽省教育厅
主办：安徽医科大学
