陈哲文;金于兰;瞿爱东;马相虎;王亮
目的 经紫外-亚硝基胍(NTG)复合诱变选育高产淀粉酶菌株.方法 以蜡状芽孢杆菌SWWL06(Bacillus cereus SWWL06)为出发菌株,分别经紫外、亚硝基胍(NTG)诱变原始菌株,获得佳诱变条件;经紫外-NTG复合诱变,所得突变菌株以透明圈与菌落直径比值大小进行初筛,再经摇瓶培养进行复筛,得高产淀粉酶突变株;连续传代,检测其遗传稳定性.结果 确定紫外波长254 nm,照射时间120 s,垂直照射距离20 cm为佳紫外诱变条件;NTG浓度为0.5 mg/ml,诱变时间40 min为佳NTG诱变条件;紫外-NTG复合诱变筛选出9株突变株,其中UV-NTG-3酶活力为3.515 U/ml,增幅高,较原始菌株SWWL06提高3.59倍;将UV-NTG-3连续传代10次,酶活性仍可达到第一代的97%.结论 已成功选育出1株高产淀粉酶菌株UV-NTG-3.
作者:李旭媛;王刚;费卓群;陈光 刊期: 2012年第11期
目的 构建携带小鼠IL-17a编码基因的重组耻垢分枝杆菌(Recombinant Mycobacterium smegmatis,rMs),并研究其对巨噬细胞表达炎症因子的影响.方法 双酶切质粒pET28a/mIL-17a和pMFA41,转化感受态E.coli TOP10,构建大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒pMFA41/mIL-17a,电转化耻垢分枝杆菌mc2155,经SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物.分别以MOI为10∶1加入rMs、rMs+anti-IL-17A、Ms感染小鼠巨噬细胞系RAW264.7,并设PBS对照组.荧光定量PCR法检测转染细胞中β防御素-2(Defensin β2,Defb-2)、巨噬细胞炎症蛋白(Macrophage inflammatory protein,MIP)-1α和MIP-2β基因mRNA水平;ELISA法检测细胞培养上清中MIP-1α、MIP-2β、IL-4及IFNγ蛋白的表达水平.结果 重组表达质粒pMFA41/mIL-17a经双酶切及测序鉴定证明构建正确;表达的重组蛋白mIL-17A可与大鼠抗小鼠IL-17A单克隆抗体特异性结合,在相对分子质量约20 000处可见特异性反应条带;rMs组RAW264.7细胞中Defb-2、MIP-1α、MIP-2β基因mRNA水平较Ms组及PBS组明显升高(P<0.01);rMs组细胞培养上清中MIP-1α、MIP-2β、IL-4和IFNγ的蛋白浓度较Ms组及PBS组明显升高(P<0.01).结论 成功构建了表达具有生物学活性mIL-17A的重组耻垢分枝杆菌疫苗,该疫苗可有效促进体外培养的巨噬细胞表达MIP、Defb2、IFN-γ及IL-4,为新型疫苗的研发奠定基础.
作者:郭盛;张建华;吴良霞;陈凌;郝春莉;范小勇 刊期: 2012年第11期
二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,22:6n3,DHA)和二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic acid,20∶5n3,EPA)均属于n3类多不饱和脂肪酸(Polyunsatumted fatty acids,PUFAs),能够在一定程度上预防和治疗糖尿病、类风湿性关节炎、自身免疫紊乱等疾病,对人体健康非常重要,因而受到越来越多的关注.本文对DHA与EPA的生理功能、合成机制及其在微藻和真菌中合成的研究现状进行了综述,并对利用转基因技术在哺乳动物体内生产EPA和DHA的前景进行了展望.
作者:左珊珊 刊期: 2012年第11期
目的 制备A群C群脑膜炎球菌结合疫苗,并对其进行生化检测及免疫原性和抗原性分析.方法 经溴化氰(CNBr)分别活化的A群、C群脑膜炎球菌荚膜多糖,在己二酰肼(ADH)的连接作用和碳二亚胺(EDAC)的偶联作用下,与破伤风类毒素(Tetanic toxoid,TT)形成结合物.以不同剂量的GAMP-TT和GCMP-TT的混合物免疫小鼠,检测小鼠血清中GAMP、GCMP和TT的抗体滴度,评价其免疫效果.根据剂量试验结果,制备A群C群脑膜炎球菌结合疫苗并进行抗原性检测,并与市售同类产品进行对比试验.结果 制备的3批GAMP-AH和3批GCMP-AH的批间差异较小,GAMP-AH和GCMP-AH的衍生率相差较大,由GCMP-AH制备的GCMP-TT的结合率明显高于GAMP-TT(P<0.01),结合物含量差异无统计学意义(P>0.05).GAMP-TT和GCMP-TT具有良好的免疫原性和抗原性,多糖蛋白结合物组较多糖组可诱导产生更高水平的GAMP和GCMP抗体,且具有免疫记忆.由以上两者制备的A群C群脑膜炎球菌结合疫苗生化指标、血清抗体效价与市售的同类产品差异无统计学意义(P>0.05).结论 成功研制了具有良好免疫原性和抗原性的A群C群脑膜炎球菌结合疫苗,为其产业化奠定了基础.
作者:吴丽洁;赵俊;韩俊杰;孙芳芳;贾泽;孙景志;肖詹蓉;董建春;张萍 刊期: 2012年第11期
目的 对注射用A型肉毒毒素(Botulinum toxin type A for injection,商品名衡力,出口商品名BTXA)制品中的活性药用成分(Active pharmaceutical ingredient,API)的性质及2009 ~ 2011年生产的注射用A型肉毒毒素原液的比活性进行分析.方法 对BTXA收获物样品进行阴离子交换层析,分离毒素复合体各组分;采用血凝试验、HPLC法、SDS-PAGE、等点聚焦电泳及N-末端氨基酸测序等方法分析A型肉毒毒素复合体及其各组分的性质;统计2009 ~ 2011年连续生产的注射用A型肉毒毒素原液的比活性数据,分析连续生产的工艺稳定性和质量重现性.结果 BTXA收获物样品在碱性条件下可被解离,解离出的A型肉毒神经毒素相对分子质量约为150 000,无血凝效价;BTXA的API为完整的单体,纯度均在99.5%以上;复合物和神经毒素的等电点分别为4.97、4.91,N-末端氨基酸测序结果与GenBank基本一致;在连续3年的生产过程中,原液比活性平均为3.0×107 LD50/mg蛋白,BTXA成品中API载量约为5 ng/瓶.结论 注射用A型肉毒毒素的活性成分是特异的复合体结构,可在碱性条件下解离出A型肉毒神经毒素;BTXA原液的比活性在连续3年的生产中持续稳定,具备很好的连续性,为临床使用的安全性提供依据.
作者:何星;苗承辉;李小娟;王云天;梁琪;张雪平;王荫椿 刊期: 2012年第11期
目的 应用7.5L生物反应器,培养Vero细胞和乙型脑炎病毒,规模化生产乙型脑炎灭活疫苗.方法 应用7.5L生物反应器,分别以5、10、15、20、25 g/L的微载体密度加装,采用灌流方式培养Vero细胞,分别将P3株乙型脑炎病毒按0.005 00、0.002 50、0.001 60、0.001 25、0.001 00 MOI接种至生物反应器内,收获乙脑病毒液.经浓缩、灭活、纯化等工艺制备疫苗半成品,经疫苗灭活及纯化试验进行工艺验证,合格后分装为疫苗成品,按照《中国药典》三部(2010版)中《冻干乙型脑炎灭活疫苗(Vero细胞)》要求,进行疫苗全项检定.结果 当微载体密度为20、25 g/L时,细胞密度可达1.2× 107个/ml,病毒滴度平均达8.33 ~ 8.52 lgLD50/ml;当病毒接种量为0.001 25 MOI时,病毒高滴度可达9.02 lgLD50/ml.经超滤浓缩后的病毒原液,使用1∶4 000 β-丙内酯灭活72 h,可达到灭活效果;纯化后可去除90%以上杂蛋白.应用7.5L生物反应器生产的6批乙型脑炎灭活疫苗,经检定各项指标均符合国家要求.结论 应用7.5L生物反应器培养Vero细胞和P3株乙型脑炎病毒,经连续灌流收获,可规模化生产Vero细胞乙型脑炎灭活疫苗.
作者:周荔葆;殷建文;赵新;吴栩涛;廖辉;刘苗苗;曲格霆;甄祖刚;焦龙;吴琼 刊期: 2012年第11期
目的 研究调控异养培养基中碳源和氮源浓度对小球藻Chlorella protothecoides(C.protothecoides)胞内生化成分积累的影响.方法 分别以葡萄糖为碳源(尿素初始浓度为3 g/L,葡萄糖浓度分别为10、20、30、40、50 g/L)、尿素为氮源(葡萄糖初始浓度为30 g/L,尿素浓度分别为3.00、0.00、0.15、0.30、0.45、0.60 g/L),避光培养小球藻细胞,收集藻液,制备冻干藻粉.采用傅里叶变换红外光谱法(Fourier transform infrared spectroscgy,FTIR)测定小球藻胞内蛋白质、油脂和碳水化合物的变化.结果 当培养基葡萄糖浓度为30 g/L,尿素浓度为3 g/L时,蛋白质吸收峰强度大,相对含量较高,碳水化合物次之,油脂含量低;与氮充足(3.00 g/L)条件下相比,氮缺失(0.00 g/L)条件下,蛋白质吸收峰强度骤然降低43.22%,油脂增高1.41倍,碳水化合物提高6.04%.结论 培养基中不同碳、氮水平可实现胞内不同大分子组分(油脂、蛋白质和碳水化合物)产量的调控,满足不同层次的工业需求.
作者:李玉芹;袁正求;冯跃;陈迪;穆锦秀;刘令 刊期: 2012年第11期
目的 建立维持正常肝细胞静息细胞周期状态的小鼠肝细胞的分离纯化及原代培养方法.方法 对传统小鼠肝细胞分离纯化的原位两步胶原酶灌流法进行改良,台盼蓝染色法计数细胞总数并鉴定肝细胞活率;用改良的WME培养基对C57BL/6小鼠肝细胞进行原代培养,经过碘酸雪夫氏染色(Periodic acid-Schiff stain,PAS)和全自动生化分析仪鉴定肝细胞的生物学特性及功能;Western blot法检测分离纯化后的小鼠肝细胞及原代培养24、48、72、96 h小鼠肝细胞的细胞周期蛋白p16、cyclin D1和cyclin A的表达水平.结果 分离纯化后可从每只小鼠肝脏稳定获取(3~5)×107个肝细胞,细胞活率达(86.68±2.46)%;原代培养96 h内的小鼠肝细胞能保持合成糖原、白蛋白、尿素的功能;原代培养小鼠肝细胞中,细胞周期蛋白p16、cyclin D1和cyclin A的表达水平与分离纯化的小鼠肝细胞相比,差异无统计学意义(P>0.05),表明原代培养96 h内的小鼠肝细胞均能维持静息细胞周期状态.结论 改良的分离纯化方法能稳定获得高产量、高活率的小鼠肝细胞;改良后的原代培养方法可使肝细胞维持其特异性功能、分化特性及静息细胞周期状态.
作者:罗娜;蔡园;张俊;汤为学;吴小翎;何松 刊期: 2012年第11期
目的 探讨酶法处理短棒状杆菌(Enzyme-digested Corynebacterium parvum product,ECPP)对荷瘤鼠脾淋巴细胞免疫功能的影响.方法 将NIH小鼠随机分为5组:生理盐水对照组(NS)、荷瘤对照组(CK)、阳性对照组(CPP)、低剂量ECPP组(ECPPⅠ,500 μg/ml ECPP)和高剂量ECPP组(ECPPⅡ,1 000 μg/ml ECPP).除NS组经腹腔注射0.2 ml 0.9% NaCl外,其他4组小鼠均经腹腔注射0.2ml艾氏腹水瘤(Ehrlich ascites carcinoma,EAC)细胞悬液(5.0×106个/ml),接种次日,每组小鼠腹腔注射相应药物(注射体积均为0.25 ml),每次间隔1d,连续5次,停药次日,颈椎脱臼处死小鼠,检测腹水量;3H-TdR法检测脾淋巴细胞转化能力;流式细胞术分析T淋巴细胞亚群及NK细胞活性;RT-PCR检测脾淋巴细胞中IFNγ、TNF-α基因mRNA的转录水平.结果 与CK组相比,各给药组均能明显降低小鼠腹水量(P<0.01),CPP组和ECPPⅡ组间差异无统计学意义(P>0.05),ECPPⅡ组降低腹水的能力明显高于ECPPⅠ组(P<0.01);与NS、CK及ECPPⅠ组相比,ECPPⅡ组可明显提高T、B淋巴细胞的转化能力,增加脾CD4+、CD8+及NK细胞数量(P<0.01),而与CPP组比较,差异无统计学意义(P>0.05);与NS、CK和ECPP Ⅰ组比较,ECPPⅡ组IFNγ、TNF-α基因mRNA转录水平明显提高(P<0.01),与CPP组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 ECPP能显著提高荷瘤鼠脾细胞的免疫功能.
作者:曹芳;杜瑞林;郭立君 刊期: 2012年第11期
目的 研究忍冬水提物对卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)致敏小鼠的疗效.方法 建立OVA致敏小鼠模型,将OVA致敏BALB/c小鼠随机分为5组,即忍冬水提物高浓度组(H组)、中浓度组(M组)、低浓度组(L组)、模型对照组(CH组)及阴性对照组(NS组);采用小鼠足垫肿胀试验检测迟发型超敏反应;甲苯胺蓝及HE染色观察小鼠肠系膜、空肠肥大细胞及空肠绒毛上皮细胞形态;ELISA法检测小鼠血清OVA特异性IgE及IgG1、小肠黏液总IgA及OVA特异性IgA水平.结果 OVA致敏小鼠出现急性腹泻;致敏小鼠经足垫皮内激发,出现迟发型超敏反应;致敏小鼠肠系膜及空肠肥大细胞聚集、胞质颗粒外泄及空肠绒毛炎症细胞浸润;小鼠血清OVA特异性IgE及小肠黏液OVA特异性IgA水平明显升高(P均<0.01).经H、M组忍冬水提物灌胃后致敏小鼠的一般状态、腹泻情况及空肠炎症明显缓解;OVA介导的足垫肿胀反应明显减弱;小鼠血清OVA特异性IgE及小肠黏液OVA特异性IgA水平明显降低(P均<0.01).结论 一定浓度忍冬水提物可有效缓解OVA致敏小鼠的速发型与迟发型超敏反应,其中高浓度金银花忍冬水提物效果较好.提示忍冬科植物中某些成分具有抗过敏作用.
作者:谢芸芸;黎海芪 刊期: 2012年第11期
目的 对1例献血者血型血清学鉴定为A2B血样进行基因型分析.方法 应用常规血型血清学方法进行血型鉴定;采用PCR-SSP法进行ABO初步基因分型的检测,并对ABO基因第6和第7外显子的核苷酸序列进行扩增、测序和分析.结果 血型血清学鉴定为A2B亚型,基因分型为BB型,初步判定为B(A)型;基因测序发现两条等位基因第6外显子均不存在261delG及297 G/G,判定该献血者血型为B与B基因的组合,经与A101核苷酸序列比对,对第7外显子的核苷酸序列分析发现,有一条核苷酸链上有526C>G,657C>T、703G>A及803G>C点突变,另一条核苷酸链上有297A>G、526C>G、657C>T、703G>A、796C>A、803G>C及930G>A点突变,确定该献血者血型基因型为CisAB02/B101.结论 血型血清学对CisAB和B(A)判定有一定的局限性,通过核苷酸序列及分析能够明确本例献血者基因型为CisAB02/B101.
作者:何子毅;刘赴平;胡应明;邹文涛 刊期: 2012年第11期
目的 比较包裹乙型肝炎(简称乙肝)的壳聚糖纳米粒与常规铝佐剂乙肝疫苗的免疫效果差异,并对壳聚糖佐剂的应用效果进行评价.方法 采用离子交联法制备20、30及40μg/ml的包裹乙肝疫苗的壳聚糖纳米粒溶液,激光粒度分析仪测定纳米粒粒径和多分散系数,BCA法测定包封率;将BALB/c小鼠随机分为4组:铝佐剂对照组、空白纳米粒对照组、常规疫苗组和壳聚糖疫苗组,肌肉注射免疫小鼠,2μg/只,隔周免疫1次,共2次.采用全自动免疫发光分析仪对小鼠血清中乙肝表面抗体进行定量分析.结果 制备的载乙肝疫苗壳聚糖纳米颗粒粒径为(262.7±10.8)nm,与空白壳聚糖纳米粒粒径相比,略有减小,多分散系数为(0.228±0.016);随着抗原浓度升高、4℃放置3个月及反复冻融,纳米粒的包封率均未发生显著变化,可达80%左右;壳聚糖疫苗组在小鼠体内产生的表面抗体滴度高可达1∶80 000以上,并从第8周起,与常规疫苗组间差异有统计学意义(P<0.01).结论 壳聚糖纳米粒作为新型疫苗佐剂,具有一定的应用价值和进一步研究的意义.
作者:任慧梅;李娜;吴星;方鑫;曾令冰;曾明 刊期: 2012年第11期
目的 建立豚鼠感染EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)动物模型,分析EBV对豚鼠的易感性.方法 将EBV经鼻腔和口腔感染豚鼠,建立感染EBV动物模型.提取分离的豚鼠淋巴细胞总RNA,巢式PCR法检测EBNA1及BcLF1基因mRNA的表达水平;ELISA法检测豚鼠血清中抗EBV IgG抗体水平的变化.取豚鼠肝脏、肺、脾脏、腮腺进行病理分析.结果 10只模型组豚鼠中有6只检测到BcLF1基因mRNA的表达,其中有4只同时检测到了EBNA1和BcLF1基因mRNA的表达;经双酶切及测序鉴定,扩增的EBNA1及BcLF1基因大小与预期相符.10只豚鼠血清中VCA IgG和EBNA-IgG抗体水平均有所升高.模型组中有5只豚鼠的肝脏、肺、脾脏、腮腺的组织发生不同程度的病变.结论 豚鼠可作为EBV感染动物模型的备选动物.
作者:刘国超;张晶;孙晓梅;胡凝珠;胡云章;董佳妮 刊期: 2012年第11期
目的 观察森林脑炎灭活疫苗的接种反应和免疫效果.方法 对内蒙古和黑龙江2个观察区共3 134名志愿者接种森林脑炎灭活疫苗,观察接种后志愿者的局部和全身不良反应,采用森林脑炎病毒IgG抗体ELISA试剂盒检测免疫后血清抗体滴度,并计算抗体阳转率.结果 接种疫苗后,在整个观察期间,所有志愿者均未发生全身反应,局部反应仅4例,不良反应总体发生率为0.13%.内蒙古观察区志愿者免疫后血清抗体GMT在1∶83.2~1∶117.5之间,总体血清抗体阳转率达88.1%;黑龙江观察区志愿者血清抗体GMT在1∶71.2~1∶84.6之间,血清抗体阳转率为86.2%.2个观察区接种疫苗后总体GMT为1∶80.4,血清抗体阳转率为86.8%.结论 森林脑炎灭活疫苗接种反应轻微、免疫原性良好,可大规模推广应用.
作者:杜瑞林;宋宗明;刘国云;王伟;刘双军;张伟红;孙洪亮;李文娟;尹兵 刊期: 2012年第11期
目的 观察高脂状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞(Alveolar typeⅡ epithelial cells,ATⅡ)株A549细胞的脂质蓄积,并探讨炎症对高脂状态下A549细胞脂质蓄积的影响及可能的作用机制.方法 将A549细胞分为4组:对照组(不加药物)、高脂组(100 μg/ml LDL)、炎症组(300 ng/ml LPS)、联合处理组(100μg/ml LDL+ 300 ng/ml LPS),处理24 h后,油红O染色观察各组细胞内脂质蓄积情况;Real-time PCR检测固醇调节元件结蛋白2(Sterol regulatory elememnt binding proteins 2,SREBP2)、HMGCoA(3-Hydroxy-3-methlglutary 1 coezyme A)还原酶和低密度脂蛋白受体(Low-density lipoprotein receptor,LDLr)基因mRNA转录水平;Western blot法检测SREBP2、LDLr和三磷酸腺酐结合盒转运体A1 (ATP-binding cassette sub-family A member 1,ABCA1)蛋白表达水平.结果 联合处理组细胞内脂质蓄积较对照组、高脂组及炎症组严重;与对照组相比,高脂组的SREBP2、HMGCoA还原酶、LDLr基因mRNA转录水平反馈性下调(0.54±0.09)、(0.51±0.06)及(0.34±0.06)倍(P<0.05);联合处理组各基因mRNA转录水平下调程度低于高脂组;SREBP2及LDLr蛋白表达水平的变化趋势与基因转录水平基本一致;与对照组相比,高脂组ABCA1蛋白的表达反馈性上调(2.78±0.38)倍(P<0.01);联合处理组ABCA1蛋白表达上调无高脂组明显.结论 炎症可加重高脂状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞内的脂质蓄积,其机制可能与炎症干扰SREBP2-LDLr/HMGCoA还原酶通路介导的细胞内脂质稳态有关.
作者:朱婷婷;王双;方严;练雪梅 刊期: 2012年第11期
目的 对汉逊酵母表达的adr亚型重组乙型肝炎(简称乙肝)疫苗(adr疫苗)进行免疫学特性与功能学研究.方法 采用adr疫苗与酿酒酵母表达的重组乙肝疫苗(adw疫苗)免疫转入HLA-A2基因小鼠,免疫剂量2μg/0.2 ml,于初免3周后进行第2次免疫.于第2次免疫1周后,采血,分离血清,经ELISA法检测小鼠血清中抗-HBs抗体水平.同时取小鼠脾脏,制备脾细胞悬液,采用HLA-A2/WLSLLVPFV五聚体荧光标记流式细胞术分析细胞中特异性抗乙肝病毒表位的CTL比例.结果 adr疫苗与adw疫苗均可诱导转基因小鼠产生抗乙肝表面抗原抗体,且抗体水平差异无统计学意义(P>0.05),2种疫苗对转基因小鼠的体液免疫应答的增强作用相似;adr疫苗诱导的乙肝表面抗原特异性CTL应答作用较adw疫苗更明显(P<0.05).结论 adr重组乙肝疫苗(汉逊酵母)诱导转基因小鼠的体液免疫应答作用与现有adw疫苗相似,但其诱导机体产生细胞免疫应答的能力更显著,可能具有更加良好的预防HBV感染作用和前景.
作者:连觅;裴军;高嵩;初明;陈咏冰;徐兰;岳芳桦;张德有;李津;王月丹 刊期: 2012年第11期
目的 以酵母细胞壁为囊材,制备盐酸氯丙嗪微囊,并观察其稳定性.方法 以载药量为评价指标,采用正交试验设计确定制备盐酸氯丙嗪微囊佳处方和工艺,并对微囊含量的检测方法进行精密度、稳定性及准确性验证.光学显微镜观察微囊形态,考察其体外释放、高湿度和强光照射的稳定性.结果 在40℃,盐酸氯丙嗪与酵母细胞壁质量比为1∶3,时间为6h,微囊的平均载药量可达41.76%.改进的含量检测方法精密度、稳定性、准确性良好.光学显微镜下可见微囊囊壁完整,呈球形或椭球形,形态均一.盐酸氯丙嗪微囊500 min体外累积释放为94.89%.盐酸氯丙嗪微囊对湿度和光度稳定性显著增加.结论 酵母细胞壁可作为囊材用于制备微囊,且能增加药物的稳定性.
作者:江涛;李伟;谭力清;邓春兰;李明;于明安 刊期: 2012年第11期
目的 探讨GLI-2(GLI family zinc finger 2)和SFRP-1(Secreled frizzled-related protein 1)在髓母细胞瘤(Medulloblastoma,MB)组织中的表达及其意义.方法 采用SP免疫组化法检测32份MB组织中GLI-2和SFRP-1的表达,分析两种蛋白之间及其与MB临床病理特征之间的相关性.结果 32例MB中,GLI-2和SFRP-1的阳性表达率分别为50%(16/32)和68.75%(22/32);MB中GLI-2和SFRP-1的表达在不同年龄、性别、肿瘤大小及部位中,差异均无统计学意义(P>0.05);SFRP-1在SHH-MB与NON-SHH-MB中的表达差异有统计学意义(P<0.001);GLI-2与SFRP-1在MB中的表达呈显著正相关(P<0.001).结论 GLI-2和SFRP-1的异常表达可能对MB的发生、发展起一定的作用.GLI-2和SFRP-1可作为MB重要的生物学指标,有助于对MB患者危险度评估及患者术后放化疗方案的选择.
作者:何密斯;李昱;林晓;郑维萍;唐俐 刊期: 2012年第11期
我国自2001年开始逐步实行生物制品批签发,至2006年1月1日将所有预防用疫苗、血液制品及用于血源筛查的体外诊断试剂纳入批签发.生物制品的批签发工作包括对每批制品的资料审核和样品的检验.批签发的实施保证了生物制品的质量[1-2].
作者:刘欣玉;张洁;贾丽丽;董关木;俞永新;徐苗;沈琦 刊期: 2012年第11期
目的 建立重组戊型肝炎疫苗工程菌三级种子库,并分析其稳定性.方法 将工程菌株HEV179/BL21 (DE3)复苏活化,经全面检测合格后冻干保存即为原始种子库;原始种子库传代扩增,经全面检定合格后,冻干保存即为主种子库;主种子库经传代扩增和全面检定合格后,甘油冻存即为工作种子库.对三级种子库进行全面检定,并对工程菌进行冻干及甘油冻存稳定性、甘油冻存时间稳定性及质粒稳定性检测.结果 建立的三级种子库经全面检定合格;菌种冻干稳定性、甘油冻存稳定性、甘油冻存时间稳定性及质粒稳定性指标均合格,菌种生长特性、遗传和表达稳定性均未发生变化.结论 成功建立了HEV179/BL21(DE3)工程菌三级种子库,菌种稳定性良好,适用于重组戊型肝炎疫苗的工业化生产.
作者:曹玉锋;徐军;时成波;孟多佳;迟春萍;王玉梅;贾媛;张剑锋;常东英;王伟善 刊期: 2012年第11期