李春莉；刘钉宾；袁颖；陶崑；史梦；冯文莉
目的 研制肽基精氨酸脱亚胺酶4(Peptidylarginine deiminase 4,PADI4)抗体定性检测ELISA试剂盒,并初步探讨其对诊断类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)的临床意义及应用价值.方法 采用PADI4多肽片段作为包被抗原,制备PADI4抗体定性检测试剂盒,并检测50份RA患者和283份健康人血清,评价该试剂盒的分析性能、精密性和稳定性.使用该试剂盒对181份临床确诊RA患者和353份健康人的血清样本进行初步检测.结果 所制备的PADI4抗体定性检测试剂盒总体符合率为85.3％,灵敏度为46.0％,特异性为92.2％；板内变异系数分别为2.47％和4.26％,板间变异系数分别为4.24％和6.20％；在4℃保存6个月,总体符合率、灵敏度、特异性、精密性均无明显变化,稳定性良好.181份RA患者血清中阳性检出率为45.3％,353份健康人血清中阳性检出率为7.7％,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 所研制的试剂盒可用于类风湿关节炎的临床辅助诊断.
作者：刘肖帅；葛鲁娜；韩金祥；常晓天；朱有名；王世立 刊期： 2012年第11期
目的 对汉逊酵母表达的adr亚型重组乙型肝炎(简称乙肝)疫苗(adr疫苗)进行免疫学特性与功能学研究.方法 采用adr疫苗与酿酒酵母表达的重组乙肝疫苗(adw疫苗)免疫转入HLA-A2基因小鼠,免疫剂量2μg/0.2 ml,于初免3周后进行第2次免疫.于第2次免疫1周后,采血,分离血清,经ELISA法检测小鼠血清中抗-HBs抗体水平.同时取小鼠脾脏,制备脾细胞悬液,采用HLA-A2/WLSLLVPFV五聚体荧光标记流式细胞术分析细胞中特异性抗乙肝病毒表位的CTL比例.结果 adr疫苗与adw疫苗均可诱导转基因小鼠产生抗乙肝表面抗原抗体,且抗体水平差异无统计学意义(P＞0.05),2种疫苗对转基因小鼠的体液免疫应答的增强作用相似；adr疫苗诱导的乙肝表面抗原特异性CTL应答作用较adw疫苗更明显(P＜0.05).结论 adr重组乙肝疫苗(汉逊酵母)诱导转基因小鼠的体液免疫应答作用与现有adw疫苗相似,但其诱导机体产生细胞免疫应答的能力更显著,可能具有更加良好的预防HBV感染作用和前景.
作者：连觅；裴军；高嵩；初明；陈咏冰；徐兰；岳芳桦；张德有；李津；王月丹 刊期： 2012年第11期
目的 对1例献血者血型血清学鉴定为A2B血样进行基因型分析.方法 应用常规血型血清学方法进行血型鉴定；采用PCR-SSP法进行ABO初步基因分型的检测,并对ABO基因第6和第7外显子的核苷酸序列进行扩增、测序和分析.结果 血型血清学鉴定为A2B亚型,基因分型为BB型,初步判定为B(A)型；基因测序发现两条等位基因第6外显子均不存在261delG及297 G/G,判定该献血者血型为B与B基因的组合,经与A101核苷酸序列比对,对第7外显子的核苷酸序列分析发现,有一条核苷酸链上有526C＞G,657C＞T、703G＞A及803G＞C点突变,另一条核苷酸链上有297A＞G、526C＞G、657C＞T、703G＞A、796C＞A、803G＞C及930G＞A点突变,确定该献血者血型基因型为CisAB02/B101.结论 血型血清学对CisAB和B(A)判定有一定的局限性,通过核苷酸序列及分析能够明确本例献血者基因型为CisAB02/B101.
作者：何子毅；刘赴平；胡应明；邹文涛 刊期： 2012年第11期
目的 观察H2O2对Apg-2与BCR/ABL蛋白亚细胞定位的影响.方法 用50μmol/LH2O2分别处理BaF3-BCR/ABL、BaF3-MIGR1及过表达Apg-2蛋白的BaF3-BCR/ABL细胞,激光共聚焦显微镜观察细胞内Apg-2、BCR/ABL蛋白的亚细胞定位变化.结果 Apg-2和BCR/~ABL蛋白在细胞中定位于胞浆,H2O2损伤可致Apg-2和BCR/ABL蛋白在BaF3-BCR/ABL细胞中发生核转位,Apg-2蛋白过表达可引起BCR/ABL蛋白核转位.结论 Apg-2蛋白在H2O2诱导的损伤后发生核转位,可能与BCR/ABL蛋白相互作用,保护H2O2诱导的细胞损伤.
作者：李春莉；刘钉宾；袁颖；陶崑；史梦；冯文莉 刊期： 2012年第11期
目的 通过对单剂水痘疫苗高接种率学校中暴发的水痘疫情分析,评估疫苗的免疫持久性.方法 采用现场流行病学方法对2011年10月至2012年1月虹口区单剂水痘疫苗高接种率学校中水痘暴发疫情进行调查和分析.结果 在2011年10月16日至2012年1月13日疫情暴发期间,累计发现36例水痘病例,罹患率为5.4％,症状以发热、皮疹为主,仅27.8％的病人呈轻度或中度发热,且均为轻型水痘病例.发病班级的水痘罹患率在2.2％～34.1％之间,其中,男性为21.21％,女性为19.23％,病例发病时间主要集中在11月9～13日,占总病例的36.1％,呈2、3、4代病例的传播特征；发病班级单剂水痘疫苗接种率为95.48％,未发现接种史与水痘发病有关(P＞0.05),患病的相对危险度(Relative risk,RR)为0.8；接种年龄组间水痘发病率差异无统计学意义(P＞0.05)；36例病例中,接种疫苗与发病时间的间隔中位数为66月,进口与国产水痘疫苗接种后,水痘发病率差异无统计学意义(P＞0.05)；暴发疫情病例中有免疫史人群的比例显著高于散发病例(P＜0.05),比值比(Odds ratio,OR)为11.3.结论 单剂水痘疫苗接种,可预防重症病例,但不能完全预防水痘暴发.建议首剂水痘疫苗接种后5～6年加强接种,或在发生疫情时,对首剂接种≥5年的无水痘患病史的密切接触者进行应急接种.
作者：钱晓华；谭顺荣；杨彦基；徐巍；张格；赵根明 刊期： 2012年第11期
目的 构建人C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)重组表达质粒pTracer CMV2-CRP,并观察其在人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelical cells,HUVEC)中的表达及其对凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(Lectin-type oxidized LDL receptor-1,LOX-1)、组织因子(Tissue factor,TF)表达的影响.方法 以质粒pCR-BluntⅡ-TOPO-CRP为模板,PCR扩增CRP基因CDS序列,克隆至pTracer CMV2载体中,转化感受态大肠杆菌DH5α,构建重组表达质粒pTracer CMV2-CRP,转染HUVEC,设实验组(转染pTracer CMV2-CRP)、阴性对照组(转染pTracer-CMV2)及正常对照组,各组细胞经G418抗性筛选,RTPCR及Western blot检测CRP基因的过表达效应及CRP的表达对HUVEC中LOX-1和TF转录及蛋白水平的影响.结果 重组真核表达质粒pTracer CMV2-CRP经双酶切鉴定及测序证明构建正确.实验组细胞中,CRP基因过表达,且LOX-1和TF基因的转录及蛋白水平明显高于正常对照组和阴性对照组(P＜0.05).结论 已成功构建人CRP基因重组真核表达质粒pTracer CMV2-CRP,并在HUVEC中过表达CRP,且明显上调HUVEC中LOX-1和TF的表达,为进一步阐述CRP在动脉粥样硬化形成过程中的作用提供了新的实验依据.
作者：高兰英；刘增长 刊期： 2012年第11期
目的 观察高脂状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞(Alveolar typeⅡ epithelial cells,ATⅡ)株A549细胞的脂质蓄积,并探讨炎症对高脂状态下A549细胞脂质蓄积的影响及可能的作用机制.方法 将A549细胞分为4组:对照组(不加药物)、高脂组(100 μg/ml LDL)、炎症组(300 ng/ml LPS)、联合处理组(100μg/ml LDL+ 300 ng/ml LPS),处理24 h后,油红O染色观察各组细胞内脂质蓄积情况；Real-time PCR检测固醇调节元件结蛋白2(Sterol regulatory elememnt binding proteins 2,SREBP2)、HMGCoA(3-Hydroxy-3-methlglutary 1 coezyme A)还原酶和低密度脂蛋白受体(Low-density lipoprotein receptor,LDLr)基因mRNA转录水平；Western blot法检测SREBP2、LDLr和三磷酸腺酐结合盒转运体A1 (ATP-binding cassette sub-family A member 1,ABCA1)蛋白表达水平.结果 联合处理组细胞内脂质蓄积较对照组、高脂组及炎症组严重；与对照组相比,高脂组的SREBP2、HMGCoA还原酶、LDLr基因mRNA转录水平反馈性下调(0.54±0.09)、(0.51±0.06)及(0.34±0.06)倍(P＜0.05)；联合处理组各基因mRNA转录水平下调程度低于高脂组；SREBP2及LDLr蛋白表达水平的变化趋势与基因转录水平基本一致；与对照组相比,高脂组ABCA1蛋白的表达反馈性上调(2.78±0.38)倍(P＜0.01)；联合处理组ABCA1蛋白表达上调无高脂组明显.结论 炎症可加重高脂状态下肺泡Ⅱ型上皮细胞内的脂质蓄积,其机制可能与炎症干扰SREBP2-LDLr/HMGCoA还原酶通路介导的细胞内脂质稳态有关.
作者：朱婷婷；王双；方严；练雪梅 刊期： 2012年第11期
我国自2001年开始逐步实行生物制品批签发,至2006年1月1日将所有预防用疫苗、血液制品及用于血源筛查的体外诊断试剂纳入批签发.生物制品的批签发工作包括对每批制品的资料审核和样品的检验.批签发的实施保证了生物制品的质量[1-2].
作者：刘欣玉；张洁；贾丽丽；董关木；俞永新；徐苗；沈琦 刊期： 2012年第11期
目的 探讨三七总皂苷对体外培养的人牙周膜细胞(Human periodontal ligament cell,hPDLC)增殖、碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活性及表达的影响.方法 采用组织块法原代培养hPDLC,并经免疫组化鉴定；分别用10、1.0、0.1和0.01 mg/L浓度的三七总皂苷处理体外培养的hPDLC,设只加含10％ FBS的DMEM培养基为空白对照,分别于1、3、5、7d后,MTT法检测其对hPDLC增殖活性的影响,酶标仪上检测细胞中ALP活性,Western blot法检测细胞中ALP蛋白的表达.结果 免疫组化结果显示,细胞来源于外胚间充质；MTT结果显示,0.1mg/L浓度组在第5天和1.0、10 mg/L浓度组在第3、5天hPDLC增殖活性明显高于空白对照组(P＜0.01)；0.1、1.0、10 mg/L浓度组在第3、5天ALP活性明显高于空白对照组(P＜0.01),1.0 mg/L浓度组APL活性明显高于其他各组(P＜0.01)；0.01、0.1、1.0、10 mg/L浓度组ALP蛋白表达量均明显高于空白对照组(P＜0.01),以1.0 mg/L浓度组ALP表达量高.结论 三七总皂苷有促进hPDLC增殖的作用,并能增加ALP活性及其表达水平.
作者：吴静；向学熔；范小平 刊期： 2012年第11期
目的 制备A群C群脑膜炎球菌结合疫苗,并对其进行生化检测及免疫原性和抗原性分析.方法 经溴化氰(CNBr)分别活化的A群、C群脑膜炎球菌荚膜多糖,在己二酰肼(ADH)的连接作用和碳二亚胺(EDAC)的偶联作用下,与破伤风类毒素(Tetanic toxoid,TT)形成结合物.以不同剂量的GAMP-TT和GCMP-TT的混合物免疫小鼠,检测小鼠血清中GAMP、GCMP和TT的抗体滴度,评价其免疫效果.根据剂量试验结果,制备A群C群脑膜炎球菌结合疫苗并进行抗原性检测,并与市售同类产品进行对比试验.结果 制备的3批GAMP-AH和3批GCMP-AH的批间差异较小,GAMP-AH和GCMP-AH的衍生率相差较大,由GCMP-AH制备的GCMP-TT的结合率明显高于GAMP-TT(P＜0.01),结合物含量差异无统计学意义(P＞0.05).GAMP-TT和GCMP-TT具有良好的免疫原性和抗原性,多糖蛋白结合物组较多糖组可诱导产生更高水平的GAMP和GCMP抗体,且具有免疫记忆.由以上两者制备的A群C群脑膜炎球菌结合疫苗生化指标、血清抗体效价与市售的同类产品差异无统计学意义(P＞0.05).结论 成功研制了具有良好免疫原性和抗原性的A群C群脑膜炎球菌结合疫苗,为其产业化奠定了基础.
作者：吴丽洁；赵俊；韩俊杰；孙芳芳；贾泽；孙景志；肖詹蓉；董建春；张萍 刊期： 2012年第11期
目的 建立重组戊型肝炎疫苗工程菌三级种子库,并分析其稳定性.方法 将工程菌株HEV179/BL21 (DE3)复苏活化,经全面检测合格后冻干保存即为原始种子库；原始种子库传代扩增,经全面检定合格后,冻干保存即为主种子库；主种子库经传代扩增和全面检定合格后,甘油冻存即为工作种子库.对三级种子库进行全面检定,并对工程菌进行冻干及甘油冻存稳定性、甘油冻存时间稳定性及质粒稳定性检测.结果 建立的三级种子库经全面检定合格；菌种冻干稳定性、甘油冻存稳定性、甘油冻存时间稳定性及质粒稳定性指标均合格,菌种生长特性、遗传和表达稳定性均未发生变化.结论 成功建立了HEV179/BL21(DE3)工程菌三级种子库,菌种稳定性良好,适用于重组戊型肝炎疫苗的工业化生产.
作者：曹玉锋；徐军；时成波；孟多佳；迟春萍；王玉梅；贾媛；张剑锋；常东英；王伟善 刊期： 2012年第11期
目的 构建携带小鼠IL-17a编码基因的重组耻垢分枝杆菌(Recombinant Mycobacterium smegmatis,rMs),并研究其对巨噬细胞表达炎症因子的影响.方法 双酶切质粒pET28a/mIL-17a和pMFA41,转化感受态E.coli TOP10,构建大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒pMFA41/mIL-17a,电转化耻垢分枝杆菌mc2155,经SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物.分别以MOI为10∶1加入rMs、rMs+anti-IL-17A、Ms感染小鼠巨噬细胞系RAW264.7,并设PBS对照组.荧光定量PCR法检测转染细胞中β防御素-2(Defensin β2,Defb-2)、巨噬细胞炎症蛋白(Macrophage inflammatory protein,MIP)-1α和MIP-2β基因mRNA水平；ELISA法检测细胞培养上清中MIP-1α、MIP-2β、IL-4及IFNγ蛋白的表达水平.结果 重组表达质粒pMFA41/mIL-17a经双酶切及测序鉴定证明构建正确；表达的重组蛋白mIL-17A可与大鼠抗小鼠IL-17A单克隆抗体特异性结合,在相对分子质量约20 000处可见特异性反应条带；rMs组RAW264.7细胞中Defb-2、MIP-1α、MIP-2β基因mRNA水平较Ms组及PBS组明显升高(P＜0.01);rMs组细胞培养上清中MIP-1α、MIP-2β、IL-4和IFNγ的蛋白浓度较Ms组及PBS组明显升高(P＜0.01).结论 成功构建了表达具有生物学活性mIL-17A的重组耻垢分枝杆菌疫苗,该疫苗可有效促进体外培养的巨噬细胞表达MIP、Defb2、IFN-γ及IL-4,为新型疫苗的研发奠定基础.
作者：郭盛；张建华；吴良霞；陈凌；郝春莉；范小勇 刊期： 2012年第11期
目的 研究罗格列酮(Rosiglitazone,RSG)对高糖高胰岛素(High glucose and insulin,HGI)诱导心肌肥大中的抵抗作用及其机制.方法 用HGI培养SD大鼠乳鼠心肌细胞,建立心肌细胞肥大模型,并给予不同浓度的RSG处理；以细胞表面积、蛋白含量和心钠肽(Atrial natriuretic peptide,ANP)基因mRNA的水平为心肌肥大指标,观察RSG对HGI诱导心肌肥大的作用；Real-time PCR和Western blot分别检测过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(Peroxisome proliferator-activated receptor-γ,PPAR-γ)和内皮型一氧化氮合酶(Endothelial nitric oxide synthase,eNOS)基因mRNA水平和蛋白的表达水平；双抗体夹心ABC-ELISA法和硝酸还原法分别检测eNOS和NO的含量.结果 HGI成功诱导大鼠心肌细胞肥大；RSG呈浓度依赖性地抑制HGI诱导的心肌细胞肥大,并明显上调HGI所致的PPAR-γ和eNOS基因mRNA水平的降低,同时增加PPAR-γ蛋白的表达水平、eNOS和NO的含量(P均＜0.05).PPAR-γ抑制剂GW9662及NOS抑制剂L-硝基-精氨酸甲酯(L-NAME)均可阻断RSG的上述作用.结论 RSG通过激活PPAR-γ受体、增加eNOS的含量、促进NO释放,从而产生抗HGI诱导的心肌细胞肥大作用.
作者：彭晓凤；吴芹；蒋青松 刊期： 2012年第11期
目的 构建携带HA标签的重组腺病毒Ad5F35-HF2S.方法 体外合成HA标签DNA双链,以K562细胞cDNA为模板,分别扩增FKBP1、FKBP2和SH2基因,依次亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV-HA中,构建重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-HF2S,穿梭质粒经Pme I酶切线性化,与腺病毒骨架质粒pAd5/F35在Ad5/F35-BJ5183感受态细胞中同源重组,获得重组腺病毒质粒pAd5/F35-HF2S,经Pac I酶切线性化后,转染AD-293细胞进行包装、扩增,获得重组腺病毒Ad5/F35-HF2S,经2轮扩增后,测定病毒滴度；采用PCR及Western blot法检测感染细胞中HF2S基因的转录及蛋白的表达.结果 重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-HF2S及重组腺病毒质粒pAd5/F35-HF2S经鉴定均构建正确；经包装及2轮扩增后,重组腺病毒Ad5/F35-HF2S病毒滴度可达1013IU/ml;经PCR及Western blot鉴定表明,重组腺病毒携带的HF2S基因能够在AD-293细胞中表达.结论 已成功构建了表达HF2S基因的重组腺病毒Ad5/F35-HF2S,为研究Grb2-SH2结构域在CML中的基因治疗和作用机制奠定了基础.
作者：李千音；黄峥兰；高淼；钟梁；冯文莉 刊期： 2012年第11期
目的 观察森林脑炎灭活疫苗的接种反应和免疫效果.方法 对内蒙古和黑龙江2个观察区共3 134名志愿者接种森林脑炎灭活疫苗,观察接种后志愿者的局部和全身不良反应,采用森林脑炎病毒IgG抗体ELISA试剂盒检测免疫后血清抗体滴度,并计算抗体阳转率.结果 接种疫苗后,在整个观察期间,所有志愿者均未发生全身反应,局部反应仅4例,不良反应总体发生率为0.13％.内蒙古观察区志愿者免疫后血清抗体GMT在1∶83.2～1∶117.5之间,总体血清抗体阳转率达88.1％；黑龙江观察区志愿者血清抗体GMT在1∶71.2～1∶84.6之间,血清抗体阳转率为86.2％.2个观察区接种疫苗后总体GMT为1∶80.4,血清抗体阳转率为86.8％.结论 森林脑炎灭活疫苗接种反应轻微、免疫原性良好,可大规模推广应用.
作者：杜瑞林；宋宗明；刘国云；王伟；刘双军；张伟红；孙洪亮；李文娟；尹兵 刊期： 2012年第11期
目的 探讨重组胸腺素α1(Recombinant human thymosin α1,rhTα1)对免疫低下小鼠接种流感疫苗后免疫应答效果的影响.方法 将BALB/c小鼠随机分为5组:疫苗组、环磷酰胺+疫苗组、环磷酰胺+疫苗+rhTα1低浓度(0.2 mg/kg)组、环磷酰胺+疫苗+ rhTα1中浓度(0.4 mg/kg)组、环磷酰胺+疫苗+rhTα1高浓度(0.8 mg/kg)组.经小鼠腹腔注射环磷酰胺,80 mg/kg,共3次,隔天给药；肌肉接种流感疫苗,1.8 μg血凝素/只；皮下注射低、中、高浓度rhTα1,0.2ml/只,每周2次,连续4周.动态监测各组小鼠血清血凝抑制(HI)抗体效价,并观察小鼠脾脏指数及脾脏形态学结构的变化.结果 与疫苗组相比,环磷酰胺+疫苗组小鼠体内HI抗体效价降低,脾指数降低,脾脏组织病理形态退化；与环磷酰胺+疫苗组相比,环磷酰胺+疫苗+ rh-Tα1各浓度组HI抗体效价升高,小鼠脾指数增加,脾脏组织病理形态明显改善.结论 重组胸腺素α1可提高免疫低下小鼠流感疫苗接种的免疫效果,为寻找适合免疫低下人群的疫苗增强剂提供了有益的尝试.
作者：王冀邯；王槐栋；胡亚；黄红兰；聂李亚；李凡 刊期： 2012年第11期
目的 比较包裹乙型肝炎(简称乙肝)的壳聚糖纳米粒与常规铝佐剂乙肝疫苗的免疫效果差异,并对壳聚糖佐剂的应用效果进行评价.方法 采用离子交联法制备20、30及40μg/ml的包裹乙肝疫苗的壳聚糖纳米粒溶液,激光粒度分析仪测定纳米粒粒径和多分散系数,BCA法测定包封率；将BALB/c小鼠随机分为4组:铝佐剂对照组、空白纳米粒对照组、常规疫苗组和壳聚糖疫苗组,肌肉注射免疫小鼠,2μg/只,隔周免疫1次,共2次.采用全自动免疫发光分析仪对小鼠血清中乙肝表面抗体进行定量分析.结果 制备的载乙肝疫苗壳聚糖纳米颗粒粒径为(262.7±10.8)nm,与空白壳聚糖纳米粒粒径相比,略有减小,多分散系数为(0.228±0.016);随着抗原浓度升高、4℃放置3个月及反复冻融,纳米粒的包封率均未发生显著变化,可达80％左右;壳聚糖疫苗组在小鼠体内产生的表面抗体滴度高可达1∶80 000以上,并从第8周起,与常规疫苗组间差异有统计学意义(P＜0.01).结论 壳聚糖纳米粒作为新型疫苗佐剂,具有一定的应用价值和进一步研究的意义.
作者：任慧梅；李娜；吴星；方鑫；曾令冰；曾明 刊期： 2012年第11期
目的 制备重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)冻干参考品,用于重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)的效力评价.方法 选取检定合格的重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)原液,经协作标定表面抗原蛋白含量后,加入氢氧化铝佐剂和冻于保护剂,冷冻干燥制备重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)冻干参考品,并按《中国药典》三部(2010版)要求进行各项检定.经10次独立试验测定冻干参考品小鼠效力,采用Reed-Münch计算ED50值；将冻干参考品置4℃(8周)、37℃(4和8周)后分别检测疫苗效力,分析其稳定性,依据Q10法进行效期推测；并对2个生产企业10批疫苗进行效力测定,分析其适用性.结果 制备的冻干参考品各项指标均符合规定,小鼠ED50均值为0.183μg,CV为50.5％；该CHO细胞效力冻干参考品蛋白含量定为20 μg/ml,规格为10 μg/0.5 ml;冻干保护剂、冻干工艺对乙型肝炎疫苗(CHO细胞)的效力影响较小,冻干参考品在37℃放置不同时间,效力变化不明显,表明冻干参考品稳定性较好,有效期约为7年；10批疫苗中,不合格率为10％,表明该参考品可用于乙型肝炎疫苗(CHO细胞)效力质控.结论 制备的冻干参考品可作为重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)效力检定的质控参考品.
作者：邱少辉；方鑫；何鹏；梁争论；张红霞；张卫婷；赵坤福；李德桂；周根喜；郭玉芬；钟熙；胡忠玉 刊期： 2012年第11期
目的 分析重组汉逊酵母表达的乙型肝炎表面抗原(HBsAg)各纯化工序样品中内毒素的去除效果.方法 采用鲎试剂法检测重组汉逊酵母表达的HBsAg小量工艺探索、中量工艺验证、中试纯化工艺中破碎细胞、微滤、超滤、硅胶吸附、层析、除菌过滤各工序样品的内毒素含量,计算内毒素去除率,分析各纯化工序与内毒素去除率的关系,并以重组酿酒酵母表达HBsAg各纯化工序中样品作为对照.结果 重组汉逊酵母表达的HBsAg纯化过程中内毒素含量由细胞破碎样品的241 EU/ml以上降至除菌过滤样品的1.0 EU/ml以下.微滤和超滤样品内毒素去除率平均可达56％和86％,占总体纯化工艺中内毒素去除率的90％以上.结论 重组汉逊酵母表达HBsAg纯化工序微滤、超滤和疏水层析均可有效去除内毒素,以超滤去除内毒素效果明显,为重组汉逊酵母纯化工艺去除内毒素的研究提供了技术参数和实验依据.
作者：刘英微；王曦；张德有；杨旭琴；许宁；张昀；苏锦锋；何亚丽；王树毅；李津 刊期： 2012年第11期
目的 经紫外-亚硝基胍(NTG)复合诱变选育高产淀粉酶菌株.方法 以蜡状芽孢杆菌SWWL06(Bacillus cereus SWWL06)为出发菌株,分别经紫外、亚硝基胍(NTG)诱变原始菌株,获得佳诱变条件；经紫外-NTG复合诱变,所得突变菌株以透明圈与菌落直径比值大小进行初筛,再经摇瓶培养进行复筛,得高产淀粉酶突变株；连续传代,检测其遗传稳定性.结果 确定紫外波长254 nm,照射时间120 s,垂直照射距离20 cm为佳紫外诱变条件；NTG浓度为0.5 mg/ml,诱变时间40 min为佳NTG诱变条件；紫外-NTG复合诱变筛选出9株突变株,其中UV-NTG-3酶活力为3.515 U/ml,增幅高,较原始菌株SWWL06提高3.59倍；将UV-NTG-3连续传代10次,酶活性仍可达到第一代的97％.结论 已成功选育出1株高产淀粉酶菌株UV-NTG-3.
作者：李旭媛；王刚；费卓群；陈光 刊期： 2012年第11期
中国生物制品学杂志
主管:中华人民共和国卫生部
主办：中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
