学术投稿

抗卵巢癌相关抗原单克隆抗体的制备及免疫分析方法的建立

许杨;范振符;陈智周;曹明华

关键词:CA125抗原, 单克隆抗体, 放射免疫分析, 肿瘤相关糖类抗原
摘要:目的研究从卵巢浆液性乳头状囊腺癌患者的腹腔积液中,纯化获得携带CA125抗原决定簇的卵巢癌相关抗原.以此为免疫原,制备单克隆抗体,并建立放射免疫分析方法并应用于临床中.方法腹腔积液经高氯酸分离,凝胶层析及亲和胶蓝柱层析纯化CA125相关抗原.应用细胞融合技术,抗体采用ELISA方法、免疫印记技术进行鉴定.单克隆抗体经碘原法标记放射性核素125I,初步建立1种碘标固相双位点夹心模式的免疫放射分析法.结果腹腔积液中CA125相关抗原经纯化,其比活度达1.1×106 U/mg.共获得6株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,采用2株配对佳的抗体,初步建立1种碘标免疫放射分析法.该方法可测下限为1.2 U/ml,批内变异系数为4.4%,批间变异系数为9.6%,平均回收率为97.0%.初步临床应用的结果表明在正常人血清中CA125相关抗原平均值为(2.147±3.092)U/ml.在60例卵巢癌患者中,平均值为(106.5±187.5)U/ml,两者比较有非常显著性差异(P<0.01).结论以患者腹腔积液中纯化的CA125相关抗原制备单克隆抗体,并建立放射免疫分析方法,初步应用于临床血清学测定中,对卵巢癌的辅助诊断具有一定价值.
实用癌症杂志相关文献
  • 原发性小肠恶性肿瘤52例术前诊断分析

    目的探讨原发性小肠恶性肿瘤的术前诊断方法.方法回顾性分析52例原发性小肠恶性肿瘤患者的临床资料.结果十二指肠癌20例,其中十二指肠球部癌4例,乳头部癌10例,降段癌5例,水平段癌1例.空肠恶性肿瘤13例,回肠恶性肿瘤19例.术前胃镜及镜下活检确诊十二指肠球部癌4例,乳头部癌8例;十二指肠镜及镜下活检确诊乳头部癌2例,降段癌1例;小肠气钡双重造影确诊15例,螺旋CT确诊3例,B超确诊1例,剖腹探查确诊18例.结论原发性小肠恶性肿瘤因临床表现无特征性,术前诊断较困难.胃镜及十二指肠镜诊断阳性率高,对空肠和回肠恶性肿瘤患者术前诊断首选小肠气钡双重造影,必要时可结合螺旋CT、B超检查.对于高度疑诊患者可适当放宽剖腹探查指征.

    作者:王丽萍;张涛;王春丁;张丽君 刊期: 2002年第05期

  • 甲状腺癌组织中c-erbB-2、nm23和组织蛋白酶D的表达及其意义

    目的探讨甲状腺癌组织中c-erbB-2、nm23和组织蛋白酶D的表达及其与颈部淋巴结转移的关系.方法采用免疫组化S-P法,检测93例甲状腺癌组织中c-erbB-2、nm23和组织蛋白酶D的表达情况.结果未分化癌组织中c-erbB-2和组织蛋白酶D阳性表达率高,两者呈正相关,不同组织学类型间差异不显著.滤泡状甲状腺癌组织中nm23阳性表达率高,乳头状癌组织较低,两者有显著性差异(P<0.05).无颈部淋巴结转移者nm23阳性表达率高于颈部淋巴结转移者,两者有非常显著性差异(P<0.01),无颈部淋巴结转移者c-erbB-2和组织蛋白酶D的阳性表达率低于颈部淋巴结转移者,两者有显著性差异(P<0.05).结论c-erbB-2、组织蛋白酶D及nm23表达均与甲状腺癌颈部淋巴结转移有关,c-erbB-2和组织蛋白酶D高表达与甲状腺癌颈部淋巴结转移呈正相关,nm23低表达与甲状腺癌颈部淋巴结转移呈负相关,三者联合检测对判断甲状腺癌是否发生颈部淋巴结转移有重要意义.

    作者:胡学信;段尚林;雷红;王建业 刊期: 2002年第05期

  • E-钙黏附素在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

    我们采用免疫组织化学方法检测E-钙黏附素(epithelial-cadherin,E-cad)在正常胰腺组织和胰腺癌组织中的表达,同时检测胰腺癌细胞增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear anti-gen,PCNA)的表达,以探讨E-cad异常表达与胰腺癌分化、增殖、浸润、转移和患者预后的关系,现报告如下.

    作者:姜天福;董翠玉 刊期: 2002年第05期

  • VEGF特异性核酶对Hela细胞VEGF表达的调节

    目的构建VEGF特异性发夹状核酶基因真核表达载体,观察其对Hela细胞VEGF表达的调节.方法将核酶基因克隆入pcDNA3中,构建了抗VEGF发夹状核酶真核表达载体pcDNA3-RZ,并进行了核酶的体外切割活性检测.将该真核表达载体转染人宫颈癌Hela细胞,采用RNA斑点杂交、流式细胞仪免疫荧光及免疫细胞化学方法,检测Hela细胞中VEGF mRNA和VEGF蛋白的表达水平.结果所构建的重组表达载体pcDNA3-RZ正确,体外切割检测该核酶具有较高的切割活性.转染了pcDNA3-RZ的Hela细胞中VEGF mRNA和VEGF蛋白的表达水平明显下降.结论成功地构建了抗VEGF发夹状核酶基因真核表达载体,该载体能明显抑制Hela细胞VEGF的表达.

    作者:严瑞兰;张积仁;辛晓燕;金明;惠宏襄 刊期: 2002年第05期

  • 糖皮质激素对人卵巢癌HO-8910细胞TβR-Ⅱ的上调作用

    目的研究转化生长因子-β1(TGF-β1)通路,是否参与人工合成的糖皮质激素地塞米松(Dex)对人卵巢癌细胞系HO-8910的增殖抑制过程.方法分别采用细胞计数和流式细胞分析方法检测细胞增殖和细胞周期分布;采用定量RT-PCR、酶联免疫吸附法(ELISA)和(或)免疫细胞化学法,检测TGF-β1及其Ⅰ型受体(TβR-Ⅰ)和Ⅱ型受体(TβR-Ⅱ)的表达水平.结果Dex可引起HO-8910细胞周期Go/G0/G1期进展停滞,并可明显上调TβR-ⅡmRNA的表达,且具有浓度依赖性特点,Dex作用HO-8910细胞8 h时作用强,此时10-7mol/LDex组TβR-ⅡmRNA水平比对照组高1.4倍(P<0.01);相应地,TβR-Ⅱ的蛋白表达水平也增高,糖皮质激素受体(GR)阻断剂RU486能够逆转这些作用,而Dex对TGF-β1和TβR-Ⅰ mRNA的表达无调节作用.结论Dex抑制HO-8910细胞增殖的机制可能包括上调TβR-Ⅱ的表达,该作用是由GR介导的.

    作者:夏冰;卢建;王钢 刊期: 2002年第05期

  • 不开胸拨脱术治疗高原地区颈段、上段食管癌26例体会

    我院自1990年10月~2001年10月对26例颈段食管癌及早期上段食管癌行食管拨脱术,获得满意的临床效果.

    作者:窦拉加 刊期: 2002年第05期

  • 原发性胆囊癌的早期诊断及其相关危险因素

    目的探讨原发性胆囊癌的早期诊断及其相关危险因素.方法回顾性分析44例原发性胆囊癌患者的临床资料及手术治疗情况.结果44例原发性胆囊癌患者中,有胆道疾病史者34例;首发症状以腹痛为常见,共38例(86.4%),其次为黄疸26例(59.1%),肝脏肿大22例(50.0%),发热21例(47.7%).B超和CT诊断准确率分别为36 4%和85.5%;31例患者行手术治疗,术前确诊率为38.7%.结论原发性胆囊癌早期诊断非常不易.CT诊断准确率较高.胆囊结石、胆囊炎以及胆囊息肉为原发性胆囊癌的相关危险因素.

    作者:徐萍;刘丕;吕农华;王崇文 刊期: 2002年第05期

  • 非霍奇金恶性淋巴瘤患者长期生存的相关因素分析

    目的探讨非霍奇金恶性淋巴瘤患者长期生存的相关因素.方法对1 210例非霍奇金恶性淋巴瘤的细胞类型、临床分期、原发灶部位、结外受累情况、B症状的有无、初治疗效及治疗方法等12种因素进行了综合对比分析.结果非霍奇金恶性淋巴瘤患者的长期生存与多种因素相关.在诸多因素中,有些是非控制性因素,而有些是可以控制的.结论非霍奇金恶性淋巴瘤患者的长期存活与多种因素密切相关,合理调控相关因素可延长患者生存期.

    作者:董群生;王健民;闵碧荷;李平 刊期: 2002年第05期

  • 乳腺癌术后胸壁照射技术剂量分布的研究

    目的对乳腺癌术后胸壁放射治疗几种常用照射技术的剂量分布特点进行研究.方法对乳腺癌手术后患者和做了标记的测量体模,按放疗体位做CT扫描,CT影像经网络送入三维TPS,在TPS上设计4种照射方案,并在人体模上进行模拟照射(参考剂量1 Gy),用热释光剂量仪进行实际测量.结果实验结果表明除电子线弧形旋转照射外,其它3种照射技术的胸壁剂量都较均匀(胸壁平均剂量>0.90 Gy).电子线弧形旋转照射和X线双切线野+内乳区电子线野技术由于在内乳区设野保证了内乳区有充足的剂量(内乳点剂量>0.90 Gy),但是后者在2个野交界处易形成剂量冷热点.单纯X线切线野和适形野技术在内乳区可产生欠剂量情况,体积剂量直方图显示电子线旋转照射技术肺部受高剂量照体积小,适形野技术也使肺部受高剂量照射体积明显减小.在体表加盖1.0~1.5 cn的组织等效填充物后,4种照射技术的皮肤剂量都可提高到0.90 Gy以上.结论乳腺癌胸壁照射技术有不同的剂量分布特点,在临床应用时应视患者具体情况选择使用.

    作者:狄小云;徐敏;王健;陈维军 刊期: 2002年第05期

  • 依西美坦治疗绝经后妇女晚期乳腺癌的临床疗效观察

    目的研究依西美坦治疗绝经后妇女晚期乳腺癌的近期疗效及不良反应.方法采用随机双盲对照方法将48例绝经后晚期乳腺癌患者分为治疗组(依西美坦组,23例)和对照组(来曲唑组,25例),治疗8周.治疗前及治疗第4周、第8周分别检测血中雌二醇(E2)水平,同时观察疗效和不良反应.结果治疗组与对照组治疗有效率分别为39.1%(9/23)与28.0%(7/25).ER阳性者的疗效较阴性者好;软组织和骨转移者的疗效明显较肝、肺及内脏转移者好;2组治疗后对E2的平均有效抑制率分别为32.5%与55.1%;治疗组的胃部不适、恶心、呕吐、颜面潮红等不良反应发生率显著低于对照组.结论依西美坦对E2的抑制作用和对绝经后晚期乳腺癌的疗效肯定,不良反应较轻.

    作者:黎治平;钟睿;马行天;程楚;陈志萍;彭世义 刊期: 2002年第05期

  • 46例输尿管移行细胞癌的诊断与治疗

    目的探讨输尿管移行细胞癌的诊断方法和治疗效果.方法分析46例经病理诊断的输尿管移行细胞癌的临床资料.结果尿脱落细胞学、B超、计算机断层扫描(CT)、磁共振尿路成像(MRU)、膀胱镜及逆行肾盂、输尿管造影等检查阳性率分别为:60.0%(18/30)、21.7%(10/46)、73.7%(28/38)、100.0%(17/17)、85.0%(34/40)、88.9%(24/27).6例原位复发,5例发生膀胱转移,9例发生远处转移,12例死亡.结论CT、膀胱镜检查及逆行肾盂、输尿管造影和MRU是重要的诊断手段,肾、输尿管全程切除及输尿管膀胱开口袖状切除是首选术式.

    作者:柳兴明;林则馨;汪辉;王祥波;钱林 刊期: 2002年第05期

  • 垂体腺瘤染色体、细胞增殖周期、PCNA及hst基因的检测

    目的研究人脑垂体腺瘤细胞的生物学特性.方法采用细胞遗传学方法检测50例垂体腺瘤染色体,应用FCM技术检测40例垂体腺瘤细胞增殖周期,采用免疫组化ABC法分别检测48例垂体腺瘤中PCNA和hst基因的表达.结果人脑垂体腺瘤组织形态属良性,却存在不同类型的生物学特性,这些生物学特性的改变与瘤体大小、侵袭性生长方式等肿瘤特性相关.结论垂体腺瘤生物学特性的检测可作为其组织形态学检测的1种补充,为垂体腺瘤的诊治及预后评价提供重要依据.

    作者:马文雄;惠国桢;凌伟华;俞文华;陈桂林 刊期: 2002年第05期

  • 双侧乳腺癌10例临床分析

    双侧乳腺癌包括双侧原发性乳腺癌和一侧乳腺癌术后对侧乳腺发生转移性癌.由于病理上大多数双侧乳腺癌均表现为浸润性癌,故区分原发性和转移性有一定困难.阚秀等[1]提出从肿瘤发生部位、组织类型、原发性病变、生长方式加以鉴别诊断.我们以此为标准,对10例双侧乳腺癌(其中8例双侧原发性乳腺癌,2例对侧转移性乳腺癌)结合文献加以分析.

    作者:曹伟;章骏 刊期: 2002年第05期

  • FⅧ-RAg、CD34在前列腺癌组织中的表达及MVD检测的意义

    目的检测第Ⅷ因子相关抗原(FⅧ-RAg)和CD34在前列腺癌(PC)组织中的表达及微血管密度(MVD),探讨其与前列腺癌组织分化、临床分期及预后的关系.方法应用免疫组化S-P法检测30例PC、30例良性前列腺增生(BPH)组织中FⅧ-RAg和CD34的表达,并检测其MVD.结果CD34表达高者其MVD值高于FⅧ-RAg表达高者.PC与BPH相比较,不同组织分化、临床分期、预后的PC组织间相互比较,其CD34、FⅧ-RAg表达水平及MVD值均有非常显著性差异(P<0.01).结论MVD与前列腺癌组织分化、临床分期和预后密切相关.同时检测肿瘤组织中CD34和FⅧ-RAg的表达,可使其MVD值更准确.

    作者:侯惠莲;张学斌;张冠军;南勋义;王鸿雁;王敏 刊期: 2002年第05期

  • 脾静脉应用于肝门部肿瘤切除术中门静脉入肝血流通道重建2例报告

    肝门部肿瘤在临床上常指第一肝门部肿瘤[1],多见于左右肝管及其汇合部等胆管来源肿瘤,原发性肝癌常侵犯肝门结构或肝门部发生淋巴结转移癌.由于肝门部结构非常复杂,常常使得该处许多手术难以进行,影响手术实施的主要原因之一是门静脉受到肿瘤侵犯.有学者报道切取大隐静脉重建门静脉入肝血流通道,但此方法需另做切口,做2个血管断端吻合,操作费时,同时需暂时阻断门静脉入肝血流,可能会导致肝脏缺血性损害.我们认为脾静脉为门静脉一粗大分支[2],可替代门静脉主干或与门静脉左右分支吻合重建门静脉入肝血流通道,且不需预先阻断门静脉,因此,脾静脉是重建门静脉入肝血流通道的理想血管.我们自2000年4月以来,对2例患者实施脾静脉重建门静脉入肝血流通道均获成功,取得了预期的效果,现报告如下.

    作者:黎保真;许超宇 刊期: 2002年第05期

  • 膀胱癌组织中LM-R、nm23的表达及其与生物学行为关系的研究

    目的探讨膀胱癌不同组织中LM-R、nm23表达的临床意义及其与生物学行为的关系.方法应用免疫组化S-P法,检测65例膀胱移行细胞癌及19例非移行细胞癌组织中LM-R、nm23的表达,并进行比较分析.结果移行细胞癌组LM-R、nm23阳性表达率分别为32.3%(21/65)和60.0%(39/65),非移行细胞癌组LM-R、nm23阳性表达率分别为73.7%(14/19)和21.1%(4/19);2组LM-R、nm23阳性表达率相比较有显著性差异(P<0.05),LM-R高表达、nm23低表达者预后差.结论非移行细胞癌浸润能力及转移能力均强于移行细胞癌(LM-R高表达、nm23低表达);LM-R、nm23表达可作为判断膀胱癌患者预后的参考指标.

    作者:沈阳;李跃武;周齐军 刊期: 2002年第05期

  • 卵巢囊肿蒂扭转的临床与病理分析

    目的探讨卵巢囊肿蒂扭转的临床病理特点及相关因素.方法对99例术后证实为卵巢囊肿蒂扭转患者的临床与病理资料进行回顾性分析.结果①术前、术后诊断符合者83例,漏诊16例,误诊9例.②左侧卵巢囊肿扭转35例,右侧64例.两侧卵巢囊肿直径比较差异无显著性(P>0.05).③临床症状与肿瘤直径、扭转度数呈明显正相关(P<0.01).④病理类型依次为:成熟畸胎瘤42例,巧克力囊肿和浆液性囊腺瘤各13例,黏液性囊腺瘤9例,单纯性囊肿5例,黄体囊肿和卵巢冠囊肿各4例,不成熟畸胎瘤2例,卵巢宫内膜样癌和卵泡膜细胞瘤各1例,广泛坏死未分类者5例.结论详细询问病史,重视妇科普查,积极治疗原发病对本病的防治有重要意义;卵巢肿瘤的蒂扭转应引起高度重视.

    作者:尹如铁;罗国林;刘兴会;刘华友;杨晓芸 刊期: 2002年第05期

  • 乳头溢液的影像学诊断

    目的评价乳腺导管造影和钼靶X线平片摄影在乳头溢液患者诊断中的临床价值.方法回顾性分析50例乳头溢液患者的钼靶X线检查资料,所有病例均经临床检查、钼靶X线平片摄影、乳腺导管造影检查及病理学检查确诊.结果良性病变47例,其中乳腺导管内乳头状瘤35例,乳腺囊性增生病7例,导管扩张症5例;乳腺导管癌3例;乳头溢液伴肿块者19例.乳腺钼靶X线平片摄影发现14例乳头溢液伴肿块者X线表现异常,乳腺导管造影发现导管内乳头状瘤28例(28/35),乳腺增生病2例(2/7),导管扩张症4例(4/5),乳腺导管癌1例(1/3).结论乳腺导管造影用于诊断乳腺导管系统疾病较为准确可靠,乳腺钼靶X线平片摄影对乳头溢液的诊断价值不大,一定条件下两者可联合应用.

    作者:丁波泥;陈道瑾;吴君辉;钱立元 刊期: 2002年第05期

  • bcl-2基因家族在前列腺增生和前列腺癌形成中的作用

    前列腺增生症(benign prostatic hyperplasia,BPH)是中老年男性的常见病和多发病,据国外临床调查报道,50岁以上男性的发病率约为50%;前列腺癌(prostate cancer,PCa)在西方国家导致男性死亡的肿瘤中排名第2位[1],在我国发病率虽然较低,但近年来已呈现上升趋势,成为严重危害中老年男性健康的主要疾病.1990年以后,分子生物学水平的不断发展推动了对其发病机制的深入研究,现已认识到BPH和PCa的发生并非全是细胞增殖的缘故,同时凋亡的减少也占据重要地位,其中具有重要抗凋亡作用的bcl-2基因在BPH和PCa的发生发展中扮演着重要角色,现就bcl-2基因家族在前列腺增生和前列腺癌中的作用作一综述.

    作者:钟恩宏;孙祖越;曹霖 刊期: 2002年第05期

  • 抗卵巢癌相关抗原单克隆抗体的制备及免疫分析方法的建立

    目的研究从卵巢浆液性乳头状囊腺癌患者的腹腔积液中,纯化获得携带CA125抗原决定簇的卵巢癌相关抗原.以此为免疫原,制备单克隆抗体,并建立放射免疫分析方法并应用于临床中.方法腹腔积液经高氯酸分离,凝胶层析及亲和胶蓝柱层析纯化CA125相关抗原.应用细胞融合技术,抗体采用ELISA方法、免疫印记技术进行鉴定.单克隆抗体经碘原法标记放射性核素125I,初步建立1种碘标固相双位点夹心模式的免疫放射分析法.结果腹腔积液中CA125相关抗原经纯化,其比活度达1.1×106 U/mg.共获得6株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,采用2株配对佳的抗体,初步建立1种碘标免疫放射分析法.该方法可测下限为1.2 U/ml,批内变异系数为4.4%,批间变异系数为9.6%,平均回收率为97.0%.初步临床应用的结果表明在正常人血清中CA125相关抗原平均值为(2.147±3.092)U/ml.在60例卵巢癌患者中,平均值为(106.5±187.5)U/ml,两者比较有非常显著性差异(P<0.01).结论以患者腹腔积液中纯化的CA125相关抗原制备单克隆抗体,并建立放射免疫分析方法,初步应用于临床血清学测定中,对卵巢癌的辅助诊断具有一定价值.

    作者:许杨;范振符;陈智周;曹明华 刊期: 2002年第05期

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主管:江西省卫生厅

主办:江西省肿瘤医院 江西省肿瘤研究所