学术投稿

不同时期小鼠胚胎整体石蜡标本的制备技术

刘淑琴;秦建民;曾锦章;郭婷婷;郭琳娜;吴孟超;王红阳

关键词:小鼠胚胎, 石蜡标本, 石蜡切片, 胚胎发育, 组织结构, 原位杂交, 实验方法, 免疫组化, 技术要求, 技术平台, 包埋技术, 完整性, 连续性, 应用, 液氮, 时段, 国内, 病因, 冰冻, 保存
摘要:目前研究小鼠胚胎发育国内外大多采用液氮冰冻胚胎切片方法进行,具有简便、省时、快捷等优点,但整体胚胎尤其大的胚胎切片技术要求高,胚胎切片的完整性和连续性难度大,组织结构较差,另外胚胎长期保存困难[1,2],因此我们通过不断探索,采用石蜡包埋技术制备出不同时段小鼠整体胚胎石蜡切片,结合应用原位杂交、免疫组化等实验方法,为研究小鼠胚胎发育的本质和疾病因等提供了有力的技术平台.
解剖学杂志相关文献
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    脑血管铸型标本的制作,大多是从颈总动脉插管,颈内、颈外动脉一起灌注.由于颈内动脉主要分布于颅、脑内,有颅骨的保护,血管壁较薄,弹性较差,可承受的压力较小.所以在灌注达到一定的压力时,颈内动脉容易被胀破,无法观察清楚脑血管的基本结构.为此,我们对脑血管进行单独插管灌注,并获得了成功.制作的脑动脉血管铸型标本显示清楚,结构比较清晰,分布界线很清楚.这种脑血管铸型标本,对于脑血管临床的诊断和脑外科手术具有较大参考意义(图1,2).具体操作如下.

    作者:吴坤成;李泽宇;刘畅;张文辉;洪辉文;王兴海 刊期: 2005年第06期

  • 龟龄集对大鼠大脑皮质和纹状体内神经丝蛋白表达的影响

    目的:研究龟龄集对大鼠中枢神经系统内神经丝蛋白的影响,探索龟龄集的抗衰老功效.方法:免疫组织化学法.结果:喂药鼠大脑皮质和纹状体内神经丝蛋白标记的胞体和纤维均明显多于对照鼠.结论:神经丝蛋白并非存在于所有的神经细胞内.龟龄集具有延缓神经元衰老,维持神经元神经丝蛋白的合成功能,借以增强动物肢体的活动性及其灵活性.

    作者:任占川;陈一勇;郭连魁 刊期: 2005年第06期

  • 家兔主要淋巴器官肥大细胞的分布特征

    目的:探讨家兔主要淋巴器官肥大细胞(MC)的分布特征与组织化学特点.方法:将家兔脾脏及圆小囊用Carnoy液和(或)4%中性甲醛溶液(NBF)固定,进行常规甲苯胺蓝染色或长时间甲苯胺蓝染色(LTB),光镜观察.结果:家兔的圆小囊MC主要分布于黏膜上皮或黏膜下层结缔组织中,脾脏MC则主要分布于红髓淋巴细胞间,两者非胸腺依赖区的淋巴滤泡中均无MC,Carnoy液固定的家兔组织染色效果更佳,采用LTB染色可不同程度的增加MC的着染性.结论:MC都具有胸腺依赖性或T细胞依赖性,淋巴器官MC与T淋巴细胞位置关系密切.不同固定液和不同时间染色方法所获得的MC数量不同.

    作者:呼格吉乐图;佘锐萍;阿拉坦其其格 刊期: 2005年第06期

  • EGF和bFGF诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化后对Tau和神经元特异性烯醇化酶表达的影响

    目的:观察表皮细胞生长因子(EGF)、碱性成纤维生长因子(bFGF)体外诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)分化为神经细胞后,神经元微管相关蛋白Tau和神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达.方法:取P4代MSCs分为EGF、bFGF和EGF+bFGF及对照组;免疫细胞化学法检测Tau蛋白和NSE表达,ELISA法分析各组细胞Tau蛋白含量.结果:免疫细胞化学检测显示EGF+bFGF组Tau蛋白和神经元特异性烯醇化酶NSE阳性细胞率高,bFGF组、EGF组和对照组依序递减;各组Tau蛋白含量结果与Tau蛋白阳性细胞率一致.结论:EGF和bFGF均可促进MSCs向神经细胞分化,并表达Tau蛋白和NSE,二者具有协同作用.

    作者:鄢文海;许烜慧;韩雪飞;马岚;许燕;王建枝;邢莹 刊期: 2005年第06期

  • N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸对血小板洐生生长因子介导的NIH3T3细胞增殖的抑制调节作用

    目的:探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对血小板洐生生长因子(PDGF)介导的NIH3T3细胞增殖的抑制调节作用.方法:采用MTT法和免疫组化法检测NIH3T3细胞增殖和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果:在10-10~10-8 mol/L浓度范围内,AcSDKP对PDGF介导的NIH3T3细胞增殖均有抑制作用,并在10-9 mol/L浓度时其抑制作用佳.PDGF对NIH3T3细胞PCNA的表达具有增强作用,而AcSDKP对PDGF介导的NIH3T3细胞PCNA的表达有显著抑制作用.结论:AcSDKP对PDGF介导的NIH3T3细胞增殖有明显抑制作用.

    作者:杨方;赵丹;马文东;罗玲;户万秘;王丽萍;朱曦玲;孙树勋 刊期: 2005年第06期

  • 原位分子杂交中脱片问题浅析

    核酸分子杂交技术是当今分子生物学研究的重要手段.原位分子杂交技术是分子生物学和组织化学结合的成果,能准确定位组织细胞内的特定基因表达.但分子杂交实验操作步骤繁琐,实验周期长,条件要求高,涉及实验试剂多,常常因为很小的因素而导致实验失败.原位分子杂交实验中,所有的操作均是针对载玻片上的目的组织进行的,因此,实验中的脱片就是常常困扰实验者的一个问题[1~3].在此,笔者根据自己的实际操作经验和资料研究,对脱片问题进行简单分析,以求对实验有所帮助.

    作者:李冰;刘同慎;朱玉红;吕增华 刊期: 2005年第06期

  • P2Y及P2Y1嘌呤受体研究进展

    1嘌呤受体的分类1929年Drury和Szent-Gyorgyi首次证明了腺核苷酸和腺苷具有生物学效应:如静脉注入腺苷后可引起豚鼠心动过缓、尿分泌抑制和血管舒张等现象.1953年Holton发现刺激神经时其感觉末稍可释放ATP.此后,对于腺核苷酸和腺苷药理学和组织反应方面的报道逐渐增多.

    作者:谢辉;胡勇;李之望 刊期: 2005年第06期

  • 喉咽、食管入口的解剖学观测及其临床意义

    介入放射学内支架置入治疗使许多难治性食管病变发生了翻天覆地的变化[1,2].但是,由于对食管入口和食管上段解剖结构的认识存在极大的偏差,内支架置入治疗高位食管疾病的应用相对较少[3,4],并且大多采用骨性标志--颈椎来定位支架上缘.体位对食管入口的位置影响较大[5],因而X线下以椎体作为解剖标志并不能直接准确显示食管入口的位置.本研究旨在进行喉咽、食管入口位置关系的解剖学研究,为体质调查积累资料,更为准确置入食管内支架治疗高位食管疾病提供解剖学依据.

    作者:韩新巍;吴刚;臧卫东;陈雪梅;李寄云 刊期: 2005年第06期

  • 不同剂量贫铀污染对大鼠皮层及海马结构生长抑素阳性神经元的影响

    目的:探讨贫铀污染对大鼠皮层及海马结构SS阳性神经元的影响.方法:采用不同剂量贫铀颗粒气管灌注大鼠3个月后,观察大鼠皮层及海马结构各区SS阳性神经元形态和数目的变化情况.结果:DU 1 mg组、DU 3 mg组和DU 5 mg组大鼠皮层SS阳性神经元染色较浅,阳性神经元数目与NS组比较均明显减少.海马结构各区DU 3 mg组和DU 5 mg组SS阳性神经元染色较浅,阳性神经元数目与NS组比较也明显减少.结论:贫铀污染能引起大鼠皮层和海马结构SS阳性神经元数目减少,并可能通过此途径引起脑功能障碍.

    作者:张珩;李积胜;王华仁;陈俊 刊期: 2005年第06期

  • 线粒体在免疫介导的神经元损伤过程中的特征

    目的:观察免疫介导的神经元损伤的发病机制.方法:利用猪的脊髓前角匀浆免疫Lewis大鼠,通过透射电镜对Lewis大鼠的脊髓前角运动神经元及突起进行观察.结果:Lewis大鼠脊髓前角运动神经元有不同程度的变性丢失,残存的神经元内可见大量异常的线粒体及神经丝的异常聚集、Golgi器及内质网扩张,基质水合过度或基质脱水,核及核仁相对正常.结论:免疫介导的神经元变性过程中,线粒体可能是抗体攻击的目标,导致细胞能量代谢障碍,继发神经元变性死亡.

    作者:刘亚玲;郭艳苏;许蕾;吴书玉;吴东霞;李春岩 刊期: 2005年第06期

  • 人精子蛋白SP22在睾丸、精子中的分布与定位

    目的:以原核表达的人精子蛋白SP22制备其兔多克隆抗体,研究人精子蛋白SP22在人睾丸和精子中的分布与定位.方法:在E. Coli中诱导表达SP22基因,以纯化出的重组人精子蛋白htSP22为抗原制备兔抗人SP22多克隆抗体,运用免疫组织化学分析SP22在人睾丸和精子中的分布与定位.结果:表达出了分子量约22 000的重组htSP22蛋白,制备获得了能特异性识别睾丸、精子中天然SP22蛋白的兔抗人SP22多克隆抗体.免疫组织及细胞化学证明SP22存在于曲细精管中各类生精细胞及精子头部表面.结论:制备的抗体具有特异性,SP22存在于睾丸曲细精管中各类生精细胞及精子头部表面.

    作者:宛传丹;黄宇烽;汪萍 刊期: 2005年第06期

  • 大鼠肢体缺血再灌注可致脑组织细胞凋亡

    目的:探讨肢体缺血再灌注(limbs ischemia-reperfusion,LIR)对脑组织的影响.方法:复制大鼠LIR模型,采用尼氏染色观察脑组织病理学改变,TUNEL法检测细胞凋亡情况,免疫组化和Western印迹法检测凋亡相关因子Bcl-2、细胞色素C(cytoC)、Caspase-3的表达变化.结果:大鼠LIR后,脑组织海马区、中脑红核区神经元细胞受损,脑组织出现水肿裂隙,cyto C、Caspase-3凋亡相关蛋白表达明显上调,24 h达高峰,与细胞凋亡数量的增加相一致,Bcl-2表达与再灌时程呈负相关.结论:LIR后可导致脑组织损伤,并出现细胞凋亡,其发生机制与Caspase-3、cyto C、Bcl-2凋亡相关蛋白的表达变化有关.

    作者:周洪霞;张宇新;张连元;张子明;张作风;董淑云;魏子峰 刊期: 2005年第06期

  • 不同剂量碘化钾对大鼠子代脑发育的影响

    目的:观察不同剂量碘化钾对仔鼠神经元特异性烯醇化酶(NSE)表达的影响.方法:断乳后1个月大鼠饮用不同浓度的碘水,饲养3个月后雌雄合笼,取第2代60日龄仔鼠,测量血清甲状腺激素值,以NSE为观察指标,采用光镜观察免疫组织化学染色的标本结合图像分析的方法,研究仔鼠大脑的发育情况.结果:各碘过量组甲状腺激素水平呈下降趋势,100 HI组呈明显甲低状态;海马CA3区NSE阳性细胞的NA、VV和灰度值随碘过量的严重程度而呈下降趋势,在100 HI组呈明显的统计学差异.结论:大鼠对碘摄入量的增高有较强的耐受性,在100 HI组可以观察到以NSE表达降低为主要特点的脑发育障碍,其发病机理可能与碘过量所致的甲状腺功能低下有关.

    作者:王俊艳;刘金宝;刘皓;陈祖培 刊期: 2005年第06期

  • 认知心理学与组织学教学过程的设计

    认知心理学认为:学习的过程是信息加工的过程,即信息的编码、贮存和提取的过程;在学习过程中,学习者通过自己对来自环境刺激的信息进行内在的认知加工而获得能力.当新接触的信息或概念与原有的知识结构中的前概念对立或者矛盾的时候,是实现新的概念代替原有概念的佳契机.心理学研究还表明:人不能长期容忍认知心理的不平衡,人都有填补认知空缺、解决认知冲突的功能.一旦引发这种认知冲突,就会引起学生认知心理学的不平衡,就能激起学生的求知欲和好奇心[1].根据认知学的这个理论,我们在教学中,将组织学教学过程分为六个环节(以肌组织这一章节为例).

    作者:施明选 刊期: 2005年第06期

  • PAS染色技术的改进

    糖类的组织化学长期以来主要靠PAS技术且沿用至今.临床上常用于诊断细胞中糖元的丢失,黏液变性,霉菌,肿瘤等多种疾病.作为PAS染色的主要染液Schiff氏液的配制是该染色成功的关键.传统的Schiff氏液的配制[1,2],使用异性重亚硫酸钠等.通常一次性大量配制备用,时间存放稍久,效果便不甚满意.笔者在多年工作中,摸索了一种配制Schiff氏液的方法,配制只需2 h,放置于4℃冰箱中3~5年可反复使用,染色效果优良,现将该法介绍如下.

    作者:钟妮娜;耿毅;彭西 刊期: 2005年第06期

  • 库普弗细胞对肝星状细胞活化和增殖的影响

    肝纤维化是各种慢性肝病向肝硬化发展的必经阶段,其形成过程可简单归纳为[1]:致肝病因子损伤肝细胞→库普弗细胞(KC)激活→分泌多种细胞因子(CK)→星状细胞(HSC)激活、增殖、转化为肌样成纤维细胞→产生大量细胞外基质(ECM)→合成大于降解并沉积→肝纤维化形成.

    作者:贾文婷;郭顺根;赵海军;庞弈晖;戚红丹 刊期: 2005年第06期

  • 猪肺动脉干的形态学和生物力学特性

    目的:探讨猪肺动脉干几何形态、显微结构成分与力学特性在增龄过程中的变化规律,为猪→人异种心脏移植吻合血管提供必要的资料.方法:应用组织学、计算机图像分析法以及生物软组织力学试验机,对猪肺动脉干进行计量形态学和力学试验.结果:猪肺动脉干的平均管径、壁厚、管腔面积、管壁面积与月龄间呈直线正相关关系,分别以1.08 mm/月、0.09 mm/月、14.4 mm2/月和7.31 mm2/月的速率增加.管壁中胶原纤维、弹性纤维、平滑肌的含量在增龄过程中未见明显变化.猪肺动脉干一维载荷下的材料常数和弹性模量随增龄虽有增加,但无统计学上的差异.结论:1~7月龄肺动脉干几何形态与月龄密切相关;显微结构成分含量和力学特性随月龄的变化不大.

    作者:黄铁柱;余明华;张一飞;李文春 刊期: 2005年第06期

  • 太行山猕猴掌(跖)面花纹强度的比较分析

    目的:研究太行山猕猴掌面和跖面的花纹强度(PI)在两性之间和左右两侧之间的差异性.方法:运用SPSS 11.0统计软件,对53只猕猴(♂:20,♀:33)的掌面和跖面7个主要花纹区,即近端小鱼际(HP)、远端小鱼际(HD)、大鱼际(TH)及指间4区(Ⅰ-Ⅳ)的花纹强度进行统计分析.结果:掌面和跖面所有研究变量没有一项达显著性差异水平.结论:掌面和跖面的花纹强度在两性之间和左右两侧之间都没有显著性差异.

    作者:胡春红;赵晓进 刊期: 2005年第06期

  • 先天性脐膨出合并右足6趾畸形一例

    孕母22岁,孕1产1,剖腹生下一女性畸胎.患儿出生十几分钟后死亡.胎龄11个月,身高35 cm,体重2000克.检查见头围30 cm,胸围21 cm.脐位正常,脐带扁圆状,长约5 cm.脐带左侧有一纵向裂口,长约7 cm,上始自劍突下2.5 cm,下至耻骨联合上3 cm.

    作者:况花荣;刘四君;林卡莉;钟瑞冲 刊期: 2005年第06期

  • 主动脉弓分支变异一例

    头颈、胸部局部标本1件,在解剖时发现主动脉弓分支变异,发出5个分支.(1)右颈总动脉:起于主动脉弓凸侧、从气管左前方斜向右上,穿气管前方再上行于气管、食管右外侧,至甲状软骨上缘高度分为颈内、外动脉.动脉管外径起端为11 mm,走行至甲状软骨下方时动脉管径为9 mm.(2)左颈总动脉:在右颈总动脉左侧2 mm处起于主动脉弓,行程正常.

    作者:洪虹;潘开超;刘志坚;唐洗敏 刊期: 2005年第06期

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