陈峻崧；窦骏；赵枫姝；陈国兵；房雪峰；洪晓武；唐权
SARS-Cov是引起非典型性肺炎的病原体.S和M蛋白都是SARS冠状病毒主要的膜结构蛋白.研究显示,冠状病毒感染细胞过程中,病毒表面膜结合蛋白起决定性作用.通过网络数据库结合生物软件分析的方法预测可能在SARS-Cov 感染过程中起重要作用并具较好抗原性参数的膜结合蛋白结构区域作为抗原表位.构建多表位串联基因片段,接入载体pET-32a后验证表明,该多表位串联基因可以在原核细胞内高效表达,从而为基于表位的SARS-Cov疫苗的进一步研制奠定了基础.
作者：汪晓华；童德妍；徐焕宾；熊凌云；熊思东 刊期： 2004年第05期
HDM能引起多种变应性疾病,已发现的HDM变应原有19类,其中第1类和第2类为重要.变应原来源的多肽或者编码HDM变应原多肽的DNA可以用于制备HDM性哮喘疫苗.应用一些可生物降解的微球包装质粒DNA,或者同时运用CpG以及编码Th1细胞因子的DNA等能加强预防接种疫苗引起的免疫反应,起到佐剂的作用;以BCG等与HDM变应原进行联合免疫亦能增强其效应.随着研究的深入,有效预防过敏性哮喘定将成为可能.
作者：范怡敏；程训佳 刊期： 2004年第05期
为阐明天花粉蛋白(Tk)诱导免疫抑制和基因调控的机制,应用ELISA方法动态测定小鼠OVA特异性T淋巴细胞培养上清液中T细胞亚群相关细胞因子的含量,观察Tk对高、低易感品系小鼠T细胞分泌细胞因子格局的影响.发现Tk作用下,高易感品系C57BL/6 (H-2b) IL-4、IL-10分泌量大幅度增高,IFN-γ显著下降;而低易感品系C3H/He (H-2k)相应的细胞因子变化极小.上述结果表明:(1)Tk可诱导功能性T细胞亚群向Th2/Tc2方向分化,并导致OVA特异性T细胞增殖受抑;(2)T细胞亚群分化与MHC背景密切相关.提示Tk作用下T细胞亚群的分化受MHC基因调控.
作者：王保龙；周芸；江阳；辛利军；周光炎 刊期： 2004年第05期
RNAi,指通过反义RNA与正链RNA形成双链RNA特异性地抑制靶基因表达的现象,是广泛存在于植物、线虫、果蝇、真菌和动物中的一种基因沉默机制,如同脊椎动物体内的免疫,能特异地抵抗病毒的感染.本文从转录水平、转录后水平、翻译水平上阐述了RNAi的抗病毒作用机制,以及在抗病毒方面的研究进展和抗病毒感染的途径和方法,说明RNAi在基因水平上对机体的保护作用.由于RNAi具有高效性、特异性、易构性等特点,为人类预防治疗病毒感染开辟了一条新途径.
作者：康洁；刘福林 刊期： 2004年第05期
构建抗人肝癌细胞单链抗体库,从中筛选与肝癌细胞特异结合的高亲和力单链抗体.从Hep G2细胞免疫的BALB/c小鼠脾脏提取总RNA,RT-PCR扩增小鼠抗体重、轻链可变区基因,用(Gly4Ser)3 连接肽基因,经重叠延伸反应,在体外将VH和VL连接成单链抗体(scFv)基因,并克隆入噬菌粒载体pCANTAB5E中,构建噬菌体单链抗体库.以Hep G2细胞为抗原对抗体库进行淘选,ELISA法鉴定各单克隆与肝癌细胞的结合活性,并对阳性克隆进行表达.成功构建了库容为1.1×106抗肝癌细胞的噬菌体单链抗体库,经筛选得到了与Hep G2细胞具有较强结合能力的单链抗体,实现了scFv在大肠杆菌中的可溶性表达.序列测定结果表明,VH和VL基因符合小鼠抗体可变区特征,scFv基因拼接正确.
作者：粘红；安利国；赵岩；陈吉中；范国才；王清明 刊期： 2004年第05期
环磷酰胺是肿瘤治疗中常见的烷化剂,严重影响骨髓、胸腺和脾脏的功能导致患者免疫力低下,容易患各种感染性疾病,疫苗接种成功率也很低,因此,寻找有效疫苗佐剂来提高这群人的疫苗接种成功率具有重要的实际意义.近年来,大量的研究显示细菌DNA中存在非甲基化的CpG二核苷酸序列(即CpG基序)能激活免疫系统,诱导天然免疫应答分泌免疫球蛋白和各种细胞因子.人工合成含CpG基序的脱氧寡核苷酸(CpG ODN)与蛋白疫苗同时接种正常小鼠,能提高抗原特异性免疫应答,诱导出高水平保护性抗体.本实验应用CpG ODN与乙肝疫苗同时肌肉注射到免疫抑制小鼠体内,观察其免疫效应,为临床上出现的免疫抑制人群进行有效疫苗接种提供依据.
作者：秦卫兵；蒋建伟；陈巧儿；韦相才；欧汝强 刊期： 2004年第05期
用流式细胞术测定婴幼儿哮喘、婴幼儿肺炎、婴幼儿急性上呼吸道感染患儿外周血淋巴细胞CD19、CD19+CD23+表达,用化学发光免疫法测定其血清总IgE水平,以探索婴幼儿呼吸道疾病时B淋巴细胞及其活化状况.结果表明,婴幼儿哮喘组CD19+、CD19+CD23+表达、血清总IgE水平明显增高,婴幼儿肺炎、婴幼儿急性上呼吸道感染无升高;婴幼儿哮喘组CD19的表达阳性率和绝对值分别与CD19+CD23+表达阳性率和绝对值均呈正相关.提示婴幼儿哮喘存在明显的B淋巴细胞数量增多及活化异常,婴幼儿肺炎和婴幼儿急性上呼吸道感染B淋巴细胞状况无明显改变.
作者：罗晓明；周馥英；周永列；王欣欣 刊期： 2004年第05期
为了探讨TNF-α基因启动区-308、-238位点多态与多发性骨髓瘤(MM)易感性的关系.采用SSP-PCR(sequence specific primer-PCR)方法检测56例中国汉族MM患者和114名中国汉族健康对照者TNF-α基因启动区-308、-238位点等位基因频率,分析两位点多态性与MM易感性的关系.结果显示,MM组与对照组-238位点A的频率分别为15.18%(17/112);15.79%(36/228),两组间比较无显著差异(P=0.884);MM组与对照组-308位点A的频率分别为1.79%(2/112);9.21%(21/228),两组间比较有显著差异(P=0.010),MM组明显低于对照组.结论:在所研究的人群中未发现TNF-α基因启动子-238位点多态性与MM易感性相关,但MM患者TNF-α基因启动区-308位点A的频率明显低于对照组,推测TNF-α-308位点A为MM发病的保护性因素.
作者：金慧燕；王东星；郭垞；陈仙度；姜华；侯健 刊期： 2004年第05期
研究ICOS/GL50信号在T细胞体外增殖、细胞因子分泌以及B细胞抗体分泌中的作用,进一步探讨该信号途径在机体体液免疫应答中的作用机制.采用3H-TdR检测GL50-L929转染细胞和特异性鼠抗人GL50单抗对T细胞体外增殖的作用;ELISA法检测GL50-L929转染细胞和抗人GL50单抗对T细胞分泌IL-2、IL-10以及ICOS-L929转染细胞和特异性鼠抗人GL50单抗对PWM介导的B细胞分泌抗体的效应.结果提示GL50-L929转染细胞能够促进经抗CD3单抗活化的T细胞增值和分泌IL-10,而抗GL50单抗可以阻断这些效应.ICOS分子与B细胞上GL50分子的结合上调PWM介导的B细胞分泌抗体而抗GL50单抗则下调这一效应.这些表明,ICOS/GL50信号途径在机体T细胞依赖的体液免疫应答反应中发挥着重要的调节作用.
作者：朱伟；邓忠彬；陆长明；於葛华；李文香；马泓冰；殷昌硕；张学光 刊期： 2004年第05期
将自行设计、合成的乙型肝炎病毒多表位抗原基因BPT,克隆入真核表达载体pCDNA3.1,构建重组质粒pCDNA3.1/BPT.后者经脂质体法转染小鼠BALB/c 3T3细胞,G418加压筛选出阳性转染细胞,并用间接免疫荧光法鉴定其在小鼠BALB/c 3T3细胞的表达.该重组质粒经胫骨前肌注射小鼠,100 μg/次每只小鼠,间隔2周加强一次,共3次.免疫诱发了特异性抗体和淋巴细胞增殖反应,并用PCR法在小鼠的心脏、肝脏及肺组织中检测到pCDNA3.1/BPT,这为研究HBV多表达抗原的核酸疫苗提供了初步的资料.
作者：骆利敏；李明；夏虎；黄建生；吴英松 刊期： 2004年第05期
为探讨SARS患者的CD4+ T淋巴细胞改变与胸部X 线表现及临床表现的动态变化关系,为SARS的诊断治疗提供相应依据.(1)通过每天测体温,了解热度、热程以及发热规律;(2)入院后行CD4+ T淋巴细胞计数检测,此后每隔2～3 d进行一次;(3)每隔24～72 h摄胸部正侧位片.结果23例均有发热,37.8～40.1℃.重症患者热程(12.82±4.49)d;普通患者为(7.60±3.14)d,(P＜0.05).入院初CD4+ T细胞平均为17.9%±5.6%;治疗15～30 d后为29.4%±5.4%.高峰期CD4+T细胞低12.5%±6.2%,与其他各期比较,差异有显著性意义(P＜0.01);恢复期5例肺纤维化患者CD4+T细胞为22.4%±4.8%,较18例无肺纤维化患者31.4%±4.4%明显降低(P＜0.01);5例并发肺纤维化患者恢复时间(35.8±12.5) d,较18例无肺纤维化患者(25±8.6) d明显延长(P＜0.01).通过CD4+ T细胞和胸部X线的动态观察,两者基本呈平行变化,但CD4+ T细胞降低较胸部X线改变发生早,恢复时间较晚,且与肺纤维化的形成有关.
作者：杨桂林；陆普选；胡毅文；刘锦清；杨根东；刘艳；周伯平；张雁云 刊期： 2004年第05期
为了探讨活动性狼疮肾炎(LN)患者外周血单个核细胞(PBMC)中防御素α1 、α3 mRNA的表达,从33例女性活动性LN患者及21例健康女性PBMC中提取总RNA,采用半定量RT-PCR的方法,以GAPDH为内参照,测定防御素α1 、α3 mRNA的相对表达.发现LN患者的防御素α1 、α3 mRNA表达均较健康人升高(P＜ 0.01).防御素α1 、α3 mRNA在活动性LN患者PBMC中的高表达提示防御素α1 、α3可能参与LN的发病.
作者：张益民；叶任高；董秀清；李幼姬 刊期： 2004年第05期
使用干细胞生长培养基(SCGM)和RPMI 1640培养基,设计不同浓度的抗CD3单抗、IL-2和PHA的培养条件,从健康成人外周血单个核细胞(PBMC)中高效扩增细胞因子诱导的自然杀伤细胞(CINK),并用MTT法检测其细胞毒活性,优化CINK细胞的体外扩增技术.用优化的方法扩增12例不同类型恶性肿瘤患者CINK细胞.结果显示,在以SCGM为基础培养基时,PBMC经抗CD3单抗、IL-2作用后获得大量增殖,在PHA存在时获得大增殖(P＜0.05),扩增的CINK细胞以CD3-CD56+NK细胞为主,扩增细胞的细胞毒活性显著高于相同来源的CIK细胞和CD3AK细胞,为应用CINK细胞进行自体肿瘤过继免疫治疗奠定了基础.
作者：黄朝晖；华东；王丰；李莉华；王金福 刊期： 2004年第05期
研究灭活SARS病毒的免疫原性.SARS病毒F69株经甲醛灭活后,加入氢氧化铝佐剂,以3种剂量接种BALB/c小鼠,定时采血,测定特异性抗体的滴度及其中和活性,同时用化学发光酶联免疫法测定抗血清与SARS病毒结构蛋白的反应特异性及其相对强度.结果发现,小鼠接种疫苗4 d后,血清中可检测到IgM抗体,直至26 d后逐渐下降;IgG抗体在初次免疫8 d后出现,47 d时达高峰,63 d后进入稳定期;不同剂量组的抗体滴度具有明显剂效关系,低剂量组和中剂量组滴度峰值为1∶19 200,高剂量组滴度峰值为1∶38 400.中和实验结果表明,小鼠所产生的抗体具有中和病毒活性,在63 d时,低剂量组和中剂量组血清的中和效价为1∶1 280,高剂量组血清的中和效价为1∶5 120.抗体分类结果表明,小鼠抗血清中含有针对多种SARS病毒结构蛋白的特异性抗体,其中,针对N蛋白、S4蛋白和S2蛋白的抗体水平相对较高,而抗M抗体、抗3CL抗体的水平相对较低.上述结果说明,SARS病毒F69株经甲醛灭活后,各主要结构蛋白仍保持较强免疫原性;免疫小鼠后,可以诱导产生高滴度的特异性混合抗体,在体外可以保护敏感细胞不受SARS病毒攻击.
作者：熊盛；王一飞；张庶民；陆家海；孟民杰；张美英；刘新建；张传海；刘石生；李久香；万卓越；郑焕英；鄢心革 刊期： 2004年第05期
为获得能结合C1q并模拟C1q受体(C1qR)配体结合位点的短肽,以C1q为钓饵蛋白筛选噬菌体环七肽库,采用C1q结合ELISA、U937细胞配体结合抑制试验、多聚IgG(AIgG)竞争抑制试验鉴定阳性克隆,再进行单链DNA测序和分析.结果经3轮筛选后,随机挑选23个噬菌体克隆进行ELISA鉴定,10个克隆与C1q有较强的结合;利用U937细胞配体结合抑制试验,得到了7个阳性克隆;从其展示肽DNA测序结果推导氨基酸序列,获得7个短肽序列:QTPFQLW、NPFNWTS、SPFXLTS、FLTWLDP、FSTFLYP、GPMWWSY和NPFXLIL.
作者：李文君；张丽芸；陈政良 刊期： 2004年第05期
乙肝病毒(HBV)的清除和预后转归在很大程度上取决于宿主的免疫应答.人类白细胞抗原(HLA)复合体是调节机体免疫应答的重要基因群,为此,我们利用基因芯片技术分析了上海地区慢性乙型肝炎患者HLA I类中的A位点与HLA II类中的DRB1位点的基因分布,以探索乙型肝炎慢性化与HLA-A和HLA-DRB1的可能关联.
作者：章晓鹰；陈建杰；陈兰羽 刊期： 2004年第05期
为探索CFA促进小鼠对蛋白质抗原产生Th1介导的特异性免疫应答的机制,我们用OVA+CFA和OVA+IFA免疫C57BL/6小鼠,并于第3天、第8天后用MACS+FACS法分离引流淋巴结中NKT细胞,在体外经CD3单抗刺激2 d后测定其分泌的细胞因子数量及格局.同时于免疫后第8天分离引流淋巴结抗原特异性T细胞,测定其分泌细胞因子的格局;并于再次免疫后2周检测小鼠血清抗体类型.ELISA结果显示,与OVA+IFA组相比,OVA+CFA免疫小鼠引流淋巴结NKT细胞和抗原特异性T细胞分泌IFN-γ的能力均显著升高(P<0.05),且血清抗体类型以IgG2a为主.表明CFA促进抗原特异性Th0细胞极化为Th1细胞可能是通过激活NKT细胞使之在免疫应答局部产生大量的IFN-γ而实现的.
作者：王胜旺；张勇；张继英；张汉明；张惠珍；王福庆 刊期： 2004年第05期
构建、鉴定结核杆菌Ag85A和细胞因子GM-CSF共同表达质粒,为研究新型抗结核杆菌DNA疫苗提供新的策略.先从质粒pBSby5中扩增出结核杆菌Ag85A基因序列并插入到质粒pIRES上成为pI85A,用PCR方法从pc-mGM-CSF质粒中扩增出mGM-CSF,构建于pI85A质粒上,成为共同表达质粒pI85AGM.然后转染7721细胞,进行蛋白的表达和鉴定.结果经酶切鉴定和DNA测序证实重组质粒构建正确.通过RT-PCR、SDS-PAGE、Western blot检测证实Ag85A与mGM-CSF基因的转录和蛋白表达正确.Ag85A与mGM-CSF免疫组小鼠的CTL活性明显增强.表明细胞因子GM-CSF和结核杆菌Ag85A共同表达载体构建成功,并能诱导小鼠的CTL活性,为研制新型结核病疫苗奠定了基础.
作者：陈峻崧；窦骏；赵枫姝；陈国兵；房雪峰；洪晓武；唐权 刊期： 2004年第05期
原发性免疫缺陷病(PID)是一组主要由单基因遗传的免疫系统疾病,其临床共同特征为容易感染、生存期短,自身免疫性疾病和恶性肿瘤的发生率高.早期诊断、及时治疗将挽救患者生命、改善其生活质量和延长寿命.基因分析为确诊PID的重要手段,国际PID基因突变数据库中已收录3 049例PID;免疫重建可根治多数PID,国际上已有近2 000例PID病儿接受骨髓移植;而我国筛查PID网络尚不健全,基因诊断PID工作刚起步,尚无骨髓移植治疗PID报道(香港特区除外).研究表明,引起PID的基因在免疫细胞的发育、免疫应答、免疫监视和维持内环境稳定等方面起重要作用,PID为免疫病理学研究提供了极好的天然模型.因此,本文从全球PID的研究现状、治疗和监控、发病机制与免疫调控;我国PID研究现状、开展PID诊断、治疗的策略诸方面,强调重视PID研究对PID的诊断、基因咨询、明确预后,干预治疗的临床意义,和促进免疫相关疾病发病机制、诊断和开辟新治疗途径等方面的研究价值.
作者：蒋利萍；杨锡强 刊期： 2004年第05期
Ly-6E是一类结构相近且与糖基磷脂酰肌醇(GPI)连接的细胞表面蛋白中的一员,其表达与SLE疾病相关.本文就Ly-6E分子在免疫学中的作用作一综述,其在SLE发病中的作用和地位尚待研究.
作者：华晶；沈南；陈顺乐 刊期： 2004年第05期
现代免疫学杂志
主管:上海市教育委员会
主办：上海市免疫学研究所,上海市免疫学会
