范怡敏；程训佳
将自行设计、合成的乙型肝炎病毒多表位抗原基因BPT,克隆入真核表达载体pCDNA3.1,构建重组质粒pCDNA3.1/BPT.后者经脂质体法转染小鼠BALB/c 3T3细胞,G418加压筛选出阳性转染细胞,并用间接免疫荧光法鉴定其在小鼠BALB/c 3T3细胞的表达.该重组质粒经胫骨前肌注射小鼠,100 μg/次每只小鼠,间隔2周加强一次,共3次.免疫诱发了特异性抗体和淋巴细胞增殖反应,并用PCR法在小鼠的心脏、肝脏及肺组织中检测到pCDNA3.1/BPT,这为研究HBV多表达抗原的核酸疫苗提供了初步的资料.
作者：骆利敏；李明；夏虎；黄建生；吴英松 刊期： 2004年第05期
为获得能结合C1q并模拟C1q受体(C1qR)配体结合位点的短肽,以C1q为钓饵蛋白筛选噬菌体环七肽库,采用C1q结合ELISA、U937细胞配体结合抑制试验、多聚IgG(AIgG)竞争抑制试验鉴定阳性克隆,再进行单链DNA测序和分析.结果经3轮筛选后,随机挑选23个噬菌体克隆进行ELISA鉴定,10个克隆与C1q有较强的结合;利用U937细胞配体结合抑制试验,得到了7个阳性克隆;从其展示肽DNA测序结果推导氨基酸序列,获得7个短肽序列:QTPFQLW、NPFNWTS、SPFXLTS、FLTWLDP、FSTFLYP、GPMWWSY和NPFXLIL.
作者：李文君；张丽芸；陈政良 刊期： 2004年第05期
环磷酰胺是肿瘤治疗中常见的烷化剂,严重影响骨髓、胸腺和脾脏的功能导致患者免疫力低下,容易患各种感染性疾病,疫苗接种成功率也很低,因此,寻找有效疫苗佐剂来提高这群人的疫苗接种成功率具有重要的实际意义.近年来,大量的研究显示细菌DNA中存在非甲基化的CpG二核苷酸序列(即CpG基序)能激活免疫系统,诱导天然免疫应答分泌免疫球蛋白和各种细胞因子.人工合成含CpG基序的脱氧寡核苷酸(CpG ODN)与蛋白疫苗同时接种正常小鼠,能提高抗原特异性免疫应答,诱导出高水平保护性抗体.本实验应用CpG ODN与乙肝疫苗同时肌肉注射到免疫抑制小鼠体内,观察其免疫效应,为临床上出现的免疫抑制人群进行有效疫苗接种提供依据.
作者：秦卫兵；蒋建伟；陈巧儿；韦相才；欧汝强 刊期： 2004年第05期
为进一步探明原发性肾小球肾炎(PGN)的发病机制,我们对IL-18基因表达及IL-18基因启动子区单核苷酸多态性(SNP)与PGN发病的关系进行了探讨.首先,分离30例PGN患者与12名正常人外周血单个核细胞(PBMC),分别提取RNA和DNA,半定量RT-PCR检测PBMC IL-18 mRNA表达水平;PCR扩增IL-18启动子区序列并作双向DNA测序,检测SNP.结果发现,PGN患者PBMC IL-18 mRNA表达较对照组显著升高(P＜0.001);IL-18启动子区-656T/G和-607 A/C等位基因频率在PGN患者和正常对照组间均存在显著性差异(P＜0.05),137G/C未发现有显著性差异(P＞0.05).结果提示,IL-18启动子区SNP可能与IL-18的产生有关,并参与PGN的发病机制.
作者：陈惠清；刘钟滨 刊期： 2004年第05期
SARS-Cov是引起非典型性肺炎的病原体.S和M蛋白都是SARS冠状病毒主要的膜结构蛋白.研究显示,冠状病毒感染细胞过程中,病毒表面膜结合蛋白起决定性作用.通过网络数据库结合生物软件分析的方法预测可能在SARS-Cov 感染过程中起重要作用并具较好抗原性参数的膜结合蛋白结构区域作为抗原表位.构建多表位串联基因片段,接入载体pET-32a后验证表明,该多表位串联基因可以在原核细胞内高效表达,从而为基于表位的SARS-Cov疫苗的进一步研制奠定了基础.
作者：汪晓华；童德妍；徐焕宾；熊凌云；熊思东 刊期： 2004年第05期
诱导有效的抗肿瘤免疫应答是肿瘤免疫治疗的主要目标,由于肽疫苗和DNA疫苗具备较高的安全性和实用性,因而成为肿瘤疫苗学领域中发展为迅速的肿瘤免疫治疗方案之一.但是这两种疫苗形式仍然具有各自的缺点,其抗原呈递动力学存在显著差异,提示这两种疫苗可能存在互补性.本研究对多肽疫苗和DNA疫苗进行综合,设计出新型肽-DNA复合疫苗,并以P815A为模式抗原,证实了该种新型疫苗激发抗肿瘤免疫的有效性.
作者：刘宏利；赵建平；倪兵；贾正才；周伟；赵婷婷；邹丽云；吴玉章 刊期： 2004年第05期
用流式细胞术测定婴幼儿哮喘、婴幼儿肺炎、婴幼儿急性上呼吸道感染患儿外周血淋巴细胞CD19、CD19+CD23+表达,用化学发光免疫法测定其血清总IgE水平,以探索婴幼儿呼吸道疾病时B淋巴细胞及其活化状况.结果表明,婴幼儿哮喘组CD19+、CD19+CD23+表达、血清总IgE水平明显增高,婴幼儿肺炎、婴幼儿急性上呼吸道感染无升高;婴幼儿哮喘组CD19的表达阳性率和绝对值分别与CD19+CD23+表达阳性率和绝对值均呈正相关.提示婴幼儿哮喘存在明显的B淋巴细胞数量增多及活化异常,婴幼儿肺炎和婴幼儿急性上呼吸道感染B淋巴细胞状况无明显改变.
作者：罗晓明；周馥英；周永列；王欣欣 刊期： 2004年第05期
HDM能引起多种变应性疾病,已发现的HDM变应原有19类,其中第1类和第2类为重要.变应原来源的多肽或者编码HDM变应原多肽的DNA可以用于制备HDM性哮喘疫苗.应用一些可生物降解的微球包装质粒DNA,或者同时运用CpG以及编码Th1细胞因子的DNA等能加强预防接种疫苗引起的免疫反应,起到佐剂的作用;以BCG等与HDM变应原进行联合免疫亦能增强其效应.随着研究的深入,有效预防过敏性哮喘定将成为可能.
作者：范怡敏；程训佳 刊期： 2004年第05期
使用干细胞生长培养基(SCGM)和RPMI 1640培养基,设计不同浓度的抗CD3单抗、IL-2和PHA的培养条件,从健康成人外周血单个核细胞(PBMC)中高效扩增细胞因子诱导的自然杀伤细胞(CINK),并用MTT法检测其细胞毒活性,优化CINK细胞的体外扩增技术.用优化的方法扩增12例不同类型恶性肿瘤患者CINK细胞.结果显示,在以SCGM为基础培养基时,PBMC经抗CD3单抗、IL-2作用后获得大量增殖,在PHA存在时获得大增殖(P＜0.05),扩增的CINK细胞以CD3-CD56+NK细胞为主,扩增细胞的细胞毒活性显著高于相同来源的CIK细胞和CD3AK细胞,为应用CINK细胞进行自体肿瘤过继免疫治疗奠定了基础.
作者：黄朝晖；华东；王丰；李莉华；王金福 刊期： 2004年第05期
为了观察IL-2和IL-4对白血病细胞CCR9分布和功能的调节作用,我们对21例T-ALL患者的血液标本进行分析.流式细胞仪检测发现T-ALL CD4+ T细胞高表达CCR9(83.0%±7.0%),IL-2和IL-4联合作用后CCR9的表达显著降低(16.0%±4.0%);RT-PCR、Northern blot和Western blot及免疫荧光数字共聚焦显微镜检测发现,IL-2和IL-4联合作用后T-ALL CD4+ T细胞上CCR9的mRNA和蛋白质的表达水平没有改变,只是位置发生变化,即CCR9发生了内置;功能检测发现IL-2和IL-4联合作用亦可相应抑制这些细胞上CCR9的黏附功能和趋化功能.实验结果可能为白血病细胞因子的治疗提供一定的线索.
作者：陈会敏；张秋萍；胡志芳；董兴高；谢珞琨；何玉玲 刊期： 2004年第05期
为研究SAA和MDS骨髓Th细胞亚群的数量及比例改变情况.用FACS同期对照研究16例正常对照组、24例发病期SAA、15例MDS骨髓Th细胞的改变.结果显示,正常对照组Th1、Th2细胞及Th1/Th2为:0.33%、0.34%、1.00,发病期SAA为:4.42%、0.40%、10.57,恢复期SAA为:0.39%、0.20%、0.92%,MDS为:0.41%、0.57%、0.75.发病期SAA的Th1、Th2细胞均显著增高(P＜0.01、0.05),Th1/Th2显著向Th1偏移(P＜0.01);恢复期SAA与正常对照基本相当(P＞0.05).与正常对照组比较,MDS组的Th1细胞未升高(P＞0.05),亦显著低于发病期SAA组(P＜0.01),虽然Th2细胞升高,但无统计学意义(P＞0.05),但Th1/Th2比值降低(P＜0.05),向Th2偏移.SAA的发病可能由于Th1细胞增多,Th2细胞代偿不足,Th1/Th2向Th1偏移;MDS骨髓Th1细胞改变不显著,Th2有增多的趋势,Th1/Th2向Th2偏移.
作者：何广胜；邵宗鸿；吴德沛；王秀丽；苗瞄；刘鸿；施均；白洁；孙娟；贾海蓉；钱林生；杨崇礼 刊期： 2004年第05期
Ly-6E是一类结构相近且与糖基磷脂酰肌醇(GPI)连接的细胞表面蛋白中的一员,其表达与SLE疾病相关.本文就Ly-6E分子在免疫学中的作用作一综述,其在SLE发病中的作用和地位尚待研究.
作者：华晶；沈南；陈顺乐 刊期： 2004年第05期
罗红霉素(Roxithromycin, Rox)是常用的抗生素.20世纪70年代,Itkin等[1]在临床观察中发现红霉素等大环内酯类抗生素可能具有糖皮质激素相近的作用.
作者：何文富；刘小康 刊期： 2004年第05期
已有证据表明乙肝病毒携带者体内存在免疫紊乱,但对于这些个体中T淋巴细胞早期激活标志CD69的研究在国内外尚未见报道.CD69是T淋巴细胞激活后早表达的表面抗原,当其表达后,可作为共刺激信号促进T细胞进一步活化和增殖[1].我们研究乙肝病毒携带者外周血CD4+CD8+T淋巴细胞CD69的表达,现报告如下.
作者：姜玉杰；丛雅琴；张锑 刊期： 2004年第05期
乙肝病毒(HBV)的清除和预后转归在很大程度上取决于宿主的免疫应答.人类白细胞抗原(HLA)复合体是调节机体免疫应答的重要基因群,为此,我们利用基因芯片技术分析了上海地区慢性乙型肝炎患者HLA I类中的A位点与HLA II类中的DRB1位点的基因分布,以探索乙型肝炎慢性化与HLA-A和HLA-DRB1的可能关联.
作者：章晓鹰；陈建杰；陈兰羽 刊期： 2004年第05期
树突状细胞(DC)作为体内功能强的抗原提呈细胞(APC),是启动机体免疫应答的中心环节[1].未成熟DC定居在外周组织,具有极强的捕获抗原能力,通过多种方式捕获入侵的病原体、损伤或恶变的组织后迁移至淋巴结,将加工过的抗原以MHC-抗原肽的形式提呈给T细胞启动机体免疫应答.在此过程中,DC逐渐发育成熟,伴随着膜表面黏附分子表达的变化以及MHC II类分子和共刺激分子如CD40、OX40L、CD80、CD86表达的上调.然而,DC抗原提呈功能的完全成熟需要T细胞提供的共刺激信号,其中CD40相关的信号通路在此过程中发挥了重要作用.
作者：周桓；顾宗江；张学光 刊期： 2004年第05期
为了探讨TNF-α基因启动区-308、-238位点多态与多发性骨髓瘤(MM)易感性的关系.采用SSP-PCR(sequence specific primer-PCR)方法检测56例中国汉族MM患者和114名中国汉族健康对照者TNF-α基因启动区-308、-238位点等位基因频率,分析两位点多态性与MM易感性的关系.结果显示,MM组与对照组-238位点A的频率分别为15.18%(17/112);15.79%(36/228),两组间比较无显著差异(P=0.884);MM组与对照组-308位点A的频率分别为1.79%(2/112);9.21%(21/228),两组间比较有显著差异(P=0.010),MM组明显低于对照组.结论:在所研究的人群中未发现TNF-α基因启动子-238位点多态性与MM易感性相关,但MM患者TNF-α基因启动区-308位点A的频率明显低于对照组,推测TNF-α-308位点A为MM发病的保护性因素.
作者：金慧燕；王东星；郭垞；陈仙度；姜华；侯健 刊期： 2004年第05期
为探索CFA促进小鼠对蛋白质抗原产生Th1介导的特异性免疫应答的机制,我们用OVA+CFA和OVA+IFA免疫C57BL/6小鼠,并于第3天、第8天后用MACS+FACS法分离引流淋巴结中NKT细胞,在体外经CD3单抗刺激2 d后测定其分泌的细胞因子数量及格局.同时于免疫后第8天分离引流淋巴结抗原特异性T细胞,测定其分泌细胞因子的格局;并于再次免疫后2周检测小鼠血清抗体类型.ELISA结果显示,与OVA+IFA组相比,OVA+CFA免疫小鼠引流淋巴结NKT细胞和抗原特异性T细胞分泌IFN-γ的能力均显著升高(P<0.05),且血清抗体类型以IgG2a为主.表明CFA促进抗原特异性Th0细胞极化为Th1细胞可能是通过激活NKT细胞使之在免疫应答局部产生大量的IFN-γ而实现的.
作者：王胜旺；张勇；张继英；张汉明；张惠珍；王福庆 刊期： 2004年第05期
研究ICOS/GL50信号在T细胞体外增殖、细胞因子分泌以及B细胞抗体分泌中的作用,进一步探讨该信号途径在机体体液免疫应答中的作用机制.采用3H-TdR检测GL50-L929转染细胞和特异性鼠抗人GL50单抗对T细胞体外增殖的作用;ELISA法检测GL50-L929转染细胞和抗人GL50单抗对T细胞分泌IL-2、IL-10以及ICOS-L929转染细胞和特异性鼠抗人GL50单抗对PWM介导的B细胞分泌抗体的效应.结果提示GL50-L929转染细胞能够促进经抗CD3单抗活化的T细胞增值和分泌IL-10,而抗GL50单抗可以阻断这些效应.ICOS分子与B细胞上GL50分子的结合上调PWM介导的B细胞分泌抗体而抗GL50单抗则下调这一效应.这些表明,ICOS/GL50信号途径在机体T细胞依赖的体液免疫应答反应中发挥着重要的调节作用.
作者：朱伟；邓忠彬；陆长明；於葛华；李文香；马泓冰；殷昌硕；张学光 刊期： 2004年第05期
为阐明天花粉蛋白(Tk)诱导免疫抑制和基因调控的机制,应用ELISA方法动态测定小鼠OVA特异性T淋巴细胞培养上清液中T细胞亚群相关细胞因子的含量,观察Tk对高、低易感品系小鼠T细胞分泌细胞因子格局的影响.发现Tk作用下,高易感品系C57BL/6 (H-2b) IL-4、IL-10分泌量大幅度增高,IFN-γ显著下降;而低易感品系C3H/He (H-2k)相应的细胞因子变化极小.上述结果表明:(1)Tk可诱导功能性T细胞亚群向Th2/Tc2方向分化,并导致OVA特异性T细胞增殖受抑;(2)T细胞亚群分化与MHC背景密切相关.提示Tk作用下T细胞亚群的分化受MHC基因调控.
作者：王保龙；周芸；江阳；辛利军；周光炎 刊期： 2004年第05期
现代免疫学杂志
主管:上海市教育委员会
主办：上海市免疫学研究所,上海市免疫学会
