学术投稿

RNA干扰技术基础与病毒学应用

蔡懿灵;季红光;欧阳儒颖

关键词:干扰, 技术基础, 病毒学, 转录后基因沉默, 序列特异性, 胚胎提取物, 发育生物学, 作用模式, 线虫, 降解, 脊椎动物, 基因治疗, 基因功能, 基因调控, 基因表达, 小干涉, 碱基对, 肿瘤, 植物, 真菌
摘要:RNA干扰(RNAi)是指由双链RNA始动的序列特异性转录后基因沉默机制,Fire等首先用这一术语描述双链RNA阻滞线虫基因表达这一现象.现已证实,RNAi不仅存在于线虫,也存在于昆虫、植物、真菌和脊椎动物.1999年Tuschl等将果蝇胚胎提取物中小RNA介导的靶mRNA降解,提出了RNAi的作用模式:大于30个碱基对的长双链RNA(dsRNA)被加工成21~23 nt的小干涉RNA(siRNA),后者可介导特异性mRNA的降解.如今RNAi在发育生物学、基因调控、基因功能的研究以及肿瘤和病毒的基因治疗等方面发挥了重要的作用.
上海医学杂志相关文献
  • 胆囊切除术中胆囊床大出血的原因及防治对策(附5例报道)

    基层医院胆囊切除术较为普及,但术中胆囊床大出血时有发生,严重者可导致死亡,故应予高度重视.现分析我院5例术中胆囊床大出血发生的原因,并探讨其防治对策.

    作者:丁新德;施亚周;黄洪勋;刘合代 刊期: 2004年第09期

  • 陪拉格病一例

    患者女,36岁.因口舌痛、溃烂2月余,伴四肢皮肤出现红斑20余天就诊.2个月前患者自觉口唇、舌、牙龈不适,随后出现灼痛、麻木,约3周后症状逐步加重,上述部位发生糜烂,影响言语及进食,当地卫生室曾予抗感染治疗(静脉滴注青霉素类药),7 d后症状未见好转而改服中药(处方不详)15 d,效果仍不明显.约40 d后,患者四肢皮肤出现多处片状红斑,且不断增长、扩大、融合,伴有全身无力、焦虑不安、失眠、食欲不振、循序出现稀糊状腹泻10 d,经当地乡镇医院对症处理好转10 d后,又腹泻10 d.近来出现轻度张口受限而转我院求治,拟诊为急性口腔黏膜溃疡、药物性口炎收入院.既往史、家族史均无类似病史.

    作者:吴银洲;余广松 刊期: 2004年第09期

  • 血管紧张素原基因T174M和M235T多态与原发性高血压的关系

    目的研究血管紧张素原(AGT)基因第2号外显子T174M和M235T多态与中国汉人原发性高血压(EH)的关系.方法采用多重SNaPshot反应,在185例EH患者(EH组)和185名健康对照者(对照组)中,对T174M和M235T多态进行基因分型.结果对照组与EH组T174M和M235T多态的CC、CT和TT基因型分布的差异无显著性(P值均>0.05);C、T等位基因频率的差异亦无显著性(P值均>0.05).按性别进行分层,EH组女性的M235T多态的基因型分布(53、28、2)与对照组女性(37、11、6)的差异有显著性(χ2=6.403,P=0.041).Logistic回归分析显示,年龄(β=0.366,OR=1.442,95%CI=0.988~2.104,P=0.058)、体重指数(β=0.211,OR=1.234,95%CI=1.078~1.414,P=0.002)、三酰甘油(β=1.705,OR=5.501,95%CI=2.179~13.890,P=0.000)和血糖(β=0.745,OR=2.106,95%CI=1.040~4.264,P=0.039)均是EH发生的独立危险因素.结论AGT基因M235T多态可能与汉族女性EH的发病有关.

    作者:刘艳;金玮;盛海辉;陆林;黄薇;于金德 刊期: 2004年第09期

  • 《检验医学》编辑部搬迁通知

    作者: 刊期: 2004年第09期

  • 器官移植患者的真菌感染

    器官移植是治疗终末期器官衰竭的有效手段,随着新型强力免疫抑制剂及广谱抗生素的大量使用,移植患者中真菌感染的问题日益突出,已成为移植物丢失和患者死亡的重要原因之一.常见的致病菌是念珠菌,其次是曲霉菌,共占移植患者真菌感染的80%[1].在具有高危因素的移植患者中预防性使用抗真菌药物,能降低真菌感染的发生率.治疗仍以两性霉素和三唑类抗真菌药物为主,其中两性霉素脂质体的使用备受关注.以下就近年器官移植患者真菌感染的发病、预防、诊断及治疗进展作一综述.

    作者:牛强;朱有华 刊期: 2004年第09期

  • 小儿气管异物临床误诊分析

    小儿气管异物时有发生,多因病史询问不详或家长不能提供详情而误诊.我院儿科1995年6月~2002年6月共收治10例,终由耳鼻喉科会诊而确诊,现报道如下.

    作者:李春力 刊期: 2004年第09期

  • 正确评价甲状腺激素自身抗体阳性患者的甲状腺功能

    目的甲状腺激素自身抗体(THAAb)可以干扰甲状腺激素的测定,使患者的临床表现与甲状腺功能测定结果不符,分析4例甲状腺激素测定时受THAAb干扰的病例,探讨如何正确评价THAAb阳性患者的甲状腺功能状态.方法通过血清敏感促甲状腺激素(sTSH)水平、甲状腺摄131I率、基础代谢率及促甲状腺激素释放激素(TRH)兴奋试验,综合评价患者甲状腺功能的实际状态;用聚乙二醇(PEG)沉淀血清中的THAAb,比较甲状腺激素水平在处理前、后的变化.结果各项辅助检查的结果均与患者的临床表现一致;PEG处理血清后测得的甲状腺激素水平也与患者的临床表现一致.结论对THAAb阳性患者可结合临床资料及其他辅助检查综合评价患者的甲状腺功能状态,也可用PEG沉淀THAAb后重复测定甲状腺激素水平,以正确评价患者的甲状腺功能.

    作者:王丽华;赵咏桔;李凤英;马晓英;顾丽群;罗邦尧 刊期: 2004年第09期

  • 不同时间笑气吸入对人工流产的镇痛作用

    人工流产(人流)术作为避孕失败的补救措施在我国的使用率较高.人流过程中,在保证受术者安全的同时,更要求无痛.因此,减轻或消除手术疼痛是临床工作亟待解决的重要课题.本研究为前瞻性、随机、对照试验,对不同时间笑气吸入的镇痛效果进行临床观察,现报道如下.

    作者:黄亚绢;韩薇 刊期: 2004年第09期

  • 吻合器低位直肠结肠吻合在妇科肿瘤盆腔根治性手术中的应用

    目的评价在妇科肿瘤盆腔根治性手术中采用吻合器进行直肠结肠吻合的有效性及其并发症.方法回顾性分析2001年3月~2004年2月我院11例妇科肿瘤患者的资料,所有患者均接受晚期卵巢癌的首次细胞减灭术或其他妇科盆腔复发灶再次切除术,术中将盆腔腹膜内原发灶和转移灶连同部分直肠结肠整块切除,同时用吻合器将直肠结肠端端吻合.结果11例患者的平均年龄为54.7岁,其中Ⅲ~Ⅳ期上皮性卵巢癌9例,宫颈癌和宫体癌各1例.8例卵巢癌患者在首次细胞减灭术中,连同原发卵巢肿瘤、盆腔转移灶及部分直肠结肠完整地切除,并行低位直肠结肠吻合术,其中7例(87.5%)术后残留灶<1 cm.其他3例复发性盆腔肿瘤,切除复发灶和部分直肠结肠,无可见肿瘤残存.除1例膀胱排尿困难外,未发生吻合口漏,无围手术期死亡.平均随访19.3个月,除1例复发性卵巢癌患者术后6个月死于肝转移外,其余10例均无瘤生存.结论在晚期妇科肿瘤手术中,使用吻合器行低位直肠结肠吻合有利于盆腔肿瘤的完整切除,并发症极少.

    作者:吴小华;李子庭;赵广法;朱慧燕;方银忠;周瑜琪;黄啸;张志毅 刊期: 2004年第09期

  • 单纯疱疹病毒Ⅱ型宫内感染的前瞻性研究

    单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)感染是性传播疾病,由于我国性病发病率现呈上升趋势,故由感染母亲垂直传播引起的胎儿、新生儿HSV-Ⅱ感染已受到围产医学界的关注.本研究采用PCR和ELISA等方法,前瞻性观察HSV-Ⅱ对孕妇感染、母婴传播及先天感染患儿的近期影响,现报道如下.

    作者:敖黎明;钱继红;陈冠仪;张蓉;刘兰女;陈孝瑾;吴圣楣 刊期: 2004年第09期

  • 经阴道超声、磁共振成像和彩色多普勒血流成像判断子宫内膜癌深肌层侵犯的准确性研究

    目的比较经阴道超声(TVUS)、磁共振成像(MRI)和彩色多普勒血流成像(CDFI)在术前诊断子宫内膜癌深肌层侵犯的准确性.方法30例子宫内膜癌患者术前1周内行TVUS、MRI和CDFI检查.按肿瘤侵犯深度将其分为无肌层侵犯或浅肌层侵犯组和深肌层侵犯组.比较TVUS、MRI和CDFI检查所见与组织学检查结果,计算各诊断技术的灵敏度、特异度、准确性、阳性预测值和阴性预测值.采用Cochran's Q法比较各诊断学参数.结果组织学检查证实,7例子宫肌层无侵犯,17例子宫浅肌层侵犯,6例子宫深肌层侵犯.TVUS、MRI和CDFI判断深肌层侵犯的灵敏度分别为83.3%、66.6%和83.3%,特异度分别为91.4%、87.5%和83.3%,准确性分别为90.0%、83.3%和83.3%.TVUS、MRI和CDFI 3种技术诊断深肌层侵犯的灵敏度、特异度和准确性的差异无显著性.结论与较为昂贵、耗时的MRI或CDFI检查比较,TVUS仍是术前评估子宫内膜癌深肌层侵犯的简便且有效的方法.

    作者:席晓薇;李双弟;万小平;陆贤伟;许玉成;何之彦 刊期: 2004年第09期

  • 2004年《介入放射学杂志》征订启事

    作者: 刊期: 2004年第09期

  • L-谷氨酰胺对慢性呼吸衰竭患者的营养治疗与免疫调理作用

    目的研究和评价L-谷氨酰胺对慢性呼吸衰竭合并营养不良患者免疫功能的影响.方法对32例慢性呼吸衰竭患者进行营养支持治疗,总能量摄入为静息能量消耗(REE)的1.5倍.A组(14例)为L-谷氨酰胺治疗组,每日3次口服L-谷氨酰胺10 g,B组(18例)为营养对照组.结果营养支持后,A组肱三头肌皮褶厚度和前白蛋白等营养参数较B组改善明显(P<0.05).A组治疗后α-肿瘤坏死因子和CD8显著下降,白介素-2、一氧化氮、IgG、CD3、CD4和CD4/CD8显著上升,并明显高于B组治疗后.结论L-谷氨酰胺对慢性呼吸衰竭营养不良患者不仅有辅助营养支持作用,并具有免疫增强和调理作用,达到强化营养支持的效果,从而改善预后,具有很好的临床应用价值.

    作者:杨玲;罗勇;徐卫国;林建海 刊期: 2004年第09期

  • 转染人转化生长因子-β3基因对瘢痕成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响

    目的观察转染人转化生长因子-β3(hTGF-β3)基因对瘢痕成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响.方法通过脂质体介导的方法,将人表皮细胞生长因子基因真核表达质粒(pBK-CMV)-TGF-β3质粒转染体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞,采用RT-PCR法检测TGF-β3mRNA的表达,放射免疫(RIA)法测定细胞培养上清液中Ⅰ型和Ⅲ型前胶原的浓度.结果构建的TGF-β3质粒可成功转染成纤维细胞,并增强Ⅰ型和Ⅲ型胶原的表达,下调Ⅰ/Ⅲ型胶原比值.结论转染hTGF-β3基因可调节瘢痕成纤维细胞的生物学活性.

    作者:朱小波;宋朝骏;张进德;袁启智;黄硕麟 刊期: 2004年第09期

  • 无晶状体眼二期前房型人工晶状体植入后的临床观察

    目的探讨无晶状体眼二期植入弹性开放襻一体式前房型人工晶状体的有效性和安全性.方法37例37眼白内障术后无晶状体眼在表面麻醉下经巩膜隧道式切口二期植入新型弹性开放襻一体式前房型人工晶状体,并联合周边虹膜切除术.术后随访5~28个月,平均18.4个月.结果37只无晶状体眼均顺利植入新型弹性开放襻一体式前房型人工晶状体.术前矫正视力为0.1~0.6,术后3个月达0.2~0.8,27眼≥0.5(73.0%),35眼(94.6%)达到术前佳矫正视力以上.术前角膜内皮细胞计数平均为(1 947±581)个/mm2,术后3个月平均为(1 871±462)个/mm2,手术前、后的差异无显著性(P>0.05).术后常见并发症为角膜水肿、葡萄膜炎、一过性高眼压.结论无晶状体眼二期植入新型弹性开放襻一体式前房型人工晶状体是一种简便、安全、有效的手术方法.

    作者:吴强;陈国辉;马晓昀 刊期: 2004年第09期

  • 47例集体亚硝酸盐中毒救治体会

    我院于2003年10月成功救治了47例集体亚硝酸盐中毒患者,现报道如下.

    作者:杨洁;杨晓燕;丘洪;顾永祺;刘军;周华;承解静 刊期: 2004年第09期

  • 安妥血糖血酮仪临床测试的分析

    目的评估安妥血糖血酮仪的准确性和重复性,并对β-羟丁酸测定在糖尿病酮症及酮症酸中毒治疗中的临床应用进行初步分析.方法①应用血糖血酮仪同时测定指尖毛细血管全血和静脉全血,并与实验室酶法进行比较,同时采用回收试验评价其准确性.②测定批内、日间重复性及不同机号、不同批号试纸间变异.③在18例糖尿病酮症或酮症酸中毒患者的治疗过程中,同时监测血酮和尿酮.结果安妥血糖血酮仪与实验室酶法测定结果成显著正相关(r=0.966~0.982,P<0.001),该测定仪检测血糖和血酮的平均回收率分别为97.3%和101.0%.除低浓度血酮检测外,其余水平血糖和血酮检测的批内、日间重复性均较好;不同机号仪器、不同批号试纸检测血糖和血酮结果间差异均无显著性(P>0.05),相关性好(r>0.99,P<0.001).在酮症及酮症酸中毒治疗监测尿酮体阴性时,17.86%血酮≥0.3 mmol/L;尿酮体阳性时,19.41%血酮(<0.3 mmol/L)正常.结论安妥血糖血酮仪具有良好的准确性和重复性.在糖尿病酮症或酮症酸中毒的监测治疗中,血酮测定较尿酮可靠.

    作者:石毅;吴松华;李鸣;项坤三 刊期: 2004年第09期

  • 滋养细胞肿瘤一例

    病例摘要患者女,24岁.因产后阴道淋漓流血10个月,于2002年1月入院.患者于2001年3月14日孕足月产钳助产分娩一男婴,此为第1胎妊娠,产时、产后流血不多,但产后有阴道流血,量时多时少,时断时续,无腹痛、发热等不适.产后3个月放置宫内节育器.2001年11月7日于外院就诊,查血β-绒毛膜促性腺激素(HCG)为9 U/ml,B超示子宫肌层包块,此后复查β-hCG 5~6次,数值波动于7~14U/ml.

    作者:孙红 刊期: 2004年第09期

  • 卵巢上皮性癌中新基因NM23-H1B的表达

    目的研究人类新基因NM23-H1B与卵巢癌的关系.方法收集2003年4月~2004年2月经病理证实的卵巢癌手术切除标本20例及卵巢交界性肿瘤4例(卵巢瘤组),正常卵巢组织4例(对照组).采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Northern杂交测定NM23-H1B mRNA的表达.结果采用RT-PCR在所有的标本中均检测到NM23-H1B基因mRNA的表达,其在正常卵巢组织中表达较低,而所有的卵巢肿瘤中其表达均出现明显上调,早期卵巢癌中的表达高于晚期.Northern杂交显示,NM23-H1B基因在正常卵巢组织的表达量较低,交界性肿瘤中的表达则与正常组织中相似,而在卵巢癌组织中表达明显增高,早期卵巢癌中的mRNA表达量高于晚期卵巢癌,早期卵巢癌中似乎在分化好(I级)的表达量明显高于分化较差(Ⅱ、Ⅲ级)者.结论NM23-H1B基因与卵巢癌有明显的相关性.

    作者:李文;刘彦;金志军;丰有吉;徐玲玲;侯庆香 刊期: 2004年第09期

  • 新生儿免疫临床实验研究

    作者: 刊期: 2004年第09期

上海医学杂志

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主管:上海市卫生局

主办:上海市医学会