陈新科;周建伟;张昭才;常虹;郭焕;颜金艳
目的 了解2013年-2016年湖州市禽类环境中禽流感病毒污染情况,评估人感染禽流感风险.方法 采集禽类饮用水等环境标本,采用荧光RT-PCR对标本进行甲型流感病毒核酸检测,阳性标本再检测H5、H7、H9亚型禽流感病毒核酸.结果 2013年-2016年共采集并检测各类环境标本5 867份,甲型流感病毒总阳性率为38.5%,检出的禽流感病毒型别以H7亚型为主(占23.6%).流感病毒检测阳性率高峰呈现于冬春季节;且阳性率较高的分别为城乡活禽市场(77.8%)、家禽屠宰厂(69.5%)、清洗禽类污水(67.9%)和禽肉案板表面拭物(57.1%).结论 湖州市禽类环境中禽流感病毒污染较为严重,且型别多样,存在人感染禽流感病毒的风险,应加强禽类环境中禽流感病毒实时监测.
作者:徐德顺;严伟;查赘峰 刊期: 2017年第09期
目的 建立果蔬样品表面诺如病毒快速有效的检测方法,评价酸吸附-碱洗脱-PEG沉淀法对果蔬样品表面诺如病毒分离富集的适用性,为诺如病毒疫情的控制和食源性疾病的溯源提供可靠的实验室依据.方法 在北京地区采集草莓样品,采用酸吸附-碱洗脱-PEG方法分离富集样品表面病毒颗粒,设计GⅠ和GⅡ的特异性引物和探针,以实时定量RT-PCR法检测病毒核酸.同时优化病毒提取方法,以Mengo病毒做为过程控制对照,制作不同浓度的标准曲线,计算病毒回收率.结果 酸吸附-碱洗脱-PEG法病毒回收率为2.36%,符合病毒检测回收率的要求,与其他食源性病毒没有交叉反应,能够应用于日常检测.结论 酸吸附-碱洗脱-PEG方法病毒回收率较高,灵敏度和重复性较好,进一步优化后可以应用于果蔬样品的日常检测.
作者:张寻;陈倩 刊期: 2017年第09期
目的 了解呼吸道感染儿童中肺炎支原体(MP)感染情况,为临床早期诊断和治疗提供可靠依据.方法 采用胶体金法检测2 428例患儿血清中MP-IgM抗体,同时做其他相关实验室检查.结果 2 428例儿童的血清标本中检出MP-IgM抗体阳性535例,阳性率为22.03%,其中男童阳性率为21.05%,女童阳性率为23.19%,男女患儿之间阳性率差异无统计学意义(x2=3.84,P >0.05).四季均可检出呼吸道感染患儿MP-IgM抗体,其中冬季阳性率高(28.07%),秋季次之(24.92%).随着年龄的增长阳性率呈逐渐上升趋势,7岁~14岁儿童阳性率高(36.96%).结论 胶体金法检测血清MP-IgM抗体操作简单,具有较高的敏感性和特异性,与血常规等联合检测有利于MP的早期诊断,本地区学龄前及学龄儿童为高危人群,临床应加强对MP的监控.
作者:石月萍 刊期: 2017年第09期
目的 了解淮安市灌肠类肉制品各生产环节致病菌污染状况及病原学特征.方法 根据国家食品安全微生物检测标准检测金黄色葡萄球菌、沙门菌和单核细胞增生李斯特菌,使用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对致病菌进行分子分型,同时对其进行药敏分析.结果 105份样品中,致病菌总体污染率为17.14%,主要致病菌为金黄色葡萄球菌和沙门菌.原辅料、中间产品和环境污染率分别为31.82%、29.03%和4.76%.经PFGE分型,沙门菌菌株的基因型比较相近,同源性高,而金黄色葡萄球菌分离株型别分散.经药敏分析,沙门菌对氨苄西林和萘啶酸的耐药菌株多,而对头孢他啶和头孢西丁不耐药;金黄色葡萄球菌对磺胺甲恶唑的耐药菌株多,而对头孢噻圬和庆大霉素不耐药.结论 金黄色葡萄球菌、沙门菌是灌肠类熟肉制品生产环节的主要污染菌群,原辅料是主要污染来源.分离出的致病菌大多具有多重耐药性.
作者:侯海燕;李兵兵;刘靓;刘纯成;邢亚东;范乃来 刊期: 2017年第09期
目的 建立果蔬中23种农药残留的QuEchERS-气相色谱-质谱分析方法.方法 称取经粉碎匀浆后的样品,经酸性乙腈提取,按照QuEchERS试剂盒操作方法,经PSA粉(N-丙基乙二胺)、石墨化碳粉及碳十八粉混合净化后,由DB-1701毛细管柱(30m×0.32 mm,0.25 μm)分离,气相色谱-质谱法测定,峰面积外标法定量.结果 该方法23种农药在0.5 μg/ml~2.0μg/ml的浓度内线性相关系数(r)均>0.995,方法的检出限(LOD)为0.001 mg/kg~0.025 mg/kg,23种农药的回收率为80.25% ~97.78%,相对标准偏差(RSD)为3.83% ~ 12.17%.在所检测的140份果蔬样品中,有9份样品检出克百威、氯氟氰菊酯及敌敌畏等农药残留,其中西红柿样品检出2份氯氟氰菊酯超出国家限量.结论 本方法稳定可靠,操作简便快速,方法回收率高,可满足果蔬中23种农药残留的检测要求.
作者:王海萍;王红玲;陈建文;秦鹏 刊期: 2017年第09期
目的 探讨自身免疫性肝炎(AIH)患者外周血T淋巴细胞表达活化指标HLA-DR、CD25、CD38在AIH发生发展中的机制及临床检测价值.方法 应用流式细胞术检测73例AIH组发病期患者、61例AIH组缓解期患者和35例健康对照组外周血T淋巴细胞免疫活化指标(HLA-DR、CD25、CD38),对AIH组发病期、AIH组缓解期与健康对照组的免疫活化指标表达百分率进行比较.结果 AIH组发病期HLA-DR+、CD3+ HLA-DR+、CD8+ HLA-DR+、CD25+、CD38+、CD8+ CD38+表达百分率均高于健康对照组;各组间百分率均数的比较,差异均有统计学意义(P<0.05).AIH组缓解期HLA-DR+、CD3+ HLA-DR+、CD8+ HLA-DR+、CD25+、CD38+、CD8+ CD38+表达百分率低于发病期,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 T淋巴细胞活化指标HLA-DR、CD25、CD38在AIH发病期表达增加,缓解期表达降低;CD4+ CD25+在AIH发病期表达降低,缓解期表达增加.
作者:陈芳琴;陶叶海 刊期: 2017年第09期
目的 探讨本院近5年临床分离肺炎克雷伯菌的临床分布及其耐药性特点.方法 收集本院2011年-2015年临床分离的肺炎克雷伯菌,药敏试验采用K-B法,实验结果按照美国临床实验室标准协会(CLSI) 2014年M100-S24标准,数据分析采用WHONET 5.6软件.结果 5年共收集肺炎克雷伯菌非重复菌株2 082株,主要来源于呼吸道、伤口、泌尿系感染患者标本.肺炎克雷伯菌耐药机制复杂,常常多种耐药机制同时存在.产ESBLS是肺炎克雷伯菌耐药的主要机制,5年间检出率为47.8%~ 58.0%;产酶菌株耐药性明显高于非产酶菌株.碳青霉烯类抗生素、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星和左氧氟沙星对肺炎克雷伯菌仍然保持较好的抗菌活性.结论 肺炎克雷伯菌耐药机制复杂,主要引起呼吸道、伤口和尿路感染;要高度重视重症患者耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌的感染,加强其实验室监测和感染控制,严防其在医疗环境中感染的播散.
作者:张爱荣;许青霞 刊期: 2017年第09期
目的 通过对胎膜早破孕妇患者阴道病原菌感染以及耐药性分析,为临床上合理性用药以及控制感染提供理论依据.方法 回顾性分析5 138例胎膜早破孕妇患者的所有临床资料,进行常规性菌群与支原体培养以及衣原体的分析.结果 5 138例胎膜早破孕妇患者中检出阳性1 734例(易感率为33.7%);病原学阳性结果支原体培养为1 283例(占25.0%),衣原体测定为143例(占2.8%),细菌为941株(占18.3%),常见病原菌主要是革兰阴性菌329株(占35.0%),以大肠埃希菌为主;革兰阳性菌358株(占38.0%),以β-溶血性链球菌、肠球菌、溶血性葡萄球菌等为主;真菌254株(占27.0%),以白色念珠菌为主.常见的支原体、病原菌耐药性均较高.结论 因胎膜早破孕妇患者常见的病原菌耐药性均较高,临床应依据药敏试验结果合理性用药.
作者:李刚;王振勇;杨胜 刊期: 2017年第09期
目的 了解湘潭市2010年-2016年手足口病重症患者的病原学类型及流行特征,为本地区的重症手足口病综合防控提供参考资料.方法 收集2010年-2016年湘潭地区所有临床诊断为手足口病重症病例的标本,应用实时荧光RT-PCR技术检测肠道病毒通用型(EV)、肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CoxA16).结果 168例手足口病重症病例中,EV阳性率为91.07%,其中EV71型病毒占70.24%,CoxA16型病毒占2.8%,其他肠道病毒占18.45%;各型别之间阳性率整体差异有统计学意义(P<0.01);发病时间主要集中在4月-6月,占76.78%,与其他月份发生率差异有统计学意义(P<0.01);不同年龄组构成比总体差异有统计学意义(P<0.01),以1岁~组多;不同样品阳性率总体差异有统计学意义(P<0.05),以混合样品阳性率高.结论 EV71型是湘潭地区手足口病重症病例的主要致病病毒类型,其流行具有明显的年龄、季节界限.为提高重症手足口病实验室检出率,提倡对病例多部位联合采样.
作者:李巧玲;肖娜;陈思源;王中秋 刊期: 2017年第09期
目的 采用气相色谱-质谱(GC-MS)联用技术和QuEChERS结合固相萃取(SPE)前处理技术,建立瓜蒌中有机氯类、有机磷类、拟除虫菊酯类和氨基甲酸酯类等70种农药残留的检测方法.方法 样品采用QuEChERS方法提取并简单净化,经SPE固相萃取柱进一步净化,由HP-5 MS毛细管柱(30m×0.25mm,0.25 μm)分离,以三重四级杆串联质谱仪检测,选择多反应监测(MRM)模式,内标法定量.结果 70种农药的线性范围为5μg/L~ 200 μg/L,相关系数>0.995,方法的检出限为0.01 μg/kg ~ 2.00 μg/kg,定量限为0.05μg/kg ~5.00 μg/kg.70种农药的平均回收率为74.2% ~ 106.7%,相对标准偏差(RSD)为0.6% ~4.6%.结论 该方法稳定、可靠、样品处理简单、分析时间短、灵敏度和准确性好,可满足瓜蒌中多种农药的同时分析,适用于中药材中农药残留的快速筛查.
作者:林林;刘广桢;穆向荣;林永强 刊期: 2017年第09期
目的 分析耐碳青霉烯类黏质沙雷菌(CRSM)的耐药机制及同源性,为临床合理用药提供依据.方法 收集2014年-2015年烧伤病区CRSM菌株12株,分析其耐药机制及同源性.结果 菌株对青霉素类、头孢菌素类和氨基糖苷类耐药率为100%,氟喹诺酮类和复方磺胺甲恶唑敏感率为100%,哌拉西林/他唑巴坦敏感率为91.7%;碳青霉烯类耐药率为91.7%;10株改良三维试验和改良Hodge试验阳性;11株Cuba NP试验阳性;8株3-氨基苯硼酸试验阳性;2株EDTA抑制试验阳性;PCR显示9株携带blaKPC-2;2株携带blaIMP-1;未发现有合产碳青霉烯酶;PFGE显示有4株菌株为同一克隆株.结论 本院烧伤病区患者分离的CRSM耐药机制以携带blaKPC-2为主,并同时产ESBLs和AmpC酶;其次是携带blatMP-1;有4株为同源株;应引起临床和实验室的重视.
作者:王菊梅;张洪球;张元海;陆军 刊期: 2017年第09期
目的 对安徽省首例人感染H5 N6禽流感病例相关标本进行实验室检测,为今后禽流感疫情实验室检测和防控提供有效参照.方法 采用荧光实时定量PCR(real-time PCR)反应检测疑似病例和外环境标本以及密切接触者的咽拭子标本,对NA基因片段采用一步法普通RT-PCR技术进行扩增.将阳性外环境标本和疑似病例标本送安徽省疾病预防控制中心流感参比中心实验室复核.结果 疑似病例咽拭子标本经实验室检测为H5N6亚型流感病毒.在13份农贸市场标本中,有2份H5 N6和H9N2亚型混合标本和1份H5 N6标本,5份H9N2亚型标本,1份H7亚型标本,1份H7和H9N2混合标本.其他标本均阴性.结论 经宣城市疾病预防控制中心、安徽省疾病预防控制中心和中国疾病预防控制中心病毒所国家流感中心一致鉴定,该患者为安徽省首例人感染H5 N6高致病性禽流感病例.
作者:陈晓龙;杨芸;黄志伟;夏志才;王辉;何军 刊期: 2017年第09期
目的 建立嗜肺军团菌微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)检测方法,并与实时荧光定量PCR(realtime fluorescence quantitative PCR,qPCR)技术进行比较.方法 针对嗜肺军团菌mip基因设计引物和探针,验证其特异性后,用于ddPCR和qPCR.优化ddPCR的退火温度、引物、探针浓度后,比较ddPCR和qPCR灵敏度和重复性,并对模拟样品进行检测.结果 用5株非嗜肺军团菌测试特异性,结果表明具有良好的特异性.ddPCR与qPCR对DNA模板的检测限一致(42.6 fg),模拟样品检出限为300 cfu/ml,ddPCR的线性相关系数(0.999)略优于qPCR(0.982),ddPCR检测的RSD(0.78% ~ 14.06%)均高于qPCR(0.30%~1.98%).结论 微滴式数字PCR方法灵敏度高、特异性强,可用于嗜肺军团菌检测,且可以对基因进行绝对定量.
作者:于纪棉;李如松;倪健波;魏姣姣;高峰;王建峰 刊期: 2017年第09期
目的 了解腹泻患者中食源性相关病毒感染情况与流行特征,为防控病毒性胃肠炎提供依据.方法 采集2 129份食源性腹泻患者粪便标本,用实时荧光定量PCR法检测轮状病毒、诺如病毒和甲型肝炎病毒核酸;用NSP4和VP1基因对轮状病毒和诺如病毒流行株分别测序.结果 检出轮状病毒核酸52份,阳性率为2.44%,以A组感染为主;检出诺如病毒核酸113份,阳性率为5.31%,以Ⅱ型为主.VP1基因将诺如病毒分为GⅠ.2、GⅡ.6和GⅡ.17 3个型;A组轮状病毒均带NSP4毒力基因.全年均可检出病毒,秋冬季是发病高峰;全人群均可检出,5岁~及其以下年龄组的阳性率高于18岁~年龄组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 检测发现A组轮状病毒和GⅡ.17型诺如病毒是本市病毒性胃肠炎主要流行病原.病原感染途径多样、带毒者多、人群普遍易感、全年均可检出,本市人群随时有暴发疫情的可能.应加强关注,强化检测,以减少疾病的流行.
作者:叶硕;周伟艳;高红;倪红霞;谢蕾;徐景野 刊期: 2017年第09期
目的 确保生活饮用水总α和总β放射性测量结果的准确度,提升实验室检验能力,减少各种因素造成的结果误差.方法 依据国家标准对水样进行总放射性水平分析.结果 2014年总α和总β放射性测量值的标准偏差均<10%,其中总α放射性测量值的标准偏差为9.30%,高于总β放射性测量值的标准偏差3.28%,比对考核结果优秀.2009年、2010年、2014年、2016年比对测量结果中总β放射性测量值的标准偏差均<15%,2009年、2010年总α放射性测量值的标准偏差均>20%.结论 水样总放射性检测过程中,应重视每一个环节的质量控制,确保检测结果的准确性.通过实验室比对,发现实验室水样总放射性测量过程中存在的问题,提升实验室人员检验能力.
作者:王延俊;罗伟立;邬家龙;孙卫;王赟;王芳 刊期: 2017年第09期
目的 建立用离子液体萃取分光光度法测定生活饮用水中挥发酚的分析方法.方法 在pH=10.0±0.2和氧化剂铁氰化钾存在的溶液中,酚与4-氨基安替吡啉生成红色的安替吡啉染料,用离子液体1-丁基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐代替氯仿萃取后,在波长470 nm处比色定量.结果 本法具有较高的灵敏度,方法检出限为0.0012 mg/L,挥发酚的浓度在0.002 mg/L ~0.04 mg/L时,线性关系良好(相关系数为0.999 9).相对标准偏差(RSD)均≤4.94%,样品加标回收率为94.0%~102.5%.结论 该方法环境污染小,操作简便快速、重现性好、准确度高、线性范围宽,适用于生活饮用水中挥发酚的测定,值得推广应用.
作者:陈惠珠;宣栋樑;王舵;蔡嵘 刊期: 2017年第09期
医学检验承担着为患者和临床医生提供疾病的预防、诊断、治疗、监测、预后判断以及健康评估等大量的信息任务.这些信息的正确与否直接关系到患者的安全.检测结果正确是医学检验的永恒目标.无论是ISO:15189,还是各级医疗管理部门的督查,终目标也是保证患者检测结果的准确.医学检验检测过程中的检测质量一般从室内质量控制(internal quality control,IQC)和室间质量评价(external quality assessment,EQA)2个方面进行综合评价[1-4].室内质量控制是检验科监控检测质量的重要手段,是重要的日常工作之一.
作者:葛亚娟;许群欢;武强;沈芳 刊期: 2017年第09期
目的 鉴定并分析类孟买型血清学特点,探讨输血策略.方法 采用ABO血型正反定型、H抗原检测及红细胞吸收放散试验,采用PCR-SSP法进行FUT1基因测序,采用配合型输血方案进行类孟买型输血策略研究.结果 6例被检者均确认为类孟买型,分别为Bmh4例、Amh2例;FUT1基因测序547-552del AG 4例、682 AG 2例;例1、例2与10份B型悬浮红细胞、10份O型洗涤红细胞进行交叉配血试验,结果显示在室温有2份交叉配血不合,在37℃交叉配血全部相合.结论 罕见类孟买型血清学鉴定研究,对后续患者的输血策略具有重要意义.
作者:刘秋菊;朱碎永;林甲进 刊期: 2017年第09期
目的 探讨中性粒细胞/淋巴细胞比率(NLR)和血小板/淋巴细胞比率(PLR),对急性肺栓塞患者短期死亡率的预测作用.方法 收集188例上海闵行区中心医院2013年1月-2015年12月的急性肺栓塞患者诊断记录,采用多元风险模型检测NLR、PLR对急性肺栓塞死亡率的预测作用,并使用受试者工作特征曲线(ROC曲线)进行评估.结果 共有144例患者符合本研究标准,其中13例在入院30 d内死亡.死亡患者存在4周以上的制动史,有较低的收缩压、舒张压,血氧饱和度较低,伴随着高心率、高呼吸频率、lgBNP和C-反应蛋白显著升高,同时NLR以及PLR比例也升高明显.PLR、NLR以及二者结合(PLR-NLR)3个指标的AUC值分别为0.752、0.758、0.750.结论 NLR、PLR对肺栓塞患者短期死亡率具有独立预测作用,NLR、PLR可以指导肺栓塞严重程度分级并进一步指导肺栓塞临床治疗.
作者:凌美蓉;刘梅;朱旻婕;潘飞;孙克玉 刊期: 2017年第09期
目的 研究精子DNA完整性不同检测方法的区别,探讨使用精子染色质结构分析法(SCSA)和精子染色质扩散实验法(SCD)分析精子DNA碎片化率(DFI)结果的一致性.方法 分别用SCSA法和SCD法检测1 19例不育症患者精液的DFI值,采用SPSS 22.0软件进行相关性分析和配对t检验.结果 SCD法检测1 19例精液标本DFI均值为(15.4±8.9)%,SCSA法DFI均值为(14.2±7.3)%SCD法DFI值高于SCSA法,差异有统计学意义(P<0.05).SCSA法和SCD法相关性分析呈明显的线性正相关(r=0.816,P<0.01).结论 SCSA法与SCD法比较,其检测精子DFI结果具有一致性;但SCD法检测值普遍比SCSA法高.
作者:白万凯;蔡蛟龙;杨洋 刊期: 2017年第09期