学术投稿

贝类中诺如病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用

白颉;李孝军;王泽;吕沁风

关键词:实时荧光定量PCR, 诺如病毒, 贝类
摘要:目的 建立实时荧光定量PCR法检测GⅠ、GⅡ型诺如病毒的方法.对东海区域市场内零售贝类海产品中诺如病毒携带情况进行监测,为海产品食品安全和风险预警提供科学依据.方法 采集浙江沿海地区市场上常见贝类,利用实时荧光定量PCR检测技术对贝类进行检测.结果 2 955份样品中有63份样品携带诺如病毒,其中杂色蛤、太平洋牡蛎、僧帽牡蛎、毛蚶中均检出GⅡ型诺如病毒.贝类样品中太平洋牡蛎的检出率高,为15.64%.贝类中诺如病毒在冬季(11月-次年2月)的检出率明显高于夏季(6月-9月),其季节分布差异有统计学意义(x2=31.3,P<0.05).结论 东海区域贝类中,特别是生食或半熟食贝类中诺如病毒的携带水平较高、分布较广,应持续做好贝类中诺如病毒携带监测,同时做好风险预警.
中国卫生检验杂志相关文献
  • 长葛市麻疹、风疹抗体水平监测结果分析

    目的 为了解长葛市麻疹、风疹IgG抗体水平,评价疫苗接种效果和人群免疫情况,为制定免疫规划和防治措施提供依据.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA法)对12 600名儿童检测麻疹、风疹IgG抗体.结果 在采集的12 600份血样中,麻疹、风疹IgG抗体阳性率分别是98.17%和94.93%.不同年龄组人群麻疹、风疹抗体水平差异有统计学意义(P<0.05),不同性别人群麻疹、风疹抗体水平差异无统计学意义(P>0.05).结论 长葛市8个月至14岁儿童麻疹IgG抗体和风疹IgG抗体保持在较高水平,形成了很好的免疫屏障.麻疹、风疹抗体保护率有随着年龄的升高而降低的趋势,提示应加强疫情监测,提高中学生及大年龄组人群麻疹、风疹强化免疫接种率,防止暴发流行.

    作者:郭伟超;曹淑娟;张小会 刊期: 2016年第16期

  • 降钙素原、C-反应蛋白、白细胞计数和中性粒细胞百分比在肺部感染性疾病早期诊断中的应用

    目的 探讨白细胞计数(WBC)、中性粒细胞百分比、C-反应蛋白(CRP)以及降钙素原(PCT)在感染性疾病特别是肺部感染性疾病早期诊断中的应用价值.方法 比较PCT、CRP、WBC和中性粒细胞百分比在局部细菌感染和全身细菌感染的差异、肺部感染革兰阴性细菌、革兰阳性细菌和真菌时的差异以及在不同菌属感染时的差异及相关性.结果 PCT、CRP、WBC和中性粒细胞百分比在局部感染和全身感染比较,差异均有统计学意义(P<0.01).肺部首次单纯感染真菌的患者PCT和CRP均高于感染革兰阳性和革兰阴性的患者.在菌属的鉴别中,仅鲍曼不动杆菌患者PCT和肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌之间差异有统计学意义(P<0.05).结论 联合检测PCT、CRP、WBC和中性粒细胞百分比水平,对早期细菌感染的诊断和抗菌药物的使用有重要的临床价值.

    作者:李树林;顾畅 刊期: 2016年第16期

  • 降钙素原、C-反应蛋白在细菌感染性肺炎诊断和预后中的价值

    目的 探讨降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)对儿童细菌感染性肺炎的早期诊断和预后判断的价值.方法 选择在本院接受治疗的70例细菌感染性肺炎儿童为细菌感染组,选取70例非细菌感染性肺炎儿童为非细菌感染组,另取70例健康儿童为非感染组.收集各组患儿痰液进行培养,于治疗前测定3组儿童C-反应蛋白(CRP)水平及白细胞计数(WBC)、血沉(ESR)等炎性指标.结果 细菌感染性肺炎患儿PCT和CRP含量明显高于非细菌感染性肺炎组和非感染组(P<0.05),细菌感染性肺炎组患儿CRP及PCT含量在痰培养阳性组中的表达量显著高于痰培养阴性组(P<0.05),细菌感染性肺炎患儿治愈组入院时CRP及PCT含量明显低于未治愈组(P<0.05).结论 CRP及PCT能在一定程度上早期诊断儿童细菌感染性肺炎并预测痰培养结果及治疗结局,具有一定的临床价值.

    作者:韩梅 刊期: 2016年第16期

  • 祛斑美白类化妆品质量现状分析及监管建议

    为了满足人们对美的追求,越来越多的祛斑美白类化妆品出现在人们的生活中.人们希望通过化妆品的使用而得到白皙、透亮的皮肤,或减轻老年斑、黄褐斑等色素沉积.因此祛斑美白类化妆品市场日趋活跃,产品销售与日俱增,已成为护肤类化妆品的主流品种之一.

    作者:吴景;张凤兰;邢书霞;王钢力 刊期: 2016年第16期

  • 周口市2015年食品中重金属临测结果分析

    目的 了解2015年周口市食品污染物中铅、镉、汞、砷的污染状况,为制定有效的控制措施提供科学依据.方法 在周口市七县一市一区的各类超市、农贸市场、饮食店等采集6类食品,共213份样品,经消化用原子吸收法测定铅、镉、汞、砷的含量.结果 本市6类食品中虽然都有不同程度的重金属污染,但均未超标.其中主要受铅污染较重的食品是发酵型蒸制面制品,检出率为100.0%.受镉污染的食品主要为调味品、蔬菜及其制品和水产品及其制品.受汞污染较重的食品有调味品、蔬菜及其制品.砷的检出率较高,主要集中在调味品、水果及其制品、方便胡辣汤和发酵型蒸制面制品.结论 周口市售食品中受不同程度的重金属污染,环境污染是引起食品中重金属检出率较高的主要原因.

    作者:孙明;李弘;鹿尘 刊期: 2016年第16期

  • 市售冬枣中糖精钠和甜蜜素掺假的调查

    目的 调查市售冬枣中糖精钠和甜蜜素的掺假情况.方法 从市场上抽查了32份冬枣样品,分别测定糖精钠和甜蜜素含量,并用高、中、低浓度的糖精钠和甜蜜素混合溶液在室温、50℃、60℃和80℃浸泡冬枣,观测感官变化,分别检测各组样品在用水淋洗后和不淋洗的糖精钠和甜蜜素含量.结果 室温和50 cc浸泡过的样品在感观上改变不明显;60℃和80℃浸泡过的样品感官有明显改变,颜色渐渐由青、绿转黄,直至棕红色,但与正常冬枣的颜色有明显差别;80℃浸泡过的样品有强烈的酸败味,容易腐败.低浓度浸泡的冬枣未检出糖精钠和甜蜜素,中等浓度浸泡的多数检出,高浓度浸泡的全部检出.结论 抽检冬枣样品中未检出糖精钠和甜蜜素;市售冬枣存在用糖精钠或甜蜜素浸泡的可能性小,但不排除有这种现象存在的可能性.

    作者:顾建华;何鹏妍;陈倩倩;张峰 刊期: 2016年第16期

  • 石墨炉原子吸收光谱法测定茶叶中的镍

    目的 建立茶叶中镍的石墨炉原子吸收光谱测定方法.方法 样品经微波消解后,分别以20 g/L磷酸二氢铵、0.2 g/L氯化钯、0.2 g/L氯化钯-20 g/L磷酸二氢铵溶液作为基体改进剂,800℃灰化,用石墨炉原子吸收分光光度法测定,氘灯扣除背景,标准曲线定量.结果 以0.2 g/L氯化钯溶液为基体改进剂,能明显改善峰形和提高检测灵敏度.方法的标准曲线溶液浓度在0.0 ng/ml ~ 50.0 ng/ml时,线性关系良好,其回归方程为y=0.009 6x+0.048 3,相关系数(r)为0.999 5,低检出限为0.02 mg/kg,相对标准偏差为3.07% ~4.07%,低、中、高3种镍浓度加标回收率分别为101.5%、98.4%、98.9%.结论 本方法具有快速、简单、准确的特点,可满足茶叶中的镍检测.

    作者:陈国征;吴佳敏 刊期: 2016年第16期

  • 江西省流行性腮腺炎病毒基因特征分析

    目的 了解江西省流行性腮腺炎病毒(MuV)的基本特征.方法 采集腮腺炎患者咽拭子标本分离病毒,对分离到的MuV小疏水蛋白(small hydrophobic protein,SH)基因316个核苷酸片段进行逆转录PCR(RT-PCR)扩增,对扩增产物进行序列测定及基因分型.结果 江西省27株MuV分离株属于F基因型,核苷酸及氨基酸同源性分别为94.6% ~ 100%和89.5% ~ 100%.与F基因型参考株序列相比,与兰州株的氨基酸同源性为91.2% ~94.7%,与上海株的氨基酸同源性为84.2% ~ 87.7%.MuV的F基因型毒株呈现特异性突变(CNt65、CNt105、GNt137、CNt192、CNt239);在与基因分型有关的氨基酸三联体上,有1株为VML,1株为ILL,其余均为IML.结论 江西省目前腮腺炎病毒流行株优势基因型为F基因型.现有的F基因型MuV流行株与A基因型疫苗株S79差异较大.氨基酸三联体己出现变异,因此需继续加强本省腮腺炎病毒监测的基因型监测.

    作者:肖芳;施勇;龚甜;周珺;刘师文;熊英 刊期: 2016年第16期

  • 分散固相萃取-气相色谱-质谱法测定牛奶中多组分农药残留

    目的 建立内标稀释-分散固相萃取-气相色谱-质谱法测定牛奶中有机磷、有机氯、菊酯类等多组分农药残留方法,为牛奶中农药残留检测提供参考.方法 样品加入乙腈、无水硫酸镁、氯化钠提取后,取上层有机相清液加入C18、PSA和无水硫酸镁作为分散固相萃取试剂去除杂质,浓缩后用气相色谱-质谱仪测定,配制基质标准曲线采用内标法定量.结果 57种农药组分在考察范围内保持良好的线性关系,相关系数为0.995 3~0.999 9,加标回收率为58.7%~127.1%,相对标准偏差(RSD)为0.5%~6.8%(n=6).结论 该方法操作方便,试剂消耗量少,回收率稳定,结果准确可靠,适合快速筛查牛奶中有机磷、有机氯、菊酯类等多组分农药残留.

    作者:侯逸众;黄方取;胡浩军;严继东;申屠平平;徐小民 刊期: 2016年第16期

  • 2型糖尿病合并尿路感染患者临床特点与病原菌的耐药性探讨

    目的 通过对2型糖尿病合并尿路感染(T2DMUTI)患者与无糖尿病的尿路感染(UTI)患者临床特点与病原菌耐药性分析,为临床合理用药提供科学依据.方法 将1078例T2DMUTI患者作为观察组,UTI患者1 156例作为对照组,回顾性分析2组患者临床资料与病原菌耐药性.结果 观察组中女性患者(89.15%)高于男性(10.85%),无症状菌尿发生率、>2次UTI比率、肾盂肾炎发生率明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).观察组与对照组患者感染均以大肠埃希菌为主.观察组真菌及混合感染高于对照组、差异均有统计学意义(P<0.05).观察组患者大肠埃希菌对环丙沙星、阿米卡星、头孢他啶、左氧氟沙星、哌拉西林-他唑巴坦、复方新诺明耐药性高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 临床诊治应早期对T2DMUTI患者进行细菌培养及药敏试验,根据药敏试验结果合理用药.

    作者:陈玲;崔大伟 刊期: 2016年第16期

  • 水中微量丙烯酰胺的检测方法

    丙烯酰胺(acrylamide)是一种不饱和酰胺,为无色片状结晶,化学结构式为H2C=CH-CONH2,易溶于水、甲醇、乙醇和丙酮,不溶于苯和庚烷.丙烯酰胺是合成聚丙烯酰胺的化工原料,而聚丙烯酰胺广泛用于饮水净化、污水处理、造纸、采矿等行业.2002年4月,瑞典国家食品管理局(NFA)首次报告了在一些富含淀粉类食品经过高温油炸、煎烤等加工制备过程中会产生大量的丙烯酰胺.随后,瑞士的Stadler和英国Mottram等研究人员对食品中丙烯酰胺形成机制进行了研究,该研究成果发表在2002年10月的《Nature》杂志上[1-2].

    作者:虞精明;陈纬;易炎忠 刊期: 2016年第16期

  • 红细胞分布宽度、中性粒细胞与淋巴细胞的比值、血小板和淋巴细胞的比值与活动性肺结核的关系

    目的 探索血液中红细胞分布宽度(RDW)、中性粒细胞与淋巴细胞的比值(NLR)、血小板和淋巴细胞的比值(PLR)与活动性肺结核(ATB)严重程度的关系.方法 收集80例活动性肺结核患者作为肺结核组(PTB),另收集80例年龄以及性别相仿的健康人作为对照组进行比对.结果 PTB与对照组相比,嗜中性粒细胞数、淋巴细胞数、PLT、PDW、RDW、NLR、PLR值均显著增高,差异有统计学意义(P<0.01).与轻至中度肺结核的患者相比,重度肺结核患者的WBC、嗜中性粒细胞数、PLT、RDW、NLR及PLR值较高,差异有统计学意义(P<0.01).结论 RDW、NLR及PLR值与活动性肺结核患者病情的严重程度有关,可作为临床管理活动性肺结核的参考指标.

    作者:李小平 刊期: 2016年第16期

  • 2011年-2015年宁波地区人类免疫缺陷病毒感染状况分析

    目的 回顾性分析2011年-2015年门诊和住院患者人类免疫缺陷病毒(HIV)的检测阳性率,了解其感染的流行趋势.方法 对2011年-2015年179 994例门诊和住院病人HIV采用酶联免疫吸附试验(ELISA)第三代方法检测,分析HIV在调查人群、不同年龄、性别和不同来源中的阳性率.结果 2011年-2015年HIV感染检测例数逐年增加,HIV感染阳性率呈先降低后升高的趋势,5年调查人群HIV感染总阳性率为12.3/万;不同性别组男性感染率为19.4/万,女性感染率为5.5/万,不同性别的HIV阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05);在不同年龄段分组中,随着年龄的增长,HIV感染阳性率逐步降低,其中,以≤30岁组阳性率高,为27.5/万,≥60岁组阳性率低,为4.2/万,HIV感染阳性率各年龄段差异有统计学意义(P<0.05).结论 宁波地区HIV阳性率在性别和年龄组间有差异,男性高于女性,青年是HIV感染的高发期,应迸一步加强性病门诊的常规艾滋检测,控制和减少交叉感染.

    作者:穆银玉;卢娜清;章琳;谢服役;忻其乐 刊期: 2016年第16期

  • 昌平区老年人慢性病患病及其危险因素调查分析

    目的 了解昌平区老年人慢性病患病及其存在危险因素.方法 选取南口地区28个自然村60周岁以上的常驻居民作为调查对象,调查内容包括体格检查和问卷调查.统计分析采用多因素Logistic回归分析和卡方检验.结果 社区60岁以上老年人糖尿病、高血压、血脂异常、超重和肥胖的患病率无年龄增长趋势;老年人糖尿病、高血压、血脂异常患病率与BMI无关;具有糖尿病、高血压和血脂异常危险因素项次年龄组和性别差异不大;老年人血脂异常可增加糖尿病患病风险;老年人的年龄、BMI、总胆固醇、吸烟、饮酒、肥胖、糖尿病、高血压和血脂异常9项特征中除BMI和肥胖率外男性均高于女性.结论 老年人慢性病管理重点为男性,充分发挥基层社区卫生服务中心作用,加强以社区服务站和社区医生为主的慢性病防治工作模式,做好慢病的预防工作.

    作者:赵志忠 刊期: 2016年第16期

  • 顶空气相色谱法测定水果蔬菜中乙烯利

    目的 利用乙烯利在碱性水溶液中受热能够分解成乙烯的特性,建立了水果、蔬菜中乙烯利残留的顶空气相色谱测定方法.方法 样品匀浆置于三角瓶中,酸化后,用甲醇超声提取,真空旋转蒸发浓缩后,加入碱液密封于顶空瓶中,70℃水浴恒温1.5h,采用Plot-U多孔聚合物毛细管色谱柱分离,火焰离子化检测器检测.结果 乙烯利浓度为0.01 μg/g~0.5μg/g时,线性关系良好,方法低检出限为0.01 mg/kg,加标回收率为80.1% ~ 101.1%,相对标准偏差为0.92%~ 6.84%.结论 本方法样品前处理简便快速、成本低、灵敏度高、重现性好,适用于水果、蔬菜中乙烯利残留量的检测.

    作者:汪霞 刊期: 2016年第16期

  • 高效液相色谱法测定口腔护理双氯芬酸含漱液中双氯芬酸的含量

    目的 建立高效液相色谱法(HPLC)测定双氯芬酸含漱液中双氯芬酸的含量方法.方法 采用Zorbax SB-C18(4.6 mm× 150 mm,5tμm)色谱柱,流动相为A(0.1%甲酸),B(乙腈);0min ~6 min,30%~50% B;6 min ~ 12 min,50%~70%B.流速为1.0 ml/min,检测波长为278 nm,柱温为30℃,进样量为10μl.结果 双氯芬酸的浓度为0.1g/ml~50 g/ml时,与峰面积的线性关系良好(r=0.9976),低检出限为0.1 g/ml.精密度RSD为0.24%,稳定性RSD为0.89%,平均回收率为98.32%.结论 该法操作简便、快速,可用于双氯芬酸含漱液的质量控制.

    作者:程晶晶 刊期: 2016年第16期

  • 玉米等谷物中玉米赤霉烯酮的高效液相色谱测定法

    目的 建立玉米等谷物中玉米赤霉烯酮测定的高效液相色谱法.方法 样品用乙腈提取,50℃氮吹干,乙腈定容后进样色谱分析.色谱条件:分离柱为Hypersil C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-0.02 mol/L乙酸铵(70:30,V/V);检测波长为236 nm.结果 本法在0μg/ml~ 10 μg/ml条件下,线性关系良好(r=0.999 95),ZEN的回归方程为y =81.25x+ 1.64,方法的检出限为5.0μg/kg.对玉米、小麦、稻谷3类样品分别作了低、中、高3种浓度的加标回收实验,回收率为84.0%~112%,相对标准偏差(RSD)为2.9% ~7.1%.结论 本法样品处理简单,操作方便,灵敏度高、稳定性好、成本低,可作为谷物中玉米赤霉烯酮定量测定的有效手段.

    作者:张婷;向仲朝 刊期: 2016年第16期

  • 2015年杭州市市售食品铝含量的调查分析

    目的 了解杭州地区食品中铝含量水平,为完善食品中铝限量标准和食品安全风险预警提供依据.方法 2015年在杭州地区商店、农贸市场、小型餐饮店随机抽取9类共373份食品样本,采用微波消解法进行样品处理,电感耦合等离子体质谱法进行铝含量测定.按GB 2760-2014《食品添加剂使用标准》、中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会2014年第8号和2015年第1号公告统计超标情况.结果 373份样本中只有10份未检出铝,铝的平均含量为154.7 mg/kg,中位数为.7.7 mg/kg,高含量达到3 868.6 mg/kg.不同食品中铝含量差异有统计学意义(x2=208.3,P <0.000 1).在170份有残留限量规定的样本中,总体超标率为18.2% (31/170).结论 2015年杭州市市售食品中铝污染水平总体不高,但部分食品中铝污染情况相对较突出,建议加大监管力度,采取相应控制措施.

    作者:薛鸣;龚立科;王姝婷;金铨;任韧;吴昊澄 刊期: 2016年第16期

  • 温州市区小型公共场所公共用品卫生监测分析

    目的 为了解温州市区公共场所公共用品的卫生状况,预防控制传染性疾病的发生和传播,为公共场所的卫生监督管理提供依据.方法 于2012年-2014年对市辖区内部分宾馆、美容美发店、足浴店的待用公共用品进行了细菌总数、大肠菌群、金黄色葡萄球菌及霉菌检测.结果 3年共检测183家场所,检测样品959份,总合格率为76.75%;3年的公共用品监测合格率依次为84.42%、72.08%、76.85%.3年公共用品监测合格率差异有统计学意义(x2=8.319,P<0.01).其中美容美发工具类合格率高,为92.92%;杯具类合格率低,为60.15%.结论 温州市区公共场所公共用品的卫生状况总体情况欠佳,尤其是要加强对普通小旅店和个体小型美容美发、足浴场所的卫生监督执法力度,健全公共用品用具的清洗、消毒制度.

    作者:胡芸;陈喆;陈松林;林莺;李基 刊期: 2016年第16期

  • 丽水市一起学校暴发诺如病毒疫情的实验室基因检测分析

    目的 测定丽水市一起学校病毒性胃肠炎暴发疫情诺如病毒的RNA聚合酶区(RdRp)和衣壳蛋白区(VP1)基因序列,从分子水平对病原进行分型鉴定.方法 收集疫情现场现症患者肛拭子、呕吐物、各类饮用水、可疑食物留样标本总计98份,采用荧光定量PCR方法检测诺如病毒,将阳性标本通过测序引物RT-PCR扩增RdRp和VP1基因序列并测定,通过生物信息学软件进行基因分型鉴定和序列分析.结果 共检出诺如病毒阳性4份,阳性检出率为4.08%(4/98),均为GⅡ基因型;RdRp和VP1序列BLAST和种系发生分型结果均显示为诺如病毒GⅡ.4亚型.结论 诺如病毒优势流行株GⅡ.4亚型是本次学校病毒性胃肠炎暴发疫情的重要病原体.

    作者:雷永良;王晓光;叶碧峰;钱卫明;陈秀英 刊期: 2016年第16期

中国卫生检验杂志

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主管:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会

主办:中华预防医学会