谢金成；何宗莉
目的:通过实验验证并建立一种用荧光定量PCR技术准确检测血清中HBV cccDNA的方法,同时能够消除HBV rcDNA非特异性扩增的干扰.方法:用两步法提取20例乙肝患者血清中的total HBV DNA,分别用荧光PCR试剂盒定量检测HBV DNA和cccDNA.然后通过质粒保护型的DNA酶对提取的DNA模板进行消化处理,使rcDNA得到一定程度的降解后,再分别进行HBV DNA和cccDNA的定量检测.结果:未经过酶消化处理直接定量cccDNA时存在一定的非特异性扩增.这种非特异性扩增在HBV DNA含量>106 copies/ml时比较明显,消化前后cccDNA定量值的对数平均相差1.94.经过酶消化后的定量cccDNA值基本消除了rcDNA非特异性扩增的干扰.结论:通过质粒保护型的DNA酶降解rcDNA后再进行cccDNA检测是一个方便可行的解决cccDNA准确定量问题的方法,非特异性干扰几乎可以完全消除.血清cccDNA与HBeAg及HBV-DNA有关,提示它可能也是HBV复制的血清标志.乙肝患者血清中cccDNA的含量与total HBV DNA含量成正相关.
作者：江明凤；江培学；陈伟华 刊期： 2010年第04期
目的:调查临床分离肺炎链球菌对常用抗菌药物的耐药状态,为临床用药提供依据.方法:2007～2008年间52株临床分离肺炎链球菌经VITKE-AMS-60全自动细菌鉴定仪GPI卡鉴定后,采用琼脂稀释法测定低抑菌浓度.结果:52株肺炎链球菌中,青霉素不敏感菌株32株,占61.5%,对头孢噻肟、头孢曲松有较好的敏感性,耐药率仅为21.2%和5.8%,而对头孢呋辛的耐药率则达50.0%.对红霉素、阿奇霉素、克林霉素高度耐药,均达92.3%,氯霉素的耐药率为15.4%,而对万古霉素和左氧氟沙星呈现高敏感性,敏感率分别达100%和98.1%.并且青霉素耐药菌株呈现多重耐药性比青霉素敏感株明显.结论:临床分离肺炎链球菌对万古霉素、左氧氟沙星敏感性高,对头孢噻肟、头孢曲松、头孢呋辛以及氯霉素比较敏感,对青霉素耐药率比较严重,而对红霉素、阿奇霉素和克林霉素普遍耐药.
作者：徐丽慧；王贤军；王敏敏；董晓勤 刊期： 2010年第04期
目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中垂体瘤转化基因(PTFG)和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达相关性及其与肺癌发生发展之间的关系.方法:应用免疫组织化学sP法检测57例NSCLC组织及6例良性病变肺组织中PTTG和PCNA蛋白的表达.结果:NSCLC组织FITG和PCNA蛋白的阳性表达率分别为87.72%和61.4%,在良性病变肺组织中均未检测到两者的表达.上述两种组织之间的PTTG和PCNA蛋白表达均有显著性差异(P<0.05).PTTG蛋白表达与TNM分期和淋巴结转移密切相关(P<0.05),与患者的性别、年龄、肿瘤大小、组织学类型及分化程度无关(P>0.05).PCNA蛋白表达与肿瘤分化程度有关(P<0.05),与患者的性别、年龄、肿瘤大小、组织学类型、TNM分期和淋巴结转移无关(P>0.05).癌组织中PTYG和PCNA蛋白的表达呈显著正相关(r=0.306,P=0.005).结论:PTTG和PCNA在非小细胞肺癌中高表达,两基因表达成显著正相关,二者在非小细胞肺癌的发生、发展中有协同作用,并可作为非小细胞肺癌生物学行为的指标.
作者：苗淑荣；王艳 刊期： 2010年第04期
目的:分析评价监测结果,发现存在问题,提出对策及时改进,控制医院感染.方法:按<消毒技术规范>对医院消毒与灭菌质量采用随机抽样进行检测.结果:5年共检测各类样品3077份,合格2978份,检测合格率为96.8%;无菌物品和压力蒸汽灭菌微生物的合格率高为100.0%,其次是使用中消毒液为99.3%;空气、物体表面和医护人员手的合格率依次为85.5%、91.6%、94.4%.结论:空气、物体表面、医护人员手合格率欠佳,应是今后整改的重点.在医院消毒效果质量方面需要加强监督管理、技术知识培训,提高医院感染的控制能力.
作者：张冬民；贾桂华；丁勇莉；毛斐 刊期： 2010年第04期
2009年7月16日南阳市宛城区汉冢乡黄姑街发生了一起食物中毒.35人就餐,15人发病.经流行病学调查,临床表现,实验室诊断,证实本次食物中毒由蜡样芽胞杆菌感染所引起.
作者：包伟华；兰中伟 刊期： 2010年第04期
目的:建立快速、灵敏、特异地检测金黄色葡萄球菌肠毒素A的荧光定量PCR检测方法.方法:以SEA基因作为肠毒素A的检测靶序列,设计荧光定量PCR引物和Taqman探针,优化反应体系的主要成分浓度和循环条件,评价方法的灵敏度、特异性和重复性,并对22株食物中毒中分离的金黄色葡萄球菌进行肠毒素A的检测.结果:建立金黄色葡萄球菌肠毒素A的荧光定量PCR检测方法.25 μl荧光定量PCR反应体系主要成分浓度分别为Mg2+7.0 mmol/L,dNTP 0.3 mmol/L,引物0.4 μmol/L,探针0.7 μmol/L,TaqDNA聚合酶2.5U.方法可检出低45个拷贝的细菌DNA,特异性和重复性良好.从22株食物中毒中分离的金黄色葡萄球菌中检出肠毒素A阳性菌株6株.结论:荧光定量PCR可快速、准确的检出金黄色葡萄球菌的肠毒索A,能为金黄色葡萄球菌食物中毒诊断提供依据.
作者：刘渠；廖灵灵；徐亚军；李涌 刊期： 2010年第04期
目的:为快速查找食物中毒原因,并预防类似食物性疾病的再次发生.方法:分别对13份剩余食物样品进行食源性致病菌检测.结果:在糯米糖饭和凉拌胡豆中分离出的可疑菌株为伤寒沙门菌.结论:根据临床症状及实验室分析,本次食物中毒是食用受到伤寒沙门菌污染的食物而引起的细菌性食物中毒.
作者：刘惠虹 刊期： 2010年第04期
目的:探讨用ELISA方法直接测定虾类中硝基呋喃类代谢物残留量中呋喃唑酮代谢物AOZ.方法:样品直接用ELISA检测试剂直接测定虾类中硝基呋喃类代谢物残留量中呋喃唑酮(Furazolidone)代谢物AOZ.结果:本方法与高效液相色谱法比较,结果差异无显著性(P>0.05);回收率在80.0%～90.0%之间,相对标准偏差13.6%.结论:用ELISA检测试剂直接测定虾类中硝基呋喃类代谢物残留量中呋喃唑酮代谢物AOZ,具有准确、简便和快速的优点.
作者：潘心红；罗晓燕；李军涛；李静 刊期： 2010年第04期
目的:分析河北省2004～2008年流行性感冒(流感)流行特点和流感病毒优势毒株的情况,为流感防治提供科学依据.方法:在流感流行季节,采集流感样病例(Influenza Like Illness,ILI)咽拭子标本,用MDCK(Madin Darby Canine Kidney)细胞培养分离流感病毒,经血凝抑制(Hemasslutination Inhibition,HI)试验鉴定病毒型别.结果:2004年10月一2008年3月共采集ILI咽拭子标本3179份,分离到流感病毒288株,血清学鉴定结果A(H1N1)亚型78株,占27.08%,A(H3N2)亚型113株,占39.24%,B-Victoria系36株,占12.50%,B-Yamagata系61株,占21.18%.在2004～2005年流行期和2006～2007年流行期均以A(H3N2)亚型流感病毒占优势;2005～2006年流行期以A(H1N1)亚型流感病毒占优势;2007～2008年流行期优势流行株为B-Yamagata系流感病毒.除2005～2006年流行期外,我省流感病毒流行高峰期均在1月份.结论:河北省流感病毒流行有明显季节性,1月为发病高峰,感染人群中流感毒株A(H1N1)、A(H3N2)亚型和B-Victoria、B-Yamagata系交替出现,流行优势毒株不断发生变化.
作者：彭世强；刘艳芳；韩光跃；高伟；齐顺祥 刊期： 2010年第04期
痰液的细菌培养是检测呼吸道感染病原菌的主要手段,在临床广泛应用,但由于普遍采用自然咳痰法,痰液标本的质量难以保证;其次呼吸道病原菌繁多和致病机理的复杂;以及临床医生的先用药后培养的不规范操作导致细菌培养不出等等原因,使实验室承受了很大的压力.
作者：倪淑芳；周炜栋；尚智 刊期： 2010年第04期
目的:用铬天青S分光光度法对杭州市内的三类面制品中铝含量进行调查分析.方法:对杭州市内的三类面制品进行采样,用干灰化法处理样品,测定其铝含量.结果:检测的三类面制品共88件,铝含量的合格率仅为20.4%(18/88).其中油条样品为58件,铝含量的合格率为3.4%(2/58);馒头样品为21件,铝含量的合格率为57.1%(12/21);发糕样品为9件,铝含量的合格率为44.4%(4/9).结论:样品经干灰化法处理后,无需考虑pH值影响,用铬天青S比色法测定,结果准确,杭州市油条、馒头、发糕这三类面制品含铝量超标严重,需要引起有关部门注意.
作者：黄闽燕；钟小伶；沈利明 刊期： 2010年第04期
目的:了解外科重症监护病房(SICU)细菌流行及耐药情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据.方法:用WHO推荐的WHONET5.4统计软件进行分析.结果:在SICU中感染的细菌以革兰阴性杆菌为主,占60.7%:主要是大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌;革兰阳性球菌占35.7%:以金黄色葡萄球菌、肠球菌以及凝围酶阴性葡萄球菌为主要分离菌;念珠菌占3.7%.大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs检出率分别为63.3%和48.1%.葡萄球菌MRSA、MRCNS检出率为75.0%和68.9%.E试验表明产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌株对第三、四代头孢菌素、环丙沙星的MIC50较高,且出现2株亚胺培南和美罗培南中介的肺炎克雷伯菌;非产ESBLs菌株对第三代、四代头孢菌素及含酶抑制剂β-内酰胺类抗菌素耐药率均<10%;鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦及阿米卡星的敏感率分别是85.3%和76.0%;铜绿假单胞菌对哌拉西林/他唑巴坦的敏感率为87.1%、头孢他啶75.1%、阿米卡星71.7%、头孢哌酮/舒巴坦64.5%;葡萄球菌对万古霉素和替考拉宁敏感率为100%,对其他抗菌药物高度耐药;肠球菌中检出2株耐万古霉素的屎肠球菌.结论:SICU中耐药现象严重,尤其是铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗菌素的耐药以及耐万古霉素肠球菌的流行值得关注.需加强SICU病原菌及耐药性监测,为临床合理使用抗菌药物提供参考依据.
作者：冯羡菊；张燕；曾利；徐岷 刊期： 2010年第04期
目的:探求快速、灵敏、可靠的食品中金黄色葡萄球菌检测方法.方法:通过选择性鉴定试验、敏感性试验及其在食品检测中的应用效果对Baird-Parker平板涂布法、PetrifilmTM测试纸片法和Baird-Parker+RPF倾注法进行了比较研究.结果:3种方法检测金黄色葡萄球菌选择性良好,PetrifilmTM试纸片法和Baird-Parker+RPF法敏感性较Baird-Parker法稍高,3种方法应用在食品检测中,金黄色葡萄球菌阳性检出率无显著性差异.结论:使用PetrifilmTM测试纸片法和Baird-Parker+RPF法检测食品中金黄色葡萄球菌虽耗材费用高于Baird-Parker平板法,但检测时间可缩短一半以上,并可节省人力,具有快速、方便的优点,在日常检测中值得推广应用.
作者：梁景涛；谢翊；林秋芬；卢振林；陈淑玲 刊期： 2010年第04期
伏马菌素(fumonisin,FB)是一组主要由串珠镰刀菌产生的真菌毒素,1988年Gelderblom等首次从串珠镰刀菌培养物中分离出伏马菌素,到目前为止,已发现的伏马菌素有FA1、FA2、FB1、FB2、FB3、FB4、FC1、FC2、FC3、FC4、FP1共11种,其中FB1、FB2和FB,在自然界中普遍存在,也是污染玉米及其制品的主要成分,而被伏马菌素污染的食品中FB1大约占70%.
作者：权伍英；谷晶 刊期： 2010年第04期
随着我国人民生活水平和健康意识的不断提高,环境、食品、药品的安全,尤其是其有害残留物问题,日益成为社会各界的关注焦点.同时由于世界贸易一体化的不断深入,我国食品、农产品及中草药的出口不断增大,但与此同时遇到的出口障碍也不断增加,其中很重要的原因就是有害残留物含量超标问题.
作者：谢婷婷；戚爱棣；杨美华 刊期： 2010年第04期
目的:研究含朱砂中药制剂中可溶性汞盐,测定含量并进行安全性评价.方法:通过处方分析、提取方法及检测方法筛查,并根据可溶性汞盐的化学性质,选用微波消解-原子荧光光度法检测含朱砂中药制剂中可溶性汞盐的含量,光电倍增管负压为300 v,原子化器温度为200℃,A通道灯电流为80 mA,还原剂为0.5%氢氧化钠+0.75%硼氢化钾,载流为3%硝酸.并根据样品检测结果及朱砂的日摄取量制定合理限度,完善质量标准中的安全性检查.结果:在0.8-4.0 μg/L的范围内线性良好(r>0.999),检出限为0.1073 μg/L.平均回收率(n=6)为91.33%,RSD为3.36%.结论:本法简便、灵敏、准确,可用于含朱砂中药制剂中可溶性汞盐的测定,评价药品安全性,完善质量标准.
作者：张映娜；李旸华；曾丽玲；林秋凤；雷柳冰 刊期： 2010年第04期
目的:建立空气-乙炔火焰原子吸收法测定富锶食品中锶含量.方法:采用干法灰化对样品进行前处理,以EDTA-表面活性剂联合增敏,采用中性火焰测定锶含量,对EDTA-表面活性剂、混合气体、共存离子干扰与消除、硝酸镧用量的确定进行试验探讨.结果:当EDTA-聚乙二醇辛基苯醚(OP)存在时,测定锶的灵敏度提高60%,同时以EDTA、硝酸镧为保护剂、消电离剂、释放剂可消除样品中共存元素的干扰.方法线性范围0～10.0 μg/ml检出限为0.02 μg/ml,相对标准偏差为4.0%-6.5%,方法回收率在92%-105%.对3种国家标准物质进行测定,测定值均与真值相吻合.结论:本方法简便、灵敏、准确,适用于富锶食品中锶的测定.
作者：谢金成；何宗莉 刊期： 2010年第04期
目的:建立乳制品中合成色素胭脂红、柠檬黄、日落黄、亮蓝的高效液相色谱测定方法.方法:使用冰乙酸作沉淀剂,溶液过盛有聚酰胺粉的G3垂融漏斗抽滤,吸附合成色素,后用乙醇-氨水解吸色素,收集全部解吸液,经蒸发、定容、过滤后进行高效液相色谱(HPLC)分析.结果:各合成色素含量在5.0～100.0 μg/ml范围内线性良好,方法相对标准偏差为2.6%～6.1%;加标回收率为96.7%～105.3%.结论:方法准确可靠、精密度好、简便快速,便于推广.
作者：刁晓霞 刊期： 2010年第04期
目的:探讨乙型肝炎患者病毒核酸载量与血清乙型肝炎病毒外膜大蛋白(HBV-LP)含量的关系.方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和实时荧光定量PCR法分别检测307例乙型肝炎患者血清的HBV-LP、HBV-M和HBVDNA,并进行相关性分析.结果:307例乙型肝炎患者血清中HBV-LP含量与HBV DNA拷贝数变化相一致,两者呈正相关(r=0.943);在131份HBeAg阳性血清中,HBV DNA与HBV-LP的阳性率分别为95.42%和93.89%,两者差异无显著性(P>0.05);在176份HBeAg阴性血清中,HBV DNA与HBV-LP的阳性率分别为46.02%和56.25%,两者差异无显著性(P>0.05).结论:血清HBV-LP水平能反映HBV感染者体内HBV复制程度,其灵敏度高于HBeAg,可作为判断HBV复制新的血清学指标.
作者：李小永；温怀凯；陶洪群；张信良；余坚 刊期： 2010年第04期
目的:麻痹性贝类毒素的N-2a细胞检测方法的建立并确定可能的检测限值.方法:使用不同浓度毒素标准品结合藜芦定和乌本苷共同作用对数生长期的N-2a细胞,通过cck-8试剂盒检测细胞毒性,确立细胞检测方法的检出限及比较各毒素作用大小,并同步利用小鼠生物法进行验证,通过精确记录小鼠死亡时间,比较各毒素的毒作用大小.结果:麻痹性贝类毒素能明显降低藜芦定和乌本苷的细胞毒性,且具有剂量-反应关系,通过比较得出毒素各成分毒性大小为:neoSTX>STX>dcSTX>GTX1,4>GTX2,3>dcGTX2,3;小鼠生物法的毒作用平均死亡时间为:neoSTX组(6.5 min),GTX1,4组(8.0 min),STX组(9.0 min),dcSTX组(15 min);GTX2,3组和deGTX2,3组未见动物死亡.结论:细胞检测与小鼠生物法具有较好的一致性,表明所建立的细胞检测法可行,且细胞毒性试验检测方法具有较高的灵敏度,低检出限值可达到10-9 mol/L剂量水平,其中浓度在10-6～10-8 mol/L间具有较好的线性.
作者：黄海燕；付英斌；赵昆山；袁建辉；周丽；刘建军 刊期： 2010年第04期
中国卫生检验杂志
主管:中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会
主办：中华预防医学会
