赵俊芳；王学谦；李桂珍；李会强
目的 建立一种快速准确的检测结核分枝杆菌(MTB)核酸的环介导等温扩增(LAMP)方法.方法 以重复插入序列IS6110为目的基因,设计LAMP引物,特异检测MTB核酸.用本法与痰涂片抗酸染色镜检法、实时荧光PCR法对100例可疑患者痰标本进行对比检查.结果 LAMP法特异性强,仅扩增MTB复合群核酸；灵敏度高,检测限达100 fg；而实时荧光PCR检测限为1 pg.对100例疑似结核病患者痰液标本检测,涂片抗酸染色法、LAMP法、实时荧光PCR法的阳性率分别为28％、39％和38％.结论 本研究建立的LAMP方法检测MTB核酸特异性强、灵敏度高、时间短且操作简便,有望成为临床快速检测MTB的新方法.
作者：沈会平；张耀祺；杨坚；石磊；陈涛；李国周；赵红波；莫自耀 刊期： 2011年第05期
细菌性阴道病( bacterial vaginosis,BV)是育龄妇女常见的阴道感染性疾病之一.虽已有一些快速检测方法[1],但目前诊断BV仍常按Amsel标准[2].该标准操作较为繁琐,易受多种因素干扰,湿片下线索细胞不易识别,易漏检、误检,标本不易保存,不便于质量控制.Nugent计分法[3]各形态菌数量判断标准较低:每油镜视野0(-)≤1个(1+),2～5个(2+),6～30个(3+),＞30个(4+),而且未提及线索细胞.《全国临床检验操作规程》[4]中提到阴道分泌物涂片革兰染色后的细菌名称和线索细胞,但无细菌数量判断标准.本研究拟结合线索细胞对Nugent计分法进行改良(简称改良法),用于BV的临床诊断,现报道如下.
作者：黄莉；彭晓枫；谢婷婷；陈美芬；夏曙华 刊期： 2011年第05期
血管炎是指原发于血管的一类炎症性疾病,许多抗体参与血管炎的发病机制及病程,其中血管炎和抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)的关联性较高.IL-33是新发现的具有多种效应的前炎症细胞因子,在炎症反应中起着关键性的作用[1].本研究测定90例血管炎患者血清ANCA和IL-33水平,以探讨IL-33与血管炎的相关性.
作者：黄晶；安倍莹；单红丽；张朝冠；白岩 刊期： 2011年第05期
交叉配血不合的原因主要是不规则抗体或自身抗体,即抗IgG类抗体的干扰;另外,某些物质过高引起或破坏了红细胞(RBC)表面的电位差,使RBC的相对平衡状态被破坏而产生非特异性凝集时也可导致血型鉴定困难、交叉配血不合等现象.本文报告对4例交叉配血不合的原因分析.
作者：孔亚红 刊期： 2011年第05期
目的 研究膜联蛋白5(annexin 5,A5)对坐骨神经选择性损伤引起的慢性疼痛应激致雄性SD大鼠生殖损伤的保护作用.方法 32只雄性SD大鼠随机分为4组,分别建立对照组、假手术组、手术组和手术+A5组模型.手术+A5组于术后第2天腹腔注射15μg/kg剂量的A5,其他实验组腹腔注射等量的pH 8.0 Tris-HCl,每日1次,连续21 d.分别测各组SD大鼠体重、称重睾丸和附睾,计算其脏器系数,并对附睾尾进行精子计数.HE染色观察睾丸组织结构变化.用化学发光法检测各组大鼠血清中睾酮浓度.结果 手术组大鼠与对照组相比,睾丸系数、附睾系数以及精子相对计数均降低(P＜0.05)；睾酮水平下降显著[(5.10±2.61) vs (22.40±4.30) mmol/L,P＜0.0l)]；病理切片见睾丸生精细胞与腔内精子数量明显减少.假手术组大鼠与对照组比,上述指标均无统计学差异.手术+A5组与手术组比,精子相对计数与睾酮含量[(19.67±2.02)vs(5.10±2.61) mmol/L,P＜0.01]均显著提高,其他参数均有不同程度的恢复,睾丸生精细胞与腔内精子数量减少程度显著恢复.结论 A5对慢性疼痛应激引起的生殖损伤具有一定的保护作用.
作者：林钗英；时姗姗；陶晓倩；柳海燕；靖俊；姚兵 刊期： 2011年第05期
目的 研究我院烧伤科2010年4～6月分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株耐药性及分子流行病学特点,找出流行菌株,为指导临床经验用药提供参考.方法 采用纸片扩散法(K-B法)及葡萄球菌A蛋白基因(spa)分型技术对分离的24株MRSA进行药物敏感性试验和同源性分析.结果 分离的菌株对青霉素、苯唑西林、阿莫西林/克拉维酸、亚胺培南、美罗培南全部耐药,其余抗菌药物除万古霉素外耐药率均在50％以上,未发现万古霉素耐药株.spa基因分型发现3个spa型,t030型共22株,t3226和t632型各1株,提示分离菌株具有高度的同源性.结论 我院烧伤科MRSA菌株具有多重耐药的特征,spa t030型菌株是其主要型别.
作者：师志云；赵志军；贾伟；李刚；张楠；纵帅；魏军 刊期： 2011年第05期
近年来临床实验室认可活动越来越普遍,并规定认可过程必须评定测量不确定度.临床实验室人员也逐渐认识到评定测量不确定度的重要性,但评定方法尚未完全一致.近年来关于不确定度评定的相关指南及研究性论文呈指数级增长,但应该评定“测量程序”还是评定“测量结果”的不确定度存在较大争议.二者在评定方法、报告方式和评定效果三方面都存在显著差异.本文从不确定度评定的理论和实践两方面进行了分析,认为在医学检验中评定“测量结果”的不确定度更为合理,也更有意义.
作者：王惠民；季伙燕 刊期： 2011年第05期
多数临床检验项目是定量检验,用数值和单位表示检验“结果”,属测量范畴.按现代计量学理论,测量结果是“一组”由测量得到的量值,通常用一个测得量值和该量值的测量不确定度表示.不确定度给出该量值的分散性信息,一方面代表测量质量,不确定度越小,测量质量越高;另一方面它是有效利用测量结果以及测量结果之间比较的需要.
作者：陈文祥 刊期： 2011年第05期
多发性骨髓瘤(MM)细胞和浆细胞包涵体的名称和形态学描述尚不一致,给初学者和临床诊断带来一定困难,为此我们结合临床实践及国内外文献对浆细胞包涵体名称和形态学特点作一阐述.1包涵体的形成与名称Kanoh等[1]将包涵体的形成分为4类:(1)来源于免疫球蛋白;(2)属于淀粉样蛋白;(3)由溶酶体颗粒组成;(4)不属于以上3种类型.Tkachuk[2]认为,骨髓瘤细胞或浆细胞胞质中如存在多个小空泡称为Mott细胞;含有的体积大的同质性球状包涵体为Russel小体;胞核中包涵体称为Dutcher小体.
作者：史敏；李顺义 刊期： 2011年第05期
目的 研究人胚胎骨髓间充质干细胞(fetal mesenchymal stem cells,FMSC)及其突变肿瘤细胞F6死亡相关蛋白激酶(death-associated protein kinase,DAPK)基因的表达及启动子区域甲基化.方法 用RT-PCR和甲基化特异性PCR( methylation-specific PCR,MS-PCR)技术对FMSC及F6细胞系DAPK基因的表达和启动子甲基化状态进行检测,并对甲基化产物测序鉴定.结果 DAPK基因在FMSC中表达而在F6中不表达.通过MS-PCR检测证实F6中DAPK基因发生甲基化,FMSC中DAPK基因发生未完全甲基化.结论 DAPK基因启动子区域发生甲基化可能是促使其基因表达下调的重要机制,在FMSC突变成F6肿瘤细胞过程中发挥重要作用.
作者：徐学静；张葵；顾光煜；钱晖；许文荣 刊期： 2011年第05期
羧基端糖肽( copeptin)是一种与精氨酸血管加压素(arginine vasopressin,AVP)同源且与其等摩尔分泌的稳定糖肽.copeptin的检测简便、快速,可有效地反映内源性AVP的水平.近年来,其对多种疾病预后评估和危险分层的作用成为研究的热点.本文重点阐述其在疾病诊断和预后评估方面的研究进展.
作者：潘萌萌；王辉 刊期： 2011年第05期
早在18世纪就有关于不确定度的论述,到上世纪60年代,人们对检测结果质量的科学表达越来越关注,测量不确定度的概念逐渐为测量人员重视并有所应用.1995年7个国际组织制定的《测量不确定度表达指南》(GUM)[1]的发表,使对测量不确定度的要求快速进入相关的技术标准.
作者：吕京 刊期： 2011年第05期
目的 用PCR检测体外诱导的万古霉素耐药金黄色葡萄球菌(VRSA)的耐药基因vanA,探讨体外诱导VRSA对万古霉素耐药机制.方法 用万古霉素体外诱导将1株异质性VRSA逐步诱导为VRSA;检测金黄色葡萄球菌特异性nuc基因和万古霉素耐药基因vanA.结果 基因检测发现VRSA菌株均不含vanA基因.结论 VRSA不含vanA基因,故细胞壁增厚是导致金黄色葡萄球菌对万古霉素耐药的主要机制.
作者：张涛；马筱玲；戴媛媛；鲁怀伟；陈多炎 刊期： 2011年第05期
目的 探讨载脂蛋白A5(apoA5)c553G/T基因多态性与代谢综合征(MS)的相关性.方法 用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析apoA5 c533G/T位点多态性在203例MS患者和216名体检健康者中的分布,并用酶法检测其血脂和血糖水平.结果 c553T等位基因在高三酰甘油(TG)血症人群中的分布频率明显高于健康对照组(P＜0.05).Logistic回归分析显示,apoA5 c553T等位基因对MS高TG血症(OR=3.380,P＜0.05)具有独立的影响.MS组和健康对照组apoA5 c553TT纯合子及GT杂合子个体比GG纯合子个体具有高TG水平.结论 apoA5 c553G/T基因多态性与血浆TG具有相关性,apoA5 c553T等位基因可能为MS的危险因素.
作者：丁妍；来名安；朱静；卢智勇；袁雅红；王小莉；李东升 刊期： 2011年第05期
目的 评价7种室间质量评价(EQA)材料和4种市售材料在9个检测系统上测定血清ALT和AST的基质效应.方法 参照美国临床实验室标准化协会( CLSI) EP14-A2指南,根据ALT和AST的参考方法建立不含磷酸吡哆醛的比对方法.9个检测系统的常规方法为待评方法.用比对方法和待评方法同时测定新鲜人血清、EQA材料及市售材料的ALT和AST水平,评价非血清样品的基质效应.结果 ALT测定中1种EQA材料对所有检测系统均表现基质效应,AST测定中2种EQA材料对所有检测系统无基质效应,其他材料视系统的不同而表现出不同的情况.结论 基质效应影响血清ALT和AST测定的准确性和可比性,应充分重视基质效应对临床检验量值溯源的影响.
作者：郑松柏；王建兵；黄宪章；马艳；庄俊华；徐宁；周华友；陈茶 刊期： 2011年第05期
测量不确定度,是表征合理地赋予被测量值的分散性的与测量结果相联系的参数.为了表征这种分散性,测量不确定度用标准差表示.近年来,测量不确定度的概念被引入临床检验领域.ISO 15195文件[1]中指出,参考测量实验室应证明它们的测量结果可通过一条不间断的比较链溯源至现有的高级别的参考物质或参考测量程序报告的每一个测量结果附有按GUM评定和表示的不确定度.中国实验室国家认可委员会按ISO/IEC 17025《校准和检测实验室能力的通用要求》[2]对校准和检测实验室认可时,也有测量不确定度的评定要求.作为医学检验界高水平的室间质量评价活动——国际参考实验室室间质量评价(RELA)活动的回报结果也需附有不确定度.
作者：吕磊 刊期： 2011年第05期
目的 了解新疆地区结缔组织病(CTD)患者血清中抗核抗体(ANA)荧光核型、靶抗原与CTD之间的相关性.方法 采用间接免疫荧光法(IIF)检测ANA荧光核型；采用免疫印迹法和酶免疫法检测抗核抗体谱和自身抗体.结果 新疆地区564例ANA阳性CTD患者中,ANA荧光核型有单一及复合核型.单一核型中核颗粒型多见(靶抗原依次为SSA、nRNP、Sm),其次核均质型(靶抗原依次为dsDNA、核小体和组蛋白).复合核型中,双核型以核颗粒型+核均质型,核颗粒型+胞浆颗粒型组合为主.三核型以核颗粒型+核均质型+胞浆颗粒型常见.在荧光核型、靶抗原及疾病关系分析结果中发现:SLE患者单核型以核均质和核颗粒常见,双核型以核颗粒+核均质、核颗粒+胞浆颗粒组合常见,三核型为核颗粒、核均质、胞浆颗粒同时出现.另外抗核糖体P蛋白以往引起胞浆颗粒荧光,而本研究中核颗粒型检出率为27.03％.抗着丝点抗体在SLE、原发性胆汁性肝硬化( PBC)、硬皮病及重叠综合征中均能检出.结论 新疆地区CTD患者血清ANA荧光核型呈现多样性.以核颗粒为优势核型；靶抗原SSA不仅可以引起经典的核颗粒荧光,还可呈现核均质、核仁型、胞浆颗粒型荧光.核糖体p蛋白呈现核颗粒型荧光.抗着丝点抗体具有较宽的疾病谱；SLE患者荧光核型呈现多样性,自身抗体谱广于其他自身免疫性疾病(AID).
作者：王晓东；董潇阳；刘旭；哈地丽亚；哈斯木；邓淑文 刊期： 2011年第05期
并殖吸虫(Paragonimus)也称为肺吸虫(lung fluke),主要寄生于宿主的肺内,引起肺吸虫病[1].肺吸虫病是一种人兽共患寄生虫病,容易误诊和漏诊.现报告因感染肺吸虫后出现嗜酸性粒细胞增多而被多家医院误诊的1例患者.1病历简介患者,男,27岁,贵州省遵义人.因头痛、胸闷、皮肤瘙痒3个月入广西宜春某院.血常规:白细胞29.5×109/L,嗜酸性粒细胞0.48.X线胸片:双下肺感染.B超:肝脾大,双侧胸腔少量积液.
作者：刘流；晏容；刘晖；贺莉芳 刊期： 2011年第05期
目的 探讨用重组苦瓜蛋白MAP30(Momordica anti-HIV protein of 30 ku)诱导人食管癌细胞株EC-1.71细胞凋亡状况.方法 MAP30诱导EC-1.71细胞后,透射电镜观察细胞凋亡的形态特征；JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位(△Ψm)变化；ELISA法检测细胞培养上清液中细胞色素c(Cytc)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平；免疫细胞化学法检测细胞ERK1/PERK1,AKT/PAKT和NF-κB表达；荧光微板阅读仪检测细胞caspase-12活性.结果 MAP30诱导可以使EC-1.71细胞固缩,核膜扭曲,核染色质聚集成块并靠近核膜,内质网高度膨胀、扩张；△Ψm水平下降；Cytc和TNF-α含量增加；胞质中ERK1、AKT表达增强而胞核中PERK1、PAKT表达降低,NF-κB活性降低,caspase-12活性增强.结论 MAP30可以诱导EC-1.71细胞凋亡.
作者：韩晓红；邵世和；薛延军；陈德玉；黄河；李先茜；许化溪 刊期： 2011年第05期
目的 建立一种五重荧光定量RT-PCR检测并鉴别流感病毒A( Flu A)、流感病毒B( Flu B)、呼吸道合胞病毒(RSV)以及新甲型H1N1流感病毒(nH1N1)的方法.方法 以人细胞RNA酶P基因为内参,用Primer Express 3.0设计PCR引物和探针.用一系列不同滴度的病毒培养物和不同来源的呼吸道病毒分别进行灵敏度和特异性分析.结果 该法灵敏度较好,可测半数组织培养感染剂量(TCID50/mL)为0.02 ～0.2的病毒量,特异性达100％,每对引物和探针只检测出相应的病毒,无交叉反应.已确诊的nH1N1、Flu B、RSV感染患者的样本用该法均成功地测出.结论 建立的五重荧光定量RT-PCR法灵敏度和特异性都较高,可检测出多种呼吸道病毒,对临床呼吸道病毒感染的诊断有一定的价值.
作者：崔大伟；郑书发；范剑；楼滨；余斐；秦志梅；邹伟华；吴英萍；陈凌晓；陈瑜 刊期： 2011年第05期
临床检验杂志
主管:江苏省卫生厅
主办：江苏省医学会
