丁妍；来名安；朱静；卢智勇；袁雅红；王小莉；李东升
早在18世纪就有关于不确定度的论述,到上世纪60年代,人们对检测结果质量的科学表达越来越关注,测量不确定度的概念逐渐为测量人员重视并有所应用.1995年7个国际组织制定的《测量不确定度表达指南》(GUM)[1]的发表,使对测量不确定度的要求快速进入相关的技术标准.
作者：吕京 刊期： 2011年第05期
测量不确定度,是表征合理地赋予被测量值的分散性的与测量结果相联系的参数.为了表征这种分散性,测量不确定度用标准差表示.近年来,测量不确定度的概念被引入临床检验领域.ISO 15195文件[1]中指出,参考测量实验室应证明它们的测量结果可通过一条不间断的比较链溯源至现有的高级别的参考物质或参考测量程序报告的每一个测量结果附有按GUM评定和表示的不确定度.中国实验室国家认可委员会按ISO/IEC 17025《校准和检测实验室能力的通用要求》[2]对校准和检测实验室认可时,也有测量不确定度的评定要求.作为医学检验界高水平的室间质量评价活动——国际参考实验室室间质量评价(RELA)活动的回报结果也需附有不确定度.
作者：吕磊 刊期： 2011年第05期
目的 研究人胚胎骨髓间充质干细胞(fetal mesenchymal stem cells,FMSC)及其突变肿瘤细胞F6死亡相关蛋白激酶(death-associated protein kinase,DAPK)基因的表达及启动子区域甲基化.方法 用RT-PCR和甲基化特异性PCR( methylation-specific PCR,MS-PCR)技术对FMSC及F6细胞系DAPK基因的表达和启动子甲基化状态进行检测,并对甲基化产物测序鉴定.结果 DAPK基因在FMSC中表达而在F6中不表达.通过MS-PCR检测证实F6中DAPK基因发生甲基化,FMSC中DAPK基因发生未完全甲基化.结论 DAPK基因启动子区域发生甲基化可能是促使其基因表达下调的重要机制,在FMSC突变成F6肿瘤细胞过程中发挥重要作用.
作者：徐学静；张葵；顾光煜；钱晖；许文荣 刊期： 2011年第05期
目的 评价Bactec MGIT 960系统自临床标本分离分枝杆菌的价值.方法 收集临床标本共578份,分别接种于Bactec MGIT 960系统和改良罗氏培养基,分离到的分枝杆菌用荧光PCR进行菌种鉴定.结果 578份临床标本中,共分离出171株分枝杆菌(29.6％).两种方法均阳性有105株,仅Bactec MGIT 960系统阳性有54株,仅罗氏培养基阳性有12株.Bactec MGIT 960系统分离率为27.5％ (159/578),罗氏培养基法为20.2％ (117/578).BactecMGIT960系统法阳性平均报告时间为10.2 d,罗氏培养基法为27.5d.Bactec MGIT 960系统法污染率为7.6％,罗氏培养基法为4.3％.结论 Bactec MGIT 960分枝杆菌检测技术是一种较好的快速分离分枝杆菌的方法,联合改良罗氏培养基可进一步提高分离率.
作者：陈晓；杨青；徐根云；孔海深 刊期： 2011年第05期
目的 了解新疆地区结缔组织病(CTD)患者血清中抗核抗体(ANA)荧光核型、靶抗原与CTD之间的相关性.方法 采用间接免疫荧光法(IIF)检测ANA荧光核型；采用免疫印迹法和酶免疫法检测抗核抗体谱和自身抗体.结果 新疆地区564例ANA阳性CTD患者中,ANA荧光核型有单一及复合核型.单一核型中核颗粒型多见(靶抗原依次为SSA、nRNP、Sm),其次核均质型(靶抗原依次为dsDNA、核小体和组蛋白).复合核型中,双核型以核颗粒型+核均质型,核颗粒型+胞浆颗粒型组合为主.三核型以核颗粒型+核均质型+胞浆颗粒型常见.在荧光核型、靶抗原及疾病关系分析结果中发现:SLE患者单核型以核均质和核颗粒常见,双核型以核颗粒+核均质、核颗粒+胞浆颗粒组合常见,三核型为核颗粒、核均质、胞浆颗粒同时出现.另外抗核糖体P蛋白以往引起胞浆颗粒荧光,而本研究中核颗粒型检出率为27.03％.抗着丝点抗体在SLE、原发性胆汁性肝硬化( PBC)、硬皮病及重叠综合征中均能检出.结论 新疆地区CTD患者血清ANA荧光核型呈现多样性.以核颗粒为优势核型；靶抗原SSA不仅可以引起经典的核颗粒荧光,还可呈现核均质、核仁型、胞浆颗粒型荧光.核糖体p蛋白呈现核颗粒型荧光.抗着丝点抗体具有较宽的疾病谱；SLE患者荧光核型呈现多样性,自身抗体谱广于其他自身免疫性疾病(AID).
作者：王晓东；董潇阳；刘旭；哈地丽亚；哈斯木；邓淑文 刊期： 2011年第05期
目的 建立环介导等温扩增(LAMP)技术快速检测临床标本中金黄色葡萄球菌(SA)的方法.方法 基于金黄色葡萄球菌femA基因部分序列设计一套(共4条)特异性引物,包括特异性识别靶序列上6个不同区域的两条内引物和两条外引物.通过条件优化,建立检测SA的LAMP方法.用该法检测临床分离的40株SA、12种其他革兰阳性球菌和8种革兰阴性杆菌,对方法特异性进行评价.SA标准菌株ATCC 25923进行10n稀释后测定方法的灵敏度.用LAMP方法及普通培养法检测临床60份咽拭子标本,评价方法的准确性.结果 LAMP技术佳反应温度为65℃,临床分离的40株SA检测阳性率达100％；其他菌株均无非特异性反应；低检测限14 CFU/test.以培养法为标准,LAMP试验检测60份咽拭子标本的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值为87.5％、100％、100％和98.1％.结论 LAMP技术操作简便、快速、灵敏度高、特异性强,可于60 min内快速筛查咽拭子标本中SA.
作者：史伟峰；史梅；罗光华；王玉月；张俊 刊期： 2011年第05期
我们于2008年2月、2011年1月从2例流行性脑脊髓膜炎患者的脑脊液标本中分别分离出W135群和B群脑膜炎奈瑟菌(N.meningitidis).这两种脑膜炎奈瑟菌血清群均为广西壮族自治区首次报告.1病历摘要病例1,女,14岁,在校学生.2008年2月22日无明显诱因出现发热、头痛,伴喷射状呕吐,于2月24日收住我院.入院时查体:T 37.5℃,神志清,急性痛苦面容,颈抵抗,心肺未见异常,克氏征双侧阳性,四肢肌张力、肌力正常,皮肤黏膜无黄染,皮下无瘀斑,全身浅表淋巴结未扪及,头颅CT扫描未见异常.
作者：林岗；劳炳焕；潘启祯 刊期： 2011年第05期
髓样细胞触发受体(triggering receptors expressed on myeloid cells,TREM)是免疫球蛋白超家族的一个受体家族,包括3个激活型受体( TREM-1,TREM-2,TREM-3)和1个抑制型受体(TREM like transcript-1,TLT-1).TREM-1主要表达于血液中性粒细胞、单核细胞表面,选择性地表达于肺泡液、肠液及其他体液的巨噬细胞表面[1-2],能够增强Toll样受体(Toll like receptor,TLR)介导的炎症反应,放大急、慢性炎症反应.随着对TREM-1研究的不断深入,TREM-1在疾病诊断和治疗方面的作用日益受到关注.
作者：姚瀚鑫；续薇；许建成 刊期： 2011年第05期
目的 研究膜联蛋白5(annexin 5,A5)对坐骨神经选择性损伤引起的慢性疼痛应激致雄性SD大鼠生殖损伤的保护作用.方法 32只雄性SD大鼠随机分为4组,分别建立对照组、假手术组、手术组和手术+A5组模型.手术+A5组于术后第2天腹腔注射15μg/kg剂量的A5,其他实验组腹腔注射等量的pH 8.0 Tris-HCl,每日1次,连续21 d.分别测各组SD大鼠体重、称重睾丸和附睾,计算其脏器系数,并对附睾尾进行精子计数.HE染色观察睾丸组织结构变化.用化学发光法检测各组大鼠血清中睾酮浓度.结果 手术组大鼠与对照组相比,睾丸系数、附睾系数以及精子相对计数均降低(P＜0.05)；睾酮水平下降显著[(5.10±2.61) vs (22.40±4.30) mmol/L,P＜0.0l)]；病理切片见睾丸生精细胞与腔内精子数量明显减少.假手术组大鼠与对照组比,上述指标均无统计学差异.手术+A5组与手术组比,精子相对计数与睾酮含量[(19.67±2.02)vs(5.10±2.61) mmol/L,P＜0.01]均显著提高,其他参数均有不同程度的恢复,睾丸生精细胞与腔内精子数量减少程度显著恢复.结论 A5对慢性疼痛应激引起的生殖损伤具有一定的保护作用.
作者：林钗英；时姗姗；陶晓倩；柳海燕；靖俊；姚兵 刊期： 2011年第05期
目的 以血清γ-谷氨酰基转移酶(GGT)催化活性参考方法测量不确定度评定为例,建立临床酶学催化活性测量参考方法的不确定度评定模型.方法 依据GGT参考方法测量流程,以GGT催化活性浓度为核心评价指标,确立影响GGT催化活性浓度测量的主要因素.采用实验和理论评估相结合的方法对已确认的各因素对GGT催化活性测量的影响量进行评定.以波长和温度对GGT催化活性参考方法测量影响量的评估为例,介绍基于“实验设计”的各因素对GGT参考方法测量灵敏系数的评定方法,在此基础上按GUM理论评定每一因素的相对标准不确定度并将其作为一个独立的不确定度分量按GUM理论合成到GGT测量的标准不确定度中,以标准不确定度×2得到扩展不确定度,建立GGT参考方法测量不确定度评定模型.结果 建立的GGT催化活性参考方法测量不确定度评定模型为:Cenzyme =1/ει·vreaction+vsample+vstarter/vsample·ΔA/Δt·f0·fcv.结论该不确定度评定模型适用于酶催化活性参考方法测量不确定度的评定.
作者：陈宝荣；孙慧颖；邵燕；胡滨；李月玲 刊期： 2011年第05期
系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是一种慢性自身免疫性疾病,患者体内往往存在多种自身抗体,病因未明.研究表明,遗传因素在SLE发病机制、临床症状及相关自身抗体的产生等方面都起重要作用.疾病分布和临床表现存在种族差异[1],与白种人比,亚洲人SLE发病率(每10万名女性中约有100名患者)高[2].
作者：李萍；李永哲 刊期： 2011年第05期
目的 探讨用重组苦瓜蛋白MAP30(Momordica anti-HIV protein of 30 ku)诱导人食管癌细胞株EC-1.71细胞凋亡状况.方法 MAP30诱导EC-1.71细胞后,透射电镜观察细胞凋亡的形态特征；JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位(△Ψm)变化；ELISA法检测细胞培养上清液中细胞色素c(Cytc)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平；免疫细胞化学法检测细胞ERK1/PERK1,AKT/PAKT和NF-κB表达；荧光微板阅读仪检测细胞caspase-12活性.结果 MAP30诱导可以使EC-1.71细胞固缩,核膜扭曲,核染色质聚集成块并靠近核膜,内质网高度膨胀、扩张；△Ψm水平下降；Cytc和TNF-α含量增加；胞质中ERK1、AKT表达增强而胞核中PERK1、PAKT表达降低,NF-κB活性降低,caspase-12活性增强.结论 MAP30可以诱导EC-1.71细胞凋亡.
作者：韩晓红；邵世和；薛延军；陈德玉；黄河；李先茜；许化溪 刊期： 2011年第05期
目的 探讨结核分枝杆菌相关γ-干扰素体外释放试验(TB-IGRA)在结核病诊断中的应用价值.方法 用国产TB-IGRA试剂定量检测268例结核病患者和104例体检健康者外周血结核特异性γ-干扰素的含量,同时与澳大利亚QFT-GIT试剂和结核菌素纯化蛋白质衍生物(PPD)皮试进行平行比较分析.结果 国产TB-IGRA试剂、QFT-GIT试剂和PPD皮试3种方法的敏感性分别为90.7％、88.1％和75.4％,特异性分别为76.9％、80.8％和54.8％,阳性预测值分别为91.0％、92.2％和81.1％,阴性预测值分别为76.2％、72.4％和46.3％,准确性分别为86.8％、86.0％和69.6％.三种方法对肺结核与肺外结核的检测效果无显著差异.结论 TB-IGRA法对诊断结核病有较高的敏感性和准确性,在结核病防控中有较好的应用价值.
作者：李晓非；熊俊辉；汪亚玲；朱莉莉；吕松琴；张军 刊期： 2011年第05期
目的 建立检测血浆中微量亚甲蓝的增敏荧光分光光度法.方法 利用β-环糊精对亚甲蓝荧光信号的增敏作用,以665 nm为激发波长,685 nm为发射波长,用荧光分光光度法直接测定血浆中的微量亚甲蓝.结果 亚甲蓝浓度在0.089～3.57 μmol/L范围内,该增敏荧光光度法呈现良好的线性关系,r=0.998 8,日内变异系数(CV)为5.7％,日间CV为6.3％,回收率为94％～105％.结论 该法简便、准确,可直接用于血浆中微量亚甲蓝的测定.
作者：周群刚；唐建华；谢莲；邱婷；谢洪平 刊期： 2011年第05期
目的 探讨Ⅰ类MHC链相关蛋白(MICA)在妇科恶性肿瘤中的表达,并分析其与临床病理参数的关系及临床应用价值.方法 用ELISA法对58名确诊妇科恶性肿瘤患者和98名体检健康者进行血清可溶性MICA(sMICA)浓度检测,分析其表达水平与肿瘤病理参数间关系.用ROC曲线对sMICA结果进行分析与评价.结果 妇科恶性肿瘤患者血清中sMICA水平为0.79(0.52,1.28) ng/mL,对照组为为0.32(0.18,0.47) ng/mL,两者具有显著性差异(U=-0.673,P＜0.01).除FIGO分期Ⅲ～Ⅳ期组患者血清sMICA水平与Ⅰ～Ⅱ期组相比有统计学差异(U1.98,P≤0.05)外,疾病类型、肿瘤浸润程度、肿瘤分化程度及组织类型各组间无显著性差异(P＞0.05).临界值为0.302 ng/mL时,对妇科恶性肿瘤诊断的ROC曲线下面积( AUCROC)为0.816,敏感性为0.847,特异性为0.718.结论 血清中sMICA表达水平与妇科恶性肿瘤的发生密切相关,以sMICA 0.302 ng/mL为临界值,有助于妇科恶性肿瘤的诊断.
作者：谭菌；黄颖烽；杨劭宇；罗宏图；周泰成 刊期： 2011年第05期
总胆汁酸(total bile acid,TBA)是易受污染的生化项目之一.本实验分别通过检测样本针、试剂针、搅拌棒、比色杯携带污染程度,探讨脂肪酶(lipase,LPS)试剂对TBA测定结果的干扰及解决办法.1材料与方法1.1仪器与试剂 Achitect 16000全自动生化分析仪(美国Abbott公司);TBA试剂(批号10-0413P,北京九强生物公司),LPS(批号60067113/1,德国德赛公司).
作者：吴丽娜；秦晓松 刊期： 2011年第05期
目的 研究我院烧伤科2010年4～6月分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)菌株耐药性及分子流行病学特点,找出流行菌株,为指导临床经验用药提供参考.方法 采用纸片扩散法(K-B法)及葡萄球菌A蛋白基因(spa)分型技术对分离的24株MRSA进行药物敏感性试验和同源性分析.结果 分离的菌株对青霉素、苯唑西林、阿莫西林/克拉维酸、亚胺培南、美罗培南全部耐药,其余抗菌药物除万古霉素外耐药率均在50％以上,未发现万古霉素耐药株.spa基因分型发现3个spa型,t030型共22株,t3226和t632型各1株,提示分离菌株具有高度的同源性.结论 我院烧伤科MRSA菌株具有多重耐药的特征,spa t030型菌株是其主要型别.
作者：师志云；赵志军；贾伟；李刚；张楠；纵帅；魏军 刊期： 2011年第05期
血管炎是指原发于血管的一类炎症性疾病,许多抗体参与血管炎的发病机制及病程,其中血管炎和抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)的关联性较高.IL-33是新发现的具有多种效应的前炎症细胞因子,在炎症反应中起着关键性的作用[1].本研究测定90例血管炎患者血清ANCA和IL-33水平,以探讨IL-33与血管炎的相关性.
作者：黄晶；安倍莹；单红丽；张朝冠；白岩 刊期： 2011年第05期
目的 对1例遗传性多发性外生骨疣(hereditary multiple exostoses,EXT)家系的EXT1和EXT2基因编码序列进行突变检测,寻找引起该病的致病基因突变.方法利用与EXT1、EXT2紧密连锁的短串联重复序列(short tandem repeat,STR)对该家系进行连锁分析,确定候选基因,用PCR-测序法对候选基因的编码区及外显子与内含子交界处进行突变分析.结果 DNA测序分析发现,先证者致病基因EXT2第3外显子有一新的637G＞A无义突变,致使编码第192位的氨基酸的密码子提前出现终止密码,使编码蛋白成为只有191个氨基酸的截断型蛋白,其余外显子未发现突变.家系调查发现,该突变来自于先证者父亲.先证者EXT1基因未发现变异.结论EXT2基因637G＞A突变是导致这个家系发生多发性骨疣的分子机制.
作者：江梅；邹晶晶 刊期： 2011年第05期
目的 探讨细胞色素P450 2C9基因(CYP2C9)多态性位点1075A＞C与个体间华法林稳定剂量差异的关系.方法 用实时荧光PCR结合熔解曲线分析的方法,对323例已获得华法林稳定剂量患者的CYP2C9 1075A＞C位点进行分型；比较不同基因型患者的华法林稳定剂量的差异.结果 323例患者中,CYP2C9基因型*1/*1(AA)、*1/*3(AC)和*3/*3(CC)分别有294例、28例和1例,各占91.02％、8.67％和0.31％,等位基因*1(1075A)和*3(1075C)的频率分别为95.36％和4.64％.在CYP2C9的3种基因型中,*1/*1基因型组华法林剂量(3.07±1.12)mg/d显著高于*1/*3基因型组(1.71±0.53) mg/d(F22.555,P＜O.01),*3/*3基因型患者的剂量低,仅为0.625 mg/d.结论 CYP2C9基因多态性是影响个体间华法林用量差异的一个主要遗传因素,对患者的CYP2C9 1075A＞C位点进行分型,可作为华法林个体化用药的一个重要依据.
作者：黄盛文；向道康；陈保林；黄凌；安邦权；罗振元 刊期： 2011年第05期
临床检验杂志
主管:江苏省卫生厅
主办：江苏省医学会
