严子禾;赵琪;夏燕萍;林萍萍;王宗明;谢国强;潘宇红;胡瑜
乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一,近年来发病率呈上升趋势.本文报告乳腺癌患者血清CA15-3、IL-6、TNF测定的临床意义.1材料和方法1.1研究对象病理学确诊的乳腺癌患者46例(其中未手术骨转移者18例),均在本院肿瘤治疗中心就诊,年龄26~67岁,平均(46±8)岁;正常对照组24例,年龄28~62岁,平均(44±6)岁,为本院健康体检者.
作者:韦光龙;曹维克;李龙 刊期: 2005年第06期
目的建立一种基于错配杂交及化学发光技术的检测亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reducatase,MTHFR)基因多态性的新方法.方法针对多态位点设计两条寡核苷酸探针,分别与野生型及突变型序列互补.将两条探针分别与含多态位点C677T的PCR扩增产物杂交,然后用化学发光法检测,根据两条探针的发光值之比确定样品的基因型.结果用本法随机检测了50例DNA样品,结果3种基因型的发光值之比可以严格区分,其中野生型(C/C)15例,杂合型(C/T)28例,突变型(T/T)7例,与参考方法(PCR-RFLP)的检测结果完全一致.结论本方法操作简便、检测快速而且费用低廉,可广泛应用于MTHFR基因突变及多态性检测.
作者:姚群峰;宁勇;吴晓明;周宜开 刊期: 2005年第06期
HLA-B27抗原的表达与强直性脊柱炎有着高度相关性,Brown等报道强直性脊柱炎患者HLA-B27阳性率高达94%,而正常人群仅为9%[1].强直性脊柱炎由于其症状与许多疾病相似而难以确诊,HLA-B27阳性虽然不能作为强直性脊椎炎的诊断依据,但对早期及不典型强直性脊柱炎的诊断有重要的参考价值[2].
作者:缪界萍 刊期: 2005年第06期
目前我国采用的检测HIV(1+2)抗体的初筛试验大多是ELISA间接法[1].在众多影响ELISA检测结果的因素中,孵育温度对反应体系的影响是为关键的因素之一[2].为此,我们对在相同温度的条件下,不同孵育方式对检测结果的影响进行了实验观察,报告如下.
作者:殷勤;盛磊 刊期: 2005年第06期
1病例概况患者马××,男,35岁,农民,2003年7月,因齿龈肿胀疼痛1周余不能咀嚼而就诊.有户外工作和睡眠的经历.口腔科门诊检查,齿龈局部压痛,有脓性分泌物,挑破齿龈流出血性脓液,并取出6条长约17 mm白色活动蝇蛆,用70%乙醇固定送检本科,鉴定为黑须污蝇Ⅲ龄幼虫.经过排脓除蛆,清洗伤口,静脉滴注甲硝唑、红霉素经1周治疗痊愈.
作者:张培琳 刊期: 2005年第06期
目的分析活动期类风湿性关节炎(RA)患者外周血CD4+T淋巴细胞的表型变化,探讨其免疫病理机制.方法采用ELISA和双标记免疫荧光法检测47例活动期RA患者和50例健康成人外周血CD4+T细胞表面CD154、CD69的表达以及血清、血浆可溶性CD154(sCD154)的含量.结果活动期RA患者的外周血CD4+T细胞CD154(16.7%±8.1%)和CD69(13.9%±7.1%)的表达水平均显著高于健康人,其血清sCD154(18.43±6.27,ng/ml)和血浆sCD154(8.34±3.42,ng/ml)含量亦分别高于健康人血清sCD154(9.56±4.71,ng/ml)和血浆sCD154(2.98±1.13,ng/ml).结论CD4+T细胞表达的CD154、CD69以及血浆sCD154含量与RA的病程密切相关,可以成为RA的辅助诊断、疗效估价和预后判断的有价值的实验室参数.
作者:杨炳华;樊一笋;许志荣;彭群新;郑元;沈轶骊 刊期: 2005年第06期
时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay,TrFIA)法具有灵敏度高、稳定性好和无放射性污染等优点[1-2].用本法检测血清癌胚抗原(CEA)的含量,已在国内许多医院应用.但该法进口试剂检测时间长,操作较为繁琐,检测成本亦较高.本文通过比较国产和进口TrFIA试剂检测CEA的敏感性和特异性,探讨国产试剂的可用性.
作者:王恩兰;陆应玉;李涛 刊期: 2005年第06期
我们用硝基四氮唑蓝(NBT)比色法测定1例胃出血患者血清果糖胺(FMN)高达8.54 mmol/L,而血清葡萄糖仅6.54 mmol/L,两者关系显然不符,考虑与药物干扰有关.经试验除与已知的维生素C干扰有关外,止血药酚磺乙胺(止血敏)对NBT法测FMN亦有严重干扰.于是我们做了止血敏干扰测定FMN的体内、外试验,发现静脉注射止血敏后一定时间内,或血清含有一定浓度止血敏,可导致NBT法FMN值假性升高.
作者:朱德文 刊期: 2005年第06期
目的检测来源不明的额外标记染色体和衍生染色体.方法用多色荧光原位杂交技术结合G显带技术和NOR技术,对1例47,XY,inv(9)(p11q13),+mar和1例46,XY,t(5;?)核型进行诊断.结果病例1的额外标记染色体片段来源于15号染色体,患者核型为47,XY,inv(9)(p11q13),+SMC(15).病例2的核型为46,XY,der(5)t(4,5)(q27;q35).在此基础上对患者的核型-表型进行了分析.结论多色荧光原位杂交技术结合细胞遗传学核型分析,对于来源不明的标记染色体和衍生染色体的诊断是非常有帮助的.
作者:王云华;崔英霞;姚兵;郝丽君;拜红霞;宛传丹;黄宇烽 刊期: 2005年第06期
目的建立检测人中性粒细胞防御素(HNP)的ELISA法,并探讨其临床应用价值.方法以纯化的HNP-1为抗原制备特异性抗-HNP单克隆抗体,建立ELISA夹心法,同时检测36名健康献血员血浆中HNP含量,并观察血库4℃保存的全血不同保存时间血浆中HNP含量的变化.结果ELISA法批内和批间变异系数分别为4.8%和9.3%,与进口试剂比较相关性良好(r=0.98,P<0.01),36名健康献血员血浆HNP含量为(46±48)ng/ml.库存全血随保存时间延长血浆HNP含量逐渐升高,保存25天的血浆HNP含量达到760 ng/ml.结论建立的ELISA定量检测法与进口试剂盒有良好的相关性,除血浆外,推测也能适用于细胞培养上清或各种体液中HNP的定量测定.
作者:王永杰;骆晓梅;李晓洲;王涛;齐名;武建国 刊期: 2005年第06期
血小板生成素(thrombopoietin,Tpo)是巨核细胞增殖、成熟,也是血小板生成的主要调节因子[1],主要由肝脏和肾脏产生[2].肝病患者常会出现血小板的减少.我们对肝病患者体内血小板生成素水平进行了研究.
作者:叶军;张立新;李加新;陈亚宝 刊期: 2005年第06期
sIgA作为黏膜免疫系统的效应分子在呼吸道、胃肠道和泌尿生殖道的黏膜抗感染中发挥重要作用.检测sIgA有助于上述部位感染的诊断和治疗[1-5].本实验建立了尿液sIgA的ELISA法,并探讨尿液sIgA测定对鉴别泌尿系统感染部位的意义.
作者:曾常茜;金海甲;刘捷 刊期: 2005年第06期
目的通过对同一检验科不同检测系统进行方法比对和偏差评估,探讨不同检测系统间天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)和肌酸激酶心型同工酶(CK-MB)4种心肌酶测定结果是否具有可比性,为血清酶测定的标准化和临床实验室认可提供实验数据.方法参考NCCLS的EP9-A文件,以日立7170生化分析仪、罗氏原装试剂、c.f.a.s校准品和质控品组成的检测系统(已通过ISO/IEC 17025标准认可)为比较方法,其他不同检测系统为实验方法,检测病人新鲜血清中4种心肌酶,用配对t检验和回归统计法分析实验方法(Y)和比较方法(X)测定结果均值处的相对偏差或医学决定水平处的系统误差,以美国临床实验室修正法规(CLIA'88)规定的室间质量评价允许误差范围的1/2为标准,判断不同检测系统的临床可接受性.结果除检测系统3、4的AST结果,检测系统1、2、3的CK-MB结果与比较方法的系统误差或均值处的相对偏差不能被接受外,其余项目测定结果的偏差临床可以接受.结论当同一实验室同一检验项目存在2个以上的检测系统时,应进行方法比对和偏差评估,判断其临床可接受性,以保证检验结果的可比性.
作者:张秀明;庄俊华;徐宁;黄宪章;郑松柏;王建兵;曹永坚;尹一兵 刊期: 2005年第06期
目的从36周人胎脑皮层分离培养神经干细胞并鉴定.方法采用无血清培养和单细胞克隆技术,从36周自愿水囊引产人胎脑皮层中分离出具有单细胞克隆能力的细胞,并观察神经干细胞体外培养、传代、分化潜能,采用免疫组化和免疫荧光技术检测克隆细胞的神经巢蛋白和各种分化细胞的特征性抗原的表达.结果从36周人胎脑皮层中成功分离出具有自我更新和多分化潜能的神经干细胞,在无血清培养时细胞呈悬浮状态生长,形成神经球,该细胞具有连续克隆能力,可传代培养,呈Nestin免疫反应阳性;在含血清培养时神经干细胞分化,并表达神经元细胞和星形胶质细胞的特异性抗原.结论36周人胎脑皮层仍能培养出具有自我复制和分化潜能的神经干细胞.
作者:尹晓娟;封志纯 刊期: 2005年第06期
目的评价Sysmex XE-2100(下简称XE-2100)定量检测网织红细胞(Ret)的性能.方法以XE-2100检测Ret,并将73例检测结果与参考方法-目视计数法及Sysmex SE-9500的检测结果进行比较.结果XE-2100检测Ret低值(2.86×109/L)、中值(43.12×109/L)、较高值(105.63×109/L)、高值(292.66×109/L)标本批内的变异系数(CV)分别为4.77%、2.88%、3.50%、2.00%;检测Ret低值(9.87×109/L)、中值(56.37×109/L)、高值(128.06×109/L)标本批间CV分别为4.66%、4.53%、2.61%,总重复性CV为3.52%.Ret在2.53×109/L~268.70×109/L范围内线性良好(r=0.9992).XE-2100检测Ret在标本采集48 h内结果稳定,携带污染率为0.23%.XE-2100、SE-9500与目视计数法检测Ret结果间有良好的相关性,r分别为0.9622、和0.9471.对XE-2100ROC曲线分析显示,其曲线下面积(AUC)为0.98和0.94,而SE-9500为0.92和0.95.结论XE-2100检测Ret具有简便、准确、精密度高、线性好、参数多等特点.
作者:彭黎明;刘胡敏 刊期: 2005年第06期
目的利用制备的鼠抗人肝癌相关LAPTM4B蛋白的单克隆抗体,检测LAPTM4B蛋白在不同肿瘤细胞中的表达.方法重组质粒pGEX-KG-LAPTM4B-N1-99经酶切及测序鉴定正确后,1 mmol/L IPTG 37℃诱导获得融合蛋白.利用亲和层析方法纯化抗人LAPTM4B单抗,免疫印迹法进行单抗鉴定,免疫细胞化学染色法检测5种肿瘤细胞中LAPTM4B的表达.结果经western blot分析抗LAPTM4B单抗可与LAPTM4B-N1-99编码的融合蛋白以及肿瘤细胞中的天然蛋白特异性结合.免疫细胞化学染色(IHC)检测到肝癌、肺癌等5种肿瘤细胞均表达LAPTM4B蛋白.IHC和免疫印迹分析证明了LAPTM4B蛋白在肿瘤细胞中的表达.结论该单抗能特异识别原核及真核细胞表达的LAPTM4B蛋白,为进一步探讨LAPTM4B蛋白的生物学效应提供了条件.
作者:彭方毅;张青云;周柔丽;涂植光;王雅明;徐建军 刊期: 2005年第06期
目的在大肠埃希菌中表达梅毒螺旋体Tp15-17嵌合抗原,用于临床检测梅毒感染.方法利用PCR法从Tp全基因组中分别扩增目的基因Tp15和Tp17,用T4DNA连接酶连接后,克隆选表达载体pGEX-6P-1中,构建重组质粒pGEX-6P-1+Tp15-17,在大肠埃希菌中表达重组Tp嵌合蛋白,重组蛋白经亲和层析柱纯化后包被微孔板,初步建立间接ELISA法检测血清中的抗Tp抗体.结果重组嵌合抗原获得了高效表达,免疫印迹试验显示重组抗原具有很强的抗原性.用重组嵌合抗原建立间接ELISA法,对梅毒螺旋体抗体阳性参比血清及梅毒患者血清的检测符合率100%.结论重组梅毒螺旋体嵌合抗原Tp15-17能够作为梅毒螺旋体诊断性ELISA抗原.
作者:汤巧 刊期: 2005年第06期
目的分析冠心病患者外周血中sCD14的水平及其与单核细胞数量的相关关系,探讨sCD14和动脉粥样硬化之间的关系.方法ELISA法测定269例冠心病患者和24例健康人血清中的sCD14水平,血细胞分析仪检测受试者抗凝全血中单核细胞的数目和比例.结果冠心病患者与健康对照组sCD14分别为:(3 011.4±1431.4)ng/L和(1 943.8±510.2)ng/L,二者结果有显著差异(t=3.7259,P=0,002);冠心病患者血清sCD14水平(Y)与血单核细胞数量(X)和比例(X)均无相关关系,直线回归方程分别为:Y=2 969.8-95.6X,r=-0.026,P=0.668;Y=2 763.6+1581.8X,r=0.060,P=0.329.结论冠心病患者血清sCD14水平显著性增高与血单核细胞数量和比例均无相关关系,可能与单核细胞的质量改变有关.
作者:张葵;王丽;罗浔阳;顾光煜;毕永春;宋景秋;夏永泉;郭丹;杜忠祥 刊期: 2005年第06期
目的探讨不同疾病患者血浆内毒素的含量及内毒素检测的临床意义.方法用鲎试剂定量动态比浊法检测患者和健康对照者血浆内毒素含量.结果30例正常人血浆内毒素含量为(3.20±1.71)pg/ml,51例肝硬化患者内毒素阳性率为49.0%,平均内毒素含量为74.97 pg/ml.31例发热、28例白血病、16例肺炎、12例肺癌、9例肝炎和14例肝癌患者组血浆内毒素阳性率分别为67.7%、67.9%、68.8%、100%、33.3%和57.1%,内毒素平均值分别为73.47、29.47、239.45、259.42、8.74和17.34 pg/ml,与正常对照组相比除肺炎和肝炎组外,均有显著性差异.不同肝病之间及肺炎和肺癌之间均无显著性差异.结论检测血浆内毒素含童有助于早期判断感染性疾病及是否存在内毒素血症,有利于临床及早诊治疾病.
作者:张建芳;徐修礼;樊新;孙怡群 刊期: 2005年第06期
人工肝支持系统(artificial liver support system,ALSS)是一种解毒装置,具有清除代谢产物,保持体内环境的稳定、促进肝细胞再生和恢复肝功能的作用.我院对近年来收治的66例重症肝病患者采用ALSS系统血浆置换疗法治疗,现将治疗前后的凝血指标结果报告如下.
作者:周芸;钱敏;唐未名 刊期: 2005年第06期