彭方毅;张青云;周柔丽;涂植光;王雅明;徐建军
目的探讨表达谱芯片技术在研究药物作用机制中的价值.方法建立荷NuTu-19卵巢癌的大鼠模型及相应对照,用罗勒多糖治疗50天,处死大鼠,以腹水量、腹腔脏器转移程度积分判断各组肿瘤生长及转移情况.提取癌组织总RNA,用RT-PCR逆转录合成eDNA,分别采用Cy3-dUTP、Cy5-dUTP标记对照组和药物组cDNA,与含有2 000点的大鼠基因表达谱芯片杂交,杂交芯片扫描结果用ImaGene 3.0软件分析,计算Cy3、Cy5两种荧光信号的强度比值.结果对照组与药物组之间共有168条差异表达基因,表达差异在3倍以上的基因有65条,均为表达下调基因;表达差异在2倍以上的基因有103条,其中表达上调基因43条,下调基因60条.经归类分析,表达差异基因主要为:①肿瘤转移相关基因;②与免疫应答有关的基因;③与细胞能量代谢有关的酶类;④与药物代谢及敏感性有关酶类的基因;⑤与信号转导以及转录过程有关的基因等.结论罗勒多糖可能通过抑制肿瘤代谢、调节肿瘤转移相关基因的表达等多种作用途径抑制肿瘤的转移,表达谱芯片技术可以快速确定药物作用的可能机制,并为进一步研究提供重要信息,加快药物的研发速度.
作者:邹明瑾;郭文静;杨美香;张丹;张静;闫实;王景芝;邵倩倩;曲迅 刊期: 2005年第06期
人工肝支持系统(artificial liver support system,ALSS)是一种解毒装置,具有清除代谢产物,保持体内环境的稳定、促进肝细胞再生和恢复肝功能的作用.我院对近年来收治的66例重症肝病患者采用ALSS系统血浆置换疗法治疗,现将治疗前后的凝血指标结果报告如下.
作者:周芸;钱敏;唐未名 刊期: 2005年第06期
目的了解免疫法、化学法、双联试剂法测定粪便隐血(Ob)的差异.方法分别用上述三法对100例门诊患者和30例确诊为上消化道出血的柏油样便进行检测.结果以化学法阳性为参照,100例门诊患者中免疫法的首次检出率为81%,续检率100%,双联试剂法一次检出率为100%;30例上消化道出血患者粪便,免疫法首次检出率60%,续检率为97%,双联法的一次检出率为100%.结论双联试剂法避免了免疫法、化学法造成的假阴性、假阳性.
作者:张云虎;张蓉;柯美津;涂倩 刊期: 2005年第06期
目的比较社区及医院败血症的病原菌分布特点、预后及相关因素.方法收集无锡地区2000~2003年4家综合性医院血培养阳性病例共480例,统计分析不同感染类型、相应的病原菌构成及其预后的差别.结果480例血培养阳性患者77.3%为社区获得性菌血症(CABSI),22.6%为医院获得性菌血症(HABSI).CABSI的主要病原菌是凝固酶阴性葡萄球菌(38.0%)、大肠埃希菌(17.8%)、沙门菌(9.4%)和金黄色葡萄球菌(8.3%);而HABSI常见病原菌依次为凝固酶阴性葡萄球菌(17.4%)、念珠菌(14.7%)、大肠埃希菌(12.8%)、铜绿假单胞菌(11.9%)和克雷伯杆菌(10.1%).HABSI的平均年龄52.2岁显著高于CABSI患者28.1岁(P<0.001).HABSI患者的病死率20.2%显著高于CABSI患者3.0%(P<0.001);医院感染组中,铜绿假单胞菌所致的感染病死率高达38.5%,而社区感染组中肺炎链球菌所致的感染病死率高,为16.7%.结论社区及医院败血症的病原菌构成、科室分布、病死率均不同,临床应有针对性地进行抗感染治疗,以降低菌血症的病死率.
作者:严子禾;赵琪;夏燕萍;林萍萍;王宗明;谢国强;潘宇红;胡瑜 刊期: 2005年第06期
深静脉血栓形成(deep vein thrombosis,DVT)是骨科创伤后的一个严重的并发症.我们对创伤后DVT患者血浆D-二聚体(D-Dimer)及血小板α颗粒膜蛋白-140(platelet α-granule menbrance protein,GMP-140)进行了测定,并探讨其对DVT的诊断意义.
作者:白雪;黄津;邓桂芳;方琳 刊期: 2005年第06期
目的在大肠埃希菌中表达梅毒螺旋体Tp15-17嵌合抗原,用于临床检测梅毒感染.方法利用PCR法从Tp全基因组中分别扩增目的基因Tp15和Tp17,用T4DNA连接酶连接后,克隆选表达载体pGEX-6P-1中,构建重组质粒pGEX-6P-1+Tp15-17,在大肠埃希菌中表达重组Tp嵌合蛋白,重组蛋白经亲和层析柱纯化后包被微孔板,初步建立间接ELISA法检测血清中的抗Tp抗体.结果重组嵌合抗原获得了高效表达,免疫印迹试验显示重组抗原具有很强的抗原性.用重组嵌合抗原建立间接ELISA法,对梅毒螺旋体抗体阳性参比血清及梅毒患者血清的检测符合率100%.结论重组梅毒螺旋体嵌合抗原Tp15-17能够作为梅毒螺旋体诊断性ELISA抗原.
作者:汤巧 刊期: 2005年第06期
血小板生成素(thrombopoietin,Tpo)是巨核细胞增殖、成熟,也是血小板生成的主要调节因子[1],主要由肝脏和肾脏产生[2].肝病患者常会出现血小板的减少.我们对肝病患者体内血小板生成素水平进行了研究.
作者:叶军;张立新;李加新;陈亚宝 刊期: 2005年第06期
正常A型人的红细胞上有A抗原,血清中有相应的抗B抗体.在某些疾病的影响下,血型抗原或抗体减少或缺失,给正确鉴定血型带来困难.本站近遇到1例罕见的抗原难检出、抗体缺失的患儿,经鉴定血型为A型,现报告如下,并分析原因.
作者:华敏玉;郭永芳;姜健;洪俊 刊期: 2005年第06期
我们用硝基四氮唑蓝(NBT)比色法测定1例胃出血患者血清果糖胺(FMN)高达8.54 mmol/L,而血清葡萄糖仅6.54 mmol/L,两者关系显然不符,考虑与药物干扰有关.经试验除与已知的维生素C干扰有关外,止血药酚磺乙胺(止血敏)对NBT法测FMN亦有严重干扰.于是我们做了止血敏干扰测定FMN的体内、外试验,发现静脉注射止血敏后一定时间内,或血清含有一定浓度止血敏,可导致NBT法FMN值假性升高.
作者:朱德文 刊期: 2005年第06期
为了比较临床常用氟喹诺酮类药物的敏感性,本文选择共116株耐苯唑西林葡萄球菌(MRS),进行加替沙星、诺氟沙星、环丙沙星、左氧氟沙星4种药物的小抑菌浓度(MIC)检测,结果如下.
作者:方蓉;赵芳;李珍大;邵海枫;王卫萍 刊期: 2005年第06期
目的通过对同一检验科不同检测系统进行方法比对和偏差评估,探讨不同检测系统间天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)和肌酸激酶心型同工酶(CK-MB)4种心肌酶测定结果是否具有可比性,为血清酶测定的标准化和临床实验室认可提供实验数据.方法参考NCCLS的EP9-A文件,以日立7170生化分析仪、罗氏原装试剂、c.f.a.s校准品和质控品组成的检测系统(已通过ISO/IEC 17025标准认可)为比较方法,其他不同检测系统为实验方法,检测病人新鲜血清中4种心肌酶,用配对t检验和回归统计法分析实验方法(Y)和比较方法(X)测定结果均值处的相对偏差或医学决定水平处的系统误差,以美国临床实验室修正法规(CLIA'88)规定的室间质量评价允许误差范围的1/2为标准,判断不同检测系统的临床可接受性.结果除检测系统3、4的AST结果,检测系统1、2、3的CK-MB结果与比较方法的系统误差或均值处的相对偏差不能被接受外,其余项目测定结果的偏差临床可以接受.结论当同一实验室同一检验项目存在2个以上的检测系统时,应进行方法比对和偏差评估,判断其临床可接受性,以保证检验结果的可比性.
作者:张秀明;庄俊华;徐宁;黄宪章;郑松柏;王建兵;曹永坚;尹一兵 刊期: 2005年第06期
我们在使用上海三科公司的BT 815A半自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基移换酶(ALT)时,发现1例ALT高值标本的结果反而很低,为此,进行了相关实验,分析了导致错误结果的原因.
作者:聂锡华 刊期: 2005年第06期
HLA-B27抗原的表达与强直性脊柱炎有着高度相关性,Brown等报道强直性脊柱炎患者HLA-B27阳性率高达94%,而正常人群仅为9%[1].强直性脊柱炎由于其症状与许多疾病相似而难以确诊,HLA-B27阳性虽然不能作为强直性脊椎炎的诊断依据,但对早期及不典型强直性脊柱炎的诊断有重要的参考价值[2].
作者:缪界萍 刊期: 2005年第06期
目的探讨不同激活型缓冲体系对碱性磷酸酶测定的影响,为临床应用提供依据.方法通过参考范围调查,临床病例标本和临床随机成人血清中碱性磷酸酶的测定,分析比较3种不同缓冲体系测定方法之间的差异.结果二乙醇胺、2-乙基氨基乙醇、2-氨基-2-甲基-1-丙醇3种不同缓冲体系的方法测定血清碱性磷酸酶活性的参考范围分别为:(98±57)U/L、(86±44)U/L、(75±42)U/L;组间比较P<0.05.221例7组肝病患者标本用3种方法测定,组间结果比较,P<0.05.成人随机标本109例,3种方法的结果比较,P<0.05.结论不同缓冲体系的测定方法对ALP测定的结果差别很大,即使底物相同,采用不同激活型缓冲体系,也会对测定结果带来较大差异,其参考范围也不一致.
作者:郑铁生;叶立新;薛锦;吴志勇;张徐;盛微翔 刊期: 2005年第06期
目的建立一种基于错配杂交及化学发光技术的检测亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reducatase,MTHFR)基因多态性的新方法.方法针对多态位点设计两条寡核苷酸探针,分别与野生型及突变型序列互补.将两条探针分别与含多态位点C677T的PCR扩增产物杂交,然后用化学发光法检测,根据两条探针的发光值之比确定样品的基因型.结果用本法随机检测了50例DNA样品,结果3种基因型的发光值之比可以严格区分,其中野生型(C/C)15例,杂合型(C/T)28例,突变型(T/T)7例,与参考方法(PCR-RFLP)的检测结果完全一致.结论本方法操作简便、检测快速而且费用低廉,可广泛应用于MTHFR基因突变及多态性检测.
作者:姚群峰;宁勇;吴晓明;周宜开 刊期: 2005年第06期
目的建立多重PCR技术检测肺炎克雷伯菌(K.pneu)中质粒型ampC基因.方法收集临床分离的表型可疑为产AmpC酶的24株K. pneu,用ampC基因的5群6个亚型的引物进行多重聚合酶链反应(mul-PCR),用三维酶抑制试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶,结合mul-PCR、三维酶抑制试验和表型试验进行基因和表型分析.同时选择4株菌(3株ampC基因阳性,1株阴性)进行转质粒试验,以证实质粒型基因的存在.结果在mul-PCR试验中,有22株扩增出C-4族中长度405 bp的片段,1株扩增出C-1族中长度462 bp的片段;1株未扩增出目的条带.三维酶抑制试验中,24株菌中有19株菌未检出AmpC酶,但药物敏感试验中有诱导耐药现象,符合C-4(DHA)族基因诱导表达的特性.转质粒试验中,3株ampC基因阳性的供体菌均将其ampC基因转入受体菌.结论采用多重PCR技术可以简化质粒型ampC基因的检测方法.在我院临床分离的K.pneu中,出现质粒编码的AmpC酶,以C-4族基因为主要流行型.
作者:邵海枫;崔蕾蕾;赵晓智;王锦娜;王卫萍 刊期: 2005年第06期
sIgA作为黏膜免疫系统的效应分子在呼吸道、胃肠道和泌尿生殖道的黏膜抗感染中发挥重要作用.检测sIgA有助于上述部位感染的诊断和治疗[1-5].本实验建立了尿液sIgA的ELISA法,并探讨尿液sIgA测定对鉴别泌尿系统感染部位的意义.
作者:曾常茜;金海甲;刘捷 刊期: 2005年第06期
目的探讨感染性疾病的发展进程中外周血单核细胞表面HLA-DR抗原表达的变化.方法用双标记流式细胞术对21名健康人及27例不同程度的脓毒症患者外周血单核细胞HLA-DR的表达进行检测并比较.结果脓毒症患者外周血单核细胞HLA-DR阳性率及荧光强度较对照组显著降低(P<0.0005),严重脓毒症患者外周血单核细胞HLA-DR阳性率<30%.结论流式细胞仪检测外周血单核细胞表面HLA-DR表达,对评价感染性疾病患者机体免疫状况及指导临床用药具有一定的参考价值.
作者:孙健;张葵;陈军浩;孙雪梅 刊期: 2005年第06期
目的探讨尿红细胞形态在尿路感染时的变化及其意义.方法用镜检法观察66例尿路感染伴有血尿患者的尿标本.结果有24例尿红细胞形态呈多形型和混合型异常改变.结论尿路感染时尿红细胞的形态改变对鉴别肾小球性、非肾小球性出血无帮助.
作者:许宏岳;汪晓侬;姚刚 刊期: 2005年第06期
目前我国采用的检测HIV(1+2)抗体的初筛试验大多是ELISA间接法[1].在众多影响ELISA检测结果的因素中,孵育温度对反应体系的影响是为关键的因素之一[2].为此,我们对在相同温度的条件下,不同孵育方式对检测结果的影响进行了实验观察,报告如下.
作者:殷勤;盛磊 刊期: 2005年第06期