邵海枫；崔蕾蕾；赵晓智；王锦娜；王卫萍
目的在大肠埃希菌中表达梅毒螺旋体Tp15-17嵌合抗原,用于临床检测梅毒感染.方法利用PCR法从Tp全基因组中分别扩增目的基因Tp15和Tp17,用T4DNA连接酶连接后,克隆选表达载体pGEX-6P-1中,构建重组质粒pGEX-6P-1+Tp15-17,在大肠埃希菌中表达重组Tp嵌合蛋白,重组蛋白经亲和层析柱纯化后包被微孔板,初步建立间接ELISA法检测血清中的抗Tp抗体.结果重组嵌合抗原获得了高效表达,免疫印迹试验显示重组抗原具有很强的抗原性.用重组嵌合抗原建立间接ELISA法,对梅毒螺旋体抗体阳性参比血清及梅毒患者血清的检测符合率100%.结论重组梅毒螺旋体嵌合抗原Tp15-17能够作为梅毒螺旋体诊断性ELISA抗原.
作者：汤巧 刊期： 2005年第06期
我院于2004年12月到2005年2月共收治了14例流行性脑膜炎病人,其中有5例为某小学五年级的在读学生,只有1例血液和脑脊液均培养出脑膜炎奈瑟菌C群.
作者：张亮；姚文虎；沈玲 刊期： 2005年第06期
深静脉血栓形成(deep vein thrombosis,DVT)是骨科创伤后的一个严重的并发症.我们对创伤后DVT患者血浆D-二聚体(D-Dimer)及血小板α颗粒膜蛋白-140(platelet α-granule menbrance protein,GMP-140)进行了测定,并探讨其对DVT的诊断意义.
作者：白雪；黄津；邓桂芳；方琳 刊期： 2005年第06期
嗜麦芽寡养单胞菌以往称嗜麦芽窄食单胞菌,是革兰阴性需氧非发酵菌,是一种条件致病菌.近年来,随着广谱抗菌药物和免疫抑制剂的应用,以及侵入性操作的开展,此菌的感染已成为治疗的难题[1].为了解我院本菌所致医院感染的临床易感因素及其耐药情况,我们对2004年本院住院患者分离的13例嗜麦芽寡养单胞菌感染进行临床分析.
作者：岳向荣；丁进；董卫 刊期： 2005年第06期
目的探讨肺炎衣原体(Cpn)感染与冠心病(CHD)、冠脉狭窄程度及C反应蛋白(CRP)的关系.方法选择冠状动脉造影(CAG)确诊的冠心病患者和健康者为研究对象,用ELISA检测样本Cpn特异性IgG及IgM抗体.应用乳胶凝集法检测CRP.结果冠脉轻度狭窄组和重度狭窄组Cpn IgG抗体阳性率均显著高于正常组,轻度狭窄组与重度狭窄组之间无显著性差异.3组Cpn IgM抗体阳性率无显著性差异;稳定性心绞痛(SAP)组和急性冠脉综合征(ACS)组Cpn IgG抗体阳性率均高于正常组,ACS组与SAP组之间差异无显著性.3组Cpn IgM抗体阳性率无显著性差异;ACS组CRP阳性率显著高于正常组和SAP组,正常组和SAP组之间无显著差异性.Cpn IgG抗体阳性组的CRP阳性率显著高于Cpn IgG抗体阴性组.结论Cpn感染所介导的炎症反应可能在冠心病的发生与发展中起-定作用,但因果关系尚待确定.
作者：庄文卓；缪竞诚；盛伟华；杨吉成 刊期： 2005年第06期
我们在使用上海三科公司的BT 815A半自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基移换酶(ALT)时,发现1例ALT高值标本的结果反而很低,为此,进行了相关实验,分析了导致错误结果的原因.
作者：聂锡华 刊期： 2005年第06期
奇异变形杆菌常引起食物中毒、婴儿腹泻及医源性感染等,由该菌引起的感染是否具有流行病学的意义,应有一种简单快速的方法来确认.我们从变形杆菌众多的同一性试验方法中,选取了Dienes试验、交叉定量凝集试验2种方法,对20株临床分离菌株进行了系统的实验研究,以用于该菌感染的流行病学调查.
作者：曹金德；倪丽萍；王惠民；张志泉；沈荣春；施英娟；褚少朋 刊期： 2005年第06期
为了解HBV DNA检测中,斑点杂交、实时荧光定量PCR及PCR-ELISA方法检测的灵敏度,以及定量检测HBV DNA含量时,与公认较好定量方法bDNA(分枝DNA)方法[1-3]检测结果之间相关性,对70例bDNA方法检测阳性标本,进行检测及对比分析.
作者：赵勤；周曾全；王忠平；丁湘舟；余文林；张惠芬；陈浩 刊期： 2005年第06期
绿色气球菌(Acrococcus uiridans)广泛分布于生肉、咸肉和加工的蔬菜中,属于条件致病菌.2004年6月我科从1例角膜溃疡患者溃疡面分离1株绿色气球菌,报告如下.
作者：王伟宝 刊期： 2005年第06期
目的建立多重PCR技术检测肺炎克雷伯菌(K.pneu)中质粒型ampC基因.方法收集临床分离的表型可疑为产AmpC酶的24株K. pneu,用ampC基因的5群6个亚型的引物进行多重聚合酶链反应(mul-PCR),用三维酶抑制试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶,结合mul-PCR、三维酶抑制试验和表型试验进行基因和表型分析.同时选择4株菌(3株ampC基因阳性,1株阴性)进行转质粒试验,以证实质粒型基因的存在.结果在mul-PCR试验中,有22株扩增出C-4族中长度405 bp的片段,1株扩增出C-1族中长度462 bp的片段;1株未扩增出目的条带.三维酶抑制试验中,24株菌中有19株菌未检出AmpC酶,但药物敏感试验中有诱导耐药现象,符合C-4(DHA)族基因诱导表达的特性.转质粒试验中,3株ampC基因阳性的供体菌均将其ampC基因转入受体菌.结论采用多重PCR技术可以简化质粒型ampC基因的检测方法.在我院临床分离的K.pneu中,出现质粒编码的AmpC酶,以C-4族基因为主要流行型.
作者：邵海枫；崔蕾蕾；赵晓智；王锦娜；王卫萍 刊期： 2005年第06期
目的利用制备的鼠抗人肝癌相关LAPTM4B蛋白的单克隆抗体,检测LAPTM4B蛋白在不同肿瘤细胞中的表达.方法重组质粒pGEX-KG-LAPTM4B-N1-99经酶切及测序鉴定正确后,1 mmol/L IPTG 37℃诱导获得融合蛋白.利用亲和层析方法纯化抗人LAPTM4B单抗,免疫印迹法进行单抗鉴定,免疫细胞化学染色法检测5种肿瘤细胞中LAPTM4B的表达.结果经western blot分析抗LAPTM4B单抗可与LAPTM4B-N1-99编码的融合蛋白以及肿瘤细胞中的天然蛋白特异性结合.免疫细胞化学染色(IHC)检测到肝癌、肺癌等5种肿瘤细胞均表达LAPTM4B蛋白.IHC和免疫印迹分析证明了LAPTM4B蛋白在肿瘤细胞中的表达.结论该单抗能特异识别原核及真核细胞表达的LAPTM4B蛋白,为进一步探讨LAPTM4B蛋白的生物学效应提供了条件.
作者：彭方毅；张青云；周柔丽；涂植光；王雅明；徐建军 刊期： 2005年第06期
目的建立一种基于错配杂交及化学发光技术的检测亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reducatase,MTHFR)基因多态性的新方法.方法针对多态位点设计两条寡核苷酸探针,分别与野生型及突变型序列互补.将两条探针分别与含多态位点C677T的PCR扩增产物杂交,然后用化学发光法检测,根据两条探针的发光值之比确定样品的基因型.结果用本法随机检测了50例DNA样品,结果3种基因型的发光值之比可以严格区分,其中野生型(C/C)15例,杂合型(C/T)28例,突变型(T/T)7例,与参考方法(PCR-RFLP)的检测结果完全一致.结论本方法操作简便、检测快速而且费用低廉,可广泛应用于MTHFR基因突变及多态性检测.
作者：姚群峰；宁勇；吴晓明；周宜开 刊期： 2005年第06期
人工肝支持系统(artificial liver support system,ALSS)是一种解毒装置,具有清除代谢产物,保持体内环境的稳定、促进肝细胞再生和恢复肝功能的作用.我院对近年来收治的66例重症肝病患者采用ALSS系统血浆置换疗法治疗,现将治疗前后的凝血指标结果报告如下.
作者：周芸；钱敏；唐未名 刊期： 2005年第06期
为了解本地区儿童下呼吸道感染的细菌状况,指导临床抗感染的经验治疗和制订或修正医院内感染控制政策,我们对2003～2004年分离的住院患儿下呼吸道中的临床常见病原菌及其耐药情况进行分析,结果报道如下.
作者：张文利；刘军；王新玉 刊期： 2005年第06期
胆红素是机体内重要的生理抗氧化物质,在预防动脉粥样硬化过程中发挥着不可替代的作用[1].血尿酸升高可能是发生心血管事件的独立预测因子[2].本研究检测冠心病和对照组的血清胆红素及尿酸水平,并进行相关分析,初步探讨二者水平与冠状动脉病变程度的关系.
作者：曾小莉；郭晶；袁慧；蒋朝晖 刊期： 2005年第06期
目的建立检测人中性粒细胞防御素(HNP)的ELISA法,并探讨其临床应用价值.方法以纯化的HNP-1为抗原制备特异性抗-HNP单克隆抗体,建立ELISA夹心法,同时检测36名健康献血员血浆中HNP含量,并观察血库4℃保存的全血不同保存时间血浆中HNP含量的变化.结果ELISA法批内和批间变异系数分别为4.8%和9.3%,与进口试剂比较相关性良好(r=0.98,P＜0.01),36名健康献血员血浆HNP含量为(46±48)ng/ml.库存全血随保存时间延长血浆HNP含量逐渐升高,保存25天的血浆HNP含量达到760 ng/ml.结论建立的ELISA定量检测法与进口试剂盒有良好的相关性,除血浆外,推测也能适用于细胞培养上清或各种体液中HNP的定量测定.
作者：王永杰；骆晓梅；李晓洲；王涛；齐名；武建国 刊期： 2005年第06期
目的对头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的可靠性和临床实用性进行评估.方法用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的124株金黄色葡萄球菌,并与苯唑西林纸片扩散法、琼脂筛选法、琼脂稀释法和胶乳凝集法、mecA基因的检测结果进行比较.结果mecA基因阳性的90株金黄色葡萄球菌头孢西丁纸片扩散法和胶乳凝集法的敏感性分别为100%和98.9%,特异性均为100%,苯唑西林纸片扩散法、琼脂筛选法和琼脂稀释法的敏感性分别为97.8%、98.9%和97.8%,特异性均为100%.结论头孢西丁纸片扩散法与mecA基因的检测结果高度一致,是筛选和确认MRSA的一种简便可靠的方法.
作者：王卫萍；周丽娟；邵海枫；张小卫 刊期： 2005年第06期
目的探讨不同疾病患者血浆内毒素的含量及内毒素检测的临床意义.方法用鲎试剂定量动态比浊法检测患者和健康对照者血浆内毒素含量.结果30例正常人血浆内毒素含量为(3.20±1.71)pg/ml,51例肝硬化患者内毒素阳性率为49.0%,平均内毒素含量为74.97 pg/ml.31例发热、28例白血病、16例肺炎、12例肺癌、9例肝炎和14例肝癌患者组血浆内毒素阳性率分别为67.7%、67.9%、68.8%、100%、33.3%和57.1%,内毒素平均值分别为73.47、29.47、239.45、259.42、8.74和17.34 pg/ml,与正常对照组相比除肺炎和肝炎组外,均有显著性差异.不同肝病之间及肺炎和肺癌之间均无显著性差异.结论检测血浆内毒素含童有助于早期判断感染性疾病及是否存在内毒素血症,有利于临床及早诊治疾病.
作者：张建芳；徐修礼；樊新；孙怡群 刊期： 2005年第06期
目的从36周人胎脑皮层分离培养神经干细胞并鉴定.方法采用无血清培养和单细胞克隆技术,从36周自愿水囊引产人胎脑皮层中分离出具有单细胞克隆能力的细胞,并观察神经干细胞体外培养、传代、分化潜能,采用免疫组化和免疫荧光技术检测克隆细胞的神经巢蛋白和各种分化细胞的特征性抗原的表达.结果从36周人胎脑皮层中成功分离出具有自我更新和多分化潜能的神经干细胞,在无血清培养时细胞呈悬浮状态生长,形成神经球,该细胞具有连续克隆能力,可传代培养,呈Nestin免疫反应阳性;在含血清培养时神经干细胞分化,并表达神经元细胞和星形胶质细胞的特异性抗原.结论36周人胎脑皮层仍能培养出具有自我复制和分化潜能的神经干细胞.
作者：尹晓娟；封志纯 刊期： 2005年第06期
目的探讨表达谱芯片技术在研究药物作用机制中的价值.方法建立荷NuTu-19卵巢癌的大鼠模型及相应对照,用罗勒多糖治疗50天,处死大鼠,以腹水量、腹腔脏器转移程度积分判断各组肿瘤生长及转移情况.提取癌组织总RNA,用RT-PCR逆转录合成eDNA,分别采用Cy3-dUTP、Cy5-dUTP标记对照组和药物组cDNA,与含有2 000点的大鼠基因表达谱芯片杂交,杂交芯片扫描结果用ImaGene 3.0软件分析,计算Cy3、Cy5两种荧光信号的强度比值.结果对照组与药物组之间共有168条差异表达基因,表达差异在3倍以上的基因有65条,均为表达下调基因;表达差异在2倍以上的基因有103条,其中表达上调基因43条,下调基因60条.经归类分析,表达差异基因主要为:①肿瘤转移相关基因;②与免疫应答有关的基因;③与细胞能量代谢有关的酶类;④与药物代谢及敏感性有关酶类的基因;⑤与信号转导以及转录过程有关的基因等.结论罗勒多糖可能通过抑制肿瘤代谢、调节肿瘤转移相关基因的表达等多种作用途径抑制肿瘤的转移,表达谱芯片技术可以快速确定药物作用的可能机制,并为进一步研究提供重要信息,加快药物的研发速度.
作者：邹明瑾；郭文静；杨美香；张丹；张静；闫实；王景芝；邵倩倩；曲迅 刊期： 2005年第06期
临床检验杂志
主管:江苏省卫生厅
主办：江苏省医学会
