朱德文
目的建立一种基于错配杂交及化学发光技术的检测亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reducatase,MTHFR)基因多态性的新方法.方法针对多态位点设计两条寡核苷酸探针,分别与野生型及突变型序列互补.将两条探针分别与含多态位点C677T的PCR扩增产物杂交,然后用化学发光法检测,根据两条探针的发光值之比确定样品的基因型.结果用本法随机检测了50例DNA样品,结果3种基因型的发光值之比可以严格区分,其中野生型(C/C)15例,杂合型(C/T)28例,突变型(T/T)7例,与参考方法(PCR-RFLP)的检测结果完全一致.结论本方法操作简便、检测快速而且费用低廉,可广泛应用于MTHFR基因突变及多态性检测.
作者:姚群峰;宁勇;吴晓明;周宜开 刊期: 2005年第06期
目前我国采用的检测HIV(1+2)抗体的初筛试验大多是ELISA间接法[1].在众多影响ELISA检测结果的因素中,孵育温度对反应体系的影响是为关键的因素之一[2].为此,我们对在相同温度的条件下,不同孵育方式对检测结果的影响进行了实验观察,报告如下.
作者:殷勤;盛磊 刊期: 2005年第06期
核苷类似物拉米夫定作用于乙型肝炎病毒(HBV)多聚酶(HBV P)活性部位YMDD基序(酪氨酸-蛋氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸,YMDD),抑制HBV DNA复制,抗病毒效果显著.但长期应用可使HBV发生YMDD变异,影响拉米夫定的疗效[1-2].为了解YMDD变异是由抗病毒药物所致,抑或是在治疗前变异株即存在,我们观察研究了拉米夫定治疗前后患者血清HBV YMDD变异及相关指标.
作者:赵绍林;陈乃玲;韦玉芳;吴惠毅;赵文海 刊期: 2005年第06期
我们用硝基四氮唑蓝(NBT)比色法测定1例胃出血患者血清果糖胺(FMN)高达8.54 mmol/L,而血清葡萄糖仅6.54 mmol/L,两者关系显然不符,考虑与药物干扰有关.经试验除与已知的维生素C干扰有关外,止血药酚磺乙胺(止血敏)对NBT法测FMN亦有严重干扰.于是我们做了止血敏干扰测定FMN的体内、外试验,发现静脉注射止血敏后一定时间内,或血清含有一定浓度止血敏,可导致NBT法FMN值假性升高.
作者:朱德文 刊期: 2005年第06期
人工肝支持系统(artificial liver support system,ALSS)是一种解毒装置,具有清除代谢产物,保持体内环境的稳定、促进肝细胞再生和恢复肝功能的作用.我院对近年来收治的66例重症肝病患者采用ALSS系统血浆置换疗法治疗,现将治疗前后的凝血指标结果报告如下.
作者:周芸;钱敏;唐未名 刊期: 2005年第06期
HBV与HCV血清标志物检测结果受标本存放时间的影响[1].我们对造成影响的主要因素进行了探讨.经对无菌或非无菌操作的血清室温(15℃~30℃)、4℃~8℃、-20℃保存不同时间后检测HBsAg、抗HBe、抗HCV,并同时进行细菌检测,结果发现,造成HBV与HCV血清标志物检测结果受标本存放时间影响的主要因素是细菌污染.
作者:姜兴来 刊期: 2005年第06期
目的探讨尿红细胞形态在尿路感染时的变化及其意义.方法用镜检法观察66例尿路感染伴有血尿患者的尿标本.结果有24例尿红细胞形态呈多形型和混合型异常改变.结论尿路感染时尿红细胞的形态改变对鉴别肾小球性、非肾小球性出血无帮助.
作者:许宏岳;汪晓侬;姚刚 刊期: 2005年第06期
目的对头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的可靠性和临床实用性进行评估.方法用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的124株金黄色葡萄球菌,并与苯唑西林纸片扩散法、琼脂筛选法、琼脂稀释法和胶乳凝集法、mecA基因的检测结果进行比较.结果mecA基因阳性的90株金黄色葡萄球菌头孢西丁纸片扩散法和胶乳凝集法的敏感性分别为100%和98.9%,特异性均为100%,苯唑西林纸片扩散法、琼脂筛选法和琼脂稀释法的敏感性分别为97.8%、98.9%和97.8%,特异性均为100%.结论头孢西丁纸片扩散法与mecA基因的检测结果高度一致,是筛选和确认MRSA的一种简便可靠的方法.
作者:王卫萍;周丽娟;邵海枫;张小卫 刊期: 2005年第06期
sIgA作为黏膜免疫系统的效应分子在呼吸道、胃肠道和泌尿生殖道的黏膜抗感染中发挥重要作用.检测sIgA有助于上述部位感染的诊断和治疗[1-5].本实验建立了尿液sIgA的ELISA法,并探讨尿液sIgA测定对鉴别泌尿系统感染部位的意义.
作者:曾常茜;金海甲;刘捷 刊期: 2005年第06期
目前,以流式细胞原理结合细胞化学或化学反应的全自动尿液(沉渣)分析仪有快速,总体准确性、重复性好的优点,但也存在假阳性等不足,值得实验室同道共同探讨.
作者:龚希平;周镇先 刊期: 2005年第06期
结核分枝杆菌(MTb)耐药性检测主要有表型检测法和基因型检测法两大类.通过研究MTb的生长活性或代谢特点来鉴定耐药性的一些表型检测法应用较多,利弊不一.本文对此作一评价.
作者:黎友伦;罗永艾 刊期: 2005年第06期
时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay,TrFIA)法具有灵敏度高、稳定性好和无放射性污染等优点[1-2].用本法检测血清癌胚抗原(CEA)的含量,已在国内许多医院应用.但该法进口试剂检测时间长,操作较为繁琐,检测成本亦较高.本文通过比较国产和进口TrFIA试剂检测CEA的敏感性和特异性,探讨国产试剂的可用性.
作者:王恩兰;陆应玉;李涛 刊期: 2005年第06期
目的利用制备的鼠抗人肝癌相关LAPTM4B蛋白的单克隆抗体,检测LAPTM4B蛋白在不同肿瘤细胞中的表达.方法重组质粒pGEX-KG-LAPTM4B-N1-99经酶切及测序鉴定正确后,1 mmol/L IPTG 37℃诱导获得融合蛋白.利用亲和层析方法纯化抗人LAPTM4B单抗,免疫印迹法进行单抗鉴定,免疫细胞化学染色法检测5种肿瘤细胞中LAPTM4B的表达.结果经western blot分析抗LAPTM4B单抗可与LAPTM4B-N1-99编码的融合蛋白以及肿瘤细胞中的天然蛋白特异性结合.免疫细胞化学染色(IHC)检测到肝癌、肺癌等5种肿瘤细胞均表达LAPTM4B蛋白.IHC和免疫印迹分析证明了LAPTM4B蛋白在肿瘤细胞中的表达.结论该单抗能特异识别原核及真核细胞表达的LAPTM4B蛋白,为进一步探讨LAPTM4B蛋白的生物学效应提供了条件.
作者:彭方毅;张青云;周柔丽;涂植光;王雅明;徐建军 刊期: 2005年第06期
乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一,近年来发病率呈上升趋势.本文报告乳腺癌患者血清CA15-3、IL-6、TNF测定的临床意义.1材料和方法1.1研究对象病理学确诊的乳腺癌患者46例(其中未手术骨转移者18例),均在本院肿瘤治疗中心就诊,年龄26~67岁,平均(46±8)岁;正常对照组24例,年龄28~62岁,平均(44±6)岁,为本院健康体检者.
作者:韦光龙;曹维克;李龙 刊期: 2005年第06期
目的探讨恶性肿瘤患者化疗前后血清中可溶性Fas、FasL水平变化及其临床意义.方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法对33例恶性肿瘤患者化疗前后的sFas、sFasL水平进行测定,20例健康体检者作正常对照.结果恶性肿瘤患者的sFas、sFasL水平显著高于正常对照组(P<0.01),且仅sFas与肿瘤临床分期相关(P<0.01).化学治疗后有效者sFas和sFasL水平均显著降低(P<0.01).结论sFas和sFasL的水平变化对探讨肿瘤的发生发展、病情判断及指导化疗有一定价值.
作者:魏卫;包志明;刘妍;袁保兰 刊期: 2005年第06期
绿色气球菌(Acrococcus uiridans)广泛分布于生肉、咸肉和加工的蔬菜中,属于条件致病菌.2004年6月我科从1例角膜溃疡患者溃疡面分离1株绿色气球菌,报告如下.
作者:王伟宝 刊期: 2005年第06期
目的探讨不同疾病患者血浆内毒素的含量及内毒素检测的临床意义.方法用鲎试剂定量动态比浊法检测患者和健康对照者血浆内毒素含量.结果30例正常人血浆内毒素含量为(3.20±1.71)pg/ml,51例肝硬化患者内毒素阳性率为49.0%,平均内毒素含量为74.97 pg/ml.31例发热、28例白血病、16例肺炎、12例肺癌、9例肝炎和14例肝癌患者组血浆内毒素阳性率分别为67.7%、67.9%、68.8%、100%、33.3%和57.1%,内毒素平均值分别为73.47、29.47、239.45、259.42、8.74和17.34 pg/ml,与正常对照组相比除肺炎和肝炎组外,均有显著性差异.不同肝病之间及肺炎和肺癌之间均无显著性差异.结论检测血浆内毒素含童有助于早期判断感染性疾病及是否存在内毒素血症,有利于临床及早诊治疾病.
作者:张建芳;徐修礼;樊新;孙怡群 刊期: 2005年第06期
目的探讨感染性疾病的发展进程中外周血单核细胞表面HLA-DR抗原表达的变化.方法用双标记流式细胞术对21名健康人及27例不同程度的脓毒症患者外周血单核细胞HLA-DR的表达进行检测并比较.结果脓毒症患者外周血单核细胞HLA-DR阳性率及荧光强度较对照组显著降低(P<0.0005),严重脓毒症患者外周血单核细胞HLA-DR阳性率<30%.结论流式细胞仪检测外周血单核细胞表面HLA-DR表达,对评价感染性疾病患者机体免疫状况及指导临床用药具有一定的参考价值.
作者:孙健;张葵;陈军浩;孙雪梅 刊期: 2005年第06期
目的了解免疫法、化学法、双联试剂法测定粪便隐血(Ob)的差异.方法分别用上述三法对100例门诊患者和30例确诊为上消化道出血的柏油样便进行检测.结果以化学法阳性为参照,100例门诊患者中免疫法的首次检出率为81%,续检率100%,双联试剂法一次检出率为100%;30例上消化道出血患者粪便,免疫法首次检出率60%,续检率为97%,双联法的一次检出率为100%.结论双联试剂法避免了免疫法、化学法造成的假阴性、假阳性.
作者:张云虎;张蓉;柯美津;涂倩 刊期: 2005年第06期
样品体积分数是生化分析仪参数设置和质量保证的重要环节,所谓样品体积分数(SVF)是样品体积(SV)与反应液总体积(TV)之比值,即SVF=SV/TV.它涉及到反应系统中所用的样品体积、样品稀释液体积、试剂体积、试剂稀释液的体积的选择和配比,关系到反应液中样品稀释倍数[1]
作者:李立和;王长友;梁夯;王宝占 刊期: 2005年第06期