王恩兰；陆应玉；李涛
目的建立一种基于错配杂交及化学发光技术的检测亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reducatase,MTHFR)基因多态性的新方法.方法针对多态位点设计两条寡核苷酸探针,分别与野生型及突变型序列互补.将两条探针分别与含多态位点C677T的PCR扩增产物杂交,然后用化学发光法检测,根据两条探针的发光值之比确定样品的基因型.结果用本法随机检测了50例DNA样品,结果3种基因型的发光值之比可以严格区分,其中野生型(C/C)15例,杂合型(C/T)28例,突变型(T/T)7例,与参考方法(PCR-RFLP)的检测结果完全一致.结论本方法操作简便、检测快速而且费用低廉,可广泛应用于MTHFR基因突变及多态性检测.
作者：姚群峰；宁勇；吴晓明；周宜开 刊期： 2005年第06期
目的评价Sysmex XE-2100(下简称XE-2100)定量检测网织红细胞(Ret)的性能.方法以XE-2100检测Ret,并将73例检测结果与参考方法-目视计数法及Sysmex SE-9500的检测结果进行比较.结果XE-2100检测Ret低值(2.86×109/L)、中值(43.12×109/L)、较高值(105.63×109/L)、高值(292.66×109/L)标本批内的变异系数(CV)分别为4.77%、2.88%、3.50%、2.00%;检测Ret低值(9.87×109/L)、中值(56.37×109/L)、高值(128.06×109/L)标本批间CV分别为4.66%、4.53%、2.61%,总重复性CV为3.52%.Ret在2.53×109/L～268.70×109/L范围内线性良好(r=0.9992).XE-2100检测Ret在标本采集48 h内结果稳定,携带污染率为0.23%.XE-2100、SE-9500与目视计数法检测Ret结果间有良好的相关性,r分别为0.9622、和0.9471.对XE-2100ROC曲线分析显示,其曲线下面积(AUC)为0.98和0.94,而SE-9500为0.92和0.95.结论XE-2100检测Ret具有简便、准确、精密度高、线性好、参数多等特点.
作者：彭黎明；刘胡敏 刊期： 2005年第06期
为了解HBV DNA检测中,斑点杂交、实时荧光定量PCR及PCR-ELISA方法检测的灵敏度,以及定量检测HBV DNA含量时,与公认较好定量方法bDNA(分枝DNA)方法[1-3]检测结果之间相关性,对70例bDNA方法检测阳性标本,进行检测及对比分析.
作者：赵勤；周曾全；王忠平；丁湘舟；余文林；张惠芬；陈浩 刊期： 2005年第06期
为了解肠球菌感染和耐药情况,我们对2002～2004年临床分离的粪肠球菌109株、屎肠球菌56株的分离情况及其耐药性的变化进行回顾性分析.
作者：吴承；熊怀民；姚乾；屈振东 刊期： 2005年第06期
目的从36周人胎脑皮层分离培养神经干细胞并鉴定.方法采用无血清培养和单细胞克隆技术,从36周自愿水囊引产人胎脑皮层中分离出具有单细胞克隆能力的细胞,并观察神经干细胞体外培养、传代、分化潜能,采用免疫组化和免疫荧光技术检测克隆细胞的神经巢蛋白和各种分化细胞的特征性抗原的表达.结果从36周人胎脑皮层中成功分离出具有自我更新和多分化潜能的神经干细胞,在无血清培养时细胞呈悬浮状态生长,形成神经球,该细胞具有连续克隆能力,可传代培养,呈Nestin免疫反应阳性;在含血清培养时神经干细胞分化,并表达神经元细胞和星形胶质细胞的特异性抗原.结论36周人胎脑皮层仍能培养出具有自我复制和分化潜能的神经干细胞.
作者：尹晓娟；封志纯 刊期： 2005年第06期
时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay,TrFIA)法具有灵敏度高、稳定性好和无放射性污染等优点[1-2].用本法检测血清癌胚抗原(CEA)的含量,已在国内许多医院应用.但该法进口试剂检测时间长,操作较为繁琐,检测成本亦较高.本文通过比较国产和进口TrFIA试剂检测CEA的敏感性和特异性,探讨国产试剂的可用性.
作者：王恩兰；陆应玉；李涛 刊期： 2005年第06期
溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)是一种细胞膜脂类衍生物,是磷脂中小、简单的分子[1].LPA可以在凝血和血栓形成过程的初期由血小板产生并释放到血液中[2],理论上它可以作为指示血栓形成启动的标志分子.我们据此对冠心病患者血浆LPA水平进行研究,探讨其临床意义.
作者：张慧玲；刘桂娟 刊期： 2005年第06期
奇异变形杆菌常引起食物中毒、婴儿腹泻及医源性感染等,由该菌引起的感染是否具有流行病学的意义,应有一种简单快速的方法来确认.我们从变形杆菌众多的同一性试验方法中,选取了Dienes试验、交叉定量凝集试验2种方法,对20株临床分离菌株进行了系统的实验研究,以用于该菌感染的流行病学调查.
作者：曹金德；倪丽萍；王惠民；张志泉；沈荣春；施英娟；褚少朋 刊期： 2005年第06期
目的探讨不同激活型缓冲体系对碱性磷酸酶测定的影响,为临床应用提供依据.方法通过参考范围调查,临床病例标本和临床随机成人血清中碱性磷酸酶的测定,分析比较3种不同缓冲体系测定方法之间的差异.结果二乙醇胺、2-乙基氨基乙醇、2-氨基-2-甲基-1-丙醇3种不同缓冲体系的方法测定血清碱性磷酸酶活性的参考范围分别为:(98±57)U/L、(86±44)U/L、(75±42)U/L;组间比较P＜0.05.221例7组肝病患者标本用3种方法测定,组间结果比较,P＜0.05.成人随机标本109例,3种方法的结果比较,P＜0.05.结论不同缓冲体系的测定方法对ALP测定的结果差别很大,即使底物相同,采用不同激活型缓冲体系,也会对测定结果带来较大差异,其参考范围也不一致.
作者：郑铁生；叶立新；薛锦；吴志勇；张徐；盛微翔 刊期： 2005年第06期
目的建立多重PCR技术检测肺炎克雷伯菌(K.pneu)中质粒型ampC基因.方法收集临床分离的表型可疑为产AmpC酶的24株K. pneu,用ampC基因的5群6个亚型的引物进行多重聚合酶链反应(mul-PCR),用三维酶抑制试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶,结合mul-PCR、三维酶抑制试验和表型试验进行基因和表型分析.同时选择4株菌(3株ampC基因阳性,1株阴性)进行转质粒试验,以证实质粒型基因的存在.结果在mul-PCR试验中,有22株扩增出C-4族中长度405 bp的片段,1株扩增出C-1族中长度462 bp的片段;1株未扩增出目的条带.三维酶抑制试验中,24株菌中有19株菌未检出AmpC酶,但药物敏感试验中有诱导耐药现象,符合C-4(DHA)族基因诱导表达的特性.转质粒试验中,3株ampC基因阳性的供体菌均将其ampC基因转入受体菌.结论采用多重PCR技术可以简化质粒型ampC基因的检测方法.在我院临床分离的K.pneu中,出现质粒编码的AmpC酶,以C-4族基因为主要流行型.
作者：邵海枫；崔蕾蕾；赵晓智；王锦娜；王卫萍 刊期： 2005年第06期
人工肝支持系统(artificial liver support system,ALSS)是一种解毒装置,具有清除代谢产物,保持体内环境的稳定、促进肝细胞再生和恢复肝功能的作用.我院对近年来收治的66例重症肝病患者采用ALSS系统血浆置换疗法治疗,现将治疗前后的凝血指标结果报告如下.
作者：周芸；钱敏；唐未名 刊期： 2005年第06期
目的利用制备的鼠抗人肝癌相关LAPTM4B蛋白的单克隆抗体,检测LAPTM4B蛋白在不同肿瘤细胞中的表达.方法重组质粒pGEX-KG-LAPTM4B-N1-99经酶切及测序鉴定正确后,1 mmol/L IPTG 37℃诱导获得融合蛋白.利用亲和层析方法纯化抗人LAPTM4B单抗,免疫印迹法进行单抗鉴定,免疫细胞化学染色法检测5种肿瘤细胞中LAPTM4B的表达.结果经western blot分析抗LAPTM4B单抗可与LAPTM4B-N1-99编码的融合蛋白以及肿瘤细胞中的天然蛋白特异性结合.免疫细胞化学染色(IHC)检测到肝癌、肺癌等5种肿瘤细胞均表达LAPTM4B蛋白.IHC和免疫印迹分析证明了LAPTM4B蛋白在肿瘤细胞中的表达.结论该单抗能特异识别原核及真核细胞表达的LAPTM4B蛋白,为进一步探讨LAPTM4B蛋白的生物学效应提供了条件.
作者：彭方毅；张青云；周柔丽；涂植光；王雅明；徐建军 刊期： 2005年第06期
1病例概况患者马××,男,35岁,农民,2003年7月,因齿龈肿胀疼痛1周余不能咀嚼而就诊.有户外工作和睡眠的经历.口腔科门诊检查,齿龈局部压痛,有脓性分泌物,挑破齿龈流出血性脓液,并取出6条长约17 mm白色活动蝇蛆,用70%乙醇固定送检本科,鉴定为黑须污蝇Ⅲ龄幼虫.经过排脓除蛆,清洗伤口,静脉滴注甲硝唑、红霉素经1周治疗痊愈.
作者：张培琳 刊期： 2005年第06期
目的分析冠心病患者外周血中sCD14的水平及其与单核细胞数量的相关关系,探讨sCD14和动脉粥样硬化之间的关系.方法ELISA法测定269例冠心病患者和24例健康人血清中的sCD14水平,血细胞分析仪检测受试者抗凝全血中单核细胞的数目和比例.结果冠心病患者与健康对照组sCD14分别为:(3 011.4±1431.4)ng/L和(1 943.8±510.2)ng/L,二者结果有显著差异(t=3.7259,P=0,002);冠心病患者血清sCD14水平(Y)与血单核细胞数量(X)和比例(X)均无相关关系,直线回归方程分别为:Y=2 969.8-95.6X,r=-0.026,P=0.668;Y=2 763.6+1581.8X,r=0.060,P=0.329.结论冠心病患者血清sCD14水平显著性增高与血单核细胞数量和比例均无相关关系,可能与单核细胞的质量改变有关.
作者：张葵；王丽；罗浔阳；顾光煜；毕永春；宋景秋；夏永泉；郭丹；杜忠祥 刊期： 2005年第06期
目的在大肠埃希菌中表达梅毒螺旋体Tp15-17嵌合抗原,用于临床检测梅毒感染.方法利用PCR法从Tp全基因组中分别扩增目的基因Tp15和Tp17,用T4DNA连接酶连接后,克隆选表达载体pGEX-6P-1中,构建重组质粒pGEX-6P-1+Tp15-17,在大肠埃希菌中表达重组Tp嵌合蛋白,重组蛋白经亲和层析柱纯化后包被微孔板,初步建立间接ELISA法检测血清中的抗Tp抗体.结果重组嵌合抗原获得了高效表达,免疫印迹试验显示重组抗原具有很强的抗原性.用重组嵌合抗原建立间接ELISA法,对梅毒螺旋体抗体阳性参比血清及梅毒患者血清的检测符合率100%.结论重组梅毒螺旋体嵌合抗原Tp15-17能够作为梅毒螺旋体诊断性ELISA抗原.
作者：汤巧 刊期： 2005年第06期
我们在使用上海三科公司的BT 815A半自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基移换酶(ALT)时,发现1例ALT高值标本的结果反而很低,为此,进行了相关实验,分析了导致错误结果的原因.
作者：聂锡华 刊期： 2005年第06期
目的对头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的可靠性和临床实用性进行评估.方法用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的124株金黄色葡萄球菌,并与苯唑西林纸片扩散法、琼脂筛选法、琼脂稀释法和胶乳凝集法、mecA基因的检测结果进行比较.结果mecA基因阳性的90株金黄色葡萄球菌头孢西丁纸片扩散法和胶乳凝集法的敏感性分别为100%和98.9%,特异性均为100%,苯唑西林纸片扩散法、琼脂筛选法和琼脂稀释法的敏感性分别为97.8%、98.9%和97.8%,特异性均为100%.结论头孢西丁纸片扩散法与mecA基因的检测结果高度一致,是筛选和确认MRSA的一种简便可靠的方法.
作者：王卫萍；周丽娟；邵海枫；张小卫 刊期： 2005年第06期
目的探讨自由基-脂质过氧化反应的产物--8-表氧前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)对急性脑外伤病情和预后判断的价值.方法90例急性脑外伤病人,按入院时GCS评分,分成轻型组(30例),中型组(26例),重型组(34例).在受伤第1、2、3、7、14 d(重型组至30 d),分别对存活病人用ELISA法测定血浆8-iso-PGF2α含量.随访3个月,根据GOS标准分为死亡组(30例),恢复不良组(28例),恢复良好组(32例).以健康体检者40例为对照组.结果(1)脑外伤各组伤后1周内4次测值均高于对照组(P＜0.01),各组8-iso-PGF2α峰值均在伤后第2 d;伤后2周8-iso-PGF2α测值仅重型组仍显著高于对照组(P＜0.01).(2)脑外伤越严重,GCS评分越低,血浆8-iso-PGF2α的含量越高,持续时间越长,其预后越差.当8-iso-PGF2α含量＞25 ng/L且持续不降者,多为死亡和重残.结论血浆8-iso-PGF2α的动态变化可作为脑外伤患者伤情、预后评估的有效的生化指标.
作者：施辉；杨俊；周辉；孙伟晔；刘希光；李爱民；陈覃 刊期： 2005年第06期
胆红素是机体内重要的生理抗氧化物质,在预防动脉粥样硬化过程中发挥着不可替代的作用[1].血尿酸升高可能是发生心血管事件的独立预测因子[2].本研究检测冠心病和对照组的血清胆红素及尿酸水平,并进行相关分析,初步探讨二者水平与冠状动脉病变程度的关系.
作者：曾小莉；郭晶；袁慧；蒋朝晖 刊期： 2005年第06期
目的分析活动期类风湿性关节炎(RA)患者外周血CD4+T淋巴细胞的表型变化,探讨其免疫病理机制.方法采用ELISA和双标记免疫荧光法检测47例活动期RA患者和50例健康成人外周血CD4+T细胞表面CD154、CD69的表达以及血清、血浆可溶性CD154(sCD154)的含量.结果活动期RA患者的外周血CD4+T细胞CD154(16.7%±8.1%)和CD69(13.9%±7.1%)的表达水平均显著高于健康人,其血清sCD154(18.43±6.27,ng/ml)和血浆sCD154(8.34±3.42,ng/ml)含量亦分别高于健康人血清sCD154(9.56±4.71,ng/ml)和血浆sCD154(2.98±1.13,ng/ml).结论CD4+T细胞表达的CD154、CD69以及血浆sCD154含量与RA的病程密切相关,可以成为RA的辅助诊断、疗效估价和预后判断的有价值的实验室参数.
作者：杨炳华；樊一笋；许志荣；彭群新；郑元；沈轶骊 刊期： 2005年第06期
临床检验杂志
主管:江苏省卫生厅
主办：江苏省医学会
