活动期类风湿性关节炎患者外周血CD4+T 细胞的表型分析

杨炳华；樊一笋；许志荣；彭群新；郑元；沈轶骊

关键词：CD154, 可溶性CD154, CD69, 类风湿性关节炎

摘要：目的分析活动期类风湿性关节炎(RA)患者外周血CD4+T淋巴细胞的表型变化,探讨其免疫病理机制.方法采用ELISA和双标记免疫荧光法检测47例活动期RA患者和50例健康成人外周血CD4+T细胞表面CD154、CD69的表达以及血清、血浆可溶性CD154(sCD154)的含量.结果活动期RA患者的外周血CD4+T细胞CD154(16.7%±8.1%)和CD69(13.9%±7.1%)的表达水平均显著高于健康人,其血清sCD154(18.43±6.27,ng/ml)和血浆sCD154(8.34±3.42,ng/ml)含量亦分别高于健康人血清sCD154(9.56±4.71,ng/ml)和血浆sCD154(2.98±1.13,ng/ml).结论CD4+T细胞表达的CD154、CD69以及血浆sCD154含量与RA的病程密切相关,可以成为RA的辅助诊断、疗效估价和预后判断的有价值的实验室参数.

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检测人中性粒细胞防御素ELISA法的建立及初步应用

目的建立检测人中性粒细胞防御素(HNP)的ELISA法,并探讨其临床应用价值.方法以纯化的HNP-1为抗原制备特异性抗-HNP单克隆抗体,建立ELISA夹心法,同时检测36名健康献血员血浆中HNP含量,并观察血库4℃保存的全血不同保存时间血浆中HNP含量的变化.结果ELISA法批内和批间变异系数分别为4.8%和9.3%,与进口试剂比较相关性良好(r=0.98,P＜0.01),36名健康献血员血浆HNP含量为(46±48)ng/ml.库存全血随保存时间延长血浆HNP含量逐渐升高,保存25天的血浆HNP含量达到760 ng/ml.结论建立的ELISA定量检测法与进口试剂盒有良好的相关性,除血浆外,推测也能适用于细胞培养上清或各种体液中HNP的定量测定.

作者：王永杰；骆晓梅；李晓洲；王涛；齐名；武建国刊期： 2005年第06期
不同孵育方式对ELISA法抗-HIV(1+2)检测结果的影响

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作者：殷勤；盛磊刊期： 2005年第06期
1例疑难血型的实验室检查及分析

正常A型人的红细胞上有A抗原,血清中有相应的抗B抗体.在某些疾病的影响下,血型抗原或抗体减少或缺失,给正确鉴定血型带来困难.本站近遇到1例罕见的抗原难检出、抗体缺失的患儿,经鉴定血型为A型,现报告如下,并分析原因.

作者：华敏玉；郭永芳；姜健；洪俊刊期： 2005年第06期
头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的对头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的可靠性和临床实用性进行评估.方法用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的124株金黄色葡萄球菌,并与苯唑西林纸片扩散法、琼脂筛选法、琼脂稀释法和胶乳凝集法、mecA基因的检测结果进行比较.结果mecA基因阳性的90株金黄色葡萄球菌头孢西丁纸片扩散法和胶乳凝集法的敏感性分别为100%和98.9%,特异性均为100%,苯唑西林纸片扩散法、琼脂筛选法和琼脂稀释法的敏感性分别为97.8%、98.9%和97.8%,特异性均为100%.结论头孢西丁纸片扩散法与mecA基因的检测结果高度一致,是筛选和确认MRSA的一种简便可靠的方法.

作者：王卫萍；周丽娟；邵海枫；张小卫刊期： 2005年第06期
8-表氧前列腺素F2α在急性脑外伤病情和预后评估中的价值

目的探讨自由基-脂质过氧化反应的产物--8-表氧前列腺素F2α(8-iso-PGF2α)对急性脑外伤病情和预后判断的价值.方法90例急性脑外伤病人,按入院时GCS评分,分成轻型组(30例),中型组(26例),重型组(34例).在受伤第1、2、3、7、14 d(重型组至30 d),分别对存活病人用ELISA法测定血浆8-iso-PGF2α含量.随访3个月,根据GOS标准分为死亡组(30例),恢复不良组(28例),恢复良好组(32例).以健康体检者40例为对照组.结果(1)脑外伤各组伤后1周内4次测值均高于对照组(P＜0.01),各组8-iso-PGF2α峰值均在伤后第2 d;伤后2周8-iso-PGF2α测值仅重型组仍显著高于对照组(P＜0.01).(2)脑外伤越严重,GCS评分越低,血浆8-iso-PGF2α的含量越高,持续时间越长,其预后越差.当8-iso-PGF2α含量＞25 ng/L且持续不降者,多为死亡和重残.结论血浆8-iso-PGF2α的动态变化可作为脑外伤患者伤情、预后评估的有效的生化指标.

作者：施辉；杨俊；周辉；孙伟晔；刘希光；李爱民；陈覃刊期： 2005年第06期
人胎脑皮层神经干细胞的体外培养及鉴定

目的从36周人胎脑皮层分离培养神经干细胞并鉴定.方法采用无血清培养和单细胞克隆技术,从36周自愿水囊引产人胎脑皮层中分离出具有单细胞克隆能力的细胞,并观察神经干细胞体外培养、传代、分化潜能,采用免疫组化和免疫荧光技术检测克隆细胞的神经巢蛋白和各种分化细胞的特征性抗原的表达.结果从36周人胎脑皮层中成功分离出具有自我更新和多分化潜能的神经干细胞,在无血清培养时细胞呈悬浮状态生长,形成神经球,该细胞具有连续克隆能力,可传代培养,呈Nestin免疫反应阳性;在含血清培养时神经干细胞分化,并表达神经元细胞和星形胶质细胞的特异性抗原.结论36周人胎脑皮层仍能培养出具有自我复制和分化潜能的神经干细胞.

作者：尹晓娟；封志纯刊期： 2005年第06期
细菌污染对血清HBV与HCV标志物检测结果的影响

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作者：姜兴来刊期： 2005年第06期
4种氟喹诺酮类药物对耐甲氧西林葡萄球菌的敏感性分析

为了比较临床常用氟喹诺酮类药物的敏感性,本文选择共116株耐苯唑西林葡萄球菌(MRS),进行加替沙星、诺氟沙星、环丙沙星、左氧氟沙星4种药物的小抑菌浓度(MIC)检测,结果如下.

作者：方蓉；赵芳；李珍大；邵海枫；王卫萍刊期： 2005年第06期
尿路感染患者尿红细胞形态变化的意义探讨

目的探讨尿红细胞形态在尿路感染时的变化及其意义.方法用镜检法观察66例尿路感染伴有血尿患者的尿标本.结果有24例尿红细胞形态呈多形型和混合型异常改变.结论尿路感染时尿红细胞的形态改变对鉴别肾小球性、非肾小球性出血无帮助.

作者：许宏岳；汪晓侬；姚刚刊期： 2005年第06期
创伤后深静脉血栓形成与GMP-140、D-二聚体的关系

深静脉血栓形成(deep vein thrombosis,DVT)是骨科创伤后的一个严重的并发症.我们对创伤后DVT患者血浆D-二聚体(D-Dimer)及血小板α颗粒膜蛋白-140(platelet α-granule menbrance protein,GMP-140)进行了测定,并探讨其对DVT的诊断意义.

作者：白雪；黄津；邓桂芳；方琳刊期： 2005年第06期
检测外周血单核细胞HLA-DR的表达及临床意义

目的探讨感染性疾病的发展进程中外周血单核细胞表面HLA-DR抗原表达的变化.方法用双标记流式细胞术对21名健康人及27例不同程度的脓毒症患者外周血单核细胞HLA-DR的表达进行检测并比较.结果脓毒症患者外周血单核细胞HLA-DR阳性率及荧光强度较对照组显著降低(P＜0.0005),严重脓毒症患者外周血单核细胞HLA-DR阳性率＜30%.结论流式细胞仪检测外周血单核细胞表面HLA-DR表达,对评价感染性疾病患者机体免疫状况及指导临床用药具有一定的参考价值.

作者：孙健；张葵；陈军浩；孙雪梅刊期： 2005年第06期
LAPTM4B新基因在肿瘤细胞中的表达及其免疫学检测技术的建立

目的利用制备的鼠抗人肝癌相关LAPTM4B蛋白的单克隆抗体,检测LAPTM4B蛋白在不同肿瘤细胞中的表达.方法重组质粒pGEX-KG-LAPTM4B-N1-99经酶切及测序鉴定正确后,1 mmol/L IPTG 37℃诱导获得融合蛋白.利用亲和层析方法纯化抗人LAPTM4B单抗,免疫印迹法进行单抗鉴定,免疫细胞化学染色法检测5种肿瘤细胞中LAPTM4B的表达.结果经western blot分析抗LAPTM4B单抗可与LAPTM4B-N1-99编码的融合蛋白以及肿瘤细胞中的天然蛋白特异性结合.免疫细胞化学染色(IHC)检测到肝癌、肺癌等5种肿瘤细胞均表达LAPTM4B蛋白.IHC和免疫印迹分析证明了LAPTM4B蛋白在肿瘤细胞中的表达.结论该单抗能特异识别原核及真核细胞表达的LAPTM4B蛋白,为进一步探讨LAPTM4B蛋白的生物学效应提供了条件.

作者：彭方毅；张青云；周柔丽；涂植光；王雅明；徐建军刊期： 2005年第06期
多重PCR技术检测肺炎克雷伯菌中质粒介导的AmpC酶基因

目的建立多重PCR技术检测肺炎克雷伯菌(K.pneu)中质粒型ampC基因.方法收集临床分离的表型可疑为产AmpC酶的24株K. pneu,用ampC基因的5群6个亚型的引物进行多重聚合酶链反应(mul-PCR),用三维酶抑制试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶,结合mul-PCR、三维酶抑制试验和表型试验进行基因和表型分析.同时选择4株菌(3株ampC基因阳性,1株阴性)进行转质粒试验,以证实质粒型基因的存在.结果在mul-PCR试验中,有22株扩增出C-4族中长度405 bp的片段,1株扩增出C-1族中长度462 bp的片段;1株未扩增出目的条带.三维酶抑制试验中,24株菌中有19株菌未检出AmpC酶,但药物敏感试验中有诱导耐药现象,符合C-4(DHA)族基因诱导表达的特性.转质粒试验中,3株ampC基因阳性的供体菌均将其ampC基因转入受体菌.结论采用多重PCR技术可以简化质粒型ampC基因的检测方法.在我院临床分离的K.pneu中,出现质粒编码的AmpC酶,以C-4族基因为主要流行型.

作者：邵海枫；崔蕾蕾；赵晓智；王锦娜；王卫萍刊期： 2005年第06期
UF-100、Uriest-100型尿分析仪与镜检法的实验比较

目前,以流式细胞原理结合细胞化学或化学反应的全自动尿液(沉渣)分析仪有快速,总体准确性、重复性好的优点,但也存在假阳性等不足,值得实验室同道共同探讨.

作者：龚希平；周镇先刊期： 2005年第06期
ELISA检测尿液sIgA及临床意义

sIgA作为黏膜免疫系统的效应分子在呼吸道、胃肠道和泌尿生殖道的黏膜抗感染中发挥重要作用.检测sIgA有助于上述部位感染的诊断和治疗[1-5].本实验建立了尿液sIgA的ELISA法,并探讨尿液sIgA测定对鉴别泌尿系统感染部位的意义.

作者：曾常茜；金海甲；刘捷刊期： 2005年第06期
进口与国产TrFIA试剂盒检测血清CEA的比较

时间分辨荧光免疫分析(time-resolved fluoroimmunoassay,TrFIA)法具有灵敏度高、稳定性好和无放射性污染等优点[1-2].用本法检测血清癌胚抗原(CEA)的含量,已在国内许多医院应用.但该法进口试剂检测时间长,操作较为繁琐,检测成本亦较高.本文通过比较国产和进口TrFIA试剂检测CEA的敏感性和特异性,探讨国产试剂的可用性.

作者：王恩兰；陆应玉；李涛刊期： 2005年第06期
乳腺癌患者血清CA15-3、IL-6、TNF测定的意义

乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一,近年来发病率呈上升趋势.本文报告乳腺癌患者血清CA15-3、IL-6、TNF测定的临床意义.1材料和方法1.1研究对象病理学确诊的乳腺癌患者46例(其中未手术骨转移者18例),均在本院肿瘤治疗中心就诊,年龄26～67岁,平均(46±8)岁;正常对照组24例,年龄28～62岁,平均(44±6)岁,为本院健康体检者.

作者：韦光龙；曹维克；李龙刊期： 2005年第06期
止血敏对果糖胺测定有正干扰

我们用硝基四氮唑蓝(NBT)比色法测定1例胃出血患者血清果糖胺(FMN)高达8.54 mmol/L,而血清葡萄糖仅6.54 mmol/L,两者关系显然不符,考虑与药物干扰有关.经试验除与已知的维生素C干扰有关外,止血药酚磺乙胺(止血敏)对NBT法测FMN亦有严重干扰.于是我们做了止血敏干扰测定FMN的体内、外试验,发现静脉注射止血敏后一定时间内,或血清含有一定浓度止血敏,可导致NBT法FMN值假性升高.

作者：朱德文刊期： 2005年第06期
江苏无锡地区社区及医院败血症病原菌与预后的比较

目的比较社区及医院败血症的病原菌分布特点、预后及相关因素.方法收集无锡地区2000～2003年4家综合性医院血培养阳性病例共480例,统计分析不同感染类型、相应的病原菌构成及其预后的差别.结果480例血培养阳性患者77.3%为社区获得性菌血症(CABSI),22.6%为医院获得性菌血症(HABSI).CABSI的主要病原菌是凝固酶阴性葡萄球菌(38.0%)、大肠埃希菌(17.8%)、沙门菌(9.4%)和金黄色葡萄球菌(8.3%);而HABSI常见病原菌依次为凝固酶阴性葡萄球菌(17.4%)、念珠菌(14.7%)、大肠埃希菌(12.8%)、铜绿假单胞菌(11.9%)和克雷伯杆菌(10.1%).HABSI的平均年龄52.2岁显著高于CABSI患者28.1岁(P＜0.001).HABSI患者的病死率20.2%显著高于CABSI患者3.0%(P＜0.001);医院感染组中,铜绿假单胞菌所致的感染病死率高达38.5%,而社区感染组中肺炎链球菌所致的感染病死率高,为16.7%.结论社区及医院败血症的病原菌构成、科室分布、病死率均不同,临床应有针对性地进行抗感染治疗,以降低菌血症的病死率.

作者：严子禾；赵琪；夏燕萍；林萍萍；王宗明；谢国强；潘宇红；胡瑜刊期： 2005年第06期
结核分枝杆菌药敏表型检测的应用价值

结核分枝杆菌(MTb)耐药性检测主要有表型检测法和基因型检测法两大类.通过研究MTb的生长活性或代谢特点来鉴定耐药性的一些表型检测法应用较多,利弊不一.本文对此作一评价.

作者：黎友伦；罗永艾刊期： 2005年第06期