学术投稿

人中性粒细胞防御素单克隆抗体制备及初步应用

王永杰;齐名;李保仝;邵海枫;宗永兰;武建国

关键词:防御素, 单克隆抗体, 免疫荧光, 中性粒细胞, 连续酸-尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳
摘要:目的制备人中性粒细胞防御素-1单克隆抗体(HNP-1McAb),并用HNP-1 McAb建立直接免疫荧光法对正常人及一系列髓性白血病患者中性粒细胞进行免疫细胞化学染色.方法用连续酸-尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离纯化人中性粒细胞防御素组份(HNP-1~3),以纯化的HNP-1为抗原制备特异性的HNP-1 McAb,并建立了HNP-1 McAb直接免疫荧光染色法.将分离纯化的正常人和兔外周血中性粒细胞、淋巴细胞,粒细胞白血病、淋巴细胞白血病患者的骨髓和外周血分别制成涂片,进行免疫荧光染色.结果 HNP-1 McAb与正常人外周血中性粒细胞及急、慢性粒细胞白血病骨髓和外周血涂片的原、早幼、中幼、晚幼和成熟的中性粒细胞均呈特异的阳性反应.人红细胞、淋巴细胞及其他非粒细胞系统的有核细胞均呈阴性反应.对兔的中性粒细胞无交叉反应.结论 HNP-1可作为粒细胞系统的特异性分化标志,其相应的HNP-1 McAb可作为粒细胞的标志性抗体用于髓性白血病的鉴别诊断和分型.
临床检验杂志相关文献
  • 肺癌患者外周血有核细胞IL-2R、TNF-α及IFN-γ表达的检测及其临床意义

    目的探讨肺癌患者外周血有核细胞IL-2R(CD25)、TNF-α和IFN-γ的表达规律及其临床意义.方法用流式细胞术对118例肺癌患者外周血表达IL-2R、TNF-α和IFN-γ有核细胞的检出率进行检测和分析.结果肺癌患者IL-2R、TNF-α和IFN-γ的表达率显著高于正常对照组(P<0.01),但其中未化疗者与正常对照组无显著性差异(P>0.05);化疗者表达率均显著高于未化疗者(P<0.01);在未化疗的患者中,伴转移者外周血有核细胞的IL-2R、TNF-α和IFN-γ的检出率均显著低于未转移者(P<0.01或P<0.05).结论肺癌患者外周血有核细胞的IL-2R、TNF-α和IFN-γ表达的检测有助于化疗机制的解释和病人预后的判定.

    作者:王书奎;王自正;翁慎毅;夏伟;傅雷;杜同信 刊期: 2004年第01期

  • 三维法测定革兰阴性杆菌AmpC酶的表型研究

    细菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要机制是产生β内酰胺酶,已发现的β-内酰胺酶种类逐渐增多,其中染色体介导的高产Ⅰ型β内酰胺酶(AmpC酶)有重要的临床意义.但对AmpC酶的检测仍无标准方法.我们对Coudron法[1]加以改良,用酶粗提液进行三维法测定380株革兰阴性杆菌的AmpC酶,结果如下.

    作者:孔海深;吴建平;吕凌云 刊期: 2004年第01期

  • CA15-3临床应用探讨

    CA153是从转移性乳腺癌中分离的一种肿瘤相关抗原,主要存在于正常乳腺上皮管腔面,细胞恶变时含量明显升高.它是一种分子量300 000~450 000的大分子糖蛋白.

    作者:符生苗 刊期: 2004年第01期

  • 人中性粒细胞防御素单克隆抗体制备及初步应用

    目的制备人中性粒细胞防御素-1单克隆抗体(HNP-1McAb),并用HNP-1 McAb建立直接免疫荧光法对正常人及一系列髓性白血病患者中性粒细胞进行免疫细胞化学染色.方法用连续酸-尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离纯化人中性粒细胞防御素组份(HNP-1~3),以纯化的HNP-1为抗原制备特异性的HNP-1 McAb,并建立了HNP-1 McAb直接免疫荧光染色法.将分离纯化的正常人和兔外周血中性粒细胞、淋巴细胞,粒细胞白血病、淋巴细胞白血病患者的骨髓和外周血分别制成涂片,进行免疫荧光染色.结果 HNP-1 McAb与正常人外周血中性粒细胞及急、慢性粒细胞白血病骨髓和外周血涂片的原、早幼、中幼、晚幼和成熟的中性粒细胞均呈特异的阳性反应.人红细胞、淋巴细胞及其他非粒细胞系统的有核细胞均呈阴性反应.对兔的中性粒细胞无交叉反应.结论 HNP-1可作为粒细胞系统的特异性分化标志,其相应的HNP-1 McAb可作为粒细胞的标志性抗体用于髓性白血病的鉴别诊断和分型.

    作者:王永杰;齐名;李保仝;邵海枫;宗永兰;武建国 刊期: 2004年第01期

  • 肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶检测

    目的了解耐氨苄西林肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶(ESBL)产生情况.方法用双纸片扩散法和Etest筛选肺炎克雷伯菌ESBLs;用SHV-PCR检测SHV β-内酰胺酶基因,进一步用PCR-NheⅠ酶切检测SHV-ESBL.结果 36株肺炎克雷伯菌中有30株产β-内酰胺酶,31株含SHV β-内酰胺酶基因,8株ESBL菌表型阳性,其中3株为SHV-ESBL.结论肺炎克雷伯菌是产ESBL的常见菌,实验室对其检测和监控非常重要.

    作者:项明洁;彭奕冰;刘明;孙学勇;倪语星 刊期: 2004年第01期

  • 配体指数级系统进化技术与医学检测

    配体指数级系统进化技术(SELEX,systematic evolution of ligands by exponential enrichment),是近年发展起来的研究核酸结构、功能及进化的一种新的组合化学技术.它是应用大容量的随机寡核苷酸库,结合PCR扩增,指数级富集与靶分子特异结合的寡核苷酸,经过几轮或数十轮筛选过程,获得高亲和力、高特异性的寡核苷酸配基,即适体(aptamer).

    作者:任延平;吕卓人 刊期: 2004年第01期

  • Act 5.diff血液分析仪的临床应用评价

    目的对Act 5.diff(Beckman-Coulter)血液分析仪进行应用评价.方法采用随机和不随机选择标本方法,对仪器进行精密度、相关性和异常细胞检出能力的测试.结果各项参数测定的变异系数(CV)均达到设计规定的要求.与STKS血液分析仪全血细胞计数(CBC)的相关性比较,各参数相关系数r=0.905~0.997.白细胞五项分类与显微镜目测法比较,相关系数r=0.411~0.944.对异常细胞检测的敏感性:旗标报警为100.0%,IMM定量为86.3%;特异性:旗标报警为95.8%;IMM定量为93.2%;有效性:旗标报警为97.3%,IMM定量为 92.0%.结论该仪器的主要指标评价结果符合设计要求,对异常细胞检测能力强,能满足临床血液常规分析.

    作者:王慧萍;王淑香;沈霞 刊期: 2004年第01期

  • 骨髓铁粒染色标本沉渣的处理方法

    骨髓铁粒染色反映了机体内铁的储存和利用情况,是诊断缺铁性贫血和非缺铁性贫血一种重要的染色方法.其内铁是通过观察幼红细胞胞质中出现的蓝色细小颗粒的数目、大小、染色深浅以及分布情况来分型,外铁是观察小粒处蓝色颗料有无、多少来判断,因此具有一定的难度.

    作者:蒋茜;孙苏玲 刊期: 2004年第01期

  • 3种苛养菌的耐药性分析

    细菌耐药性是抗感染治疗中普遍存在的问题.为了解苛养菌感染及其耐药性,我们对医院1998年1月至2001年1月从感染性病人分离的肺炎链球菌﹑淋病奈瑟菌﹑流感嗜血杆菌的耐药性进行调查.结果报告如下.

    作者:陶相光;杜桂英;刘田林;曹洪林 刊期: 2004年第01期

  • 免疫法与化学法测定隐血的比较

    我院从1998年开始应用胶体金试纸测定隐血[1]并取得了较满意的结果,同时发现在某些特殊标本胶体金法检测结果常与临床不符.为此,对胶体金法与邻联甲苯胺法及尿隐血试纸进行比较,报告如下.

    作者:高茂馗;束国防 刊期: 2004年第01期

  • 紫外线照射对31项血清生化测定结果的影响

    严重急性呼吸综合征(SARS)患者发病后病情进展迅速,急诊检验有时不能等待转送到有相应条件的实验室进行.因此,如何做好病人血样的前处理,杀灭血液中以及沾染在试管壁的病毒亟待解决.

    作者:李丹;敬华;杨晋德;陈兴明;许丽艳 刊期: 2004年第01期

  • UF-100全自动尿沉渣分析仪各检测项目假阳性结果的分析

    为适应尿沉渣分析标准化的要求,UF-100全自动尿沉渣分析仪及Fast-Read10尿沉渣定量分析板在临床检验中的应用越来越广泛.但比较UF-100分析仪法与Fast-Read10分析板法[1]的结果,我们发现前者各检测项目均存在不同程度的假阳性现象.通过对1 600例尿液标本假阳性结果的分析,得出了各检测项目的影响因素,现报道如下.

    作者:马政辉 刊期: 2004年第01期

  • SARS病人核鼓槌体的细胞形态学观察

    目的了解SARS患者中性粒细胞核鼓槌体的临床意义.方法观察220例SARS病人、120例SARS复诊病人、60例服用大剂量激素治疗的非SARS病人、100例高热病人外周血细胞核鼓槌体变化.结果 SARS患者每100个中性粒细胞细胞核有一个鼓槌体的占34个,两个鼓槌体的占17个,三个鼓槌体的占4个;服用大剂量激素治疗的非SARS病人一个核鼓槌体占4个,SARS复诊病人有一个核鼓槌体者占8个.结论中性粒细胞核鼓槌体形成可能与SARS病程有关.

    作者:张立文;钱超;丁志平;冉宝春;王海;傅淑宏;朱红;任军伟;王红霞;秦小玲;丛玉隆 刊期: 2004年第01期

  • 对《用健康人血浆替代血凝质控物的探讨》一文的建议

    拜读贵刊2002年第4期的<用健康人新鲜血浆替代血凝质控物的探讨>一文(以下简称该文),我们复习了有关文献,并参考该实验方法作血凝4项指标的检测,认为作APTT检测用血浆不宜放冰箱冷藏,而应置-20℃冷冻保存.

    作者:赵爱娜;王玉;刘强 刊期: 2004年第01期

  • 抗核周因子抗原片的筛选及临床意义

    目的分析抗核周因子(APF)对类风湿性关节炎(RA)尤其是对早期RA诊断价值,并探讨制备APF抗原片的规律性.方法从152例不同供体中颊黏膜取材制备核周因子抗原片,分别对早期RA、典型RA、非RA的结缔组织病、正常对照共4组对象检测APF;同时检测抗角质蛋白抗体(AKA)、类风湿因子(RF).结果只有50%的供体颊黏膜上皮适宜做APF的抗原片.以1∶20为阳性阈值,APF的阳性率分别为:早期RA 73.3%;典型RA 63.3%;非RA的结缔组织病组3.3%;正常对照组3.3%.RA组明显高于对照组;APF与AKA、RF均有相关性.结论 APF抗原的选择与性别无相关性;结缔组织病人和健康人之间亦无差异.APF对于RA的诊断尤其是早期诊断有较大的价值.

    作者:高丽霞;郭惠芳;刘凤珍;孙彩霞 刊期: 2004年第01期

  • 测定自身免疫溶血性贫血患者未成熟网织红细胞指数的临床价值

    Coombs试验在自身免疫溶血性贫血(autoimmune hemolytic anemia,AIHA)的诊断中大的缺点是敏感性不足,常难以发现早期的 AIHA.网织红细胞(reticulocyte,Ret)是晚幼红细胞脱核后到成熟的红细胞之间的过渡细胞,是反映骨髓造血功能的重要指标.近年来国际上采用流式细胞分析技术测定Ret的RNA含量,用于骨髓移植后骨髓造血恢复的观察[1-2].

    作者:门剑龙 刊期: 2004年第01期

  • 自关节液中分离1株巴西奴卡菌

    Nocardia(奴卡菌)是广泛存在于自然界泥土里的腐生菌,能引起肺部感染或经创伤进入皮下组织引起感染.我科从关节液内分离出1株N.brasiliensis(巴西奴卡菌),报道如下.

    作者:李采青;刘金禄;卢成 刊期: 2004年第01期

  • 十二指肠溃疡患者治疗前后免疫学状态的变化

    十二指肠溃疡(DU)的病因和发病机理尚不完全清楚,但机体的免疫应答在其发生、发展中起着重要作用.本文旨在从细胞分子水平探讨DU的发病机制.

    作者:张勇;何朝霞;尹旭辉;赵玉峰;张细胜;谢刚 刊期: 2004年第01期

  • 《临床检验杂志》投稿须知

    作者: 刊期: 2004年第01期

  • 宫颈糜烂患者液基细胞学检查

    目的通过Thinprep液基细胞学检查,提高早期宫颈癌及宫颈癌前病变诊断率.方法对265例宫颈糜烂者做宫颈脱落细胞液基标本采集和阴道镜活检,用液基标本做薄片细胞学诊断和人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)检测.细胞学诊断采用TBS分级系统,阳性诊断包括意义不明确的不典型鳞状细胞(ASCUS)以上病变,诊断结果与阴道镜活检和HPV DNA阳性检出率对照.结果细胞学检出SCC 4例,HSIL 61例,LSIL 23例,ASCUS 37例.与阴道镜活检阳性符合率分别为SCC 100%(4/4),HSIL 92.4%(61/66),LSIL 71.9%(23/32).两者阳性率比较无显著性差异(P>0.05).HPV DNA阳性检出率与细胞学分级密切相关.结论 Thinprep在宫颈癌及宫颈癌早期病变诊断中敏感性较高,做细胞学和HPV DNA双重检查,可为患者提供较准确、可靠的诊断.

    作者:黄卫彤;韦英群;韦红卫;黄明春 刊期: 2004年第01期

临床检验杂志

临床检验杂志

主管:江苏省卫生厅

主办:江苏省医学会