冯艳铭；李智涛；邵大哓；李振勇；王樯；屈凌波；赵玉芬
由于聚合酶链反应(PCR)技术的高度敏感性和复杂性,分析标准化和质量保证已迫在眉睫.探索一种专门适用于PCR室间质量评价方案(PCR EQA方案)十分必要.EQA是临床实验室和公共卫生实验室质量保证的重要组成部分.1988年美国临床实验室改进法案修正案(CLIA88)规定所有开展中度复杂和高度复杂检验项目的临床实验室都必须首先获得相关检测项目满意的EQA成绩.近几年,PCR技术已经广泛应用于临床实验室,IFCC已把临床诊断分子扩增方法列入EQA计划并将其作为质量评价的一个重要工具[1].
作者：奚伟红 刊期： 2004年第05期
目的对全自动蛋白电泳系统筛查地中海贫血效果进行观察及评价.方法用法国Sebia公司生产的Hydrasys LC电泳仪进行血红蛋白电泳,用其配套的Hyrys扫描系统对HbA、HbA2、HbF、HbH、HbBart's、HbCS区带进行扫描,得出各种血红蛋白含量,用pH8.6醋酸纤维薄膜电泳作HbH、HbBart's、HbA2含量对比,用微量血红蛋白电泳作血红蛋白区带对比;用碱变试验作HbF对比.结果测定标本2472份,检出β地中海贫血173例;α地中海贫血:用pH8.6醋酸纤维薄膜电泳法检出HbH68例、HbBart's 25例,用全自动蛋白电泳系统电泳方法检出HbH 63例、HbBart's 22例,HbCS两种方法均为13例.结论全自动蛋白电泳系统能很好地分辨出增高的HbA2和HbF,对β地中海贫血检查有良好的效果;在α地中海贫血的检查中,对HbCS的检出效果较好,并且能作含量测定,但HbH区带多较淡染,有些标本出现HbBart's区带浓于HbH区带的现象,有假阴性结果出现.
作者：赵应斌；潘柳吟；李丽敏 刊期： 2004年第05期
美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)于2004年1月推出了需氧菌抗菌药物敏感试验执行标准第14版信息增刊(M100-S14),以取代M100-S13(见NCCLS,Wayne,Pennsylvania,2004,24(1):1-159.).下面简要介绍第14版信息增刊主要更新内容,供临床微生物学实验室工作人员参考.
作者：孙长贵；成军 刊期： 2004年第05期
我们用改良三维法,检测了141株铜绿假单胞菌的高产AmpC-β内酰胺酶和超广谱-β内酰胺酶(ESBLs),并对其耐药表型及耐药机制进行分析,报告如下.
作者：刘金波；何海明；周宁；王金富 刊期： 2004年第05期
目的建立内标荧光定量PCR技术检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA,以避免PCR扩增过程中可能出现的假阴性或部分抑制.方法在TaqMan荧光探针杂交PCR技术检测HBV载量的基础上,结合内标参照的方法指示PCR的扩增效率.结果本检测方法具有很好的特异性、重复性,检测敏感度达到1×103 copies/ml.经过对382例乙肝患者标本测定证实,标志物为HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)的血清检出率为100%,标志物为HBsAg(+)、抗HBe(+)、抗HBc(+)的血清检出率为72.0%,与Roche试剂比较,两者的相关系数为0.987.结论本法快速、简便、特异性好、能指示病毒感染程度.
作者：冯艳铭；李智涛；邵大哓；李振勇；王樯；屈凌波；赵玉芬 刊期： 2004年第05期
目的探讨原发性肾病综合征患儿白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)基因表达的变化.方法应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测原发性肾病综合征(idiopathic nephritic syndrome,INS)患儿外周血单个核细胞(PBMC)IL-10 mRNA的变化.结果INS患儿急性期IL-10 mRNA较正常对照组显著升高(P＜0.01),而缓解期与正常对照组相比较无显著差异(P＞0.05).结论检测INS患儿PBMC IL-10可作为观察病情活动的一个免疫学指标.
作者：颜承靖；文怡；吴元俊 刊期： 2004年第05期
目的纯化卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)潜伏相关核抗原(LANA)羧基端编码基因ORF73C原核表达蛋白并分析其免疫原性.方法含重组质粒pGEX-6p-1+ORF73C(pORF73C)的宿主菌BL21经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达.用glutathione Sepharose 4B亲和层析柱纯化表达产物后,以重组3C蛋白酶对融合蛋白进行解离,SDS-PAGE对表达及纯化产物进行鉴定.以纯化的ORF73C蛋白免疫小鼠获得抗血清,建立ELISA检测其免疫原性.结果SDS-PAGE显示蛋白条带大小分别为49 000和23 000,与预期的ORF73C融合蛋白及ORF73C蛋白分子量大小一致;ELISA检测显示,抗ORF73C多抗免疫反应性高于未免疫小鼠血清2倍以上.结论成功获得了纯化的ORF73C蛋白,经ELISA显示其有较强免疫原性.
作者：汤巧；卢春；黄丽；钱超；曾怡；张玲 刊期： 2004年第05期
目的对Sysmex SE-9000+HPC(简称SE-9000+HPC)全自动血液分析仪进行系统评价.方法以国际血液学标准化委员会(ICSH)和美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)制定的评价标准对其性能进行评价,同时对其全血细胞计数(CBC)的参考范围进行测定.结果SE-9000+HPC各项指标的线性良好(r＞0.995),在室温或4℃条件下至少可稳定48 h;不精密度的CV均＜5%;各参数的携带污染率低(＜0.01%);其测定结果与ICSH推荐的参考方法及CD-1600血细胞分析仪结果间相关性均较好(r＞0.97);高胆红素及高血脂对CBC各参数基本无干扰(P＞0.05);与手工法对943例白细胞分类(DC)结果比较,二者嗜中性粒细胞(N)、淋巴细胞(L)、嗜酸性粒细胞(E)、单核细胞(M)及嗜碱性粒细胞(B)的r分别为0.922、0.923、0.853、0.565和0.182;SE-9000+HPC对DC的敏感性、特异性及总有效性分别为85.2%、65.5%和73.4%;对276例DC异常标本的原始细胞及幼稚粒/红细胞筛选的总有效性≥75%;除RBC、Hb及HCT外,843例健康成人的CBC各项指标间无性别差异(P＞0.05).结论SE-9000+HPC各方面性能良好,测定CBC参数快速、准确、精密、可靠、过筛能力强,是一种大中型医院实验室对大批量全血标本的CBC与DC进行快速而有效筛检的全自动血液分析仪.
作者：彭黎明；府伟灵；高行军 刊期： 2004年第05期
全自动生化分析仪存在交叉污染现象的报道较多,但以往报道多见于试剂成分含有高浓度测试物质,通过试剂针携带污染对后面的测试项目造成正误差[1-2].我们在工作中发现硫氰酸汞试剂(测定氯离子)对含有还原型辅酶Ⅱ的尿素试剂存在交叉污染,且对尿素测定造成较大负误差.现将结果报告如下.
作者：李浩；秦晓燕；刘明琴 刊期： 2004年第05期
目的了解不育患者血清抗精子抗体(AsAb)的类型及其吸附精子部位的分布情况,探讨AsAb定位检测在体外受精筛选中的临床应用.方法采用德国欧蒙公司生产的生物薄片试剂盒(间接免疫荧光法)对来我院就诊的1678例不育患者血清进行AsAB检测.结果AsAb总阳性率为7.63%;其中IgM占42.2%,IgG占46.1%,两者同时存在的占8.6%,IgA占3.1%;抗头部的(包括抗头尾部和抗头体尾部)占62.5%,抗体部的未见,抗尾部的占36.7%,抗体尾部的占0.8%.IgM类抗头部的(包括抗头尾部)占84.6%,IgG类抗尾部的占65.7%,IgA类抗头部的占100%.结论血清AsAb类型以IgM和IgG为主,吸附部位以抗头部为主,IgM以抗头部为主,而IgG以抗尾部为主,AsAb定位检测对体外受精治疗者的筛选有独特的价值.
作者：夏乾峰；覃西；钱士匀 刊期： 2004年第05期
由于管型中各种细胞常发生不同程度的变性,在光学显微镜下正确鉴别常常比较困难,我们采用过氧化物酶染色方法可较好地鉴别管型中的细胞成分[1-2].
作者：金浩 刊期： 2004年第05期
严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)是新发生的传染病,2002年11月中旬起在我国流行,迄今还存在许多未解之谜,包括它是否可以通过空气、飞沫、接触、血液等途径传播.国家卫生部和世界卫生组织血液安全和临床技术部(WHO/BCT)分别于2003年4月23日和5月15日下发<关于做好传染性非典型肺炎发生地区血液工作的通知>和提出几点建议[1-2].为探讨是否存在流行前献血者为SARS冠状病毒隐性感染者,我们对163份SARS流行前无偿献血的标本回顾性检测SARS冠状病毒抗体,现报告如下.
作者：彭道波；赖福才；郭叔珍；王燕军；陈金军；侯金林 刊期： 2004年第05期
2003年10月我们从1例上呼吸道感染患者痰中分离培养出1株多重耐药的支气管败血鲍特菌(Bordetella bronchiseptica),报道如下.1病例摘要患者,女,48岁,2003年9月底曾患支气管感染,从痰中分离培养出肺炎克雷伯菌并对大部分抗生素敏感,因此选用头孢噻肟钠每12 h一次静滴5 d,痊愈,痰培养转为阴性.
作者：董卫；马雅静；赵海军 刊期： 2004年第05期
阿尔茨海默病(AD)及血管性痴呆(VD)是老年期痴呆常见的两种类型.老年斑(SP)和神经原纤维缠结(NFT)是AD的两大病理改变.其中β淀粉样蛋白(Aβ)是SP的主要成分,NFT与tau蛋白密切相关,而IL-6在AD神经中枢炎症反应中起重要作用.因此,脑脊液中Aβ1-42、tau蛋白及IL-6水平的测定对AD的诊断具有重要意义.
作者：刘俊恒；潘继承；朱建一；李爱民 刊期： 2004年第05期
Proteus Penneri(潘氏变形杆菌,原称普通变形杆菌生物1群),系临床少见分离菌,我们从一脊柱侧弯患儿的中段尿中分离出1株,现报道如下.1病历摘要患儿,男,12岁,2003年5月7日来我院就诊,主诉为尿痛、小便失禁,体温正常,实验室检查:尿常规:蛋白微量,隐血(+),镜检:白细胞(3+),红细胞1～4/HP;中段尿细菌培养分离出潘氏变形杆菌纯培养.临床用环丙沙星、呋喃妥因治疗,2周后临床症状基本消失,尿常规检查正常,中段尿培养阴性.
作者：承燕萍；李珍大；王卫萍；邵海枫 刊期： 2004年第05期
脂肪酸结合蛋白(FABP)已作为急性心肌梗死(AMI)的早期诊断指标之一[1].本文报告不稳定性心绞痛(UAP)患者血清中FABP的检测结果,探讨其对UAP患者预后的判断价值.
作者：臧荣发 刊期： 2004年第05期
目的探讨胎儿骨髓间质干细胞对CD34+细胞体外扩增的造血支持作用.方法体外分离、纯化胎儿骨髓间质干细胞;Mini-MACS免疫磁珠分选3份脐血CD34+细胞;建立胎儿骨髓间质干细胞与CD34+细胞共培养体系:第1组为单独CD34+细胞培养,第2组为胎儿骨髓间质干细胞+CD34+细胞共培养,第3组为细胞因子(干细胞因子,白细胞介素-3,Flt3配体,血小板生成素)+CD34+细胞共培养,第4组为胎儿骨髓间质干细胞+细胞因子+CD34+细胞共培养.用流式细胞仪检测不同培养时间的CD34+细胞.结果胎儿骨髓间质干细胞表达CD29,CD44;免疫磁珠分选CD34+细胞的平均纯度为97.4%;胎儿骨髓间质干细胞+CD34+细胞共培养28 d,有核CD34+细胞仍占有核细胞的6.43%;CD34+细胞在胎儿骨髓间质干细胞、细胞因子作用下培养28 d,有核细胞总数、CD34+细胞数分别被扩增1.65×105倍、788倍.结论胎儿骨髓间质干细胞可有效扩增脐血造血干/祖细胞.
作者：胡嘉波；许文荣；毛飞；朱伟；孙晓春；钱晖；许化溪 刊期： 2004年第05期
目的探讨应用比例法检测结核分枝杆菌耐药性的可行性及可比性.方法用比例法和绝对浓度法分别检测240株结核分枝杆菌对异烟肼(INH)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)、利福平(RFP)、乙硫异烟胺(TH1321)、对氨基水杨酸(PAS)、丁胺卡那(AN)、卡那霉素(KM)、氧氟沙星(OFLX)、卷曲霉素(CPM)的耐药性.结果SM、RFP、CPM、PAS、AN、KM绝对浓度法和比例法检出的耐药率无显著性差异,而INH、EMB、TH1321、OFLX用比例法测试耐药率均明显高于绝对浓度法(P＜0.01),两法药敏结果INH、SM、EMB、RFP、TH1321、CPM、AN、KM、OFLX和PAS的符合率分别为:81.7%、90.8%、83.8%、97.9%、83.3%、94.2%、97.5%、95.4%、83.3%、92.5%.结论比例法和绝对浓度法耐药率的差别主要与选定的药物临界浓度有关.
作者：赵玉玲 刊期： 2004年第05期
我们设计与制作了一种集采样、运输、检验和保存于一体的粪便标本收集管,经过20多个医院应用,得到了临床、检验工作人员和病员的充分肯定.1设计与制作用食品级聚乙烯为原料,制作形状如图1所示.尖底管状结构,分为三个部件:尖底离心管、管盖和椎状小勺.小勺固定在管盖上.管高98 mm,大管径15 mm,管内容积12 ml,椎状小勺容积0.1 ml,管璧厚度1 mm.见图1a.
作者：蔡美珠；王开正；邓正华 刊期： 2004年第05期
目的探讨脑脊液半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cystatin C)对脑转移瘤的诊断价值.方法采用速率散射比浊法对27例脑转移瘤患者和20例正常对照进行脑脊液中cystatin C、β2-微球蛋白(β2-MG)和白蛋白(Alb)含量测定.结果患者组脑脊液中cystatin C浓度[(1.25±0.43)mg/L]显著低于对照组[(2.81±0.77)mg/L](P＜0.05),β2-MG浓度[(3.18±0.67)mg/L]显著高于对照组[(1.01±0.32)mg/L](P＜0.05),Alb浓度[(325.7±41.5)mg/L]显著高于对照组[(185.5±25.8)mg/L](P＜0.01);三项检测指标的特异性无显著性差异(P＞0.05),cystatin C、Alb检测的敏感性均显著高于β2-MG(P＜0.05),cystatin C与Alb检测的敏感性无显著性差异(P＞0.05).结论脑脊液cystatin C浓度检测对于脑转移瘤的诊断是一个较好的指标.
作者：马荣红；温小波；崔天盆；吴健民 刊期： 2004年第05期
临床检验杂志
主管:江苏省卫生厅
主办：江苏省医学会
