赵玉玲
目的了解ICU感染的病原菌特点及耐药性,为临床经验性用药提供参考依据.方法对本院住ICU的病人标本中检出的病原菌进行统计分析.结果352份阳性标本中革兰阴性杆菌140株占39.8%,其中鲍曼不动杆菌的检出率占首位(28.1%),铜绿假单胞菌次之(9.7%);革兰阳性球菌127株占36.1%,其中金黄色葡萄球菌的检出率占首位(21.9%),表皮葡萄球菌和屎肠球菌次之(均为6.5%);各类真菌85株占24.1%.标本来源以痰为主(86.1%).结论加强ICU感染的病原菌检测非常必要,可指导临床合理用药.
作者:朱建一;潘宇红 刊期: 2004年第05期
目的对Sysmex SE-9000+HPC(简称SE-9000+HPC)全自动血液分析仪进行系统评价.方法以国际血液学标准化委员会(ICSH)和美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)制定的评价标准对其性能进行评价,同时对其全血细胞计数(CBC)的参考范围进行测定.结果SE-9000+HPC各项指标的线性良好(r>0.995),在室温或4℃条件下至少可稳定48 h;不精密度的CV均<5%;各参数的携带污染率低(<0.01%);其测定结果与ICSH推荐的参考方法及CD-1600血细胞分析仪结果间相关性均较好(r>0.97);高胆红素及高血脂对CBC各参数基本无干扰(P>0.05);与手工法对943例白细胞分类(DC)结果比较,二者嗜中性粒细胞(N)、淋巴细胞(L)、嗜酸性粒细胞(E)、单核细胞(M)及嗜碱性粒细胞(B)的r分别为0.922、0.923、0.853、0.565和0.182;SE-9000+HPC对DC的敏感性、特异性及总有效性分别为85.2%、65.5%和73.4%;对276例DC异常标本的原始细胞及幼稚粒/红细胞筛选的总有效性≥75%;除RBC、Hb及HCT外,843例健康成人的CBC各项指标间无性别差异(P>0.05).结论SE-9000+HPC各方面性能良好,测定CBC参数快速、准确、精密、可靠、过筛能力强,是一种大中型医院实验室对大批量全血标本的CBC与DC进行快速而有效筛检的全自动血液分析仪.
作者:彭黎明;府伟灵;高行军 刊期: 2004年第05期
目的建立一种实时荧光逆转录多聚酶链反应(RT-PCR),检测喉鳞状细胞癌组织人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA表达水平,并与传统的RT-PCR进行比较.方法采用TriZOL提取总RNA并将mRNA逆转录成cDNA,然后利用TaqMan技术定量检测喉鳞状细胞癌组织hTERT mRNA.结果实时荧光RT-PCR检测癌组织的阳性率为97.06%,癌旁组织的阳性率为38.24%,差异显著(x2=24.25,P<0.005),与癌旁组织比较,喉鳞状细胞癌组织hTERT mRNA表达水平平均上升17.88倍;传统的RT-PCR检测喉鳞状细胞癌组织和癌旁组织的阳性率分别为73.53%和11.77%,均显著低于实时荧光RT-PCR的阳性率(P<0.01).结论实时荧光RT-PCR是检测喉癌组织hTERT mRNA水平的一种快速有效、灵敏度和特异性更高的方法,hTERT mRNA表达的上调可能是导致喉鳞状细胞癌发生的重要因素.
作者:李一荣;吴健民;黄翔;陈凤花;时杰;胡丽华 刊期: 2004年第05期
目的探讨应用比例法检测结核分枝杆菌耐药性的可行性及可比性.方法用比例法和绝对浓度法分别检测240株结核分枝杆菌对异烟肼(INH)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)、利福平(RFP)、乙硫异烟胺(TH1321)、对氨基水杨酸(PAS)、丁胺卡那(AN)、卡那霉素(KM)、氧氟沙星(OFLX)、卷曲霉素(CPM)的耐药性.结果SM、RFP、CPM、PAS、AN、KM绝对浓度法和比例法检出的耐药率无显著性差异,而INH、EMB、TH1321、OFLX用比例法测试耐药率均明显高于绝对浓度法(P<0.01),两法药敏结果INH、SM、EMB、RFP、TH1321、CPM、AN、KM、OFLX和PAS的符合率分别为:81.7%、90.8%、83.8%、97.9%、83.3%、94.2%、97.5%、95.4%、83.3%、92.5%.结论比例法和绝对浓度法耐药率的差别主要与选定的药物临界浓度有关.
作者:赵玉玲 刊期: 2004年第05期
脂肪酸结合蛋白(FABP)已作为急性心肌梗死(AMI)的早期诊断指标之一[1].本文报告不稳定性心绞痛(UAP)患者血清中FABP的检测结果,探讨其对UAP患者预后的判断价值.
作者:臧荣发 刊期: 2004年第05期
全自动生化分析仪存在交叉污染现象的报道较多,但以往报道多见于试剂成分含有高浓度测试物质,通过试剂针携带污染对后面的测试项目造成正误差[1-2].我们在工作中发现硫氰酸汞试剂(测定氯离子)对含有还原型辅酶Ⅱ的尿素试剂存在交叉污染,且对尿素测定造成较大负误差.现将结果报告如下.
作者:李浩;秦晓燕;刘明琴 刊期: 2004年第05期
目的获得人线粒体肌酸激酶广泛型亚型(uMtCK)的全长基因,在大肠埃希菌中表达,研制抗uMtCK多克隆抗体.方法采用逆转录PCR从培养的肿瘤细胞(Hela细胞)中成功扩增出1 062 bp的uMtCK的基因片段,插入到质粒pMD18-T中,经酶切和测序证实为uMtCK的基因编码序列,再插入到质粒pQE30,转化大肠埃希菌,诱导重组质粒pQE30-uMtCK表达酶融合蛋白.经亲和层析纯化,并进行SDS-PAGE、western blot鉴定及酶活性测定.纯化的uMtCK蛋白免疫家兔制备抗uMtCK多抗.结果RT-PCR扩增出的片段经酶切鉴定和测序证实为uMtCK的基因;在大肠埃希菌M15中实现了高效、可溶性的融合表达,表达量约17%.重组uMtCK具有CK样催化活性,表明原核表达的uMtCK具有类似于天然蛋白质的生物学活性.经免疫印迹分析,制备的抗uMtCK多抗适合作uMtCK的进一步分析之用.结论人uMtCK在大肠埃希菌中实现了高效表达,制备了针对uMtCK的抗体.
作者:张建;王爱华;顾鹏飞;于嘉屏 刊期: 2004年第05期
目的使用特异性抗体和植物血凝素(PHA)建立γ-谷氨酰转肽酶同功酶Ⅱ(γ-glutamyltranspeptidase isoenzymesⅡ,GGTⅡ)特异膜免疫吸附检测法,探讨其对肝细胞癌(HCC)的临床价值.方法从HCC患者血清中提取、分离、纯化GGTⅡ,经神经氨酸酶(NMD)消化后,制备GGTⅡ特异性抗体,将纯化的特异性抗体(anti-GGTⅡ)、NMD和PHA吸附并固定到硝酸纤维素膜上,对HCC及其相关疾病患者血清中GGTⅡ进行定性检测.结果本法检测HCC阳性率达86.6%,特异性为95.7%;对直径小于5 cm的HCC检测阳性率达60.6%,对AFP阴性或低浓度的HCC患者检测阳性率为66.2%.结论GGTⅡ特异膜免疫吸附检测法可作为AFP的补充用于HCC的辅助诊断和早期发现.有简便快速、微量灵敏和价格低廉的特点.
作者:李军;魏曙亚;燕林青;候蓉;原荣;苗爱莲;王香林 刊期: 2004年第05期
我们设计与制作了一种集采样、运输、检验和保存于一体的粪便标本收集管,经过20多个医院应用,得到了临床、检验工作人员和病员的充分肯定.1设计与制作用食品级聚乙烯为原料,制作形状如图1所示.尖底管状结构,分为三个部件:尖底离心管、管盖和椎状小勺.小勺固定在管盖上.管高98 mm,大管径15 mm,管内容积12 ml,椎状小勺容积0.1 ml,管璧厚度1 mm.见图1a.
作者:蔡美珠;王开正;邓正华 刊期: 2004年第05期
目的建立检测人心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)化学发光免疫分析方法.方法用重组cTnI免疫新西兰兔获得抗体,经DEAE-23层析和(NH4)2SO4沉淀纯化后,用碳化二亚胺(EDC)法标记辣根过氧化物酶,Sephadex G-200纯化.优化鲁米诺-H2O2-肉桂酸发光体系,建立了cTnI化学发光免疫分析法.用该法检测138例正常人及病人血清标本,确定正常值参考范围,并与肌ISA法比较.结果所得抗体的滴度为1:8 000.优化后的发光体系为:鲁米诺(4.5 mmol/L),H2O2(7.5 mmol/L),四苯硼钠(0.8 mmol/L),肉桂酸(0.4 mmol/L),比单独用肉桂酸或四苯硼钠作增强剂灵敏度分别增加了1.19和1.05倍.本法检测灵敏度为0.2 ng/ml,线性范围为0.4~50 ng/ml,批内CV平均9.0%,批间CV平均11.8%,回收率为104.2%.Hb浓度在0~50 nmol/L,T-Bil在0~15μmol/L,TG在0~2.0 mmol/L对测定结果无影响.与ELISA比较,两法结果一致(P>0.05),相关系数r=0.9852(P<0.01).用BioCheck标准品为校正物,确定临床诊断参考范围为<2.12 ng/ml,诊断符合率为96.2%.结论建立的cTnI化学发光免疫分析法可常规用于临床检验.
作者:吴国球;劳心珍;孙宏伟;黄立新;张粉梅;钱娟英;卢惠霞 刊期: 2004年第05期
我们对IL-1β与反复自然流产(RSA)的关系进行了研究,结果如下.1材料与方法1.1采集标本收集自我院计划生育门诊及住院患者,年龄23~40岁,其中RSA组17例,无RSA史的先兆流产组34例,正常早孕组(孕期≤12周)41例,健康体检组40例.
作者:黄革玲;李健 刊期: 2004年第05期
近几年来,泌尿生殖道的支原体,即解脲脲原体(Ureaplasma Urealyticum,Uu)和人型支原体(M.hominis,Mh)感染,在国内受到了很大的重视,就其流行性和耐药等方面涌现了大量的文献报道.在这些报道中[1~5],支原体的分离培养和鉴定方法均存在着一些问题.其中,尤为突出的就是仅凭肉汤培养基颜色的变化来判断有无支原体生长,而不是根据它们在固体培养基上的典型菌落形态,这是令人疑惑不解的.我们综合国内外有关文献资料,就肉汤颜色变化与支原体培养阴阳性结论的问题进行探讨,以期得到大家的重视.
作者:赵旺胜;柏兵 刊期: 2004年第05期
目的了解早产儿并发肺炎与支原体(5种)感染的关系.方法收集151例足月产儿和101例早产儿的咽拭子标本,应用套式聚合酶链反应检测解脲脲原体(Uu)、肺炎支原体(Mpn)、人型支原体(Mh)、生殖支原体(Mg)和发酵支原体(Mf)等5种支原体核酸.结果足月产儿Uu、Mpn、Mh、Mg、Mf检出率分别为8.6%,3.3%,2.0%,0%和0%;早产儿分别为41.6%,21.8%,11.9%,4.9%和0%,Uu、Mpn、Mh、Mg 4种支原体检出率显著高于足月产儿(P<0.01).其中49例剖宫早产儿的Uu、Mpn、Mh、Mg检出率也明显高于98例足月剖宫儿.结论新生儿早产与Uu、Mh、Mpn、Mg等支原体感染相关.
作者:朱云霞;周勤;吴志君 刊期: 2004年第05期
目的体外试验人-鼠嵌合抗人组织蛋白酶B(抗Cat B)抗体对Cat B的抑制作用.方法培养1株分泌人-鼠嵌合抗人Cat B抗体细胞,收集细胞培养上清,分离纯化人-鼠嵌合抗人Cat B抗体,用于体外抑制Cat B活性试验.结果该抗体在体外能抑制Cat B活性.结论抗Cat B抗体能特异结合Cat B并抑制其酶活性,将可能用于Cat B过度表达的癌症治疗.
作者:樊晓晖;Kopitar-Jerala Natasa;Premzl Ales;Kos Janko 刊期: 2004年第05期
Proteus Penneri(潘氏变形杆菌,原称普通变形杆菌生物1群),系临床少见分离菌,我们从一脊柱侧弯患儿的中段尿中分离出1株,现报道如下.1病历摘要患儿,男,12岁,2003年5月7日来我院就诊,主诉为尿痛、小便失禁,体温正常,实验室检查:尿常规:蛋白微量,隐血(+),镜检:白细胞(3+),红细胞1~4/HP;中段尿细菌培养分离出潘氏变形杆菌纯培养.临床用环丙沙星、呋喃妥因治疗,2周后临床症状基本消失,尿常规检查正常,中段尿培养阴性.
作者:承燕萍;李珍大;王卫萍;邵海枫 刊期: 2004年第05期
从1例88岁男性、急性泌尿系感染患者尿中,连续两次培养出放射土壤杆菌,报道如下.1细菌生物学特性接种羊血平板35℃过夜,生长菌落呈针尖状,透明、湿润、光滑、边缘整齐,不溶血.原划线处菌苔呈水滴状,48 h后菌落中等大小,麦康凯和尿定位平板上菌落生长良好.
作者:李平;潘玫;孙贞 刊期: 2004年第05期
2003年10月我们从1例上呼吸道感染患者痰中分离培养出1株多重耐药的支气管败血鲍特菌(Bordetella bronchiseptica),报道如下.1病例摘要患者,女,48岁,2003年9月底曾患支气管感染,从痰中分离培养出肺炎克雷伯菌并对大部分抗生素敏感,因此选用头孢噻肟钠每12 h一次静滴5 d,痊愈,痰培养转为阴性.
作者:董卫;马雅静;赵海军 刊期: 2004年第05期
由于管型中各种细胞常发生不同程度的变性,在光学显微镜下正确鉴别常常比较困难,我们采用过氧化物酶染色方法可较好地鉴别管型中的细胞成分[1-2].
作者:金浩 刊期: 2004年第05期
阿尔茨海默病(AD)及血管性痴呆(VD)是老年期痴呆常见的两种类型.老年斑(SP)和神经原纤维缠结(NFT)是AD的两大病理改变.其中β淀粉样蛋白(Aβ)是SP的主要成分,NFT与tau蛋白密切相关,而IL-6在AD神经中枢炎症反应中起重要作用.因此,脑脊液中Aβ1-42、tau蛋白及IL-6水平的测定对AD的诊断具有重要意义.
作者:刘俊恒;潘继承;朱建一;李爱民 刊期: 2004年第05期
目的探讨少数白血病患儿骨髓中两群不同幼稚细胞的免疫表型特点及其性质.方法采用多参数流式细胞术(multiparameter flow cytometry,MCF)及CD45/SSC双对数散点图设门技术分析10例白血病患儿骨髓样本中各群细胞的抗原表达情况.结果10例样本中均检测到两群幼稚细胞群体,一群构成比较高(优势群体,8.5%~76.9%),其中有7例样本存在抗原的异常表达,包括早期、晚期抗原的非同步性表达、错位表达及抗原的缺失;另一群构成比较低(0.7%~13.9%),所有样本均表达B淋巴细胞抗原,为正常的幼稚B淋巴细胞,其中有3例存在抗原的非同步性表达.有7例样本流式细胞术检测的白血病细胞(优势群体)构成比低于形态学结果(P<0.01).结论少数白血病患儿的骨髓除存在白血病细胞之外也可存在数量不等的正常幼稚B淋巴细胞,有时可伴有抗原的异常表达,需与混合白血病相鉴别.在白血病免疫分型中,流式细胞术对幼稚细胞的定性分析比定量分析更具有临床意义.
作者:巩文玉;刘怡;李志刚;吴敏媛 刊期: 2004年第05期