学术投稿

浅谈国内支原体培养和鉴定中存在的问题

赵旺胜;柏兵

关键词:国内, 支原体培养, 肉汤培养基, 人型支原体, 泌尿生殖道, 解脲脲原体, 固体培养基, 颜色变化, 文献资料, 菌落形态, 鉴定方法, 分离培养, 阴阳性, 体生长, 流行性, 耐药, 感染
摘要:近几年来,泌尿生殖道的支原体,即解脲脲原体(Ureaplasma Urealyticum,Uu)和人型支原体(M.hominis,Mh)感染,在国内受到了很大的重视,就其流行性和耐药等方面涌现了大量的文献报道.在这些报道中[1~5],支原体的分离培养和鉴定方法均存在着一些问题.其中,尤为突出的就是仅凭肉汤培养基颜色的变化来判断有无支原体生长,而不是根据它们在固体培养基上的典型菌落形态,这是令人疑惑不解的.我们综合国内外有关文献资料,就肉汤颜色变化与支原体培养阴阳性结论的问题进行探讨,以期得到大家的重视.
临床检验杂志相关文献
  • 过氧化物酶染色鉴别尿细胞管型

    由于管型中各种细胞常发生不同程度的变性,在光学显微镜下正确鉴别常常比较困难,我们采用过氧化物酶染色方法可较好地鉴别管型中的细胞成分[1-2].

    作者:金浩 刊期: 2004年第05期

  • Sysmex SE-9000全自动血液分析仪性能的评价

    目的对Sysmex SE-9000+HPC(简称SE-9000+HPC)全自动血液分析仪进行系统评价.方法以国际血液学标准化委员会(ICSH)和美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)制定的评价标准对其性能进行评价,同时对其全血细胞计数(CBC)的参考范围进行测定.结果SE-9000+HPC各项指标的线性良好(r>0.995),在室温或4℃条件下至少可稳定48 h;不精密度的CV均<5%;各参数的携带污染率低(<0.01%);其测定结果与ICSH推荐的参考方法及CD-1600血细胞分析仪结果间相关性均较好(r>0.97);高胆红素及高血脂对CBC各参数基本无干扰(P>0.05);与手工法对943例白细胞分类(DC)结果比较,二者嗜中性粒细胞(N)、淋巴细胞(L)、嗜酸性粒细胞(E)、单核细胞(M)及嗜碱性粒细胞(B)的r分别为0.922、0.923、0.853、0.565和0.182;SE-9000+HPC对DC的敏感性、特异性及总有效性分别为85.2%、65.5%和73.4%;对276例DC异常标本的原始细胞及幼稚粒/红细胞筛选的总有效性≥75%;除RBC、Hb及HCT外,843例健康成人的CBC各项指标间无性别差异(P>0.05).结论SE-9000+HPC各方面性能良好,测定CBC参数快速、准确、精密、可靠、过筛能力强,是一种大中型医院实验室对大批量全血标本的CBC与DC进行快速而有效筛检的全自动血液分析仪.

    作者:彭黎明;府伟灵;高行军 刊期: 2004年第05期

  • 生化液体质控品与冻干质控品的应用比较

    2002年初江苏省临床检验中心向全省各级医院检验科推荐Beckman液体生化质控品作为生化室内质量控制品.我室当时使用Randox冻干质控品,我们对两种质控品进行回顾性比较.

    作者:罗浔阳;张葵;顾光煜;王丽 刊期: 2004年第05期

  • PCR室间质量控制评价方法研究

    由于聚合酶链反应(PCR)技术的高度敏感性和复杂性,分析标准化和质量保证已迫在眉睫.探索一种专门适用于PCR室间质量评价方案(PCR EQA方案)十分必要.EQA是临床实验室和公共卫生实验室质量保证的重要组成部分.1988年美国临床实验室改进法案修正案(CLIA88)规定所有开展中度复杂和高度复杂检验项目的临床实验室都必须首先获得相关检测项目满意的EQA成绩.近几年,PCR技术已经广泛应用于临床实验室,IFCC已把临床诊断分子扩增方法列入EQA计划并将其作为质量评价的一个重要工具[1].

    作者:奚伟红 刊期: 2004年第05期

  • 人雌激素和孕激素受体的流式细胞术检测及几种不同抗体的应用

    目的建立人类雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)的流式细胞术检测方法,并比较几种不同抗体的应用情况.方法将乳腺癌细胞株MCF-7、T-47d用不同方法固定处理,比较它们与抗体特异性结合的差异,挑选佳细胞固定方法.同时,以与MDA-MB-231(MM231)细胞反应阳性率不大于5%为标准,对不同浓度的ER抗体1D5和MA1-310、PR抗体1A6和PgR636的反应特异性进行分析比较,并用于临床样本的检测.结果经0.25%多聚甲醛(PFA)预固定、75%乙醇固定、核分离液处理后的细胞,与抗体特异性反应的荧光强度大;在1~4μg/100μl浓度范围内,1D5与MM231反应阳性率低于5%,与MCF-7反应阳性率大于95%.同浓度的MA1-310与MM231和MCF-7反应时的阳性细胞率相当;1A6 1:100稀释,PgR636 1:10~1:200稀释,与MM231反应阳性率低于5%,与T-47d反应阳性率大于95%;用1D5(2μg)、1A6和PgR636(1:100)对12例临床乳腺癌样本ER、PR检测结果分别为(64.36±27.92)%、(53.95±28.17)%和(55.63±26.93)%.结论细胞经0.25%PFA预固定、75%乙醇固定、核分离液处理后,用一定浓度范围的1D5、1A6和PgR636可分别对ER、PR进行流式细胞术定量检测.本研究方法可用于临床样本的检测.

    作者:陶德定;江敏;吴剑宏;冯永东;龚建平 刊期: 2004年第05期

  • 浅谈国内支原体培养和鉴定中存在的问题

    近几年来,泌尿生殖道的支原体,即解脲脲原体(Ureaplasma Urealyticum,Uu)和人型支原体(M.hominis,Mh)感染,在国内受到了很大的重视,就其流行性和耐药等方面涌现了大量的文献报道.在这些报道中[1~5],支原体的分离培养和鉴定方法均存在着一些问题.其中,尤为突出的就是仅凭肉汤培养基颜色的变化来判断有无支原体生长,而不是根据它们在固体培养基上的典型菌落形态,这是令人疑惑不解的.我们综合国内外有关文献资料,就肉汤颜色变化与支原体培养阴阳性结论的问题进行探讨,以期得到大家的重视.

    作者:赵旺胜;柏兵 刊期: 2004年第05期

  • 血清IL-1 β测定用于判别自然流产

    我们对IL-1β与反复自然流产(RSA)的关系进行了研究,结果如下.1材料与方法1.1采集标本收集自我院计划生育门诊及住院患者,年龄23~40岁,其中RSA组17例,无RSA史的先兆流产组34例,正常早孕组(孕期≤12周)41例,健康体检组40例.

    作者:黄革玲;李健 刊期: 2004年第05期

  • 2种方法检测结核分枝杆菌对10种药物耐药性的比较

    目的探讨应用比例法检测结核分枝杆菌耐药性的可行性及可比性.方法用比例法和绝对浓度法分别检测240株结核分枝杆菌对异烟肼(INH)、链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)、利福平(RFP)、乙硫异烟胺(TH1321)、对氨基水杨酸(PAS)、丁胺卡那(AN)、卡那霉素(KM)、氧氟沙星(OFLX)、卷曲霉素(CPM)的耐药性.结果SM、RFP、CPM、PAS、AN、KM绝对浓度法和比例法检出的耐药率无显著性差异,而INH、EMB、TH1321、OFLX用比例法测试耐药率均明显高于绝对浓度法(P<0.01),两法药敏结果INH、SM、EMB、RFP、TH1321、CPM、AN、KM、OFLX和PAS的符合率分别为:81.7%、90.8%、83.8%、97.9%、83.3%、94.2%、97.5%、95.4%、83.3%、92.5%.结论比例法和绝对浓度法耐药率的差别主要与选定的药物临界浓度有关.

    作者:赵玉玲 刊期: 2004年第05期

  • 密闭式粪便标本收集管的设计与制作

    我们设计与制作了一种集采样、运输、检验和保存于一体的粪便标本收集管,经过20多个医院应用,得到了临床、检验工作人员和病员的充分肯定.1设计与制作用食品级聚乙烯为原料,制作形状如图1所示.尖底管状结构,分为三个部件:尖底离心管、管盖和椎状小勺.小勺固定在管盖上.管高98 mm,大管径15 mm,管内容积12 ml,椎状小勺容积0.1 ml,管璧厚度1 mm.见图1a.

    作者:蔡美珠;王开正;邓正华 刊期: 2004年第05期

  • 脑转移瘤患者脑脊液半胱氨酸蛋白酶抑制剂C变化的临床意义

    目的探讨脑脊液半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cystatin C)对脑转移瘤的诊断价值.方法采用速率散射比浊法对27例脑转移瘤患者和20例正常对照进行脑脊液中cystatin C、β2-微球蛋白(β2-MG)和白蛋白(Alb)含量测定.结果患者组脑脊液中cystatin C浓度[(1.25±0.43)mg/L]显著低于对照组[(2.81±0.77)mg/L](P<0.05),β2-MG浓度[(3.18±0.67)mg/L]显著高于对照组[(1.01±0.32)mg/L](P<0.05),Alb浓度[(325.7±41.5)mg/L]显著高于对照组[(185.5±25.8)mg/L](P<0.01);三项检测指标的特异性无显著性差异(P>0.05),cystatin C、Alb检测的敏感性均显著高于β2-MG(P<0.05),cystatin C与Alb检测的敏感性无显著性差异(P>0.05).结论脑脊液cystatin C浓度检测对于脑转移瘤的诊断是一个较好的指标.

    作者:马荣红;温小波;崔天盆;吴健民 刊期: 2004年第05期

  • NCCLS抗菌药物敏感性试验执行标准第14版信息增刊更新内容介绍

    美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)于2004年1月推出了需氧菌抗菌药物敏感试验执行标准第14版信息增刊(M100-S14),以取代M100-S13(见NCCLS,Wayne,Pennsylvania,2004,24(1):1-159.).下面简要介绍第14版信息增刊主要更新内容,供临床微生物学实验室工作人员参考.

    作者:孙长贵;成军 刊期: 2004年第05期

  • 早产儿并发肺炎与5种支原体感染的关系

    目的了解早产儿并发肺炎与支原体(5种)感染的关系.方法收集151例足月产儿和101例早产儿的咽拭子标本,应用套式聚合酶链反应检测解脲脲原体(Uu)、肺炎支原体(Mpn)、人型支原体(Mh)、生殖支原体(Mg)和发酵支原体(Mf)等5种支原体核酸.结果足月产儿Uu、Mpn、Mh、Mg、Mf检出率分别为8.6%,3.3%,2.0%,0%和0%;早产儿分别为41.6%,21.8%,11.9%,4.9%和0%,Uu、Mpn、Mh、Mg 4种支原体检出率显著高于足月产儿(P<0.01).其中49例剖宫早产儿的Uu、Mpn、Mh、Mg检出率也明显高于98例足月剖宫儿.结论新生儿早产与Uu、Mh、Mpn、Mg等支原体感染相关.

    作者:朱云霞;周勤;吴志君 刊期: 2004年第05期

  • 从痰标本中分离出1株多重耐药的支气管败血鲍特菌

    2003年10月我们从1例上呼吸道感染患者痰中分离培养出1株多重耐药的支气管败血鲍特菌(Bordetella bronchiseptica),报道如下.1病例摘要患者,女,48岁,2003年9月底曾患支气管感染,从痰中分离培养出肺炎克雷伯菌并对大部分抗生素敏感,因此选用头孢噻肟钠每12 h一次静滴5 d,痊愈,痰培养转为阴性.

    作者:董卫;马雅静;赵海军 刊期: 2004年第05期

  • HBsAg 阴性的慢性乙型肝炎患者病毒血症水平与临床的关系

    HBsAg阴性的HBV感染发生率约占乙型肝炎患者的10%~25%[1].此种HBsAg阴性的HBV感染是临床不明原因慢性肝炎的常见病因[2].为探讨HBsAg阴性慢性乙型肝炎患者病毒血症水平状况及其与临床的关系,重叠HCV感染时的影响,我们对44例HBsAg阴性慢性乙型肝炎患者血清HBV标志物(HBVM)及HBV DNA含量、肝内HBcAg表达进行了检测,并与肝组织病理学结果比较,报告如下.

    作者:刘晓梅;张世兰 刊期: 2004年第05期

  • 尿蛋白SDS-琼脂糖凝胶电泳方法建立及临床应用

    目的建立应用于临床的尿蛋白十二烷基硫酸钠(SDS)-琼脂糖凝胶(AGE)电泳方法.方法分别对Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型4种琼脂糖、不同的缓冲对、电压和电泳时间进行实验,确定佳的分离条件,建立测定方法.结果当Ⅳ型琼脂糖凝胶浓度为40 g/L,SDS含量为1 g/L,在pH 7.0的AMP-咪唑-HCl缓冲体系下进行电泳,可以有效地将尿蛋白按分子量大小进行分离.57份临床尿蛋白阳性标本电泳结果表明,生理性蛋白尿24例,中、高分子蛋白尿5例,小分子蛋白尿11例和混合型蛋白尿17例.结论本法具有分离效果好、操作简便、灵敏度高、成本低廉等优点,可以将尿蛋白按分子量大小分为小分子、中分子以及混合型,对肾脏疾病的受损部位和损伤程度的判断具有较高的价值,适于基层实验室的常规开展.

    作者:吴惠毅;孙召东;刘安定;仇为民;赵绍林;杨新玲 刊期: 2004年第05期

  • 肾病综合征患儿IL-10基因表达的检测及其意义

    目的探讨原发性肾病综合征患儿白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)基因表达的变化.方法应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测原发性肾病综合征(idiopathic nephritic syndrome,INS)患儿外周血单个核细胞(PBMC)IL-10 mRNA的变化.结果INS患儿急性期IL-10 mRNA较正常对照组显著升高(P<0.01),而缓解期与正常对照组相比较无显著差异(P>0.05).结论检测INS患儿PBMC IL-10可作为观察病情活动的一个免疫学指标.

    作者:颜承靖;文怡;吴元俊 刊期: 2004年第05期

  • 舒巴坦单剂对鲍曼不动杆菌的体外抑菌活性研究

    目的探讨在β-内酰胺类抗生素/舒巴坦联合制剂对鲍曼不动杆菌的抑菌作用中,舒巴坦发挥何种作用.方法将舒巴坦配制成10μg/片和30μg/片2种浓度的纸片,应用K-B法检测舒巴坦单剂纸片以及氨苄西林/舒巴坦、头孢哌酮/舒巴坦对鲍曼不动杆菌的抑菌圈直径,同时增加了舒巴坦分别与哌拉西林、替卡西林、头孢唑林、头孢呋辛、头孢三嗪、头孢噻肟等6种药物组成的复合纸片.并选择菌株进行舒巴坦对鲍曼不动杆菌的低抑菌浓度试验,用革兰染色法和电镜观察鲍曼不动杆菌的菌体及细胞壁的改变.结果无论是氨苄西林/舒巴坦、头孢哌酮/舒巴坦还是另外6种β-内酰胺类药物与舒巴坦的组合制剂的抑菌圈直径与舒巴坦单剂的抑菌圈直径相比均无显著性差异(P>0.05).革兰染色光镜下可见菌体改变为长丝状,电镜下可见在亚抑菌浓度时细胞壁缺失.结论对鲍曼不动杆菌体外的抗菌试验显示,舒巴坦对该菌的细胞壁损伤在复合制剂中起主要作用,和舒巴坦与何种主药组合对β-内酰胺酶的抑制作用无明显相关性.

    作者:褚少朋;邵海枫;李珍大;王卫萍;曹红琴 刊期: 2004年第05期

  • KSHV ORF73C基因原核表达产物的纯化与免疫原性分析

    目的纯化卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)潜伏相关核抗原(LANA)羧基端编码基因ORF73C原核表达蛋白并分析其免疫原性.方法含重组质粒pGEX-6p-1+ORF73C(pORF73C)的宿主菌BL21经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达.用glutathione Sepharose 4B亲和层析柱纯化表达产物后,以重组3C蛋白酶对融合蛋白进行解离,SDS-PAGE对表达及纯化产物进行鉴定.以纯化的ORF73C蛋白免疫小鼠获得抗血清,建立ELISA检测其免疫原性.结果SDS-PAGE显示蛋白条带大小分别为49 000和23 000,与预期的ORF73C融合蛋白及ORF73C蛋白分子量大小一致;ELISA检测显示,抗ORF73C多抗免疫反应性高于未免疫小鼠血清2倍以上.结论成功获得了纯化的ORF73C蛋白,经ELISA显示其有较强免疫原性.

    作者:汤巧;卢春;黄丽;钱超;曾怡;张玲 刊期: 2004年第05期

  • 白血病患儿骨髓中两群不同幼稚细胞的免疫表型分析

    目的探讨少数白血病患儿骨髓中两群不同幼稚细胞的免疫表型特点及其性质.方法采用多参数流式细胞术(multiparameter flow cytometry,MCF)及CD45/SSC双对数散点图设门技术分析10例白血病患儿骨髓样本中各群细胞的抗原表达情况.结果10例样本中均检测到两群幼稚细胞群体,一群构成比较高(优势群体,8.5%~76.9%),其中有7例样本存在抗原的异常表达,包括早期、晚期抗原的非同步性表达、错位表达及抗原的缺失;另一群构成比较低(0.7%~13.9%),所有样本均表达B淋巴细胞抗原,为正常的幼稚B淋巴细胞,其中有3例存在抗原的非同步性表达.有7例样本流式细胞术检测的白血病细胞(优势群体)构成比低于形态学结果(P<0.01).结论少数白血病患儿的骨髓除存在白血病细胞之外也可存在数量不等的正常幼稚B淋巴细胞,有时可伴有抗原的异常表达,需与混合白血病相鉴别.在白血病免疫分型中,流式细胞术对幼稚细胞的定性分析比定量分析更具有临床意义.

    作者:巩文玉;刘怡;李志刚;吴敏媛 刊期: 2004年第05期

  • 应用全自动蛋白电泳系统检查地中海贫血

    目的对全自动蛋白电泳系统筛查地中海贫血效果进行观察及评价.方法用法国Sebia公司生产的Hydrasys LC电泳仪进行血红蛋白电泳,用其配套的Hyrys扫描系统对HbA、HbA2、HbF、HbH、HbBart's、HbCS区带进行扫描,得出各种血红蛋白含量,用pH8.6醋酸纤维薄膜电泳作HbH、HbBart's、HbA2含量对比,用微量血红蛋白电泳作血红蛋白区带对比;用碱变试验作HbF对比.结果测定标本2472份,检出β地中海贫血173例;α地中海贫血:用pH8.6醋酸纤维薄膜电泳法检出HbH68例、HbBart's 25例,用全自动蛋白电泳系统电泳方法检出HbH 63例、HbBart's 22例,HbCS两种方法均为13例.结论全自动蛋白电泳系统能很好地分辨出增高的HbA2和HbF,对β地中海贫血检查有良好的效果;在α地中海贫血的检查中,对HbCS的检出效果较好,并且能作含量测定,但HbH区带多较淡染,有些标本出现HbBart's区带浓于HbH区带的现象,有假阴性结果出现.

    作者:赵应斌;潘柳吟;李丽敏 刊期: 2004年第05期

临床检验杂志

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主办:江苏省医学会