黄革玲；李健
我们用改良三维法,检测了141株铜绿假单胞菌的高产AmpC-β内酰胺酶和超广谱-β内酰胺酶(ESBLs),并对其耐药表型及耐药机制进行分析,报告如下.
作者：刘金波；何海明；周宁；王金富 刊期： 2004年第05期
目的建立内标荧光定量PCR技术检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA,以避免PCR扩增过程中可能出现的假阴性或部分抑制.方法在TaqMan荧光探针杂交PCR技术检测HBV载量的基础上,结合内标参照的方法指示PCR的扩增效率.结果本检测方法具有很好的特异性、重复性,检测敏感度达到1×103 copies/ml.经过对382例乙肝患者标本测定证实,标志物为HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗HBc(+)的血清检出率为100%,标志物为HBsAg(+)、抗HBe(+)、抗HBc(+)的血清检出率为72.0%,与Roche试剂比较,两者的相关系数为0.987.结论本法快速、简便、特异性好、能指示病毒感染程度.
作者：冯艳铭；李智涛；邵大哓；李振勇；王樯；屈凌波；赵玉芬 刊期： 2004年第05期
2003年10月我们从1例上呼吸道感染患者痰中分离培养出1株多重耐药的支气管败血鲍特菌(Bordetella bronchiseptica),报道如下.1病例摘要患者,女,48岁,2003年9月底曾患支气管感染,从痰中分离培养出肺炎克雷伯菌并对大部分抗生素敏感,因此选用头孢噻肟钠每12 h一次静滴5 d,痊愈,痰培养转为阴性.
作者：董卫；马雅静；赵海军 刊期： 2004年第05期
目的探讨脑脊液半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cystatin C)对脑转移瘤的诊断价值.方法采用速率散射比浊法对27例脑转移瘤患者和20例正常对照进行脑脊液中cystatin C、β2-微球蛋白(β2-MG)和白蛋白(Alb)含量测定.结果患者组脑脊液中cystatin C浓度[(1.25±0.43)mg/L]显著低于对照组[(2.81±0.77)mg/L](P＜0.05),β2-MG浓度[(3.18±0.67)mg/L]显著高于对照组[(1.01±0.32)mg/L](P＜0.05),Alb浓度[(325.7±41.5)mg/L]显著高于对照组[(185.5±25.8)mg/L](P＜0.01);三项检测指标的特异性无显著性差异(P＞0.05),cystatin C、Alb检测的敏感性均显著高于β2-MG(P＜0.05),cystatin C与Alb检测的敏感性无显著性差异(P＞0.05).结论脑脊液cystatin C浓度检测对于脑转移瘤的诊断是一个较好的指标.
作者：马荣红；温小波；崔天盆；吴健民 刊期： 2004年第05期
近几年来,泌尿生殖道的支原体,即解脲脲原体(Ureaplasma Urealyticum,Uu)和人型支原体(M.hominis,Mh)感染,在国内受到了很大的重视,就其流行性和耐药等方面涌现了大量的文献报道.在这些报道中[1～5],支原体的分离培养和鉴定方法均存在着一些问题.其中,尤为突出的就是仅凭肉汤培养基颜色的变化来判断有无支原体生长,而不是根据它们在固体培养基上的典型菌落形态,这是令人疑惑不解的.我们综合国内外有关文献资料,就肉汤颜色变化与支原体培养阴阳性结论的问题进行探讨,以期得到大家的重视.
作者：赵旺胜；柏兵 刊期： 2004年第05期
目的建立快速简便的SARS冠状病毒RNA提取方法.方法采用异硫氰酸胍-玻璃粉法提取病毒RNA,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测SARS冠状病毒RNA.结果24例SARS患者的粪便和痰液标本同时采用异硫氰酸胍-玻璃粉法和QIAGEN公司的试剂盒提取SARS冠状病毒RNA,其粪便标本RT-PCR的阳性率分别为83.3%(20/24)和100-0%(24/24);痰液标本RT-PCR的阳性率分别为16.7%(4/24)和20.8%(5/24).异硫氰酸胍-玻璃粉法RT-PCR的阳性率与洗脱温度有关.结论异硫氰酸胍-玻璃粉法提取SARS冠状病毒RNA简便、快速、经济,可用于临床.
作者：戴二黑；郭兆彪；王效义；杨瑞馥 刊期： 2004年第05期
目的了解早产儿并发肺炎与支原体(5种)感染的关系.方法收集151例足月产儿和101例早产儿的咽拭子标本,应用套式聚合酶链反应检测解脲脲原体(Uu)、肺炎支原体(Mpn)、人型支原体(Mh)、生殖支原体(Mg)和发酵支原体(Mf)等5种支原体核酸.结果足月产儿Uu、Mpn、Mh、Mg、Mf检出率分别为8.6%,3.3%,2.0%,0%和0%;早产儿分别为41.6%,21.8%,11.9%,4.9%和0%,Uu、Mpn、Mh、Mg 4种支原体检出率显著高于足月产儿(P＜0.01).其中49例剖宫早产儿的Uu、Mpn、Mh、Mg检出率也明显高于98例足月剖宫儿.结论新生儿早产与Uu、Mh、Mpn、Mg等支原体感染相关.
作者：朱云霞；周勤；吴志君 刊期： 2004年第05期
目的纯化卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)潜伏相关核抗原(LANA)羧基端编码基因ORF73C原核表达蛋白并分析其免疫原性.方法含重组质粒pGEX-6p-1+ORF73C(pORF73C)的宿主菌BL21经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达.用glutathione Sepharose 4B亲和层析柱纯化表达产物后,以重组3C蛋白酶对融合蛋白进行解离,SDS-PAGE对表达及纯化产物进行鉴定.以纯化的ORF73C蛋白免疫小鼠获得抗血清,建立ELISA检测其免疫原性.结果SDS-PAGE显示蛋白条带大小分别为49 000和23 000,与预期的ORF73C融合蛋白及ORF73C蛋白分子量大小一致;ELISA检测显示,抗ORF73C多抗免疫反应性高于未免疫小鼠血清2倍以上.结论成功获得了纯化的ORF73C蛋白,经ELISA显示其有较强免疫原性.
作者：汤巧；卢春；黄丽；钱超；曾怡；张玲 刊期： 2004年第05期
目的体外试验人-鼠嵌合抗人组织蛋白酶B(抗Cat B)抗体对Cat B的抑制作用.方法培养1株分泌人-鼠嵌合抗人Cat B抗体细胞,收集细胞培养上清,分离纯化人-鼠嵌合抗人Cat B抗体,用于体外抑制Cat B活性试验.结果该抗体在体外能抑制Cat B活性.结论抗Cat B抗体能特异结合Cat B并抑制其酶活性,将可能用于Cat B过度表达的癌症治疗.
作者：樊晓晖；Kopitar-Jerala Natasa；Premzl Ales；Kos Janko 刊期： 2004年第05期
我们对IL-1β与反复自然流产(RSA)的关系进行了研究,结果如下.1材料与方法1.1采集标本收集自我院计划生育门诊及住院患者,年龄23～40岁,其中RSA组17例,无RSA史的先兆流产组34例,正常早孕组(孕期≤12周)41例,健康体检组40例.
作者：黄革玲；李健 刊期： 2004年第05期
目的研制适用于KX-21血液分析仪的配套试剂.方法用季铵盐型表面活性剂破坏红细胞,进行白细胞计数与分类;用非氰化物还原法进行血红蛋白的测定;以无机盐为主体组成中性等渗稀释液,建立配套的KX-21血液分析检测试剂.结果用自制的KX-21配套试剂和原装配套试剂分别检测全血样品及末梢血稀释样品各200份,两套试剂所测得的红细胞(RBC)、血红蛋白(Hb)、平均红细胞体积(MCV)、血小板(PLT)、白细胞(WBC)、白细胞分类小、中、大(W-SCR、W-MCR、W-LCR)等相关系数均大于0.95;全血样品的各项检测指标CV值均小于10%.结论自制KX-21配套试剂与原装试剂可比性实验表明,两者结果无显著性差异,自配的KX-21配套试剂完全可以替代原装进口试剂,并不影响检测结果,还可达到节约成本的目的.
作者：陈佑明；杨恒波；黄敬 刊期： 2004年第05期
目的对全自动蛋白电泳系统筛查地中海贫血效果进行观察及评价.方法用法国Sebia公司生产的Hydrasys LC电泳仪进行血红蛋白电泳,用其配套的Hyrys扫描系统对HbA、HbA2、HbF、HbH、HbBart's、HbCS区带进行扫描,得出各种血红蛋白含量,用pH8.6醋酸纤维薄膜电泳作HbH、HbBart's、HbA2含量对比,用微量血红蛋白电泳作血红蛋白区带对比;用碱变试验作HbF对比.结果测定标本2472份,检出β地中海贫血173例;α地中海贫血:用pH8.6醋酸纤维薄膜电泳法检出HbH68例、HbBart's 25例,用全自动蛋白电泳系统电泳方法检出HbH 63例、HbBart's 22例,HbCS两种方法均为13例.结论全自动蛋白电泳系统能很好地分辨出增高的HbA2和HbF,对β地中海贫血检查有良好的效果;在α地中海贫血的检查中,对HbCS的检出效果较好,并且能作含量测定,但HbH区带多较淡染,有些标本出现HbBart's区带浓于HbH区带的现象,有假阴性结果出现.
作者：赵应斌；潘柳吟；李丽敏 刊期： 2004年第05期
目的建立检测人心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)化学发光免疫分析方法.方法用重组cTnI免疫新西兰兔获得抗体,经DEAE-23层析和(NH4)2SO4沉淀纯化后,用碳化二亚胺(EDC)法标记辣根过氧化物酶,Sephadex G-200纯化.优化鲁米诺-H2O2-肉桂酸发光体系,建立了cTnI化学发光免疫分析法.用该法检测138例正常人及病人血清标本,确定正常值参考范围,并与肌ISA法比较.结果所得抗体的滴度为1:8 000.优化后的发光体系为:鲁米诺(4.5 mmol/L),H2O2(7.5 mmol/L),四苯硼钠(0.8 mmol/L),肉桂酸(0.4 mmol/L),比单独用肉桂酸或四苯硼钠作增强剂灵敏度分别增加了1.19和1.05倍.本法检测灵敏度为0.2 ng/ml,线性范围为0.4～50 ng/ml,批内CV平均9.0%,批间CV平均11.8%,回收率为104.2%.Hb浓度在0～50 nmol/L,T-Bil在0～15μmol/L,TG在0～2.0 mmol/L对测定结果无影响.与ELISA比较,两法结果一致(P＞0.05),相关系数r=0.9852(P＜0.01).用BioCheck标准品为校正物,确定临床诊断参考范围为＜2.12 ng/ml,诊断符合率为96.2%.结论建立的cTnI化学发光免疫分析法可常规用于临床检验.
作者：吴国球；劳心珍；孙宏伟；黄立新；张粉梅；钱娟英；卢惠霞 刊期： 2004年第05期
美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)于2004年1月推出了需氧菌抗菌药物敏感试验执行标准第14版信息增刊(M100-S14),以取代M100-S13(见NCCLS,Wayne,Pennsylvania,2004,24(1):1-159.).下面简要介绍第14版信息增刊主要更新内容,供临床微生物学实验室工作人员参考.
作者：孙长贵；成军 刊期： 2004年第05期
目的探讨少数白血病患儿骨髓中两群不同幼稚细胞的免疫表型特点及其性质.方法采用多参数流式细胞术(multiparameter flow cytometry,MCF)及CD45/SSC双对数散点图设门技术分析10例白血病患儿骨髓样本中各群细胞的抗原表达情况.结果10例样本中均检测到两群幼稚细胞群体,一群构成比较高(优势群体,8.5%～76.9%),其中有7例样本存在抗原的异常表达,包括早期、晚期抗原的非同步性表达、错位表达及抗原的缺失;另一群构成比较低(0.7%～13.9%),所有样本均表达B淋巴细胞抗原,为正常的幼稚B淋巴细胞,其中有3例存在抗原的非同步性表达.有7例样本流式细胞术检测的白血病细胞(优势群体)构成比低于形态学结果(P＜0.01).结论少数白血病患儿的骨髓除存在白血病细胞之外也可存在数量不等的正常幼稚B淋巴细胞,有时可伴有抗原的异常表达,需与混合白血病相鉴别.在白血病免疫分型中,流式细胞术对幼稚细胞的定性分析比定量分析更具有临床意义.
作者：巩文玉；刘怡；李志刚；吴敏媛 刊期： 2004年第05期
目的了解ICU感染的病原菌特点及耐药性,为临床经验性用药提供参考依据.方法对本院住ICU的病人标本中检出的病原菌进行统计分析.结果352份阳性标本中革兰阴性杆菌140株占39.8%,其中鲍曼不动杆菌的检出率占首位(28.1%),铜绿假单胞菌次之(9.7%);革兰阳性球菌127株占36.1%,其中金黄色葡萄球菌的检出率占首位(21.9%),表皮葡萄球菌和屎肠球菌次之(均为6.5%);各类真菌85株占24.1%.标本来源以痰为主(86.1%).结论加强ICU感染的病原菌检测非常必要,可指导临床合理用药.
作者：朱建一；潘宇红 刊期： 2004年第05期
目的了解不育患者血清抗精子抗体(AsAb)的类型及其吸附精子部位的分布情况,探讨AsAb定位检测在体外受精筛选中的临床应用.方法采用德国欧蒙公司生产的生物薄片试剂盒(间接免疫荧光法)对来我院就诊的1678例不育患者血清进行AsAB检测.结果AsAb总阳性率为7.63%;其中IgM占42.2%,IgG占46.1%,两者同时存在的占8.6%,IgA占3.1%;抗头部的(包括抗头尾部和抗头体尾部)占62.5%,抗体部的未见,抗尾部的占36.7%,抗体尾部的占0.8%.IgM类抗头部的(包括抗头尾部)占84.6%,IgG类抗尾部的占65.7%,IgA类抗头部的占100%.结论血清AsAb类型以IgM和IgG为主,吸附部位以抗头部为主,IgM以抗头部为主,而IgG以抗尾部为主,AsAb定位检测对体外受精治疗者的筛选有独特的价值.
作者：夏乾峰；覃西；钱士匀 刊期： 2004年第05期
由于聚合酶链反应(PCR)技术的高度敏感性和复杂性,分析标准化和质量保证已迫在眉睫.探索一种专门适用于PCR室间质量评价方案(PCR EQA方案)十分必要.EQA是临床实验室和公共卫生实验室质量保证的重要组成部分.1988年美国临床实验室改进法案修正案(CLIA88)规定所有开展中度复杂和高度复杂检验项目的临床实验室都必须首先获得相关检测项目满意的EQA成绩.近几年,PCR技术已经广泛应用于临床实验室,IFCC已把临床诊断分子扩增方法列入EQA计划并将其作为质量评价的一个重要工具[1].
作者：奚伟红 刊期： 2004年第05期
全自动生化分析仪存在交叉污染现象的报道较多,但以往报道多见于试剂成分含有高浓度测试物质,通过试剂针携带污染对后面的测试项目造成正误差[1-2].我们在工作中发现硫氰酸汞试剂(测定氯离子)对含有还原型辅酶Ⅱ的尿素试剂存在交叉污染,且对尿素测定造成较大负误差.现将结果报告如下.
作者：李浩；秦晓燕；刘明琴 刊期： 2004年第05期
目的对Sysmex SE-9000+HPC(简称SE-9000+HPC)全自动血液分析仪进行系统评价.方法以国际血液学标准化委员会(ICSH)和美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)制定的评价标准对其性能进行评价,同时对其全血细胞计数(CBC)的参考范围进行测定.结果SE-9000+HPC各项指标的线性良好(r＞0.995),在室温或4℃条件下至少可稳定48 h;不精密度的CV均＜5%;各参数的携带污染率低(＜0.01%);其测定结果与ICSH推荐的参考方法及CD-1600血细胞分析仪结果间相关性均较好(r＞0.97);高胆红素及高血脂对CBC各参数基本无干扰(P＞0.05);与手工法对943例白细胞分类(DC)结果比较,二者嗜中性粒细胞(N)、淋巴细胞(L)、嗜酸性粒细胞(E)、单核细胞(M)及嗜碱性粒细胞(B)的r分别为0.922、0.923、0.853、0.565和0.182;SE-9000+HPC对DC的敏感性、特异性及总有效性分别为85.2%、65.5%和73.4%;对276例DC异常标本的原始细胞及幼稚粒/红细胞筛选的总有效性≥75%;除RBC、Hb及HCT外,843例健康成人的CBC各项指标间无性别差异(P＞0.05).结论SE-9000+HPC各方面性能良好,测定CBC参数快速、准确、精密、可靠、过筛能力强,是一种大中型医院实验室对大批量全血标本的CBC与DC进行快速而有效筛检的全自动血液分析仪.
作者：彭黎明；府伟灵；高行军 刊期： 2004年第05期
临床检验杂志
主管:江苏省卫生厅
主办：江苏省医学会
