王涛;王峰;何炜;单争争;樊青霞
目的:探讨丙泊酚对HepG2肝母细胞瘤细胞侵袭能力的影响及相关机制.方法:用不同质量浓度(0、3、6、9和12 mg/L)丙泊酚培养HepG2细胞24h后,通过细胞侵袭实验检测侵袭率;培养24、48和72 h后用MTT法检测细胞活性;培养48 h后采用RT-PCR和Western blot法检测细胞中MMP-2、MMP-9 mRNA及MMP-2、MMP-9和TIMP-1蛋白的表达.结果:随丙泊酚质量浓度的增加,HepG2细胞的侵袭能力逐渐降低(F=4 883.900,P<0.001),细胞活性逐渐降低(F=38.334,P<0.001),MMP-2及MMP-9 mRNA及蛋白的表达亦逐渐降低(P<0.05),而TIMP-1蛋白的表达逐渐升高(F =44.918,P<0.001).结论:丙泊酚能降低HepG2细胞的侵袭能力及细胞活性,其机制与抑制MMP-2和MMP-9蛋白的表达及促进TIMP-1蛋白的表达有关.
作者:高巍;宋平义;景桂霞;张晓琪;南克俊;沙保勇 刊期: 2015年第03期
目的:构建杜氏盐藻环盒子1(RBX1)的酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-RBX1,筛选与RBX1相互作用的蛋白.方法:采用PCR技术扩增杜氏盐藻RBX1的开放阅读框,测序分析后插入酵母表达质粒,构建诱饵载体pG-BKT7-RBX1.将酶切鉴定正确的诱饵载体用PEG/LiAc法分别转化到酵母菌Y187和AH109中,通过表型筛选检测RBX1对酵母菌有无自激活和毒性作用.转化诱饵质粒的Y187与文库菌AH109杂交,待三叶草形状的合子形成后用营养缺陷型培养基和α-半乳糖苷酶活性实验筛选阳性克隆并测序.结果:成功构建了pGBKT7-RBX1,它对Y187和AH109两种酵母菌既无自激活又无毒性作用.杂交后筛选得到两个阳性克隆,阳性克隆1与莱茵衣藻和拟南芥中氧化还原酶铁硫蛋白亚基的同源性为38%和39%,阳性克隆2与莱茵衣藻中转化抑制剂蛋白的同源性为57%.结论:诱饵载体pGBKT7-RBX1可用于酵母双杂交.成功筛选得到两个阳性克隆,可能是与RBX1相互作用的蛋白.
作者:许尧;张楠楠;张彦婷;李庆华;杨露;朱相展;薛乐勋;关方霞 刊期: 2015年第03期
目的:探讨冠状动脉旁路移植术后严重神经系统并发症发生的危险因素.方法:收集1 060例冠状动脉旁路移植术后患者的资料,术后发生严重神经系统并发症57例,采用logistic回归对术后严重神经系统并发症发生的危险因素进行筛选.结果:57例中,脑栓塞13例,颅内出血7例,连续昏迷17例,谵妄15例,癫痫2例,缺血性视神经脑病3例.57例中,11例死亡,46例存活.经logistic回归分析,年龄≥70岁是一个主要的危险因素[β=1.622,OR (95% CI)=5.063(1.085 ~ 46.165)];术中体外循环对严重神经系统并发症的发生没有影响[β=0.910,OR(95% CI)=2.485(0.437~5.097)].结论:年龄≥70岁为冠状动脉旁路移植术后严重神经系统疾病并发症发生的重要危险因素.
作者:马超;法宪恩;柳兵;周玉阳;黄真锋;高勇 刊期: 2015年第03期
目的:通过观察miRNA let-7b修饰的骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对脊髓损伤大鼠的运动功能恢复的作用,探讨miRNA let-7b在损伤脊髓修复中的作用和机制.方法:60只成年SD大鼠分为对照组、BMSCs组、miRNA组,每组20只.采用改良Allen's法制备脊髓损伤模型.造模后1周,BMSCs组行BMSCs移植,miRNA组移植miRNA let-7b慢病毒载体感染的BMSCs,对照组注射生理盐水.移植后第3天至8周,按BBB标准量表对大鼠后肢运动功能进行评分,用免疫组化方法检测脊髓中神经丝蛋白-200(NF-200)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果:实验时间内,各组大鼠BBB评分和脊髓NF-200表达持续升高;不同时间点BBB评分和脊髓NF-200表达以miRNA组高,BMSCs组次之,对照组低(P<0.05).移植后各组脊髓GFAP表达均呈持续性增高,各时间点GFAP阳性表达面积以对照组大,BMSCs次之,miRNA组小(P<0.05).结论:miRNA let-7b可能通过促进BMSCs分化为神经元样细胞、抑制脊髓损伤后反应性胶质细胞的增生及胶质瘢痕形成等机制促进损伤后的神经功能恢复.
作者:徐玉生;崔浩;张松;王培松;朱海洋;钟斌;苗金红 刊期: 2015年第03期
目的:探讨二甲双胍对人食管癌KYSE450细胞系增殖和凋亡的影响及其可能机制.方法:体外常规培养KYSE450细胞,采用MTT法检测不同浓度二甲双胍对KYSE450细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测凋亡率,RT-PCR、Western blot检测药物作用后KYSE450细胞中4EBP1和S6K1 mRNA及蛋白表达的变化.结果:5、10、20和40 mmol/L二甲双胍对KYSE450细胞的增殖均有抑制作用,且呈剂量和时间依赖性(F剂量=470.513,F时间=743.696,F交互=22.359,P均<0.001).5、10和20 mmol/L二甲双胍作用48 h后KYSE450细胞凋亡率显著增加,且呈浓度依赖性(F=282.076,P<0.001).与对照组相比,5、10和20 mmol/L二甲双胍组KYSE450细胞中4EBP1、S6K1 mRNA和蛋白的表达量均明显下降(mRNA:F4EBP1=86.727,FS6K1=86.486,P均<0.001;蛋白:F4EBP1 =43.137,FS6K1=118.924,P均<0.001).20 mmol/L二甲双胍作用24、48和72 h后KYSE450细胞中4EBP1、S6K1 mRNA和蛋白表达亦降低(mRNA:F4EBP1=146.772,FS6K1=36.500,P均<0.001;蛋白:F4EBP1=73.900,FS6K1=92.950,P均<0.001).结论:二甲双胍能够抑制人食管癌KYSE450细胞增殖并诱导凋亡,其机制可能与4EBP1和S6K1 mRNA及蛋白表达下调有关.
作者:王涛;王峰;何炜;单争争;樊青霞 刊期: 2015年第03期
目的:了解2013年河南省学校传染病突发公共卫生事件的流行特征,为制定防控策略提供依据.方法:采用描述流行病学方法对2013年河南省学校传染病突发公共卫生事件进行分析.应用PHGIS 1.7.0绘制事件地区分布图.采用Kruskal-Wallis秩和检验比较不同类别传染病突发公共卫生事件持续时间及调查处置的投入时间.结果:2013年河南省学校共报告传染病突发公共卫生事件15起;呼吸道传染病13起,肠道传染病2起.波及17 170人,发病308例,无死亡病例,罹患率为1.79%.事件分布在全省9个省辖市14个县区.农村10起,城市5起;农村罹患率(2.52%)高于城市(1.34%) (x2=32.007,P<0.001).事件主要集中在3~6月和9~12月.农村小学发生事件多,为10起.事件持续时间中位数为13d,卫生部门调查处置投入时间中位数为29 d.乙类传染病突发公共卫生事件持续时间高于丙类及其他类传染病(x2=6.892,P=0.032).结论:2013年河南省学校传染病突发公共卫生事件主要是呼吸道传染病,其次是肠道传染病;春季和秋冬季为高发季节;农村小学是河南省学校传染病突发公共卫生事件发生的主要场所.需要采取综合措施来预防和控制学校传染病突发公共卫生事件的发生.
作者:尤爱国;杨建华;赵晓静;潘静静;苏佳 刊期: 2015年第03期
目的:观察冬凌草提取物KYBNZ-1I对口腔鳞状细胞癌细胞Tca8113增殖的抑制作用,并探讨其可能机制.方法:采用MTT法检测0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 mg/L的KYBNZ-1I分别作用24、48、72 h对Tea8113细胞增殖的抑制作用.分别采用流式细胞仪及Western blot检测0.0、1.0、2.0、3.0 mg/L的KYBNZ-1I作用48 h Tca8113细胞的周期分布、凋亡情况及CyclinD1、CyclinB1、Cdc-2蛋白的表达.结果:KYBNZ-1I对Tca8113细胞增殖有抑制作用,该作用呈剂量和时间依赖性(F剂量=133.991,F时间=22.526,P< 0.05).与对照组比较,1.0、2.0、3.0 mg/L的KYBNZ-1I作用48 h后G2/M期细胞增多,并可诱导细胞凋亡,呈剂量依赖性(F=108.465、212.353,P<0.05);随药物剂量的升高,CyclinD1蛋白的表达水平下降(F=45.288,P<0.001),CyclinB1、Cdc-2蛋白的表达水平升高(F=21.273、19.228,P<0.05).结论:KYBNZ-1I对Tca8113细胞增殖有抑制作用,可将细胞阻滞于G2/M期并诱导细胞凋亡,其作用机制可能与KYBNZ-1I抑制CyclinD1蛋白的表达、提高CyclinB1和Cdc-2蛋白的表达有关.
作者:常悦;王维嘉;朴军颜;姚珂;左非非;徐少博;徐霞 刊期: 2015年第03期
以往研究[1-6]显示,在乳癌细胞的生长、浸润、转移过程中,乳癌特异基因1 (breast cancer specific gene-1,BCSG1)、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)、基质金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMPs)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)均起到一定的作用.作者对乳腺纤维腺瘤、浸润性导管癌旁乳腺组织、无腋窝淋巴结转移浸润性导管癌和伴腋窝淋巴结转移浸润性导管癌组织中BCSG1、MMP-2、TIMP-2、VEGF蛋白的表达进行了检测,分析其表达特征,为判断乳癌恶性进程和评估预后提供依据.
作者:郭茂华;郑瑞锋;申培红;胡景团;汪晟坤;蔺红丽;乔亚光;陈峰杰;李彦伟 刊期: 2015年第03期
目的:探讨实时剪切波弹性成像(SWE)技术对TI-RADS 4级甲状腺单发实性结节良恶性判定的应用价值.方法:对132例TI-RADS 4级甲状腺单发实性结节患者行SWE检查,获取病灶杨氏模量平均值(Emean),以病理结果为金标准绘制ROC曲线,得出佳界值.将4a级结节中Emean低于界值者判定为3级,将4b级结节中Emean高于界值者判定为5级;余保持不变.分析调整前后的诊断结果.结果:常规超声检查判定为4a级结节73例,根据SWE,51例被判定为3级结节,其中良性46例,恶性5例;常规超声检查判定为4b级结节59例,根据SWE,42例被判定为5级结节,其中良性4例,恶性38例.结论:对于TI-RADS 4级结节行SWE检查可以进一步判定良、恶性,有效降低穿刺活检率.
作者:魏振玲;崔可飞;付超;司彩凤;刘媛祎;马笑 刊期: 2015年第03期
目的:分析某医院2010年至2014年超声诊断的六大类致死性畸形发病情况,并应用自回归移动平均模型(ARIMA)建立发病预测模型.方法:收集某医院2010年1月至2014年12月采用四维超声系统筛查发现的六大类致死性畸形病例资料,分析其发病规律;采用2010年1月至2013年12月的数据拟合ARIMA模型,并用该模型对2014年1月至12月的发病率进行预测.结果:2010年1月至2014年12月共检查86 018例,筛查出六大类致死性畸形胎儿1 063例,总发病率为12.36‰,其中发病率高的为严重开放性脊柱裂(3.67‰),其后依次为单腔心(3.39‰)、腹壁裂-内脏外翻(2.06‰)、无脑儿(1.77‰)、致死性骨发育不良(0.79‰)、严重脑膨出(0.67‰).ARI(1,0)模型能够较好地预测六大类致死性畸形月发病率,具有较高的预测精度(MAD为0.381 7,MAPE为28.01%,MSE为0.061 8).结论:六大类致死性畸形的发病率仍较高,ARI(1,0)模型能较好地用于其发病率的预测.
作者:樊慧;栗河舟;郝长付 刊期: 2015年第03期
目的:探讨维生素D结合蛋白(DBP)基因rs7041位点多态性与汉族人群肥胖易感性的关系.方法:采用PCR-RFLP技术检测211例肥胖者和213例体重正常者的DBP基因rs7041位点基因型,采用logistic回归分析基因多态性与肥胖的关联性,采用多因素降维法分析基因-环境之间的交互作用.结果:肥胖组和对照组DBP基因rs7041位点TG+ GG和TT基因型分布频率差异有统计学意义(x2=5.425,P=0.020),肥胖组rs7041位点等位基因G分布频率高于对照组(x2=5.175,P=0.023).调整相关影响因素后,DBP基因rs7041位点TG基因型携带者肥胖危险性升高(调整OR=1.528,95% CI=1.017~2.295),TG+ GG基因型携带者肥胖危险性升高(调整OR=1.605,95% CI=1.079 ~ 2.389).进一步分析显示,DBP基因与环境因素(吸烟、饮酒、体力活动等)之间无交互作用(P>0.05).结论:DBP基因rs7041位点多态性与肥胖易感性之间存在关联.
作者:王重建;王高帅;李玉倩;刘晓田;张路宁;彭晓燕;周浩;王雪青;任义 刊期: 2015年第03期
目的:探讨C3a、C5a在局灶节段肾小球硬化症发病中的作用.方法:雄性BALB/c小鼠分为正常对照组、野生型组、C3aR敲除组、C5aR敲除组,每组15只.野生型组、C3aR敲除组、C5aR敲除组小鼠一次性注射阿霉素(10 mg/kg)造模,正常对照组给予等体积的生理盐水,注射阿霉素后第0、1、4、8、12周观察小鼠一般状况,检测24 h尿蛋白和血清白蛋白、甘油三酯、胆固醇、肌酐.另取15只小鼠,于第4、8、12周每组处死5只小鼠,观察肾脏组织病理学变化.结果:与正常对照组比较,注射阿霉素4、8、12周后,模型小鼠24 h尿蛋白和血清甘油三酯、胆固醇、肌酐水平增加(P<0.05),而血清白蛋白水平下降(P<0.05);与野生型组比较,C3aR、C5aR敲除组各项指标明显改善(P<0.05).C3aR、C5aR敲除组比野生型组小鼠肾脏组织病理学改变明显减轻.结论:C3a、C5a参与了局灶节段肾小球硬化症的发病过程.
作者:任凌燕;张颖;晏现丽;周雅丽;权松霞;邢国兰 刊期: 2015年第03期
目的:探讨血清铜、同型半胱氨酸(Hcy)、尿酸(UA)水平、tau和Aβ1-42蛋白与阿尔茨海默病(AD)患者认知功能及生活质量的关系.方法:分别采用等离子体原子吸收光谱法检测96例AD患者及120例健康对照者血清铜水平,循环酶法测定血清Hey水平,比色法测定血UA水平,ELISA试验检测血清中tau和Aβ1-42蛋白水平,采用简易智能量表(MMSE)评价认知功能,采用世界卫生组织生活质量测定简表(中文版)评价生活质量.结果:与对照组相比,AD组血清铜(t=4.744,P<0.001)、Hcy(t=7.174,P<0.001)和tau蛋白(t=4.238,P<0.001)水平明显升高,UA(t=8.225,P<0.001)、Aβ1-42蛋白水平(t=8.781,P<0.001)明显降低.Pearson相关分析显示AD患者MMSE评分与血清铜、Hcy水平呈负相关(r=-0.450、-0.537;P <0.001),与UA、Aβ1-42无关;生活质量评分与血清铜、Hcy水平呈负相关(r=-0.490、-0.550;P <0.001),与UA、Aβ1-42无关.结论:血清铜、Hcy水平与AD患者认知功能、生活质量有关,UA可能在AD的防治中起积极作用.
作者:王楠;何远宏;潘双杰 刊期: 2015年第03期
目的:分析LIN28在男性原始生殖细胞(PGCs)中的表达变化.方法:收集男性胚胎/胎儿,胎龄为7周、8周、9周、10周、11~12周、13~ 14周各3例.分离早期胚胎性腺组织,运用免疫荧光技术分析PGCs中LIN28和OCT4的表达.结果:6组睾丸组织中LIN28和OTC4阳性细胞百分数比较,差异均有统计学意义(F=15.651,6.501,P均<0.05).胎龄第7~14周,OCT4一直定位于PGCs的细胞核中;胎龄第8~9周时,OCT4在PGCs中的表达低于第7周,第10~12周OCT4表达再次升高,而在第13周后,OCT4表达逐渐降低.从胎龄第7周开始直至第14周,PGCs中LIN28蛋白的表达逐渐增强,在胎龄第13 ~ 14周达到高峰.在定位上,在胎龄第7周时LIN28表达于PGCs胞核内;在胎龄第8~9周时,PGCs胞核和胞质中均可观察到LIN28的表达;而在胎龄第10周以后,部分PGCs仅胞质中表达LIN28;在胎龄第11~14周时LIN28均定位于PGCs的胞质中.结论:LIN28可能是一个可行的、比较稳定的雄性生殖细胞标记因子.
作者:汪亚芬;冯涵琪;王兴玲;胡旭林;纪家葵;管一春;李丽;刘芳 刊期: 2015年第03期
目的:研究PRDM16基因多态性及其单倍体型与超重肥胖发生风险的关系.方法:采用snapshot或连接酶检测技术检测275例超重肥胖者与253例正常体重者PRDM16基因rs2651899、rss2236518、rs2282198位点的基因型.利用SHEsis在线软件构建单倍体型,分析其与超重肥胖的关系.结果:PRDM16基因rs2651899位点等位基因A在超重肥胖组和正常体重组的分布差异有统计学意义[OR(95% CI)=1.306(1.021 ~1.670),P=0.033].单倍体型AAT、GAC、GCT在超重肥胖组和正常体重组的分布差异有统计学意义[AAT:OR(95% CI)=1.554(1.118~2.162),P=0.008;GAC:OR(95% CI)=0.623(0.394~ 0.984),P=0.041;GCT:OR(95% CI)=0.682(0.481~0.967),P=0.031].结论:PRDM16基因rs2651899位点的等位基因A以及单倍体型AAT可能是超重肥胖发生的危险因素,单倍体型GAC、GCT可能是超重肥胖发生的保护因素.
作者:詹芳芳;刘莉;戚敏杰;卢明;平智广 刊期: 2015年第03期
目的:检测宫颈癌和宫颈上皮内瘤变(CIN)组织中成纤维活化蛋白α(FAPα)的表达情况.方法:采用免疫组化SP法检测10例宫颈炎、40例CIN及81例宫颈癌组织中FAPα的表达.结果:FAPα在宫颈炎组织中不表达,宫颈癌组织中FAPd阳性表达率高于CIN组织(x2=81.706,P<0.001).不同组织学类型(Z=2.069,P=0.039)、淋巴结转移情况(Z=3.382,P=0.001)和浸润深度(Z=2.185,P=0.029)的宫颈癌组织中FAPα表达水平比较,差异有统计学意义.结论:FAPα可能参与了宫颈癌的发生发展.
作者:徐丽伟;张梦真 刊期: 2015年第03期
目的:探讨TDP-25对SH-SY5Y细胞自噬蛋白表达及细胞活力、凋亡的影响.方法:将神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y分为3组,分别转染质粒GFP-N1、GFP-TDP-43和GFP-TDP-25,24 h后应用免疫荧光法检测包涵体,Western blot法检测LC3、Beclin-1蛋白的表达情况.将SH-SY5Y细胞转染质粒GFP-TDP-25后分为2组,一组加自噬抑制剂3-MA,一组不加3-MA,MTT比色法检测细胞活力,Annexin-V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡情况.结果:GFP-N1组细胞胞质、胞核均见较强绿色荧光信号;GFP-TDP-43组较强的绿色荧光信号分布于胞核中,未见明显的包涵体形成;GFP-TDP-25组可见较强的绿色荧光信号颗粒状分布于胞质中,形成包涵体;3组Beclin-1表达水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ差异有统计学意义(F=192.700、247.420,P<0.05),GFP-TDP-25组Beclin-1表达水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ大于GFP-TDP-43组(P<0.05),后者大于GFP-N1组(P<0.05).加入3-MA后,转染GFP-TDP-25的细胞细胞活力降低,细胞凋亡率增高(t=38.595、5.920,P<0.001).结论:TDP-25可能通过上调细胞巨自噬水平减弱其对细胞的损害.调控巨自噬水平对肌萎缩性侧索硬化症和额颞叶变性患者的病情进展可能起到一定的延缓作用.
作者:周玉帅;殷竞争;张瑞锋;滕军放 刊期: 2015年第03期
目的:以鱼腥草挥发油GC-MS特征谱峰面积和其对Raji细胞的抑制率为基础进行谱效关系分析,以确定鱼腥草挥发油抗肿瘤的药效成分组.方法:通过GC-MS技术获取不同产地鱼腥草挥发油的色谱图,通过MTT实验考察不同产地鱼腥草挥发油对Raji细胞的抑制率,采用偏小二乘回归分析技术对色谱峰与抑制率的内在联系进行谱效分析.结果:GC-MS特征谱中色谱峰6、14、15、22、25、26、27和细胞抑制率具有较强的正相关关系,其代表物质对抗肿瘤药效贡献较大,为抗肿瘤药效成分组.结论:鱼腥草挥发油的抗肿瘤作用是多种成分共同作用的结果.
作者:张壮丽;赵宁;赵志鸿;张小俊;王桂芳 刊期: 2015年第03期
目的:检测子痫前期孕妇外周血和胎盘组织中S100A12蛋白的表达,观察其血清对滋养细胞的影响,探讨S100A12与子痫前期的关系.方法:选择轻度子痫前期孕妇30例,重度子痫前期孕妇30例,同期入院分娩的正常孕妇30例(正常对照组),采用ELISA法检测孕妇外周血中S100A12水平,免疫组化法检测胎盘组织中S100A12蛋白的表达水平.用各组孕妇血清体外培养滋养细胞48 h,另设无血清培养的空白对照组,应用MTT法和流式细胞仪检测细胞增殖及凋亡情况,Western blot法检测细胞中晚期糖基化终末产物受体RAGE蛋白的表达.结果:轻、重度子痫前期组孕妇外周血及胎盘组织中S100A12水平均高于正常对照组(P<0.05),且重度子痫前期组高于轻度子痫前期组(P<0.05).轻、重度子痫前期组滋养细胞早期凋亡率、晚期凋亡率、总凋亡率及RAGE蛋白的表达均明显高于正常孕妇及空白对照组(P<0.05),增殖率则降低(P<0.05);重度子痫前期组较轻度子痫前期组变化更显著(P<0.05).结论:S100A12高表达可能是子痫前期的重要发病机制之一.
作者:赵先兰;潘淑敏;刘彩 刊期: 2015年第03期
目的:探讨CD44v6和MMP-9在胃癌组织中的表达及其与肿瘤浸润转移的关系.方法:应用免疫组化SP双染技术检测CD44v6和MMP-9在60例原发性胃癌及60例癌旁正常胃组织中的表达情况,分析其在胃癌组织中的表达与临床病理特征之间的关系以及两者在胃癌浸润转移过程中的相关关系.结果:胃癌组织中CD44v6和MMP-9蛋白的表达均高于癌旁正常胃组织(x配对=36.393和44.083,P<0.001).CD44v6和MMP-9蛋白的表达与胃癌的浸润深度(x2=10.899和11.129,P<0.05)、TNM分期(X2=8.102和6.376,P<0.05)有关,与患者的性别、年龄、肿瘤直径、淋巴结转移及生长的部位无关(P>0.05).CD44v6和MMP-9蛋白在胃癌中的表达呈正关联(rs =0.036,P =0.009).结论:CD44v6和MMP-9在胃癌组织中阳性表达可能在肿瘤浸润及转移过程中发挥协同作用.
作者:王水生;赵春临;丁朝辉;徐化楠;叶延伟 刊期: 2015年第03期