张军喜；柴健；马颖辉；蒋丽芳
缺氧缺血性脑损伤( hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)是引起新生儿急性死亡和慢性神经系统损伤的主要原因.目前临床上常用的治疗新生儿HIBD的方法如高压氧疗法、亚低温疗法等都仅局限于对症、支持治疗,只能在一定程度上缓解症状,尚难从根本上恢复神经系统功能.大量研究[1-3]发现,通过移植具有多向分化潜能的神经干细胞( neural stem cells,NSCs)能减少HIBD新生大鼠由于局部缺血而导致的神经细胞死亡,使之运动和学习记忆能力均得到提高.将经过基因修饰的NSCs进行移植,有望为HIBD的治疗提供一个崭新的思路.
作者：王军；朱登纳 刊期： 2011年第06期
目的:探讨谷氨酰胺对急性全脑缺血再灌注损伤时小肠黏膜Occludin蛋白表达的影响.方法:采用四血管阻断法建立大鼠全脑缺血再灌注动物模型.实验分4组,分别为假手术组、盐水对照组、奥扎格雷组和谷氨酰胺组,每组24只大鼠.建模成功后,盐水对照组立即腹腔注射2 mL生理盐水；奥扎格雷钠组按33.67 mg/kg腹腔注射奥扎格雷钠；谷氨酰胺组按33.67 mg/kg腹腔注射奥扎格雷钠和按0.4 g/kg腹腔注射体积分数20％的L-丙氨酸-L-谷氨酰胺双肽注射液.再灌注6、12及24h,每组各处死大鼠8只,取脑和小肠,光镜下观察脑组织海马区病理改变,免疫组化SP法测定小肠黏膜Occludin蛋白表达.结果:盐水对照组、奥扎格雷钠组和谷氨酰胺组于再灌注6、12和24h海马锥体细胞结构紊乱、边界模糊,在12和24 h各时间点,4组大鼠肠黏膜Occludin蛋白表达差异有统计学意义(H=15.175和20.234,P均＜0.001).与假手术组比较,其余3组Ocdudin蛋白表达下降(P＜0.05)；与谷氨酰胺组相比,盐水对照组和奥扎格雷钠组表达下降(P＜0.05).结论:谷氨酰胺可以提高全脑缺血再灌注大鼠小肠组织中Occludin蛋白表达水平,从而减轻全脑缺血再灌注对小肠黏膜的损伤.
作者：王庆治；张帮杰；王素娟；张丽萍；谭军 刊期： 2011年第06期
目的:比较不同剂量的放射治疗对人脑胶质瘤干细胞及其分化的胶质瘤细胞的杀灭作用,探讨胶质瘤干细胞与放疗耐受的相关性.方法:分离、培养并纯化人脑胶质瘤干细胞,并同时诱导纯化的肿瘤干细胞向胶质瘤细胞分化,对人脑胶质瘤干细胞及其分化后的胶质瘤细胞分别以0、2、3、5、8、12 Gy的6MVX线照射后,继续培养72 h,采用MTT法检测细胞的增殖情况.结果:由胶质瘤干细胞分化出的子代胶质瘤细胞对放射治疗的耐受性下降,且随照射剂量增大,细胞生长抑制显著(F=125.971,P＜0.001).结论:脑胶质瘤干细胞分化后,对放射治疗的耐受性下降.
作者：李远；关方霞；杨波；胡祥；杜英；焦红亮；田毅 刊期： 2011年第06期
目的:观察杜氏盐藻寡糖基转移酶亚基stt3a的酵母双杂交诱饵载体表达产物对酵母细胞有无毒害作用并检测其自激活作用.方法:应用PCR方法获得stt3a可溶端的基因片段,将基因片段按正确的方向插入到酵母表达质粒pGBKT7中,经限制性内酶切鉴定正确后,用PEG/LiAc法转化到酵母菌株Y187中,并通过表型筛选检测诱饵蛋白有无毒性和自激活作用.结果:成功获得了stt3a可溶端的基因片段,其表达的蛋白对酵母菌株Y187无毒害,报告基因-半乳糖苷酶活性没有被诱导.结论:酵母双杂交GAL4系统可以被用来研究杜氏盐藻中与stt3a相互作用的蛋白.
作者：侯永杰；李杰；李庆华；王建人；薛乐勋 刊期： 2011年第06期
目的:探讨玻璃化冷冻法对冻融胚胎移植周期结局的影响.方法:对324个玻璃化冷冻人卵裂期胚胎复苏周期和146个程序化慢速冷冻胚胎复苏周期进行分析,比较2组冷冻胚胎复苏后的存活率、完整率、种植率、临床妊娠率、孕周、新生儿身高及体质量等指标.结果:玻璃化冷冻组的胚胎完整率、临床妊娠率均高于程序化慢速冷冻组(83.24％ vs47.54％,x2=179.772,P＜0.001；37.38％ vs 27.66％,x22=4.073,P=0.044)；2组流产率、分娩孕周、新生儿出生体质量及身高比较,差异无统计学意义(P均＞0.05).结论:玻璃化冷冻胚胎较程序化慢速冷冻法有更高的复苏胚胎完整率及临床妊娠率,可在临床上安全应用.
作者：娄华；孙丽君；王兴玲；郝大勇；王雪梅；于晓娜 刊期： 2011年第06期
脾脏窦岸细胞血管瘤(littoral cell angioma,LCA)是少见的脾血管源性肿瘤.Falk等[1]于1991年首次报道,该病兼具组织细胞和内皮细胞的特性,但不同于已知脾脏血管源性肿瘤,将其命名为LCA.LCA大多数为良性肿瘤,但也有恶性病例的报道[2].现报道1例LCA并复习文献.
作者：刘艳杰；范正军；薛建锋；程波；张水军 刊期： 2011年第06期
糖尿病肾病( diabetic nephropathy,DN)是糖尿病微血管病变之一,是导致终末期肾病的主要病因.早期治疗DN对延缓慢性肾功能不全的发生、发展有着重要的临床意义[1].作者收集了2008年1月至2010年3月漯河市第六人民医院收治的186例DN患者的临床资料,观察了不同剂量厄贝沙坦治疗DN的疗效,报道如下.
作者：孙四平 刊期： 2011年第06期
目的:检测Hela细胞雄激素受体(AR)基因外显子1的甲基化水平.方法:用亚硫酸氢盐克隆测序法和联合亚硫酸氢盐的限制酶法(COBRA)检测不同来源Hela细胞AR基因外显子1的甲基化水平,BiQ Analyzer软件分析测序结果.结果:在非CpG胞嘧啶转化率＞98％的前提下,Hela细胞AR基因外显子1片段的总甲基化率≥96.2％,除第8个CpG位点外,其他CpG位点均为完全甲基化或高甲基化.COBRA法与测序法结果一致.结论:DNA甲基化可能是Hela细胞AR基因失活的分子机制.
作者：李笑竹；赵贵森；岳阳阳；翟仙敦；艾红伟；薛小琦 刊期： 2011年第06期
目的:了解柯萨奇病毒B5( CoxB5)河南分离株全基因特征及与其他肠道病毒基因的关系.方法:采用RT-PCR扩增全基因,采用DNAStar中的SeqMan拼接所测序列,BioEdit进行同源性比较,Simplot进行相似度分析.结果:CoxB5/Henan/2010基因组全长7 401 bp.与原型株Faulkner相比,编码区氨基酸同源性为95.6％,核苷酸同源性为79.9％,其中VP4-VP2核苷酸差异为17.8％～20.4％,VP1核苷酸差异为19.5％,P2、P3核苷酸差异分别为19.5％、21.7％.不同型别肠道病毒间VP4-VP2核苷酸差异为14.4％ ～ 34.9％,VP1核苷酸差异为18.3％～42.3％,P2、P3核苷酸差异为17.1％～21.0％、15.5％ ～ 22.6％.结论:与原型株相比,CoxB5/Henan/2010株编码区发生沉默突变,其核苷酸变异并不影响氨基酸序列的变化；肠道病毒基因组各分区在进化中不同步.
作者：黄学勇；许玉玲；李幸乐；晁灵；陈豪敏；许汴利 刊期： 2011年第06期
关节镜下前交叉韧带重建是一项非常成熟的技术,无论是单束重建还是双束重建都取得了良好的临床效果.既往研究[1-3]对移植物的选择、固定方法、重建方法及骨隧道内口的定位等方面都做了大量的论述.然而,对肌腱切取、隧道方向、隧道长度等术中操作的细节问题涉及不多.为了进一步完善该项技术,作者对107例自体腘绳肌腱单束重建前交叉韧带术中所遇到的各种问题进行了总结,报道如下.
作者：吴术红；刘毅 刊期： 2011年第06期
目的:克隆杜氏盐藻鞭毛相关蛋白(FAP)的cDNA片段并探讨其功能.方法:分析莱茵衣藻等生物的FAP同源蛋白的氨基酸序列保守区域,设计简并引物.提取盐藻总RNA进行RT-PCR.根据得到的序列设计3'RACE引物,巢式PCR扩增该cDNA的3'端序列.秋水仙碱处理对数生长期的盐藻细胞,使细胞停留在分裂中期,并诱导鞭毛缩短,半定量PCR检测FAP基因的表达情况.结果:RT-PCR和3'RACE分别得到长1 535 bp和782bp的cDNA片段,拼接后总长2 141 bp,编码541个氨基酸.序列比对发现与莱茵衣藻的FAP(88％)、团藻CDC48(89％)氨基酸序列均有较高的同源性.秋水仙碱处理后盐藻细胞FAP mRNA表达量高于未处理对照组(F组间=43.192,P＜0.001；F时间=2.659,P=0.043；F交互=594.419,P＜0.001).结论:成功获得杜氏盐藻FAP的cDNA片段,该基因在秋水仙碱诱导的鞭毛重吸收过程中表达量增高.
作者：李靓；石科；李俊平；柴丹丹；薛乐勋 刊期： 2011年第06期
目的:探讨胃肠道间质瘤组织中Ki-67、细胞周期素D1( Cyclin D1)、细胞间黏附分子(ICAM-1)、凋亡抑制蛋白( Livin)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达与Fletcher分级的相关性.方法:应用免疫组化SP法检测67例胃肠道间质瘤存档蜡块标本中各蛋白的表达情况,单因素和多因素分析各蛋白表达与Fletcher分级的关系.结果:单因素分析结果显示,不同危险度分组中,Ki-67、Cyclin D1、Livin及MMP-9蛋白表达的差异有统计学意义(P均＜0.05).有序Logistic回归多因素分析结果显示,Cyclin D1和MMP-9对Fletcher分级影响显著,是Fletcher分级的独立影响因子,Cyclin D1和MMP-9的优势比分别为3.51和3.29.结论:Cyclin D1、MMP-9蛋白在胃肠道间质瘤组织中的表达与Fletcher分级具有明确的相关性,可作为判定恶性程度的参照因素.
作者：务森；张谢夫；赵春临；刘涛 刊期： 2011年第06期
目的:探讨索坦对肾透明细胞癌786-0细胞生长与Tiam1表达的影响.方法:将对数生长期肾透明细胞癌786-0细胞分为4组:索坦低、中、高浓度处理组和正常对照组.索坦低、中、高浓度处理组细胞分别用2、4和8μmol/L索坦培养24、48和72 h.采用免疫细胞化学和原位杂交技术检测各组细胞中Tiam1蛋白和mRNA的表达.采用MTT和TUNEL法检测培养48 h各组细胞凋亡和存活情况.结果:各组细胞培养24、48和72 h时间点的Tiaml蛋白及mRNA表达比较,差异有统计学意义(F=898.782、551.191、510.484,294.803、460.127、358.019,P均＜0.05).索坦高、中、低浓度处理组不同时间点Tiam1蛋白及mRNA表达比较,差异有统计学意义(F=38.601、81.324、262.601,120.671、509.902、56.464,P均＜0.05).同一时间点随着索坦浓度增加,细胞Tiam1蛋白及mRNA的表达减弱(P＜0.05)；同一浓度处理组中,随着时间延长,Tiam1蛋白及mRNA的表达降低(P＜0.05).培养48 h,各组细胞存活率和凋亡率比较,差异有统计学意义(F=123.432和120.341,P均＜0.001),随着索坦浓度增加,细胞存活率降低,凋亡率增加(P＜0.05).结论:索坦可能通过抑制Tiam1基因在肾癌细胞株786-0中表达,促进肿瘤细胞凋亡,抑制细胞生长.
作者：孟庆泽；乔保平；宫璀璀；刘德海；张喜卿 刊期： 2011年第06期
目的:探讨非小细胞肺癌( NSCLC)组织中CD68和c-Jun蛋白的表达与肺癌发生发展的关系及其意义.方法:采用免疫组化SP法检测67例人NSCLC标本(每个标本取癌、癌旁和正常组织)中CD68和c-Jun蛋白的表达,应用Spearman秩相关检验CD68阳性细胞数与c-Jun蛋白表达的相关性.结果:肺癌、癌旁及正常肺组织中CD68阳性细胞数依次为11.8±1.4、97.5±2.5和52.1±1.9,差异有统计学意义(F=52 334.934,P＜0.001)；c-Jun蛋白的平均光密度值依次为0.25±0.03、0.23±0.02和0.20±0.01,差异有统计学意义(F=91.280,P＜0.001).癌旁组织中CD68阳性细胞数与年龄、性别、病理类型、分化程度、吸烟无关(P＞0.05),与TNM分期(F=158.273,P＜0.001)、淋巴结转移(F=84.985,P＜0.001)、是否侵及胸膜(F=16.422,P＜0.001)有关.癌旁组织中c-Jun蛋白的表达与年龄、性别、病理类型、吸烟无关(P＞0.05),与TNM分期(F=19.319,P＜0.001)、分化程度(F=33.918,P＜0.001)、淋巴结转移(t=12.155,P＜0.001)、是否侵及胸膜(F=8.318,P=0.005)有关.在癌旁组织中CD68阳性细胞数与c-Jun蛋白的表达呈正相关(rs =0.519,P＜0.001).结论:巨噬细胞主要浸润在癌旁组织中,可能通过激活蛋白-1促进NSCLC的发展转移.
作者：刘瑜；王娜；冯斐斐；燕贞；王威；张少锋；秦丽娟；吴逸明 刊期： 2011年第06期
目的:构建杜氏盐藻类驱动蛋白钙调素结合蛋白马达区(KMD)基因原核表达载体并表达纯化KMD.方法:通过软件和在线工具预测KMD的理化性质.构建KMD的原核表达载体pET28a-KMD,而后在大肠杆菌BL21(DE3)内16℃过夜诱导表达KMD,通过超声破碎菌体和高速离心,将上清液进行亲和层析.获得粗纯目的蛋白,再利用离子交换层析和凝胶过滤层析进一步纯化.SDS-PAGE检测层析各阶段蛋白样品.将纯化后的KMD均分3份分别放置在-80℃、4℃和18℃环境中,1周后SDS-PAGE检测目的蛋白是否降解.结果:KMD相对分子质量为37 480,预测pI为7.99.基因中含有的稀有密码子不会明显影响其在大肠杆菌BL21( DE3)中表达.多步层析后可以获得2个独立的目的蛋白洗脱峰,均为KMD且纯度可满足结晶条件搜索.纯化后的KMD在4℃和18℃下放置1周后无降解.结论:获得大量高纯度、均一性良好的KMD蛋白,能够满足培养蛋白晶体所需.
作者：徐朋奇；李木；张红梅；石科；韩康；李梅；薛乐勋 刊期： 2011年第06期
目的:预测结核分枝杆菌( MTB)耐药相关药物外排抗原(Rv1634、Rv2846c、Rv2937、Rv2686c、Rv2687c 及Rv3065)的HLA-A2限制性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位.方法:通过NCBI数据库获取目的蛋白的氨基酸序列,运用BLAST分析它们与人类蛋白的同源性,利用SYFPEITHI、BIMAS和NetCTL数据库软件预测HLA-A2限制性CTL表位.结果与结论:预测筛选出6个候选抗原的21个HLA-A2限制性CTL优势表位.
作者：陈飞；高艳锋；朱宇皇；祁元明 刊期： 2011年第06期
目的:探讨PTEN、E-cadherin和CD44v6蛋白表达与食管癌临床病理因素的关系.方法:采用免疫组织化学SP法分别检测39例食管正常黏膜、23例癌旁不典型增生和52例食管鳞状细胞癌组织中PTEN、E-cadherin和CD44v6蛋白的表达水平.结果:食管正常黏膜、癌旁不典型增生和食管鳞状细胞癌组织中PTEN、E-cadherin蛋白阳性表达率逐渐降低(x2=14.322,21.622,P＜0.001),CD44v6蛋白阳性表达率逐渐升高(x2=19.372,P＜0.00l).PTEN、E-cadherin阳性表达率随癌组织分化程度的降低而降低(P＜0.01),随浸润深度的增加而降低(P＜0.05)；有淋巴结转移者PTEN、E-cadherin阳性表达率低于无淋巴结转移者(x2=9.871和6.502,P=0.002和0.011).CD44v6阳性表达率随癌组织分化程度的降低和浸润深度的增加而逐渐升高(P＜0.05),有淋巴结转移者CD44v6阳性表达率高于无淋巴结转移者(x2校正=4.442,P=0.035).癌组织中E-cadherin、PTEN与CD44v6的表达呈负关联(rp =0.585,0.531,P＜0.001),PTEN与E-cadherin的表达呈正关联(rp =0.601,P＜0.001).结论:PTEN、E-cadherin和CD44v6的异常表达参与了食管鳞状细胞癌的发生、发展和浸润转移.
作者：张思森；张谢夫；张云汉 刊期： 2011年第06期
准确的血型鉴定是临床安全输血的前提和保证.采用传统的试管法、玻片法进行ABO、RhD血型鉴定,操作过程难于标准化,检测结果易受环境、温度等影响,而且不易保存,给临床输血带来不安全隐患.微柱凝胶法( micro-column gel technique,MGT)用于ABO、RhD血型鉴定,由于便于标准化操作,结果容易判读,方便保存等特点[1],被广泛应用于医院和血站系统.河南省肿瘤医院自2009年采用MGT进行ABO、RhD血型鉴定,同时用试管法、玻片法进行比对试验,现报道如下.
作者：董晓锋；周健；吕毅 刊期： 2011年第06期
目的:探讨包皮组织中肿瘤抑制蛋白p53和细胞周期调节基因p21 waf/cip1的表达与尿道下裂发病的关系.方法:采用RT-PCR技术检测30例尿道下裂患儿和30例对照组患儿包皮组织p53和p21 waf/cip1 mRNA表达水平.结果:与对照组比较,尿道下裂组p53 mRNA的表达降低(t=11.431,P=0.010),p21 waf/cip1 mRNA的表达无变化(t=1.408,P=0.244)；不同程度尿道下裂患儿p53和p21 wat/cip1的mRNA表达水平差异无统计学意义(F=3.641和3.089,P=0.158和0.187).结论:p53和p21 waf/cip1基因表达的变化可使尿道板和尿道襞上皮细胞过度增殖,尿道板腔化受阻,进而导致尿道下裂的发生.
作者：罗向阳；王伟 刊期： 2011年第06期
目的:探讨普罗布考对过氧化氢( H2 O2)诱导的心肌细胞凋亡的影响,探讨其可能的机制.方法:培养的新生大鼠心肌细胞随机分组,分别给予0、1、10和100μmol/L普罗布考预处理6h后,再给予0.2 mmol/L H2O2继续孵育6h.采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,RT-PCR法检测细胞Bcl-2及Bax mRNA的表达,黄嘌呤氧化酶法测定细胞内超氧化物歧化酶( SOD)活性,硫代巴比妥酸法检测细胞内丙二醛(MDA)含量.结果:普罗布考剂量依赖性地抑制H2O2诱导的心肌细胞凋亡,降低心肌细胞Bax mRNA表达,升高Bcl-2 mRNA表达,升高心肌细胞SOD活性,降低MDA含量.结论:普罗布考可抑制H2 O2诱导的乳鼠心肌细胞凋亡,其作用机制与改善心肌细胞氧化应激水平有关.
作者：罗萍；杜松；段红艳；李海霞 刊期： 2011年第06期
郑州大学学报（医学版）杂志
主管:河南省教育厅
主办：郑州大学
