杜氏盐藻核基质的制备

王天云；柴玉荣；侯卫红；谢华；赵青赞；王宁；薛乐勋

关键词：盐藻, 核基质, 核基质结合区, SDS-PAGE

摘要：目的:制备盐藻核基质,进而分离核基质结合区(matrix attachment regions).方法:采用体积分数0.5%TritonX-100破碎细胞,体积分数15%Percoll分离盐藻细胞核,二碘水杨酸锂(1ithium diiodosalicylate,LIS)抽提核蛋白,SDS-PAGE电泳分析蛋白质成分.结果:分离出了高纯度的盐藻细胞核,电泳分析表明绝大部分核蛋白已被去除.结论:体积分数0.5%TritonX-100能有效破碎盐藻细胞,体积分数15%Percoll可分离高纯度的盐藻细胞核,25mmol/L LIS抽提可除去盐藻绝大部分核蛋白获得核基质.

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作者：孙永恒；乔保平；王昀；石奇刚刊期： 2004年第01期
布洛芬乙酯的微生物拆分

目的:从土壤中筛选出能立体选择性水解布洛芬乙酯,并且水解产物为S-布洛芬的菌株.方法:土样通过吐温20培养基初筛到酯酶活力较高的菌株,并通过复筛测定菌株水解布洛芬乙酯的产物旋光度,从而得到活性菌株.结果与结论:用筛选到的菌株Candida sp.的培养物催化水解布洛芬乙酯所得产品的外观、熔点、旋光度和核磁共振色谱等各项检测指标与Sigma公司的标准品S-布洛芬基本一致,表明该菌株具有生产S-布洛芬的潜力.

作者：谈重芳；王雁萍；吴健；史贤明；刘宏民；秦广雍；霍裕平刊期： 2004年第01期
膀胱镜检查患者300例健康教育体会

2001年10月至2002年8月,作者对300例膀胱镜检查的患者进行健康教育尝试,报道如下.

作者：齐艳刊期： 2004年第01期
铜绿微囊藻抗性株与野生株对铜离子的富积效应

目的:分离筛选高铜离子抗性的铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa),并研究其抗性机制及对铜离子的富积效果.方法:将抗性株与野生株分别加入不同浓度铜离子的BGll培养基中,在不同时间段取样过滤,分析过滤液中铜离子的残留量.结果:在相同时间内,抗性株比野生株产生类金属硫蛋白(MTL)的量要大,培养基中Cu2+减少主要发生在培养后24 h以前.抗性株在24 h之前对Cu2+富积较快,24h的去除率为48.87%,96 h的去除率为80.77%;而野生株在24 h之前对Cu2+富积相对较慢,24 h去除率为20.88%,96 h的去除率为34.29%.结论:利用抗性株铜绿微囊藻治理高铜离子污染源具有较大的应用前景.

作者：刘红涛；侯桂琴；席宇；赵以军；薛乐勋刊期： 2004年第01期
原发性中枢神经系统恶性淋巴瘤综合治疗12例

恶性淋巴瘤是一种常见的恶性肿瘤,而原发性中枢神经系统恶性淋巴瘤(prinmary central nervous system lymphoma,简称PCNSL)较少见,临床报道不多.1993年至2001年作者共收治经病理证实的原发于颅内的恶性淋巴瘤12例,现将综合治疗体会报道如下.

作者：赵明；徐欣；龙江；宋来君刊期： 2004年第01期
全身伽玛刀治疗非小细胞肺癌60例近期疗效观察

放射治疗是肺癌现代治疗中常用的方法之一.近年来,随着科技的发展,放射肿瘤学取得了突破性进展.2001年2月至2002年12月,作者采用立体定向伽马射线全身治疗系统(简称全身伽玛刀)共治疗60例中晚期非小细胞肺癌(NSCLC),近期疗效良好,报道如下.

作者：单国用；庆明轩；陈永顺；宋淑兰刊期： 2004年第01期
高血压脑出血术后亚低温辅助治疗效果观察

目的:研究亚低温应用对高血压脑出血术后治疗效果的影响.方法:65例高血压脑出血术后患者随机分为亚低温组和常规降温对照组.亚低温组33例,均于术后2 h内进行亚低温治疗,持续38～72 h,肛温维持在35.0～35.5℃.对照组32例,体温维持在37.0～37.5℃.2组其他治疗相同.监测降温期间患者的体温、呼吸、血压、心率、血氧饱和度、颅内压、血糖、血电解质和血气.2组患者均于术后3个月按日常生活能力(ADL)分级标准进行临床疗效评价.结果:与对照组相比,亚低温治疗组患者术后高颅压、高血糖、消化道出血发生率均显著下降(P＜0.05);无严重并发症,病死率明显降低,预后显著改善(P＜0.05).结论:高血压脑出血患者术后适时恰当应用亚低温辅助治疗,可降低术后病死率,提高患者生存质量.

作者：王新军；赵普学；寿纪新；李培栋；单峤；赵忠伟；刘泉刊期： 2004年第01期
杜氏盐藻叶绿体16S rRNA基因的克隆

目的:克隆和鉴定杜氏盐藻叶绿体16S rRNA基因.方法:根据衣藻、小球藻等绿藻叶绿体16S rRNA基因序列,利用软件分析找出其高度保守区,据此设计引物,PCR扩增杜氏盐藻叶绿体16S rRNA序列,并与莱茵衣藻、普通小球藻、绿肾藻和原始绿藻Mesostigma Vivide进行同源性比较.结果:序列分析表明所克隆的序列1110bp与莱茵衣藻、普通小球藻、绿肾藻和原始绿藻Mesostigma Vivide 4种绿藻的序列同源性分别为85.0%、79.9%、81.3%和81.6%.结论:本实验中所克隆的序列为杜氏盐藻的叶绿体16S rRNA基因.

作者：潘卫东；张贵星；袁保梅；李杰；王建民；薛乐勋刊期： 2004年第01期
人血管生成抑制因子canstatin原核表达载体的构建及表达

目的:构建国人血管生成抑制因子canstatin的原核表达载体并在大肠杆菌BL21中表达canstatin重组蛋白.方法:用Trizol试剂提取人肝脏组织总RNA,通过RT-PCR扩增canstatin的cDNA,克隆到pMD18-T载体中并进行序列分析.将canstatin cDNA定向克隆于原核表达载体pET30a(+)中,而后在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导表达.结果:canstatin cDNA克隆入质粒pET30a(+)获得了重组表达载体pET30a(+)/Cans,canstatin的cDNA长度为684 bp,编码227个氨基酸.IPTG诱导原核表达载体pET30a(+)/Cans在大肠杆菌BL21中的表达量约占菌体总蛋白量的35%.结论:原核表达载体pET30a(+)/hCans在大肠杆菌BL21中高效表达canstatin重组蛋白.

作者：侯卫红；袁保梅；王天云；柴玉荣；侯桂琴；王建民；薛乐勋刊期： 2004年第01期
腹腔镜在208例急腹症中的应用

本院自1993年3月开展腹腔镜胆囊切除术(LC)以来,共完成各类腹腔镜手术5000例,其中208例应用于急腹症的诊治,取得了满意的效果,现总结如下.

作者：万德礼；刘树清；司亚卿；杨菊红刊期： 2004年第01期
胃癌组织中核基质蛋白与P16基因上游序列结合检测

目的:研究胃癌组织核基质蛋白与p16基因上游序列的结合情况及其意义.方法:采用Southwestern印迹技术及Genetools定量分析软件,对22例胃癌及相应正常组织的核基质蛋白与P16基因上游序列的结合进行了检测.结果:正常胃组织核基质蛋白与p16基因上游序列结合主带的相对分子质量(Mr)为28000、30000、40000、43000、50000,胃癌组织中为40000、66000.与正常胃组织比较,胃癌组织中核基质蛋白与P16基因上游序列结合的66000主带阳性信号明显增强(P＜0.05);而不同分化程度及不同临床分期胃癌组织间,此主带阳性信号强度差异无统计学意义(P＞0.05).结论:胃癌组织中66000蛋白与p16基因上游区结合量的异常可能是胃癌发生的早期分子事件.

作者：丁一；李卓；乐晓萍；邢文英；朱晓燕；张钦宪刊期： 2004年第01期
杜氏盐藻荧光素酶基因表达载体的构建

目的:构建盐藻荧光素酶基因表达载体.方法:分别用合适的限制性内切酶消化载体pGL3-Enhancervector、pD-B、pMD-CA和pMD-rbcs,胶回收适当的片段,T4 DNA连接酶过夜连接,转化宿主菌大肠杆菌JM109.挑取阳性克隆,提取质粒DNA,酶切鉴定.结果:得到含盐藻自身启动子碳酸酐酶(CA)基因启动子、双倍重复碳酸酐酶(DCA)基因启动子和来自衣藻的1,5二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶小亚基(rbcs)基因启动子,以及荧光素酶(Luc)基因为外源基因的3个盐藻表达载体.结论:构建了3个杜氏盐藻荧光素酶表达载体.

作者：柴玉荣；王天云；侯桂琴；侯卫红；谢华；袁保梅；王建民；薛乐勋刊期： 2004年第01期
肾移植患者外周血淋巴细胞穿孔素的表达

目的:探讨外周血淋巴细胞(PBL)免疫标记物穿孔素在移植肾急性排斥反应(AR)诊断方面的价值.方法:选肾移植手术后近期稳定患者30例,AR 18例,肾移植手术后长期稳定患者10例和健康对照组20例,应用聚蔗糖-泛影葡胺密度梯度离心法分离PBL,免疫细胞化学ABC法检测PBL中穿孔素表达.结果:AR患者PBL穿孔素表达阳性率明显高于肾功能近期与长期稳定组(60.95%vs 16.66%),并且穿孔素表达出现的时间可比AR的临床表现出现早2～3 d,AR时应用甲基强的松龙冲击治疗可显著降低PBL穿孔素阳性细胞数.结论:穿孔素是一种有价值的AR标志物,对PBL中穿孔素表达的动态检查有助于早期诊断肾移植术后可能发生的AR.

作者：杜斌；薛武军；田普训刊期： 2004年第01期
蝶骨嵴脑膜瘤23例外科治疗体会

蝶骨嵴脑膜瘤起源于蝶骨大小翼部,肿瘤多侵犯脑神经、血管、海绵窦,手术全切较为困难,术后并发症多.现对本院1990年至2001年经手术治疗的蝶骨嵴脑膜瘤23例的诊断治疗分析如下.

作者：苏玉林；张鹏远；王建祯；陶胜中刊期： 2004年第01期
增殖性糖尿病视网膜病变患者血清及玻璃体中胰岛素样生长因子-1及表皮生长因子含量测定

目的:观察增殖性糖尿病视网膜病变(PDR)中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)和表皮生长因子(EGF)的变化.方法:20例PDR伴不同程度增生性玻璃体视网膜病变(prolifrative vitreoretinopathy,PVR)的患者为观察组,20例健康人及无眼病的尸体眼10眼为对照,用放射免疫方法检测观察组和对照组血清及玻璃体切割物中IGF-1及EGF的含量.结果:PDR患者血清及玻璃体切割物中IGF-1及EGF的含量明显高于对照组(P＜0.01);观察组玻璃体与血清中IGF-1及EGF含量差异无统计学意义(P＞0.05).结论:PDR患者血清及玻璃体切割物中高表达IGF-1及EGF,IGF-1及EGF在PDR的发生和发展中起重要作用.

作者：赵宏；王新；朱冬梅；高延庆；张蕾；李铮刊期： 2004年第01期
妊娠合并AIDS 4例临床观察

非洲被认为是AIDS发源地,目前世界上80%的HIV阳性人群分布在非洲[1].作者在赞比亚工作期间,对妊娠合并AIDS典型死亡病例进行了详细观察,现报道如下.

作者：王嘉莉刊期： 2004年第01期
先天性腹裂11例手术体会

腹裂(gastroschisis)是新生儿期危及生命的严重腹壁发育畸形.本院于1994年至2003年8月共收治11例,应用3种手术方法治疗,存活8例,现总结报道如下.

作者：孙玉梅；王淑芹刊期： 2004年第01期
杜氏盐藻硝酸盐还原酶cDNA片段的克隆与分析

目的:获得杜氏盐藻硝酸盐还原酶cDNA片段.方法:根据Dunaliella tertiolecta、衣藻、团藻等生物硝酸盐还原酶(nitrate reductase,NR)高度保守序列EGWWFKP、WNVMGMM设计一对简并引物,以含硝酸盐培养基培养的的盐藻cDNA为模板,进行PCR扩增,产物克隆至T载体后转化大肠杆菌JM109,经筛选后测序,将测序结果推导成氨基酸序列,并与Dunaliella tertiolecta、团藻、衣藻、小球藻等进行同源性分析.结果:在盐藻中所获得的cDNA片段,核苷酸长度为381 bp,编码127个氨基酸.推导的氨基酸序列与下列物种的硝酸盐还原酶进行同源性比较:Dunaliella tertiolecta为88.2%同源,团藻为78%,衣藻为67%,小球藻为59%.结论:所克隆的序列为盐藻硝酸盐还原酶cDNA片段.

作者：谢华；姜国忠；吕玉民；牛向丽；许培荣；王建民；薛乐勋刊期： 2004年第01期
深静脉血栓形成患者MTHFR/C677T基因多态性检测

目的:检测深静脉血栓形成患者5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性检测.方法:利用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,检测了103例深静脉血栓形成患者(DVT组)与106例正常对照(正常对照组)的MTHFR基因677碱基C-T的突变情况.结果:DVT组与正常对照组相比,MTHFR基因677位点纯合突变基因型频率(27.2%)明显高于对照组(15.1%),P＜0.05;变异型等位基因(T)频率为0.55,高于正常对照0.38,P＜0.05.结论:提示MTHFR基因纯合突变型(T/T)可能是深静脉血栓形成的一个遗传性风险因子,为探讨血栓形成机制提供了新的依据.

作者：贺颖；连建华；齐华；郑红；游文凤刊期： 2004年第01期
复发性口疮患者血液中SOD活性与Zn、Cu、Fe含量检测

目的:研究复发性口疮(RAU)患者血液中超氧化物歧化酶(sOD)活性及微量元素(TE)的变化.方法:用Disilvestro方法测定50例复发性口疮患者及50例正常人血清中的SOD活性,用光谱分析仪测定锌(Zn)、铜(Cu)、铁(Fe)含量并加以比较.结果:复发性口疮患者血液中SOD活性((17.13±2.26)u/ml)较正常人((21.08±1.46)u/ml)明显降低(P＜0.01),血清中Zn((0.712 7±0.069 8)mg/L)、Fe((1.029 1±0.121 6)mg/L)含量低于正常人Zn((0.963 9±0.129 3)mg/L)、Fe((1.285 8±0.127 1)mg/L)含量(P＜0.01),Cu的含量与正常人差异无统计学意义(P＞0.05).结论:在RAU的发病过程中SOD活性及Zn、Fe含量低下可能是RAU多因素致病环节,可提高SOD活性和适当补充锌、铁制剂治疗RAU患者.

作者：季旭东；石晶；韩冰；曲旭红；石爱梅刊期： 2004年第01期