学术投稿

血管内皮生长因子-siRNA对恶性黑素瘤细胞生长的抑制作用

涂亚庭;陶娟;黄长征;张杏平;张丽霞;沈关心

关键词:黑色素瘤, 内皮生长因子, siRNA, 细胞凋亡
摘要:目的探讨血管内皮生长因子siRNA对恶性黑素瘤细胞株A375增殖和凋亡的影响.方法构建针对血管内皮生长因子的siRNA真核表达载体pU-VEGF-siRNA将其表达载体经电穿孔转染A375细胞,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫酶联吸附实验(ELISA)方法检测转染后的A375细胞VEGF的mRNA和蛋白表达,应用细胞计数比较转染组和对照组A375细胞增殖能力,将含转染组和对照组A375细胞的上清液分别培养人静脉内皮细胞(ECV-304),观察其生长情况,并用流式细胞仪观察转染pU-VEGF-siRNA载体对A375细胞凋亡的影响.结果转染pU-VEGF-siRNA载体后,A375细胞的VEGF mRNA和蛋白表达均较对照组明显下降,并且其生长缓慢,其细胞周期出现亚二倍凋亡峰.用转染pU-VEGF-siRNA的A375细胞上清液培养的ECV-304细胞增殖力较对照组下降.结论通过RNA干扰技术阻断VEGF的表达,可抑制A375和ECV-304细胞增殖,诱导A375细胞凋亡.
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    目的建立敏感、特异的快速检测4种分枝杆菌的方法.方法用特异性引物对结核分枝杆菌、鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌菌悬液DNA进行PCR扩增,验证其敏感性和特异性.将上述4种分枝杆菌的特异性引物同时放入PCR扩增反应体系中,以此反应体系分别对该4种分枝杆菌菌悬液DNA、及其两两组合或特定的三重组合进行扩增,同时验证其敏感性.结果4种分枝杆菌的特异性引物分别放入各自的PCR扩增反应体系中,可分别特异性地扩增出该4种分枝杆菌对应的DNA片段,敏感性达1×101~1×102个菌细胞/mL.4种分枝杆菌的特异性引物同时放入同一PCR扩增反应体系中可分别特异性地扩增出对应的4种分枝杆菌单菌及其两两组合或三种分枝杆菌组合的DNA片段,敏感性达1×102~1×103个菌细胞/mL;4种分枝杆菌的特异性引物对其他分枝杆菌进行扩增,结果均为阴性.结论多重PCR方法能敏感、特异地快速检测4种分枝杆菌.

    作者:王洪生;李晓杰;吴勤学;崔盘根;刘训荃 刊期: 2005年第05期

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    先证者男,24岁.患者2岁起双手掌、足底皮肤出现角化过度,皮肤表面出现细小裂纹,并有不同程度的增厚,随年龄增长,病情逐渐发展.皮损为光滑、硬化而均匀,半透明,蜡黄色,逐渐延伸至掌跖侧缘.皮肤科情况:掌跖角化明显,累及整个手掌或足底.局部皮肤增厚,失去弹性,足底和手掌粗糙不平,皮肤纹理处发生皲裂,部分裂口很深.患者既往健康,智力正常.毛发、牙齿发育均正常.

    作者:韩维田;姜淼;边超英;王格;李学付;李伟洲 刊期: 2005年第05期

  • 全国皮肤美容激光与光子治疗学习班通知

    作者: 刊期: 2005年第05期

  • 西安地区105株淋球菌抗菌药物耐药性分析

    我院参加了中国疾病预防控制中心性病麻风病防治技术指导中心建立的淋球菌耐药监测协作网,首次对西安地区2002年分离的105株淋球菌对抗菌药物敏感性进行了监测,现将结果报道如下.

    作者:冯莲凤;蔺军霞;阴爱珍;江敦信 刊期: 2005年第05期

  • 含HPV16 E7的病毒样颗粒诱导小鼠产生特异性CTL反应

    目的探讨含BPVL1/HPV16 E7嵌合型乳头瘤病毒样颗粒(VLPs)在动物小鼠体内的免疫学特性.方法将HPV16 E7基因分为(a)、(b)、(c)3段,与BPVL1连接后表达的BPVL1/HPV16 E7(a)、(b)、(c)嵌合型VLP分别免疫小鼠C57BL/6J,对其淋巴结淋巴细胞进行细胞毒性T淋巴细胞反应(CTL)分析.结果接受嵌合型VLP BPVL1/HPV16 E7(b)免疫的小鼠淋巴结淋巴细胞可以引发很强的对C-2细胞(HPV16 E7aa47-59转染的EL-4细胞)的特异性CTL反应,但不能对EL-4细胞产生细胞毒性作用.结论含BPVL1/PV16 E7嵌合型VLP作为抗原输送系统致敏小鼠T淋巴细胞并引发抗原特异性CTL反应,可能为HPV疫苗的设计提供一个新手段.

    作者:程浩;叶俊;周健 刊期: 2005年第05期

  • 新生儿蔓状血管瘤巨肢畸形一例

    新生儿男,出生前无宫内窘迫,足月自然产,在分娩过程中胎儿出现肩嵌顿,予以助产,20 min后胎儿娩出.生后面色苍白,无自主呼吸,四肢肌张力松弛,阿普加(Apgar)评分1 min为3分,为新生儿重度窒息,立即行气管插管,吸痰、头罩吸氧,10 min后出现哭声,自主呼吸恢复,面色转红.其母25岁,早孕反应重,持续1个月自行消失,孕3个月患重感冒,未服药,妊娠5个月后觉胎动活跃.自怀孕起每日喜饮橙汁1000~1500 mL,孕期有吸烟史,每日2~3支,分娩前2个月戒烟,妊娠23周B超提示未见异常,父母非近亲结婚.

    作者:张琳;高金梅 刊期: 2005年第05期

  • 人乳头瘤病毒11型E7蛋白基因重组腺病毒载体的构建及表达

    目的构建人乳头瘤病毒11型(HPV11)E7蛋白基因腺病毒载体,并在真核细胞表达.方法用PCR法,扩增出HPV11E7基因,定向克隆至pENTR-TOPO载体形成重组质粒TOPO-E7.TOPO-E7与腺病毒载体pAD/CMV/V5-DESTTM重组反应,E7基因被重组到腺病毒载体上.该载体经PacI酶切,脂质体法转染人胚肾293A细胞,获得重组腺病毒载体pAD-E7.pAD-E7转染人HaCaT细胞,激光共聚焦显微镜分析E7蛋白表达情况.结果经酶切及序列分析鉴定,重组质粒TOPO-E7成功构建.重组子一D-E7转染293A细胞后,获得滴度为1.4×107 pfu/mL的重组腺病毒载体.该载体转染HaCaT细胞,48 h后激光共聚焦显微镜下可见细胞内E7蛋白表达.结论重组腺病毒载体能有效介导HPV11E7基因在真核细胞的表达.

    作者:王飞;毕志刚;李光富;吴海玮;王群;刘丰;王新军;张兆松 刊期: 2005年第05期

  • 尖锐湿疣患者外周血树突细胞亚群的检测

    目的检测尖锐湿疣患者外周血树突细胞(DC)亚群并探讨其意义.方法采用免疫荧光三标记流式细胞仪检测25例尖锐湿疣患者外周血DC亚群(DC1/CD11c+和DC2/CD123+),并以26例正常人作为对照.结果尖锐湿疣患者外周血CD123+DC百分数为(0.63±0.34)%比对照组(0.41±0.17)%明显增高(P<0.01).长病程组及复发患者CD123+DC增高明显(均为P<0.01),而短病程组及初发患者则无明显改变(均为P>0.05).尖锐湿疣患者组CD11c+DC百分数(1.40%±0.44%)与对照组(1.57%±0.78%)相比差异无统计学意义(P>0.05).结论尖锐湿疣患者外周血DC2亚群占优势,导致向Th2样免疫反应偏移,此可能与尖锐湿疣的复发和病程的长短有关.

    作者:钱起丰 刊期: 2005年第05期

  • 我国梅毒流行和临床特点

    2001年统计全国梅毒发病率为6.11/10万,在8种监测性病中构成比由1991年1.08%上升到2000年的933%[1].众所周知,梅毒对人体危害严重,传染性强,潜伏期长,临床表现复杂,诊疗有一定的困难等,历来为人们重视,是性病防治中的重点.拟纵观当代梅毒流行和临床情况,复习建国前后防治梅毒经验,从流行病学、临床医学等方面进行分析对比,了解我国近期梅毒的特点,旨在更好地指导我们开展防治梅毒的工作.

    作者:韩国柱;邵长庚 刊期: 2005年第05期

  • 人乳头瘤病毒感染中细胞生长分化标志分子的表达

    角蛋白10(K10)、角蛋白17(K17)、角蛋白16(K16)、角质形成细胞转谷酰胺酶(TGK)、细丝聚集素是表皮细胞增生分化的重要标志分子.在病理情况下伴随着表皮角质形成细胞的生长分化异常,这些分子可有异常表达[1,2].我们通过免疫组化LAB法,以银屑病和正常人皮肤为对照,原位检测了K17、K16、TGK、细丝聚集素、K10在扁平疣、寻常疣、尖锐湿疣中的表达情况,现报道如下.

    作者:訾绍霞;刘玮;吴延芳;蔡瑞康 刊期: 2005年第05期

  • 持续性衣原体感染与关节炎

    衣原体是专性细胞内寄生微生物,沙眼衣原体和肺炎衣原体对人类都有致病性.沙眼衣原体主要引起沙眼和非淋菌性尿道炎,肺炎衣原体是获得性肺炎的病原体之一.它们能够从初感染部位向远处其他部位播散,并在该处长期存在下来.在感染和播散过程中,沙眼衣原体和肺炎衣原体均不产生毒素,但是会引起强烈的免疫病理反应,从而引发多种疾病,炎症性关节炎便是其中之一[1].一些衣原体感染引起的急性炎症性关节炎患者会演变成为慢性关节炎.

    作者:齐蔓莉;田敬群;傅志宜 刊期: 2005年第05期

  • 血管内乳头状内皮细胞增生一例

    患者女,35岁.左足底近端皮下结节伴疼痛1月余.1个月前不明原因出现左足底近端皮下结节,用手触之约有黄豆粒大小,自述有压痛且不能长时间站立和行走.否认有外伤史及其他疾病史.

    作者:顾敏;狄梅 刊期: 2005年第05期

  • 头孢曲松治疗孕妇早期梅毒

    头孢曲松为第三代半合成头孢菌素,具有血浆有效浓度高、维持时间长、组织穿透力强、能通过胎盘屏障、对孕妇及胎儿危害小等特点.虽然一些研究发现头孢曲松可有效治疗神经梅毒和早期梅毒[1-3],但其治疗孕妇梅毒是否有效尚未见报道.1997年5月至2001年5月,我们用头孢曲松治疗了11例有青霉素过敏史或皮试阳性的早期梅毒孕妇,现将结果报道如下.

    作者:周平玉;顾志英;徐金华;王侠生;廖康煌 刊期: 2005年第05期

  • HSPC016基因在凝集性生长人毛乳头细胞的表达

    目的确定造血干细胞相关基因HSPC016的表达与毛乳头细胞凝集性生长的关系.方法对凝集性生长的人毛乳头细胞、非凝集性生长的人毛乳头细胞和人真皮成纤维细胞分别进行细胞内mRNA原位杂交;用RT-PCR从以上3组细胞总RNA扩增HSPC016基因.结果原位杂交发现HSPC016基因在凝集性生长的人毛乳头细胞表达,而在非凝集性生长的人毛乳头细胞和人真皮成纤维细胞均不表达;RT-PCR可以从凝集性生长的人毛乳头细胞RNA中扩增到约200 bp目的片段,而不能从非凝集性生长人毛乳头细胞和人真皮成纤维细胞中扩增到相应目的片段.结论HSPC016基因在凝集性生长的人毛乳头细胞特异性表达,可能与毛乳头细胞的分化和功能状态有关.

    作者:杨卫兵;郝飞;宋志强;杨希川 刊期: 2005年第05期

  • 微波与药物联合治疗带状疱疹后遗神经痛50例

    带状疱疹是一种常见病,可发生于各个年龄段,但以中老年为多见,因免疫力低下是一个重要诱因.其中老年患者可并发带状疱疹后遗神经痛.目前对于带状疱疹后遗神经痛的治疗较为棘手,单纯药物治疗疗效不令人满意.我们在临床上用微波联合药物治疗带状疱疹后遗神经痛,疗效明显好于单纯药物治疗.

    作者:詹旭辉 刊期: 2005年第05期

  • 全国艾滋病性病高级培训班通知

    作者: 刊期: 2005年第05期

  • 系统性红斑狼疮患者生活质量调查与分析

    本研究采用国内外通用的生活质量(quality of life,QOL)测量工具,测量系统性红斑狼疮(SLE)患者的生活质量,筛选对生活质量的影响因素,为临床有针对性地采取措施和合理治疗提供依据.

    作者:陈欢;谢红付 刊期: 2005年第05期

  • 一期梅毒多发性硬下疳一例

    患者男,32岁,以阴茎、龟头、包皮多发性硬结、溃烂10余天为主诉于2003年12月25日到我院就诊.自诉在就诊前1个月有非婚性接触史,未戴安全套.10 d前患者阴茎、龟头、包皮出现多个硬结,无明显自觉症状,很快溃烂,有少许渗液,无瘙痒及疼痛,3 d前发现左侧腹股沟出现质地较硬核桃大小的肿块,无发热、无尿道不适感,在当地就诊疑为梅毒,到我院进一步确诊.

    作者:尹光文 刊期: 2005年第05期

  • 间接免疫荧光法测定尖锐湿疣皮损中人乳头瘤病毒

    我科于2002年1月至2003年12月用间接免疫荧光法(IIF)测定尖锐湿疣患者皮损中的人类乳头瘤病毒(HPV),并与醋酸白试验及组织病理学检查结果比较,现报道如下.

    作者:张武;王昕;李铮;张海燕;于娜;赵娜;王惠珍 刊期: 2005年第05期

  • 软下疳一例

    患者男,22岁,因皮疹伴疼痛6 d,于2004年5月14日入我院.患者就诊前6 d无明显诱因出现右侧冠状沟周围散在数个小丘疹,很快破溃形成溃疡,疼痛及触痛明显.否认近期婚外性接触史,患者3个月前曾因梅毒及尖锐湿疣在我科门诊就诊,治疗后病情未再复发.

    作者:陈先进;王福胜 刊期: 2005年第05期

中华皮肤科杂志

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