学术投稿

四种分枝杆菌快速检测方法的研究

王洪生;李晓杰;吴勤学;崔盘根;刘训荃

关键词:分枝杆菌, 结核, 鸟, 堪萨斯, 鸟复合, 聚合酶链反应
摘要:目的建立敏感、特异的快速检测4种分枝杆菌的方法.方法用特异性引物对结核分枝杆菌、鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌菌悬液DNA进行PCR扩增,验证其敏感性和特异性.将上述4种分枝杆菌的特异性引物同时放入PCR扩增反应体系中,以此反应体系分别对该4种分枝杆菌菌悬液DNA、及其两两组合或特定的三重组合进行扩增,同时验证其敏感性.结果4种分枝杆菌的特异性引物分别放入各自的PCR扩增反应体系中,可分别特异性地扩增出该4种分枝杆菌对应的DNA片段,敏感性达1×101~1×102个菌细胞/mL.4种分枝杆菌的特异性引物同时放入同一PCR扩增反应体系中可分别特异性地扩增出对应的4种分枝杆菌单菌及其两两组合或三种分枝杆菌组合的DNA片段,敏感性达1×102~1×103个菌细胞/mL;4种分枝杆菌的特异性引物对其他分枝杆菌进行扩增,结果均为阴性.结论多重PCR方法能敏感、特异地快速检测4种分枝杆菌.
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  • 西安地区105株淋球菌抗菌药物耐药性分析

    我院参加了中国疾病预防控制中心性病麻风病防治技术指导中心建立的淋球菌耐药监测协作网,首次对西安地区2002年分离的105株淋球菌对抗菌药物敏感性进行了监测,现将结果报道如下.

    作者:冯莲凤;蔺军霞;阴爱珍;江敦信 刊期: 2005年第05期

  • 四种分枝杆菌快速检测方法的研究

    目的建立敏感、特异的快速检测4种分枝杆菌的方法.方法用特异性引物对结核分枝杆菌、鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌菌悬液DNA进行PCR扩增,验证其敏感性和特异性.将上述4种分枝杆菌的特异性引物同时放入PCR扩增反应体系中,以此反应体系分别对该4种分枝杆菌菌悬液DNA、及其两两组合或特定的三重组合进行扩增,同时验证其敏感性.结果4种分枝杆菌的特异性引物分别放入各自的PCR扩增反应体系中,可分别特异性地扩增出该4种分枝杆菌对应的DNA片段,敏感性达1×101~1×102个菌细胞/mL.4种分枝杆菌的特异性引物同时放入同一PCR扩增反应体系中可分别特异性地扩增出对应的4种分枝杆菌单菌及其两两组合或三种分枝杆菌组合的DNA片段,敏感性达1×102~1×103个菌细胞/mL;4种分枝杆菌的特异性引物对其他分枝杆菌进行扩增,结果均为阴性.结论多重PCR方法能敏感、特异地快速检测4种分枝杆菌.

    作者:王洪生;李晓杰;吴勤学;崔盘根;刘训荃 刊期: 2005年第05期

  • 咪喹莫特对BALB/c小鼠细胞因子生成的影响

    目的探讨咪喹莫特的免疫调节机制.方法ELISA检测经咪喹莫特灌胃(30 mg/kg)后不同时间点的BALB/c小鼠血清干扰素α(IFN-α)、白介素12(IL-12)、干扰素γ(IFN-γ)、白介素4(IL-4)浓度的变化.ELISA检测喂食咪喹莫特的BALB/c小鼠脾细胞在与0.25μg/mL刀豆素A共孵育时分泌IFN-γ、IL-4的能力.结果咪喹莫特体内诱导BALB/c小鼠生成IFN-α、IL-12,在诱导后2 h达高峰;咪喹莫特体内无诱导BALB/c小鼠生成IFN-γ、IL-4的作用;接受咪喹莫特灌胃的BALB/c小鼠脾细胞体外受ConA诱导时,分泌IFN-γ和IL-12的能力增强.结论咪喹莫特诱导BALB/c小鼠分泌IFN-α、IL-12等前炎症因子,并由此促进机体获得性免疫.

    作者:周小勇;李新宇;郑家润 刊期: 2005年第05期

  • 手术联合微波治疗男性巨大尖锐湿疣11例

    男性生殖器的巨大尖锐湿疣因疣体过大,常合并组织器官畸形,尤其是发生于包皮龟头处者,由于治疗不及时或处理不得当,导致病情复杂化,使临床治疗难度较大.近年来,我们收治了一些男性巨大尖锐湿疣合并包皮龟头畸形,甚至并发巨大溃疡、感染的患者,经采用手术加微波为主的综合治疗,取得了满意的疗效,报道如下.

    作者:梁刘萍;江丽芬;于娜沙;彭学标;曾抗 刊期: 2005年第05期

  • 女贞子等对人头皮毛囊体外培养影响的研究

    目的研究中药对体外培养人头皮毛囊生长的影响.方法观察不同浓度的野山楂、女贞子、猪苓、白芨提取物混合剂以及人参总皂甙对体外培养人头皮毛发生长的影响.结果野山楂、女贞子、猪苓、白芨提取物混合剂低剂量组(1.28μg/mL和6.4μg/mL)在培养初期和末期加速毛发生长,32μg/mL在培养末期加速毛发生长.低剂量组(1.28μg/mL,6.4μg/mL,32μg/mL)可延长毛发的生长时间,尤以1.28μg/mL和6.4μg/mL组的延长作用更强;中剂量组(160μg/mL和800μg/mL)仅在培养初期加速毛发生长,而对毛发生长时间的影响不明显;高剂量组(4 mg/mL和20 mg/mL)在整个生长周期抑制毛发生长,同时缩短毛发生长时间.人参总皂甙高剂量组(40μg/mL和200μg/mL)抑制毛发的生长,缩短毛发的生长时间,且浓度越高,抑制作用越强,缩短作用越明显.结论低剂量的野山楂、女贞子、猪苓、白芨提取物混合剂对体外培养的人头皮毛囊生长有促进作用.

    作者:孙宇;杨淑霞;涂平;宋继权;丁杨峰 刊期: 2005年第05期

  • 尖锐湿疣患者外周血树突细胞亚群的检测

    目的检测尖锐湿疣患者外周血树突细胞(DC)亚群并探讨其意义.方法采用免疫荧光三标记流式细胞仪检测25例尖锐湿疣患者外周血DC亚群(DC1/CD11c+和DC2/CD123+),并以26例正常人作为对照.结果尖锐湿疣患者外周血CD123+DC百分数为(0.63±0.34)%比对照组(0.41±0.17)%明显增高(P<0.01).长病程组及复发患者CD123+DC增高明显(均为P<0.01),而短病程组及初发患者则无明显改变(均为P>0.05).尖锐湿疣患者组CD11c+DC百分数(1.40%±0.44%)与对照组(1.57%±0.78%)相比差异无统计学意义(P>0.05).结论尖锐湿疣患者外周血DC2亚群占优势,导致向Th2样免疫反应偏移,此可能与尖锐湿疣的复发和病程的长短有关.

    作者:钱起丰 刊期: 2005年第05期

  • 不同抗菌药物体外对沙眼衣原体的单独和联合抗菌作用观察

    目的观察大观霉素与头孢曲松体外对沙眼衣原体的单独抗菌作用以及分别与红霉素、氧氟沙星和多西环素的联合抗菌作用.方法采用培养液稀释法测定抗菌药物体外单独对沙眼衣原体的抗菌作用,棋盘格稀释法研究抗菌药物体外联合后的相互作用情况.受试沙眼衣原体株总共12例,临床株10例,质控株2例.Ridit检验比较不同抗菌药物联合间的差异有统计学意义.结果对沙眼衣原体而言,大观霉素与头孢曲松和几种抗菌药物体外联合后多数为无关作用.大观霉素与红霉素或多西环素联合时,分别有42%(5/12)和50%(6/12)的菌株表现出协同作用;头孢曲松与多西环素联合时8%(1/12)的菌株为拮抗作用;氧氟沙星与头孢曲松联合时8%(1/12)表现为协同作用.统计结果显示,与大观霉素或头孢曲松联合时,红霉素、氧氟沙星及多西环素三者之间差异无统计学意义(P值均>0.05).与红霉素或多西环素联合时,大观霉素比头孢曲松更为有效,U值分别为2.46和2.83,P值均<0.5;与氧氟沙星联合时,大观霉素和头孢曲松之间差异无统计学意义(P>0.05).结论本研究结果提示大观霉素与红霉素或多西环素体外联合对沙眼衣原体能产生更好的协同作用.

    作者:尚淑贤;夏隆庆;邵长庚;钟铭英;张津萍;赵建斌;王千秋 刊期: 2005年第05期

  • 超声治疗尖锐湿疣临床观察

    2003年3-12月,我们对55例尖锐湿疣患者进行了超声治疗,并以CO2激光治疗53例尖锐湿疣患者作为对照,现将结果报道如下.

    作者:王苏平;李成志;刁庆春;田耘博;梁成萍 刊期: 2005年第05期

  • 生殖器部位皮损的单纯疱疹病毒检测及分型

    目的探讨生殖器疱疹部位皮损的不典型表现及其与单纯疱疹病毒型别的关系.方法对外生殖器部位及其周围有硬结或疖肿、裂隙、毛囊炎等非水疱性皮肤黏膜损害的患者进行临床资料采集和分析,并对皮损标本进行单纯疱疹病毒的分离培养、PCR检测和病毒分型.结果105例有外生殖器部位非水疱性皮损的患者入选本研究,在硬结(或疖肿)、裂隙、毛囊炎、类似擦破、单个溃疡、非特异性红斑和红肿渗液性包皮龟头炎皮损中,PCR检测HSV的阳性率分别33.3%(6/18)、20%(3/15)、37.5%(6/16)、28.6%(2/7)、33.3%(4/12)、20%(5/25)和50%(6/12),总的检出阳性率为30.5%(32/105).分离培养法检测HSV的阳性率分别为22.2%(4/18)、13.3%(2/15)、25%(4/16)、14.3%(1/7)、33.3%(4/12)、8%(2/25)和41.7%(5/12),总的检出阳性率为21%(22/105).两种方法检测HSV的总检出率差异无统计学意义(κ=0.095,P=0.114).HSV-PCR分型结果与荧光单克隆抗体分型结果相符.在所有HSV阳性者中,HSV-1感染占9.4%(3/32),HSV-2感染占90.6%(29/32).结论生殖器HSV感染的皮肤黏膜损害多样,可为外生殖器部位的硬结(疖肿)、裂隙、毛囊炎、类似擦破、单个溃疡、非特异性红斑和红肿渗液性包皮龟头炎等不典型表现,而且主要由HSV-2感染引起.

    作者:赖伟红;韩国柱;姜文华;苏晓红;薛华忠 刊期: 2005年第05期

  • 全国皮肤美容激光与光子治疗学习班通知

    作者: 刊期: 2005年第05期

  • 尖锐湿疣皮损中人乳头瘤病毒基因分型研究

    目的采用反向杂交研究尖锐湿疣皮损中人乳头瘤病毒(HPV)的感染状况.方法提取尖锐湿疣新鲜标本的HPV DNA,采用PGMY09/11引物系统进行聚合酶链反应(PCR).PCR产物在标记有37种HPV型特异性探针的尼龙膜条带上进行HPV DNA杂交分型.所有DNA模板采用HPV6和11型特异性引物进行PCR检测验证.数据经SPSS11.0统计软件分析.结果杂交结果显示201例标本HPVDNA均为阳性,共发现31种HPV基因型,其主要的HPV基因型名称及所占比例分别如下:HPV11(53.7%,108/201)、HPV6(43.8%,88/201)、HPV16(6.5%,13/201)、HPV52(6.0%,12/201)、HPV33和HPVcp6108(均为5.5%,11/201)、HPV42(5.0%,10/201)等.60.2%(121/201)的标本由单一型HPV感染,39.8%的标本由混合型HPV感染.HPV6和11型特异性引物PCR结果显示HPV6和11的阳性率分别为45.8%和56.2%,与杂交结果比较,一致性分别为98.5%和96.5%,κ值分别为0.97和0.93,P值均<0.001.结论至少有31种HPV基因型与尖锐湿疣相关.HPV11阳性率高,HPV68、40、54、67、73、82、35、64和83在尖锐湿疣中少见,HPV cp6108在尖锐湿疣中首次发现,且阳性率较高(与HPV33并列第5位).HPV26、69、70、71、72和IS39可能与尖锐湿疣不相关.尖锐湿疣中单一型和混合型HPV阳性率分别为60.2%(121/201)和39.8%(80/201).

    作者:蒋明军;王书崎;龚向东;余艳华;陈强;高省;尹跃平;韩国柱;孙建方 刊期: 2005年第05期

  • 吸烟和嗜酒与银屑病关系的Meta分析

    近年来有关吸烟、嗜酒与银屑病关系的研究报道逐渐增多,但迄今为止国内外对于这一问题仍存在争议.我们对吸烟和嗜酒2个因素,采用荟萃(Meta)分析方法,对国内外公开发表的文献进行系统性评价,为银屑病的预防和卫生决策提供科学依据.

    作者:庞春坤;刘云霞;刘建平 刊期: 2005年第05期

  • 头孢曲松治疗孕妇早期梅毒

    头孢曲松为第三代半合成头孢菌素,具有血浆有效浓度高、维持时间长、组织穿透力强、能通过胎盘屏障、对孕妇及胎儿危害小等特点.虽然一些研究发现头孢曲松可有效治疗神经梅毒和早期梅毒[1-3],但其治疗孕妇梅毒是否有效尚未见报道.1997年5月至2001年5月,我们用头孢曲松治疗了11例有青霉素过敏史或皮试阳性的早期梅毒孕妇,现将结果报道如下.

    作者:周平玉;顾志英;徐金华;王侠生;廖康煌 刊期: 2005年第05期

  • 嘉瑞有奖征文通知

    作者: 刊期: 2005年第05期

  • 反义蛋白激酶Cξ下调角质形成细胞中增殖相关基因的表达

    自从1977年发现蛋白激酶C(PKC)以来,研究证明PKC信号转导通路在细胞生长、分化等功能的调节中起关键的作用[1],我们以往的研究已证明细胞的增殖与增殖相关基因的表达密切相关[2,3].我们在以前研究的基础上,从细胞增殖相关基因的角度,进一步探讨了反义PKCξ抑制Colo16角质形成细胞增殖的机制,为弄清PKCξ在角质形成细胞增殖调控中的作用提供实验依据.

    作者:张晓艳;宋佩华;马圣清;柳惠图 刊期: 2005年第05期

  • 男男性接触和性传播疾病

    男男性接触者(men who have sex with men,MSM)自古即有,是一个多样的人群,包括素质性男同性恋者(gay)、双性恋和异性恋的男性.这一人群的发生和先天因素、后天养育以及其所处的环境有关.因为文化的原因,他们较普遍地拥有多个性伴和将肛门直肠、口腔视为性器官(肛交和口交),以满足性欲,因此属于性传播疾病(STD)的高危行为人群,特别是传播艾滋病(AIDS)和某些性病,因而是防治性病和艾滋病的重点人群.以下对MSM中的性病和艾滋病的流行、临床表现及其防治作一介绍.

    作者:邵长庚;曹宁校 刊期: 2005年第05期

  • 评介《阴部疾病与性病》

    由中国协和医科大学北京协和医院王家璧教授主编、清华大学出版的新书<阴部疾病与性病>已经问世.顾名思义,该书是一部专门讲述发生在外生殖器部位的各种疾病与性病的专著.该书内容涉及到皮肤科、性病科、泌尿科、妇产科、感染内科等专业,并设有外生殖器解剖、阴道镜检查和性病流行病学章节.

    作者:叶干运 刊期: 2005年第05期

  • 连接酶链反应检测性病患者沙眼衣原体感染

    目的评价连接酶链反应(LCR)诊断性病患者尿道/宫颈中沙眼衣原体(Ct)的意义.方法STD门诊尿道(宫颈)炎患者276例,取尿道/宫颈拭子,以LCR分析法检测Ct.采用每4份标本相混合的方法分别以LCR分析法检测尿道/宫颈拭子标本中的Ct,其中56例患者同时进行尿道/宫颈拭子Ct细胞培养.差异性结果由PCR法扩增Ct的主要外膜蛋白基因来进行确认,确定LCR分析法检测Ct的敏感性、特异性.结果LCR分析法检测尿道/宫颈拭子Ct的敏感性、特异性分别为96.7%和100%.采用每4份标本相混合的方法分别以LCR分析法检测尿道/宫颈拭子标本中的Ct,与单独用每份标本逐一进行LCR检测比较,结果完全一致,符合率为100%.结论以尿道/宫颈拭子为标本,LCR分析法检测Ct的敏感性、特异性高.适用于诊断泌尿生殖道Ct感染.用标本相混合的方法LCR分析检测尿道/宫颈拭子标本中的Ct,适用于Ct感染的普查.

    作者:郑和义;曹经江 刊期: 2005年第05期

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    患者男,33岁,近来有嫖娼史.因外生殖器疼痛性溃疡伴淋巴结溢脓1个月而就诊.患者于1个月前出现外生殖器疼痛性溃疡,当时未引起注意,继而溃疡面积扩大,腹股沟淋巴结肿大,疼痛逐渐加剧,淋巴结穿孔流脓.

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    作者:涂亚庭;陶娟;黄长征;张杏平;张丽霞;沈关心 刊期: 2005年第05期

中华皮肤科杂志

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