学术投稿

金黄色葡萄球菌肠毒素A基因在C57BL/6小鼠淋巴细胞中的表达

汪宇;陆洪光;程波;麦跃;余德厚

关键词:基因, 细菌, 遗传载体, 基因表达, 致细胞病变, 病毒
摘要:目的通过复制缺陷型腺病毒载体的介导,将金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因转染入C57BL/6小鼠淋巴细胞中,观察基因表达产物对B16细胞的作用.方法通过MTT法直接测定重组腺病毒颗粒感染的淋巴细胞的增殖情况,采用双抗体夹心ABC-ELISA法,测定淋巴细胞培养上清液中白介素2的水平.MTT法测定活细胞数目,以了解活化的C57BL/6小鼠淋巴细胞对B16细胞的杀伤效应.结果加入不同滴度的重组腺病毒颗粒后,C57BL/6小鼠淋巴细胞明显增殖;同时淋巴细胞培养上清液中白介素2水平也明显增加.重组腺病毒颗粒转染的C57BL/6小鼠淋巴细胞可明显杀伤B16细胞,效/靶比越高,杀伤效应越明显.结论SEA基因可以在C57BL/6小鼠淋巴细胞中表达,并且表达产物能够活化C57BL/6小鼠淋巴细胞,进而杀伤B16细胞.
中华皮肤科杂志相关文献
  • 我国梅毒流行和临床特点

    2001年统计全国梅毒发病率为6.11/10万,在8种监测性病中构成比由1991年1.08%上升到2000年的933%[1].众所周知,梅毒对人体危害严重,传染性强,潜伏期长,临床表现复杂,诊疗有一定的困难等,历来为人们重视,是性病防治中的重点.拟纵观当代梅毒流行和临床情况,复习建国前后防治梅毒经验,从流行病学、临床医学等方面进行分析对比,了解我国近期梅毒的特点,旨在更好地指导我们开展防治梅毒的工作.

    作者:韩国柱;邵长庚 刊期: 2005年第05期

  • 头孢曲松治疗孕妇早期梅毒

    头孢曲松为第三代半合成头孢菌素,具有血浆有效浓度高、维持时间长、组织穿透力强、能通过胎盘屏障、对孕妇及胎儿危害小等特点.虽然一些研究发现头孢曲松可有效治疗神经梅毒和早期梅毒[1-3],但其治疗孕妇梅毒是否有效尚未见报道.1997年5月至2001年5月,我们用头孢曲松治疗了11例有青霉素过敏史或皮试阳性的早期梅毒孕妇,现将结果报道如下.

    作者:周平玉;顾志英;徐金华;王侠生;廖康煌 刊期: 2005年第05期

  • 间接免疫荧光法测定尖锐湿疣皮损中人乳头瘤病毒

    我科于2002年1月至2003年12月用间接免疫荧光法(IIF)测定尖锐湿疣患者皮损中的人类乳头瘤病毒(HPV),并与醋酸白试验及组织病理学检查结果比较,现报道如下.

    作者:张武;王昕;李铮;张海燕;于娜;赵娜;王惠珍 刊期: 2005年第05期

  • 5%咪喹莫特乳膏治疗尖锐湿疣多中心、随机、双盲研究

    目的观察5%咪喹莫特乳膏治疗肛周和外生殖器尖锐湿疣的临床疗效和安全性.方法采用随机、双盲、平行对照的临床研究方法,受试者每周3次局部外搽研究药物,用药后6~8 h用清水清洗,疗程8周.疣体完全消退者继续随访1个月以观察复发率.结果共有231例肛周及外生殖器尖锐湿疣患者参加本次研究,其中5%咪喹莫特乳膏治疗组116例,安慰剂对照组115例.治疗后2、4、6、8周的痊愈率在治疗组分别为8.41%、30.84%、49.53%及61.68%,对照组分别为2.68%、7.14%、16.07%及24.11%,两组间差异有统计学意义(P<0.001);疗后2、4、6、8周的有效率在治疗组分别为34.58%、60.75%、68.22%及74.77%,对照组分别为10.72%、18.75%、28.57%及32.14%,两组间差异有统计学意义(P<0.001).治疗组痊愈患者随访1个月后的复发率为10.61%,与对照组相比差异无统计学意义.治疗组无系统不良反应,仅有给药部位的局部不良反应,以轻度和中度红斑为多见,发生率为34.55%.结论5%咪喹莫特乳膏治疗肛周和外生殖器尖锐湿疣疗效好,安全性好,使用方便.

    作者:陈昆;郭在培;毕志刚;林宝珠;陈兴平;常宝珠;张谊之;张美华;曾凡钦;江文;顾恒 刊期: 2005年第05期

  • 含HPV16 E7的病毒样颗粒诱导小鼠产生特异性CTL反应

    目的探讨含BPVL1/HPV16 E7嵌合型乳头瘤病毒样颗粒(VLPs)在动物小鼠体内的免疫学特性.方法将HPV16 E7基因分为(a)、(b)、(c)3段,与BPVL1连接后表达的BPVL1/HPV16 E7(a)、(b)、(c)嵌合型VLP分别免疫小鼠C57BL/6J,对其淋巴结淋巴细胞进行细胞毒性T淋巴细胞反应(CTL)分析.结果接受嵌合型VLP BPVL1/HPV16 E7(b)免疫的小鼠淋巴结淋巴细胞可以引发很强的对C-2细胞(HPV16 E7aa47-59转染的EL-4细胞)的特异性CTL反应,但不能对EL-4细胞产生细胞毒性作用.结论含BPVL1/PV16 E7嵌合型VLP作为抗原输送系统致敏小鼠T淋巴细胞并引发抗原特异性CTL反应,可能为HPV疫苗的设计提供一个新手段.

    作者:程浩;叶俊;周健 刊期: 2005年第05期

  • 金黄色葡萄球菌肠毒素A基因在C57BL/6小鼠淋巴细胞中的表达

    目的通过复制缺陷型腺病毒载体的介导,将金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因转染入C57BL/6小鼠淋巴细胞中,观察基因表达产物对B16细胞的作用.方法通过MTT法直接测定重组腺病毒颗粒感染的淋巴细胞的增殖情况,采用双抗体夹心ABC-ELISA法,测定淋巴细胞培养上清液中白介素2的水平.MTT法测定活细胞数目,以了解活化的C57BL/6小鼠淋巴细胞对B16细胞的杀伤效应.结果加入不同滴度的重组腺病毒颗粒后,C57BL/6小鼠淋巴细胞明显增殖;同时淋巴细胞培养上清液中白介素2水平也明显增加.重组腺病毒颗粒转染的C57BL/6小鼠淋巴细胞可明显杀伤B16细胞,效/靶比越高,杀伤效应越明显.结论SEA基因可以在C57BL/6小鼠淋巴细胞中表达,并且表达产物能够活化C57BL/6小鼠淋巴细胞,进而杀伤B16细胞.

    作者:汪宇;陆洪光;程波;麦跃;余德厚 刊期: 2005年第05期

  • 不同抗菌药物体外对沙眼衣原体的单独和联合抗菌作用观察

    目的观察大观霉素与头孢曲松体外对沙眼衣原体的单独抗菌作用以及分别与红霉素、氧氟沙星和多西环素的联合抗菌作用.方法采用培养液稀释法测定抗菌药物体外单独对沙眼衣原体的抗菌作用,棋盘格稀释法研究抗菌药物体外联合后的相互作用情况.受试沙眼衣原体株总共12例,临床株10例,质控株2例.Ridit检验比较不同抗菌药物联合间的差异有统计学意义.结果对沙眼衣原体而言,大观霉素与头孢曲松和几种抗菌药物体外联合后多数为无关作用.大观霉素与红霉素或多西环素联合时,分别有42%(5/12)和50%(6/12)的菌株表现出协同作用;头孢曲松与多西环素联合时8%(1/12)的菌株为拮抗作用;氧氟沙星与头孢曲松联合时8%(1/12)表现为协同作用.统计结果显示,与大观霉素或头孢曲松联合时,红霉素、氧氟沙星及多西环素三者之间差异无统计学意义(P值均>0.05).与红霉素或多西环素联合时,大观霉素比头孢曲松更为有效,U值分别为2.46和2.83,P值均<0.5;与氧氟沙星联合时,大观霉素和头孢曲松之间差异无统计学意义(P>0.05).结论本研究结果提示大观霉素与红霉素或多西环素体外联合对沙眼衣原体能产生更好的协同作用.

    作者:尚淑贤;夏隆庆;邵长庚;钟铭英;张津萍;赵建斌;王千秋 刊期: 2005年第05期

  • 四种分枝杆菌快速检测方法的研究

    目的建立敏感、特异的快速检测4种分枝杆菌的方法.方法用特异性引物对结核分枝杆菌、鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌菌悬液DNA进行PCR扩增,验证其敏感性和特异性.将上述4种分枝杆菌的特异性引物同时放入PCR扩增反应体系中,以此反应体系分别对该4种分枝杆菌菌悬液DNA、及其两两组合或特定的三重组合进行扩增,同时验证其敏感性.结果4种分枝杆菌的特异性引物分别放入各自的PCR扩增反应体系中,可分别特异性地扩增出该4种分枝杆菌对应的DNA片段,敏感性达1×101~1×102个菌细胞/mL.4种分枝杆菌的特异性引物同时放入同一PCR扩增反应体系中可分别特异性地扩增出对应的4种分枝杆菌单菌及其两两组合或三种分枝杆菌组合的DNA片段,敏感性达1×102~1×103个菌细胞/mL;4种分枝杆菌的特异性引物对其他分枝杆菌进行扩增,结果均为阴性.结论多重PCR方法能敏感、特异地快速检测4种分枝杆菌.

    作者:王洪生;李晓杰;吴勤学;崔盘根;刘训荃 刊期: 2005年第05期

  • 弥漫性掌跖角化病一家系16例

    先证者男,24岁.患者2岁起双手掌、足底皮肤出现角化过度,皮肤表面出现细小裂纹,并有不同程度的增厚,随年龄增长,病情逐渐发展.皮损为光滑、硬化而均匀,半透明,蜡黄色,逐渐延伸至掌跖侧缘.皮肤科情况:掌跖角化明显,累及整个手掌或足底.局部皮肤增厚,失去弹性,足底和手掌粗糙不平,皮肤纹理处发生皲裂,部分裂口很深.患者既往健康,智力正常.毛发、牙齿发育均正常.

    作者:韩维田;姜淼;边超英;王格;李学付;李伟洲 刊期: 2005年第05期

  • 全国中医中西医结合皮肤性病研究进展学习班通知

    作者: 刊期: 2005年第05期

  • 荨麻疹患者治疗前后血浆组胺、白三烯B4和5-羟色胺的变化

    荨麻疹是临床常见的过敏性皮肤病,有多种炎症介质发挥了作用,其中组胺、白三烯B4(LTB4)和5-羟色胺(5-HT)是参与其病理生理过程的重要介质,结合治疗观察患者血浆中三者的水平有利于进一步了解荨麻疹的发病机制.我们对急性荨麻疹和慢性荨麻疹患者血浆中的组胺、LTB4和5-HT含量在应用咪唑斯汀(商品名皿治林,西安杨森制药有限公司生产)治疗前后进行了测定,现报道如下.

    作者:李翠华;王琼;彭振辉;王冬云;刘安 刊期: 2005年第05期

  • 尖锐湿疣皮损中人乳头瘤病毒基因分型研究

    目的采用反向杂交研究尖锐湿疣皮损中人乳头瘤病毒(HPV)的感染状况.方法提取尖锐湿疣新鲜标本的HPV DNA,采用PGMY09/11引物系统进行聚合酶链反应(PCR).PCR产物在标记有37种HPV型特异性探针的尼龙膜条带上进行HPV DNA杂交分型.所有DNA模板采用HPV6和11型特异性引物进行PCR检测验证.数据经SPSS11.0统计软件分析.结果杂交结果显示201例标本HPVDNA均为阳性,共发现31种HPV基因型,其主要的HPV基因型名称及所占比例分别如下:HPV11(53.7%,108/201)、HPV6(43.8%,88/201)、HPV16(6.5%,13/201)、HPV52(6.0%,12/201)、HPV33和HPVcp6108(均为5.5%,11/201)、HPV42(5.0%,10/201)等.60.2%(121/201)的标本由单一型HPV感染,39.8%的标本由混合型HPV感染.HPV6和11型特异性引物PCR结果显示HPV6和11的阳性率分别为45.8%和56.2%,与杂交结果比较,一致性分别为98.5%和96.5%,κ值分别为0.97和0.93,P值均<0.001.结论至少有31种HPV基因型与尖锐湿疣相关.HPV11阳性率高,HPV68、40、54、67、73、82、35、64和83在尖锐湿疣中少见,HPV cp6108在尖锐湿疣中首次发现,且阳性率较高(与HPV33并列第5位).HPV26、69、70、71、72和IS39可能与尖锐湿疣不相关.尖锐湿疣中单一型和混合型HPV阳性率分别为60.2%(121/201)和39.8%(80/201).

    作者:蒋明军;王书崎;龚向东;余艳华;陈强;高省;尹跃平;韩国柱;孙建方 刊期: 2005年第05期

  • TOPO定向克隆和表达Ⅱ型单纯疱疹病毒gG基因的免疫优势表位片段

    目的通过基因工程技术,克隆和表达Ⅱ型单纯疱疹病毒gG基因的免疫优势表位片段.方法以PCR法扩增HSV-2的gG基因的免疫优势表位片段;将PCR产物与TOPO定向表达载体连接;然后鉴定含有目的基因的重组表达载体;并转化BL21StarTM菌株诱导表达目的蛋白;以免疫印迹法检测表达的目的蛋白.结果PCR法扩增出616 bp的DNA片段;通过PCR法及测序法证实重组质粒中含有616 bp的DNA片段,其中99.5%序列与目的基因序列一致.SDS-PAGE结果显示重组蛋白在3 h时的表达产量高.免疫印迹法通过抗gG的单克隆抗体,证实重组蛋白在大肠杆菌中的表达.结论Ⅱ型单纯疱疹病毒的gG免疫优势表位基因片段的成功表达,为制备国产的HSV-2血清诊断试剂提供资料.

    作者:王书崎;尹跃平;余艳华;赖伟红;蒋明军;陈强;陈祥生 刊期: 2005年第05期

  • 超声治疗尖锐湿疣临床观察

    2003年3-12月,我们对55例尖锐湿疣患者进行了超声治疗,并以CO2激光治疗53例尖锐湿疣患者作为对照,现将结果报道如下.

    作者:王苏平;李成志;刁庆春;田耘博;梁成萍 刊期: 2005年第05期

  • 人乳头瘤病毒感染中细胞生长分化标志分子的表达

    角蛋白10(K10)、角蛋白17(K17)、角蛋白16(K16)、角质形成细胞转谷酰胺酶(TGK)、细丝聚集素是表皮细胞增生分化的重要标志分子.在病理情况下伴随着表皮角质形成细胞的生长分化异常,这些分子可有异常表达[1,2].我们通过免疫组化LAB法,以银屑病和正常人皮肤为对照,原位检测了K17、K16、TGK、细丝聚集素、K10在扁平疣、寻常疣、尖锐湿疣中的表达情况,现报道如下.

    作者:訾绍霞;刘玮;吴延芳;蔡瑞康 刊期: 2005年第05期

  • 男男性接触和性传播疾病

    男男性接触者(men who have sex with men,MSM)自古即有,是一个多样的人群,包括素质性男同性恋者(gay)、双性恋和异性恋的男性.这一人群的发生和先天因素、后天养育以及其所处的环境有关.因为文化的原因,他们较普遍地拥有多个性伴和将肛门直肠、口腔视为性器官(肛交和口交),以满足性欲,因此属于性传播疾病(STD)的高危行为人群,特别是传播艾滋病(AIDS)和某些性病,因而是防治性病和艾滋病的重点人群.以下对MSM中的性病和艾滋病的流行、临床表现及其防治作一介绍.

    作者:邵长庚;曹宁校 刊期: 2005年第05期

  • HSPC016基因在凝集性生长人毛乳头细胞的表达

    目的确定造血干细胞相关基因HSPC016的表达与毛乳头细胞凝集性生长的关系.方法对凝集性生长的人毛乳头细胞、非凝集性生长的人毛乳头细胞和人真皮成纤维细胞分别进行细胞内mRNA原位杂交;用RT-PCR从以上3组细胞总RNA扩增HSPC016基因.结果原位杂交发现HSPC016基因在凝集性生长的人毛乳头细胞表达,而在非凝集性生长的人毛乳头细胞和人真皮成纤维细胞均不表达;RT-PCR可以从凝集性生长的人毛乳头细胞RNA中扩增到约200 bp目的片段,而不能从非凝集性生长人毛乳头细胞和人真皮成纤维细胞中扩增到相应目的片段.结论HSPC016基因在凝集性生长的人毛乳头细胞特异性表达,可能与毛乳头细胞的分化和功能状态有关.

    作者:杨卫兵;郝飞;宋志强;杨希川 刊期: 2005年第05期

  • 女贞子等对人头皮毛囊体外培养影响的研究

    目的研究中药对体外培养人头皮毛囊生长的影响.方法观察不同浓度的野山楂、女贞子、猪苓、白芨提取物混合剂以及人参总皂甙对体外培养人头皮毛发生长的影响.结果野山楂、女贞子、猪苓、白芨提取物混合剂低剂量组(1.28μg/mL和6.4μg/mL)在培养初期和末期加速毛发生长,32μg/mL在培养末期加速毛发生长.低剂量组(1.28μg/mL,6.4μg/mL,32μg/mL)可延长毛发的生长时间,尤以1.28μg/mL和6.4μg/mL组的延长作用更强;中剂量组(160μg/mL和800μg/mL)仅在培养初期加速毛发生长,而对毛发生长时间的影响不明显;高剂量组(4 mg/mL和20 mg/mL)在整个生长周期抑制毛发生长,同时缩短毛发生长时间.人参总皂甙高剂量组(40μg/mL和200μg/mL)抑制毛发的生长,缩短毛发的生长时间,且浓度越高,抑制作用越强,缩短作用越明显.结论低剂量的野山楂、女贞子、猪苓、白芨提取物混合剂对体外培养的人头皮毛囊生长有促进作用.

    作者:孙宇;杨淑霞;涂平;宋继权;丁杨峰 刊期: 2005年第05期

  • 尖锐湿疣患者外周血树突细胞亚群的检测

    目的检测尖锐湿疣患者外周血树突细胞(DC)亚群并探讨其意义.方法采用免疫荧光三标记流式细胞仪检测25例尖锐湿疣患者外周血DC亚群(DC1/CD11c+和DC2/CD123+),并以26例正常人作为对照.结果尖锐湿疣患者外周血CD123+DC百分数为(0.63±0.34)%比对照组(0.41±0.17)%明显增高(P<0.01).长病程组及复发患者CD123+DC增高明显(均为P<0.01),而短病程组及初发患者则无明显改变(均为P>0.05).尖锐湿疣患者组CD11c+DC百分数(1.40%±0.44%)与对照组(1.57%±0.78%)相比差异无统计学意义(P>0.05).结论尖锐湿疣患者外周血DC2亚群占优势,导致向Th2样免疫反应偏移,此可能与尖锐湿疣的复发和病程的长短有关.

    作者:钱起丰 刊期: 2005年第05期

  • 全国皮肤美容激光与光子治疗学习班通知

    作者: 刊期: 2005年第05期

中华皮肤科杂志

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