关秀文；韦炳邓；杨军；杜寒松；张万里；牛彦锋
目的 研究香菇多糖对5-FU抑制胃癌细胞增殖的影响及可能机制.方法 体外培养AGS胃癌细胞,分为CON组(未加入香菇多糖和5-FU)、LEN组(仅香菇多糖培养)、FNM组(仅5-FU培养)和L+F组(香菇多糖和5-FU培养),比较4组细胞增殖、细胞周期、增殖指数(proliferation index,PI)、凋亡率、多重耐药基因(multidrug resistance 1,MDR1)和多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-associated proteins,MRP)表达的差异.结果 LEN组和CON组D1～D7吸光值的差异无统计学意义,但均显著高于FNM组和L+F组吸光值(P＜0.05),且L+F组细胞D1 ～D7的吸光值均显著低于FNM组(P＜0.05).CON组和LEN组AGS胃癌细胞G0/G1期和凋亡率均显著低于FMN组和L+F组(P＜0.05),S期和G2/M期均显著高于FMN组和L+F组(P＜0.05);L+F组AGS胃癌细胞G0/G1期和凋亡率均显著高于FNM组(均P＜0.05),S期和G2/M期低于FNM组(均P＜0.05).CON组和FNM组AGS胃癌细胞MDR1和MRP表达均显著高于LEN组和L+F组(P＜0.05);L+F组MDR1和MRP表达均显著低于LEN组(P＜0.05).结论 香菇多糖可显著增强5-FU对AGS细胞增殖的抑制作用,其作用机制可能与降低耐药基因MDR1和MRP表达有关.
作者：关秀文；韦炳邓；杨军；杜寒松；张万里；牛彦锋 刊期： 2014年第08期
目的 壳聚糖/卵磷脂/β-环糊精微球的工艺优化及特性研究.方法 喷雾干燥法制备壳聚糖/卵磷脂/β-环糊精微球,并采用Lq(34)正交设计,通过扫描电子显微术(scanning electron microscopy,SEM)、傅立叶变化红外线光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)、示差扫描量热法(differential scanning calorimetry,DSC)、紫外分光光度法(ultraviolet spectrophotometric,UV)表征微球的理化特性,优化微球制备工艺.结果 壳聚糖/卵磷脂/β-环糊精微球喷雾干燥的佳工艺条件:进口温度为150℃,进料速度为8 mL/min,空气流量为300 L/h,壳聚糖/卵磷脂/β-环糊精的比例为1∶1∶0.33;扫描电子显微镜显示微球的形态圆整,表面有少许皱褶,无粘连;红外结果表明卵磷脂的羰基与壳聚糖的氨基及β-环糊精的羟基形成氢键;差热分析结果表明壳聚糖/卵磷脂/β-环糊精微球的热稳定性降低;优化工艺制得的壳聚糖/卵磷脂/β-环糊精微球的载药量、包封率为(5.08±0.18)％和(9.53±0.69)％.结论 根据上述条件对壳聚糖/卵磷脂/β-环糊精微球喷雾干燥工艺优化后得到的结果较满意,为壳聚糖/卵磷脂/β-环糊精微球的制备和应用提供可行的依据.
作者：孙玉卿；冯占芹；李志韧；郑增娟；李志坚；张维芬 刊期： 2014年第08期
目的 观察经Tat多肽,适配体TTA1,聚乙二醇(PEG)联合修饰的新型纳米载体明胶硅氧烷纳米粒子(gelatin-siloxane nanoparticles,GS NPs)跨血脑屏障及靶向到达胶质瘤的能力.方法 通过两步溶胶-凝胶法合成GS NPs,然后在其表面依次修饰上PEG、TTA1、Tat,并以荧光染料Cy5.5-NHS标记.建立胶质瘤裸鼠原位模型20～25只,分为空白对照组,GS NPs组,PEG-GS NPs组,TTA1-PEG-GS NPs组,Tat-TTAl-PEG-GS NPs组.尾静脉注射各种修饰的纳米粒子,观察其在大鼠体内分布情况;将裸鼠处死后取脑、肝、脾,观察纳米粒子在各器官的分布.结果 活体成像及统计分析结果显示TTA1-Tat-PEG-GS NPs在脑部的荧光强于Tat-PEG-GSNPs、PEG-GS NPs、GS NPs组,且在肿瘤部位的荧光强于脑内其他部位,而在肝脏脾脏的荧光弱于其他3组.结论 TTA1-Tat-PEG-GSNPs能够逃逸内皮网状吞噬系统(reticuloe endothelin system,RES)的吞噬,还能跨过血脑屏障,而且对胶质瘤具有靶向性,是一种潜在的胶质瘤治疗基因及药物的靶向载体.
作者：张龙；胡洋；林晓宁；魏峰；丰伟；田新华 刊期： 2014年第08期
目的 本文拟采用体外实验,探讨脑细胞色素P450 2E1(cytochrome P450 2E1,CYP 2E1)在尼古丁致神经细胞氧化损伤中的可能作用.方法 实验选用IMR-32人神经母细胞瘤细胞系,设置对照组,尼古丁小剂量组(0.1 nM)、中剂量组(1 nM)和大剂量组(10 nM),并选用中剂量尼古丁加入不同剂量CYP2E1特异性抑制剂二丙烯基硫醚(diallyl sulfide,DAS)(0.025、0.05、0.075 nM).尼古丁或尼古丁与二丙烯基硫醚处理细胞48 h.取处理后细胞,分别检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、CYP2E1mRNA和蛋白水平的变化,并对CYP2E1蛋白表达水平与LDH活力、SOD活力、ROS含量进行相关性分析.结果 与对照组相比,经低、中、高剂量尼古丁处理后,IMR-32细胞增殖受抑制,抑制率分别为39％、47％、52％(均P＜0.05);细胞受到损伤,培养基LDH活力分别升高14％、50％、70％(均P＜0.05);SOD活力下降至对照组的76％、58％、44％(均P＜0.05);细胞CYP2E1蛋白表达水平显著升高至2.19、2.65及2.76倍(均P＜0.05),未见CYP2E1 mRNA水平改变;ROS生成量升高48％、65％、136％(均P＜0.05).与尼古丁(1nm)组相比,加入低、中、高剂量抑制剂后,SOD活力升高24％、47％、52％(均P＜0.05);ROS含量下降至77.8％、57.8％、44.3％(均P＜0.05).相关性分析显示,CYP2E1含量与LDH活力呈正相关,与SOD活力呈负相关,相关系数分别为0.740和-0.584,与ROS含量呈正相关,相关系数为0.695(均P＜0.01).结论 尼古丁处理可抑制IMR-32细胞增殖,诱导脑CYP2E1表达,明显诱导ROS生成,致神经细胞损伤.
作者：党帅；张红梅 刊期： 2014年第08期
目的 探讨基质细胞衍生因子-1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)在大鼠下颌骨中牵张成骨(distraction osteogenesis,DO)区的表达情况及其作用机制.方法 40只SD大鼠随机分为8组,每组各5只,全部将右侧下颌骨表面皮肤切开,放置下颌骨牵张器,调整塑形并固定.而后将大鼠左侧下颌骨骨折行钛板内固定手术以作对照.随后分别于不同的时间点(0、3、6、9、12、15、18、21 d)将大鼠麻醉处死,解剖大鼠双侧下颌骨后,小心刮取右侧牵张间隙骨痂及左侧骨折处骨痂进行免疫组织化学检测和酶联免疫吸附测定.结果 40只大鼠伤口均愈合正常,手术耐受性良好.免疫组化染色结果显示:SDF-1在成骨细胞和微血管周围表达较多,且在DO的新生骨痂中的表达较骨折处骨痂中的表达明显升高.酶联免疫吸附检测结果显示:无论在DO区或是骨折区,SDF-1术后3d的表达量增加了3倍,术后1周后,SDF-1在骨折区的表达情况呈逐渐下降趋势,在DO区的表达在进入牵张期内其再次上升,高达原有水平的5倍,牵张结束后缓缓下降,SDF-1在2区的表达情况比较分别在9、12、15d天有统计学差异(P＜0.05).结论 SDF-1在牵张成骨区和骨折区的表达差异明显,为日后研究SDF-1在牵张成骨中的表达及作用机制奠定了理论基础.
作者：周恩瑜；李天泉；李保康；邬玉林；刘亮；屈依丽 刊期： 2014年第08期
目的 建立三乙酰更昔洛韦的高效液相色谱定量分析方法,为企业决定是否回收三乙酰更昔洛韦提供依据.方法 三乙酰更昔洛韦稀释后进高效液相色谱.色谱柱为COSMOSIL 5C18-PAQ Packed Column(4.6 mm×250 mm);流动相为甲醇-水(10∶90);检测波长:255 nm;柱温:25℃.结果 该方法测得回归方程为ΔA=1156C(μg/mL)-262,相关系数r为0.9999.线性范围为1～40 μg/mL,定量限为1μg/mL,精密度RSD为0.6％,重复性RSD为0.2％.母液中浓度为23.2 μg/mL.结论 所建立的HPLC法,简单、准确、灵敏、重复性好.
作者：郝六平；魏转；薛娜；黄文杰；马丽锋 刊期： 2014年第08期
目的 通过生物信息学方法分析结肠癌(colorectal cancer,CRC)相关的基因,构建其蛋白质相互作用网络,并预测结肠癌的microRNA、转录因子和相关药物.方法 首先通过倍数关系值分析255个结肠癌相关的微阵列芯片样本中的表达基因,然后使用蛋白质网络数据库String构建其蛋白质相互作用网络,后应用MSigDB 3.0分析法并结合WebGestalt在线软件,对3组数据中的表达基因进行microRNA、转录因子和药物预测.结果 本研究识别了4763个与结肠癌有关的基因,并采用表达显著的前200个基因构建了蛋白质相互作用网络.此外,本文又采用前200个基因,通过生物信息学方法预测得到了与结肠癌有关的22条microRNA、58个转录因子和9种药物.结论 本研究识别了结肠癌的表达基因,构建了其蛋白质相互作用网络,并预测了其microRNA、转录因子和结肠癌有关药物,为结肠癌的诊断和治疗提供了潜在的生物标记.
作者：邵学谦；孙雯 刊期： 2014年第08期
目的 黄河滩枣大枣多糖胶囊制剂的制备及其质量考察.方法 通过对所提取的大枣多糖的处方前性能评价以及多糖与辅料的配伍研究,开发了黄河滩枣大枣多糖的胶囊制剂;以验证过的苯酚-硫酸多糖测定法和所开发的体外溶出方法对胶囊制剂进行了大枣多糖的含量和体外溶出度分析测定;通过加速稳定性试验等研究技术,对所制备的大枣多糖胶囊制剂进行了较为全面的质量考察.结果 研究结果表明所选用的辅料对大枣多糖含量测定无影响,所制备的大枣多糖胶囊割剂符合质量标准要求;所采用的苯酚-硫酸测定多糖法具有良好的线性(R2=0.9992)、良好的日内日间精密度以及回收率;3个批次的胶囊制剂经带有感应封口的药用聚乙烯塑料瓶包装后在40℃/75％ RH条件下,3个月内主药含量及其他检查项目未见明显变化.结论 所开发的黄河滩枣大枣多糖胶囊处方配方合理,制备方法简便易行,终制剂产品质量稳定,易于产品质量控制.
作者：赵忠熙；程惠玲；杨民；刘新权 刊期： 2014年第08期
目的 研究大麻素受体2(type 2 cannabinoid receptor,CB2受体)对肥胖小鼠体质量、血甘油三酯(triglyceride,TG)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)和单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)的影响.方法 20只雄性小鼠随机分为正常组(N组,n=4)、肥胖组(n=16),分别给予普通饲料和高脂饲料喂养6周,成功制作肥胖小鼠模型.再将肥胖组小鼠随机分为4组:模型组(S组,n=4)、CB2激动剂JWH-133干预组(J组,n=4)、CB2拮抗剂AM-630干预组(A组,n=4)、JWH-133+ AM-630干预组(AJ组,n=4).N组、S组腹腔内注射生理盐水,10 mg/kg,1次/天,共28 d;J、A、AJ组分别腹腔内注射JWH-133、AM-630、JWH-133+AM-630,10 mg/kg,1次/天,共28 d.药物干预前后测定小鼠的体质量、血TG、TNF-α、MCP-1水平.结果 给药第4周J组小鼠体质量、血TG、TNF-α、MCP-1水平均显著高于S组,A组上述指标均显著低于S组(P＜0.05),AJ组指标与S组对比差异无统计学意义.结论 CB2受体在肥胖发病机制中起重要作用.激活CB2受体会增加肥胖小鼠体质量、血TG、TNF-α、MCP-1水平,抑制CB2受体会减低肥胖小鼠体质量、血TG、TNF-α、MCP-1水平.
作者：陈彦；陈刚；余惠珍；吴冰；许桂平 刊期： 2014年第08期
寡核苷酸(oligonucleotides,ONs)是一类大小不超过20个碱基的短链核苷酸,它已用于家族遗传病及癌症的治疗,显示出巨大的应用前景.但寡核苷酸入胞效率低下,严重影响其治疗效果,成为其临床使用的大障碍.细胞膜穿透肽(cell-penetrating peptides,CPPs)是一种能够以既不影响生物活性分子的活性也不会损伤细胞的方式携带货物入胞的运载工具,是非常理想的ONs运载工具.但CPPs的入胞能力参差不齐,需要具体考量选择何种CPPs作为ONs的载体.目前已有各种定性、定量评估CPPs细胞转导能力的策略,其中经典的评价手段是荧光分析法.但鉴于其容易出现假阳性结果的现实情况,特别推荐将其与链接校正ONs相结合进行应用,以更准确的分析CPPs-ONs入胞情况.
作者：李海涛；周华军；田书梅；张晓磷；赵云云 刊期： 2014年第08期
目的 观察人参皂苷Rb1对成骨细胞增殖、分化的影响.方法 选取出生24h之内的SD乳鼠10只,提取分离成骨细胞,并经细胞形态观察、碱性磷酸酶活性化学染色法以及Giemsa染色法鉴定.根据加入不同浓度的人参皂苷Rb1将成骨细胞分为0、10-8、10-7、10-6、10-5 mol/L 5组;采用CCK-8法检测加药24、48、72 h后对成骨细胞增殖的影响;采用PNPP法检测成骨细胞中ALP活性,分析不同浓度的人参皂苷Rb1对成骨细胞分化的影响;Real-Time PCR法检测增殖标记基因PCNA、Ki67和分化标记基因COL1、BGP的表达水平.结果 成功分离获得成骨细胞,经细胞形态学鉴定和染色结果显示细胞满足后续实验要求.CCK-8法检测结果显示:与0 mol/L组相比,人参皂苷Rb1不同浓度组对成骨细胞均有不同程度的促进增殖作用(P＜0.05,P＜0.001);碱性磷酸酶(ALP)比活性检测结果显示:与0 mol/L组相比,人参皂苷Rb1 10-7、10-6、10-5 mol/L浓度组分别培养3、5、7d后,及10-8 mol/L培养7d后,成骨细胞活性均有显著升高(P ＜0.05,P＜0.001),佳效果浓度组为10-6 mol/L;Real-Time PCR法检测结果显示:与0 mol/L组相比,人参皂苷Rb1 10-7、10-6、10-5 mol/L各浓度组均能显著提高成骨细胞PCNA、Ki67、BGP、COL1 mRNA表达水平,10-8 mol/L可显著提高COL1mRNA表达水平,差异均有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.001),其中以10-6 mol/L浓度组效果佳.结论 不同浓度(10-8、10-7、10-6、10-5 mol/L)人参皂苷Rb1对成骨细胞增殖、分化具有明显促进作用.
作者：王伟；黄坤；郑雷蕾 刊期： 2014年第08期
目的 观察积雪草苷对大鼠心梗后左室功能及左室胶原改建的影响.方法 通过结扎雄性SD大鼠左冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,随机分为假手术组、心梗模型组和积雪草苷治疗组,积雪草苷治疗组自造模当天灌胃给予积雪草苷连续6w,其他2组给予等体积生理盐水.各组大鼠分别在术后3d、1w、2w、6w时点,采用动脉导管测定心功能;氯氨T法测量左室非梗死区心肌羟脯氨酸水平;免疫组化法测定左室非梗死区心肌Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白比值.结果 与同时点心梗模型组比较,积雪草苷组大鼠2w、6w时LVDP显著降低(P＜0.05),+dp/dtmax显著提高(P＜0.05),-dp/dtmax显著提高(P＜0.01);2 w、6w时左室非梗死区心肌羟脯氨酸含量显著降低(P＜0.01);2w、6w时左室非梗死区心肌胶原Ⅰ/Ⅲ比值显著降低(P＜0.01).结论 积雪草苷可改善心梗大鼠左室功能,减少左室非梗死区心肌组织胶原异常表达,减轻大鼠心梗后心肌纤维化.
作者：王策 刊期： 2014年第08期
目的 观察顺铂对子宫内膜异位症大鼠模型血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)以及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的影响.方法 采用自体子宫移植法建立子宫内膜异位症大鼠模型,将行假手术的大鼠作为正常对照标准,将建模成功的大鼠随机分为模型组、治疗组与对照组,观察异位病灶的形态特点,在光镜下分析治疗组治疗前后的病理特点,检测不同方法处理后异位病灶腹腔液中VEGF、TNF-α的浓度变化.结果 治疗组治疗后异位病灶的上皮细胞明显变薄,间质细胞和腺体明显减少,腺体样结构增大;模型组异位病灶腹腔液VEGF、TNF-α的浓度显著高于假手术组,且具有显著性差异(P＜0.05);治疗组异位病灶腹腔液VEGF、TNF-α的浓度显著低于模型组,且有显著性差异(P＜0.05).结论 子宫内膜异位症大鼠注射顺铂后,异位病灶腹腔液中VEGF、TNF-α的浓度明显降低,异位病灶中炎症细胞被抑制生长,异位病灶腹腔的微环境得到改善.
作者：肖丽；李坤 刊期： 2014年第08期
目的 建立高效阳离子色谱法测定盐酸考来维仑片中有机胺杂质含量的方法.方法 采用高效阳离子交换色谱对盐酸考来维仑片中有机胺杂质进行定量研究,对该方法进行线性范围、检测限的确定以及准确度、精密度验证,并进行初步应用.结果 该方法可以在33 min内,同时定量测定癸胺(decylamine)、杂质A(aminoquat)、杂质B(aminodihexylquat)和杂质C(decylaminoquat)4种有机胺类杂质.各个杂质在6.32～ 58.52 μg/mL范围内线性关系良好,回归方程的线性相关系数均大于0.9978.盐酸考来维仑片中测定有机胺杂质的回收率为102.9％ ～114.6％,RSD为1.8％～2.4％(n=9).结论 该方法简单、快速、准确,可用于盐酸考来维仑片中有机胺杂质的测定.
作者：张伟；任连杰；周长明；吕雯；韩春霞 刊期： 2014年第08期
目的 本文对东北地区极其丰富的生物资源柞蚕蛹油中不饱和脂肪酸的纯化工艺进行研究.方法 通过超临界二氧化碳流体萃取法(super critical fluid extraction technology-CO2,SFE-CO2)提取东北柞蚕蛹油,采用尿素包合法对蚕蛹油混合脂肪酸进行纯化,并利用正交设计法优化纯化条件.结果 SFE-CO2萃取东北柞蚕蛹干粉中蛹油的萃取率为17.93％ (w/w),不饱和脂肪酸油酸、亚油酸和α-亚麻酸占混合脂肪酸含量为22.73％.以脂肪酸-尿素-甲醇(1∶3∶10,w/w/v),包合温度-10℃,包合时间为18h为包合条件,经一次包合后,不饱和脂肪酸纯度达到84.08％,二次包合后纯度达95.70％.结论 尿素包合法纯化柞蚕蛹油中的不饱和脂肪酸方法操作简单、成本较低,是进一步开发柞蚕蛹油不饱和脂肪酸产品的可靠纯化方法.
作者：曲晓宇；张四喜；周利婷；宋燕青 刊期： 2014年第08期
目的 研究泛素交联酶UBE2D3(ubiquitin-conjugating enzyme E2D3)在端粒酶介导的放射敏感性调节机制中的作用.方法 针对UBE2D3基因序列,设计3条干扰序列,通过筛选选取1条干扰效率优的序列并合成pshRNA-UBE2D3;在MCF-7细胞中,转染过表达质粒pEGFP-UBE2D3以及干扰质粒pshRNA-UBE2D3,Western blot检测UBE2D3对hTERT蛋白表达的影响;通过转染pEGFP-hTERT,Western blot法检测hTERT蛋白表达对UBE2D3的影响;通过转染pshRNA-UBE2D3抑制UBE2D3的表达,PCR-ELISA法检测端粒酶活性,MTT法检测MCF-7细胞周期的变化,CCK-8法检测MCF-7细胞增殖情况,克隆形成法检测MCF-7细胞放射敏感性的变化.结果 成功筛选出一条针对UBE2D3的优干扰序列,干扰UBE2D3能显著降低MCF-7细胞的放射敏感性;UBE2D3能参与hTERT调控放射敏感性的调节,抑制UBE2D3的表达可能通过上调hTERT和Cyclin D1的表达、增加hTERT的活性、加速G1期向S期转变以及提高MCF-7细胞的增殖从而降低MCF-7细胞的放射敏感性.然而,过表达UBE2D3未能检测到hTERT的表达差异.结论 抑制UBE2D3可能通过上调hTERT以及Cyclin D1的表达参与hTERT调节的放射敏感性的过程.
作者：朱强；王丕琳；张铁；尹子毅；曲更宝；殷咏梅 刊期： 2014年第08期
目的 以介孔硅包覆磁颗粒M-MS 50与SHU-555A对比,标记永生化神经干细胞C17.2.方法 采用了核磁共振,普鲁士蓝染色,流式细胞仪,原子发射光谱,弛豫仪等一系列检测手段,测定细胞对磁颗粒的吞腹量,磁颗粒对细胞毒性的影响,及其在细胞内的代谢情况,选择细胞标记的优条件.结果 在神经干细胞对荧光介孔硅包覆铁氧化物的吞噬行为实验结果来看,随着孵育时间增长,SHU-555A和M-MS 50都更多的被C17.2神经干细胞所吞噬,这表现出细胞标记的时间依赖性.而M-MS 50在较短时间内便可以对细胞有一定的标记率.在标记神经干细胞的MRI和ICP-OES定量分析中可以得出,C17.2神经干细胞对SHU-555A和M-MS 50均表现出浓度依赖性和时间依赖性,SHU-555A和M-MS 50与C17.2细胞孵育,都存在标记率随时间梯度和浓度梯度的增加而提高,直到平衡这一现象.而通过荧光介孔硅包覆铁氧化物细胞内分布和代谢研究,发现随着标记时间的增长和标记浓度的增加,C17.2神经干细胞的标记率逐渐增加;磁颗粒有没有从细胞中代谢出来,并且在培养多长时间之后,细胞对M-MS 50的代谢达到平衡.结论 介孔硅包覆氧化铁纳米颗粒M-MS 50在标记神经干细胞C17.2上相对SHU-555A有较明显的优势,而其多功能,特殊的介孔结构,又为以后进一步利用提供了更广阔的空间.M-MS 50能够有效地缩短周围质子的弛豫时间,提高弛豫信号强度,是一种非常优越的造影剂.
作者：张波；戚利坤；李立新 刊期： 2014年第08期
目的 本论文以多核螯合Pt(Ⅱ)抗肿瘤金属配合物为中心,重点开展了三氮螯合单功能三核铂(Ⅱ)配合物的DNA结合及其抗肿瘤活性的研究工作.方法 将30 μM配合物[Pt3L1 Cl3] Cl3(Ⅰ)与0.09 mM的5'-GMP溶解在水中,37℃条件下孵化24h,当反应进行到2h和24h时,取出反应液,利用电喷雾质谱方法检测反应产物;配制不同浓度比rb(drug-to-nucleotide ratio)的配合物[Pt3 L2Cl3] Cl3 (Ⅰ)和配合物[Pt3L103] 03(Ⅱ)与pUC19质粒DNA(200 ng)的反应液,37℃下避光孵化12 h,然后在1×TAE buffer(40 mMTris acetate,1 mM EDTA)中,用1％琼脂糖凝胶电泳分析其在电泳中的迁移情况;配合物[Ph L1 Cl3] Cl3 (Ⅰ)和Ⅱ的体外细胞毒活性用白血病细胞株(HL-60)、肺癌细胞株(A-549)和肝癌细胞株(BEL-7402)进行测试.结果 电喷雾质谱方法检测反应产物时配合物[Pt3L1Cl3] Cl3(Ⅰ)极易与5'-GMP快速反应,形成单加合物、双加合物以及三加合物,表明Ⅰ与5'-GMP较强的结合能力;凝胶电泳实验中测定的配合物[Pt3L1Cl3] Cl3 (Ⅰ)、Ⅱ的rb值分别为0.099和0.66,配合物[Pt3L1 Cl3]Cl3(Ⅰ)使DNA完全解旋所需浓度大大低于配合物[Pt3L2Cl3]Cl3(Ⅱ);体外细胞毒活性测试,从测试结果来看,配合物[Pt3L2Cl3] Cl3(Ⅱ)在浓度10-4 M保持了较高的抗肿瘤活性,但是在10-5～10-8 M范围内,Ⅰ、Ⅱ和顺铂对此细胞株几乎全无毒性,抑制率全部低于40％.结论 三氮螯合单功能三核铂(Ⅱ)配合物的DNA结合对提高药物在生物内的稳定性和降低不良反应有利.
作者：黄晶；洪鸣 刊期： 2014年第08期
目的 将EPO dimer分别连接牛血清蛋白(bovine serum alumin,BSA)、匙孔血蓝蛋白(keyhole limpet hemocyanin,KLH)、卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)几个不同的载体蛋白构成抗原,免疫BALB/c小鼠,并结合特定的ELISA检测系统,来优化选择抗EPO dimer单克隆抗体.方法 采用单克隆抗体制备技术筛选获得杂交瘤细胞;EHSA法鉴定杂交瘤细胞的特性;分析比较不同载体蛋白构建单克隆抗体的差异与效果.结果 共筛选获得了5株杂交瘤细胞,5株杂交瘤细胞均能分泌EPO dimer抗体.经过进一步的特异性鉴定、亚型鉴定以及效价鉴定后,有4株杂交瘤细胞被挑选进行大量抗体制备,为后期临床基础实验提供材料.4株杂交瘤分别为克隆S-18-2,其亚型为IgG2b,κ;克隆S-369-7,其亚型为IgG1,κ;克隆S-410-3,其亚型为IgG1,κ;克隆S-514-7,其亚型为IgG2b,κ;其中克隆S-18-2、S-514-7分泌抗体EPO dimer的能力稳定,其抗体对载体蛋白OVA、KLH、BSA均无效价,且它们抗原抗体反应只针对EPO dimer;克隆S-369-7、S-410-3分泌抗体EPO dimer的能力也很稳定,对载体蛋白OVA、KLH、BSA也均无效价,尤其其抗原抗体反应可以同时针对EPO dimer以及EPO dimer-PEG,即本实验获得的这2株杂交瘤细胞分泌的抗体既可检测EPO dimer又可检测EPO dimer-PEG.比较连接BSA、OVA、KLH这几个不同载体蛋白构建单克隆抗体的差异与效果,发现以EPO dimer连接载体蛋白OVA获得的单克隆抗体效果佳.结论 本实验用偶联载体的方法增强了小分子EPO dimer的免疫原性,得到了稳定分泌EPOdimer抗体的杂交瘤细胞.
作者：邱贞琴；邰秀珍 刊期： 2014年第08期
目的 研究在不同钙离子存在条件下二氧化硅的性质和对蛋白包裹能力有无变化,来确定其是否有作为口服载体的性能.方 法研究包裹多肽二氧化硅纳米颗粒的制备、包裹多肽二氧化硅纳米颗粒的体外释放实验、包裹不同多肽的二氧化硅纳米颗粒的表征、包裹含有不同量的氯化钙和不同结构的多肽二氧化硅纳米颗粒性能.结果 以含有His标签的增强绿色荧光蛋白(enhance green fluorescent portein,EGFP;PI 5.99)为模型,采用反相微乳液体系中加入适量氯化钙,钙离子既和二氧化硅纳米粒子内部的氧原子形成离子键,又和His标签形成络合作用,这样就将蛋白质固定在二氧化硅纳米粒子内部,经过多次洗涤泄露较少.酶切、加热、尿素变性等试验均显示其具有良好的稳定性.结论 通过在传统的反相微乳液体系中加入适量的钙离子,就可以达到良好的包裹效果,且其在酸性条件下不易释放,而在碱性条件则相对容易释放,符合用于口服药物载体的基本要求.
作者：郭丰义；沈玉莲；吴胜本；张鹏辉 刊期： 2014年第08期
中国生化药物杂志
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