学术投稿

南药益智果实的总RNA提取方法比较研究

吴小英;陈玉容;侯杰;高炳淼

关键词:南药, 益智, RNA提取, 多糖多酚
摘要:目的 筛选从南药益智不同发育时期的果实中提取出高质量RNA的试剂盒.方法 以南药益智果实为研究对象,比较了3种MagZol TM Reagent,Takara RNAiso plus和RNAprep Pure Plant Kit试剂盒提取方法,利用琼脂糖凝胶电泳、NanoDrop TM 2000分光光度计和Aligent 2100生物分析仪对3种方法提取的总RNA进行质量检测.结果 采用RNAprepPure Plant Kit试剂盒从南药益智不同发育时期果实中提取的RNA电泳条带清晰、RNA完整性好,其纯度(OD260/280)分别为2.04、2.08和2.06;浓度分别为68.12 ng/μl、140.20 ng/μl和181.51 ng/μl.结论 试剂盒RNAprep Pure Plant Kit可有效地从富含多酚益智果实中提取高质量RNA,为南药益智的高通量转录组测序等分子生物学研究奠定基础.
时珍国医国药杂志相关文献
  • 肝豆灵对肝豆状核变性TX小鼠ERK信号通路及空间学习记忆的影响

    目的 观察化痰祛瘀方肝豆灵对肝豆状核变性TX模型小鼠学习记忆及ERK信号调节通路的影响.方法 将小鼠分为正常对照组、模型组、二巯丁二酸组、肝豆灵组、肝豆灵+二巯丁二酸组,每组20只,选用具有化痰祛瘀功效的肝豆灵片,运用免疫印迹法和Morris水迷宫实验观察肝豆灵对肝豆状核变性模型小鼠学习记忆及细胞外信号调节激酶(extra-cellular-signal-responsive kinase,ERK)信号通路的影响.结果 与模型对照组比较,化痰祛瘀方肝豆灵能促进肝豆状核变性病模型小鼠ERK1/2磷酸化水平(P<0.001),缩短找到水下平台的潜伏期(P<0.05),延长在水下平台的停留时间(P<0.05),肝豆灵+二巯丁二酸效果优于单用肝豆灵(P<0.01、0.001).结论 化痰祛瘀方肝豆灵可能通过促进肝豆状核变性模型小鼠鼠ERK1/2磷酸化水平而改善空间记忆功能.

    作者:韩辉;郑明翠;吴丽敏;吕丹丽;许金波 刊期: 2018年第03期

  • 艾灸温度对大鼠脊髓背角不同类型神经元放电变化的影响

    目的 通过观察不同温度的艾灸对大鼠脊髓背角不同类型神经元放电变化的影响,探索不同温度艾灸在脊髓水平的初级起效机制.方法 87只SD雄性大鼠,在麻醉状态下暴露L1段脊髓,采用玻璃微电极在脊髓后正中沟旁开0.5mm处探查脊髓背角神经元放电.记录到稳定的神经元放电后即通过刷毛及有齿镊夹皮确定神经元类型,之后依次于神经元放电恢复稳定后给予大鼠足三里穴41℃、45℃、49℃艾灸刺激,同时记录脊髓背角神经放电频率.结果 低阈机械性神经元多分布在Ⅱ层、Ⅳ层;伤害特异性神经元多分布在Ⅰ层;广动力型神经元分布范围较广,以Ⅳ层,Ⅴ层为主.三类神经元中,低阈机械性神经元放电频率低.与艾灸前相比,不同温度艾灸对低阈值机械性神经元的放电频率影响不明显(均P>0.05),49℃艾灸可明显增加伤害特异性神经元的放电频率(P<0.05),45℃艾灸可显著增加广动力型神经元的放电频率(P<0.05).不同温度艾灸相互比较对艾灸前后神经元的放电频率差值及变化率,49℃艾灸对伤害特异性神经元兴奋效应强,与41℃、45℃艾灸相比差异具有统计学意义(均P<0.05);45℃艾灸对广动力型神经元兴奋效应强,与41℃艾灸相比差异具有统计学意义(P<0.05).结论 艾灸在脊髓背角的传入主要以兴奋伤害特异性神经元与广动力型神经元为主,其中,45℃艾灸对广动力型神经元的兴奋作用强,49℃艾灸对伤害性神经元的兴奋作用强.

    作者:陈智宇;原萌谦;黄蜀烨;冒金锋;王明;蔡辉;余芝;张建斌 刊期: 2018年第03期

  • 南北医家同病异治崩漏浅析

    崩漏是妇科血证之一,也是妇科常见病之一.笔者先后师从北方医家陈师、岭南著名医家罗师,观察南北医家对本病病因病机的不同认识,同时结合地理、气候、患者体质不同,对于崩漏采用不同的治疗方法,并对其医案进行整理与总结.通过分析二位医家的方药和经验,认为治疗本病除以辨证论治为基础外,也要根据不同地域环境和人群体质运用不同治疗原则、药物配伍及用量,从而达到更好的疗效,得出与中医同病异治和因地制宜的原则相契合的结论.

    作者:杜鑫;陈莹;罗颂平 刊期: 2018年第03期

  • 茶枯抗菌成分提取方法及抗菌机理初步研究

    目的 研究茶枯抗白色念珠菌成分的提取方法及抗菌机理,为进一步高效利用茶枯及新型抗真菌药物先导化合物的开发提供一定的理论基础.方法 对渗漉法、回流法及超声法3种提取方法进行比较,确定佳提取方法以及佳提取条件;采用牛津杯法及倍半稀释法测定茶枯提取物抑茵圈大小及小抑菌浓度(MIC);测定提取物对细菌的生长曲线及电导率的影响.结果 3种提取方法比较:回流提取>超声提取>渗漉提取;回流提取佳条件为:按1∶20料液比加入70%乙醇,加热回流提取1.5h;茶枯提取物对白色念珠菌MIC为6.9 mg/ml;荼枯提取物的抑茵作用主要表现在对数生长期,作用后茵悬液电导率明显增加.结论 回流提取法为茶枯提取物佳提取方法,该提取物可抑制白色念珠茵的生长,其主要是通过改变细胞膜通透性发挥抑菌作用.

    作者:吴春;张亚楠;王雅英;李黎明;王青 刊期: 2018年第03期

  • 基于数据挖掘的治疗疫病外用方剂用药规律研究

    目的 基于中医传承辅助系统,分析中国中医药数据库中疫病外周方剂的组方规律.方法 筛选治疗疫病的外用方剂,将处方信息录入中医传承辅助系统(V2.5),采用该软件集成的关联规则分析、复杂系统熵聚类核心组合分析及无监督的熵层次聚类新处方分析等数据挖掘技术,分析治疗疫病外用方剂的常用药物、药对和用药规律.结果 共纳入方剂151首,涉及中药383味,降序排列方中药物使用频次,提取新处方核心药物组合共12个,演化新处方6个.结论 总结了中国中医药数据库中治疗疫病外用方剂的用药规律,为疫病外用新药的研发奠定了基础.

    作者:鲁晏武;孟庆海;陈仁寿;周轶群 刊期: 2018年第03期

  • 一带一路战略下“互联网+中医”实现途径探析

    “互联网+中医”模式可以便捷、高效的把中医知识、中医健康服务、中医文化等带到“一带一路”沿线各国,为中医药的对外传播提供良好的平台.互联网+中医文化传播、互联网+中医健康服务、互联网+中医教育等新模式为“一带一路”的战略实施提供了有效的实现途径,尽管目前在实现过程中尚存在诸多困难,但“互联网+中医”模式将在“一带一路”建设过程中发挥重要作用.

    作者:杨丽娜;施建荣 刊期: 2018年第03期

  • 祛瘀通经方治疗慢性前列腺炎不育症的机制与效果研究

    目的 探讨祛瘀通经方联合抗生素治疗慢性前列腺炎合并不育症的临床疗效和可能机制.方法 收集整理男科收治并确诊的慢性前列腺炎合并不育症患者232例,随机分为两组,各116例.对照组口服盐酸左氧氟沙星与新硒宝治疗;治疗组服用盐酸左氧氟沙星与新硒宝的同时加用自拟祛瘀通经方.治疗前后分别进行精液与前列腺液常规检查,同时检测精液中精浆弹性硬蛋白酶和中性α-葡萄糖苷酶含量、血清瘦素的水平并观察治疗效果和不良反应发生率.结果 与治疗前比较,两组精液量、精子密度、精子活动力、精子成活率和精子畸形率均较治疗前明显改善、精液中精浆弹性硬蛋白酶和前列腺液中白细胞数量明显降低,前列腺液中卵磷脂小体数量明显增多(P<0.01),治疗组精液液化时间明显缩短、血清瘦素水平明显降低、中性α-葡萄糖苷酶含量明显升高(P<0.05);与对照组比较,治疗组精液常规检查各项指标改善更显著、精液中精浆弹性硬蛋白酶、前列腺液中白细胞数量、血清瘦素水平和总不良反应发生率明显降低,精液中中性α-葡萄糖苷酶含量和前列腺液中卵磷脂小体数量明显增多,慢性前列腺炎治疗总有效率明显提高(P<0.05).结论 祛瘀通经方联合抗生素治疗慢性前列腺炎能提高疗效并降低不良反应发生率,同时提高精液与精子质量,其可能机制是降低血清瘦素水平和精液中精浆弹性硬蛋白酶含量.

    作者:杨德华;邓娜;王广建 刊期: 2018年第03期

  • 互联网+模式下中医服务信息化SWOT分析及对策

    综合分析互联网+模式下中医服务信息化内外部环境影响因素,通过调研和SWOT分析,根据中医信息化优势一弱点一机会一威胁矩阵的组合情况,可知互联网+中医具备优势独特、形成规模、政策扶持、老龄化加剧等优势和机会,也具有资源整合量大、规则不完善、平台发展参差不齐等劣势和挑战.建议提高中医在医疗保障体系中的地位与作用、注重线下中医人才建设、完善互联网+中医平台建设.

    作者:林薇;刘兴隆 刊期: 2018年第03期

  • 化肝健脾汤治疗溃疡性结肠炎的疗效评估和机制探讨

    目的 研究化肝健脾汤治疗溃疡性结肠炎的临床疗效并探讨其机制.方法 将68例患者随机分为2组,观察组34例采用化肝健脾汤联合美沙拉嗪缓释颗粒剂治疗,对照组34例采用选用关沙拉嗪缓释颗粒剂治疗,2组均治疗8周,观察2组症状积分、证候疗效、结肠镜检查积分、血清TNF-α、IL-1β3和IL-6水平.结果 与治疗前相比,两组患者的症状积分都明显降低(P<0.05),与对照组相比,治疗后观察组的症状积分下降明显(P<0.05).在两组证候疗效比较中,观察组为94.1%,对照组为76.5%,两组相比,差异有统计学意义(P<0.05).两组结肠镜检查积分均较治疗前降低(P<0.05),但观察组比对照组下降明显(P<0.05).在两组治疗前后血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平比较中,两组炎症因子水平明显下降(P<0.05),与对照组治疗后相比,观察组下降明显(P<0.05).结论 化肝健脾汤联合美沙拉嗪可以有效地改善患者临床症状及内镜下表现,降低血清炎症因子水平,化肝健脾汤的清肝疏肝柔肝,理气祛湿健脾之功与传统气机升降理论和圆运动理论不谋而合,该疗法值得临床推广应用.

    作者:余利华;葛飞;严晶 刊期: 2018年第03期

  • 双参颗粒剂的制备

    目的 研究人参皂苷佳提取工艺,与刺五加提取物一同作为原料药,制备双参颗粒剂.方法 通过正交实验优化人参皂苷的佳提取条件;筛选制备双参颗粒剂所需辅料,通过正交实验优化其处方.结果 人参皂苷的佳提取条件为6倍量的80%乙醇,80℃回流提取2次,每次3h;双参颗粒剂的制备方法为:以人参干浸膏和刺五加提取物(1∶2∶1)为原料药,并与蔗糖、β-环糊精的比为1∶1∶0.5,10% CMC-Na为黏合剂,16目筛制粒,30℃烘干,16目筛整粒.结论 实验可有效提取人参皂苷,制备的双参颗粒剂口感良好、粒度符合要求.

    作者:付佳;苑广信;安丽萍;杜培革;赵南晰 刊期: 2018年第03期

  • 逍遥散加减干预高催乳激素血症模型动物促卵泡刺激素受体的表达及意义

    目的 探讨逍遥散加减对高催乳激素血症(HPRL)模型动物促卵泡刺激素受体(FSHR)基因的表达,以探讨其对生殖轴的影响.方法 除空白组外,运用甲氧氯普胺腹腔注射制作HPRL大鼠模型.将模型大鼠随机分为模型对照组,溴隐亭组,低、中、高剂量逍遥散组,待各组完成治疗,处死,取股动脉血,采用定量PCR测定实验动物血清FSHR的表达;ELISA法测血清FSH、LH、E2、P、T的含量.结果 高剂量逍遥散组能升高血清FSHR含量,P<0.05.FSH、LH有降低趋向,E2、P有增加趋向,各剂量组呈量效关系;但对T影响不大.结论 通过实验研究,逍遥散加减可能通过改善高催乳激素血症模型动物FSHR、性激素水平,从而起到治疗目的.

    作者:许露;李燕;张泰魏 刊期: 2018年第03期

  • 对比论述中医和苗医对癌因性疲乏的认识

    癌因性疲乏(cancer-related fatigue,CRF)普遍存在于恶性肿瘤病人中.在当代医学模式的影响下,对恶性肿瘤的治疗除了对肿瘤本身的治疗外,提高病人的生活质量也开始备受关注.CRF较普通疲乏而言有程度重、持续时间长且不能通过休息缓解的特点,对病人的日常生活造成严重的负面影响,因而得到医护人员和病人越来越多的重视.中医药及苗族医药经过中国历代医家的传承与发展,形成了相对完善的理论体系.两个学科在对CRF的认识和治疗上各具特色,本文主要从中医理论和苗医理论对CRF认识作对比论述,旨在指导临床实践,为治疗CRF的研究提供思路.

    作者:刘欣欣;杨柱;崔瑾;龙奉玺;张震;税会利;邓茜;唐东昕 刊期: 2018年第03期

  • 紫蕊凝胶质量标准研究

    目的 为开发利用地衣资源的紫玉凝胶建立质量控制方法.方法 采用薄层鉴别法对紫蕊凝胶中巴巴酸进行鉴别;采用高效液相法对制剂中巴巴酸含量进行测定;色谱条件:Diamonsil C18,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(80:20),检测波长378nm,柱温30℃.结果 薄层色谱法鉴别聚筛蕊凝胶剂的特征斑点明显,喷洒10%的浓硫酸溶液之后在105℃的烘箱里加热显现淡紫色的斑点;巴巴酸在10~100μg/ml之间线性良好,精密度及加样回收试验结果符合要求.结论 该法简便易用,专属性好、结果准确,可用于紫蕊凝胶的质量控制.

    作者:胡奇志;李平凤;方蕙芳;王学军;胡成刚 刊期: 2018年第03期

  • 从“心胸内关谋”浅论经穴脏腑相关学说

    内关穴与心脏密切相关有着大量的理论与实验依据,但当前大部分研究,如经穴诊断方面研究仍停留在初步认识阶段,缺乏系统性的机制探索.经穴脏腑相关的实质可能是在一定物质结构基础上,经穴状态、脏腑组织功能状态自身调节,动态塑造后的彼此影响.以内关穴与心脏交互作用为切入点,运用高通量的表观遗传技术,研究经穴脏腑相关学说对深入挖掘和阐释经穴脏腑理论的科学内涵具有重要意义.

    作者:陶嘉磊;顾一煌;卢圣锋;刘辛同;张宏如 刊期: 2018年第03期

  • 黄芪多糖体外干预大鼠骨髓源性内皮祖细胞共培养对雪旺细胞增殖的影响

    目的 观察黄芪多糖体外干预大鼠骨髓源性内皮祖细胞共培养对雪旺细胞增殖能力的影响.方法 采用密度梯度离心法分离、培养、纯化大鼠骨髓源性内皮祖细胞;利用FITC-UEA-1和Dil-acLDL双染色及流式细胞术检测细胞表型对其进行抽样鉴定;雪旺细胞采用细胞株复苏,当细胞传代培养至所需数量时,将两种细胞通过Transwell共培养体系进行培养,并予以不同浓度的黄芪多糖(0.05mg/ml、0.1mg/ml、0.2mg/ml、0.4mg/ml、0.8mg/ml)干预培养24h,时效关系研究中予以不同时间(Oh、6h、12h、24h、48h)干预进行培养.MTT比色法检测雪旺细胞的增殖情况.结果 黄芪多糖体外干预大鼠骨髓源性内皮祖细胞共培养能明显促进雪旺细胞的增殖,并呈一定的浓度和时间依赖性.黄芪多糖浓度为0.4mg/ml时增殖能力为显著(P<0.01);时效关系研究中培养24h增殖能力达到佳效应(P<0.01).结论 黄芪多糖体外干预大鼠骨髓源性内皮祖细胞共培养能有效促进雪旺细胞的增殖.

    作者:陈永华;徐寒松;吴青;吴春;李吉灿;蒋梅;王治义 刊期: 2018年第03期

  • “寒湿入营”与肿瘤恶病质

    肿瘤恶病质的中医研究纷杂,但缺乏对关键病机的统一认识和准确表述,不利于恶病质的针对性治疗[1].“寒湿入营”指脾肾阳虚,寒湿内生,混于水谷精微,上奉于心化生营血,心阳不足不能温化营血之邪,久则寒凝湿阻、营血壅滞,可见纳差、消瘦、乏力;舌胖大水滑上覆如泥浆水状苔;脉细涩无力等表现.其发展过程和临床表现均与恶病质相似互通,提示“寒湿入营”在肿瘤恶病质发生发展的中扮演了重要角色,以此切入深层挖掘肿瘤恶病质的关键病机和对应治法方药可丰富其临证手段.

    作者:夏孟蛟;金钊;郑川;祝捷;严然;由凤鸣 刊期: 2018年第03期

  • 基于综合评分法的不同产地加工方法对天花粉药材质量的影响

    目的 为了优选黔产天花粉的佳产地加工方法.方法 分别采用阴干、晒干、烘干、微波干燥、水浸后捣碎晒干等不同加工方法对新鲜天花粉药材进行加工处理,以天花粉蛋白、多糖、皂苷、水溶性浸出物、醇溶性浸出物为评价指标,采用综合评分法优选天花粉的佳产地加工方法.结果 天花粉不同产地加工方法的综合评分值差异较大,从大到小的顺序依次为微波干燥(0.71)>烘干(0.47)>晒干(0.25)>阴干(0.17)>水浸后捣碎晒干(0.00).结论 微波干燥为天花粉的佳产地加工方法,佳工艺为:取天花粉鲜药材,除去杂质泥土,刮去外皮,切成0.5cm厚的斜片,于55 ℃微波干燥箱中烘干.该方法能较好地控制天花粉药材的质量.

    作者:冯果;吴增光;刘文;李玮;何新;王劲楠;郑传奇;刘青;陈荧荧 刊期: 2018年第03期

  • 电针对肥胖鼠脂质代谢中游离脂肪酸、载脂蛋白A1和载脂蛋白B的影响

    目的 探讨电针对肥胖鼠的脂质代谢游离脂肪酸(FFA)、载脂蛋白Al(Apo-A1)和载脂蛋白B(Apo-B)的影响.方法 复制营养性肥胖模型,将肥胖鼠均分成模型组、电针7天组、电针14天组、电针21天组及电针28天组.电针组选取天枢、关元、足三里及三阴交,施以补法干预,得气后接通电针,观察各组小鼠的体重、Lee§指数、血脂四项、FFA、Apo-A1和Apo-B的差异.结果 模型组的体重、Lee's指数显著正常组,电针各组呈现梯度下降,电针21天组较之其他电针组,在降低CHO(4.68±0.64)、TG(3.47±0.87)、FFA(12.36±3.72)、Apo-A1(13.04±0.99)及Apo-B(55.39±7.38)尤为显著.结论 电针能够提高脂质代谢率,降低肥胖鼠的血脂浓度,达到减肥消脂的目的.

    作者:司原成;苗维纳;何嘉悦;丁维俊 刊期: 2018年第03期

  • 涤痰汤对痰浊阻窍型MCI模型大鼠血脂及氧化应激指标的影响

    目的 采用D-半乳糖结合半高脂饲料复合因素构建痰浊阻窍型轻度认知功能障碍(mild cognitive impairment,MCI)大鼠模型,观察和探讨涤痰汤对模型大鼠学习记忆、血脂、氧化应激指标的影响.方法 将13月龄SD大鼠随机分为老年对照组、MCI模型组(简称模型组)、西药组(盐酸多奈哌齐片,0.9 mg·kg-1)、中药低剂量组(涤痰汤,4.275 g·kg-1)、中药高剂量组(涤痰汤,8.55g· kg-1),另设3月龄大鼠为青年对照组.采用颈部皮下注射D-半乳糖8周,后4周加服半高脂饲料喂食的方法建立MCI大鼠模型.西药组、中药低剂量组、中药高剂量组分别予盐酸多奈哌齐片(0.9mg·kg-1)、涤痰汤(4.275 g·kg-1)、涤痰汤(8.55g·kg-1)灌胃4周,模型组、老年对照组、青年对照组予等容积蒸馏水灌胃.采用Morris水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力,生化分析仪检测血脂水平,比色法测定海马组织中T-AOC、GSH-Px含量.结果 行为学实验结果显示:模型组大鼠潜伏期明显延长(与老年对照组相比,P<0.01);中药高剂量组、西药组潜伏期明显缩短(与模型组相比,P <0.01)、低剂量组潜伏期亦缩短(P<0.05);中药各剂量组与西药组间差异无显著性.血脂检测表明,与对照组比较,模型组总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)均增高(与青年组比较P<0.01,与老年组比较P<0.05);与模型组比较,涤痰汤高剂量组TC、LDL-CTG减低(P<0.05),TG明显减低(P<0.01),涤痰汤低剂量组TG减低(P<0.05),盐酸多奈哌齐组无明显变化(P>0.05).海马组织T-AOC及GSH-Px含量测定则显示:与模型组相比,涤痰汤高剂量组与盐酸多奈哌齐组T-AOC含量均明显增加(P<0.01),涤痰汤低剂量组T-AOC含量也有所增加(P<0.05),涤痰汤高剂量组GSH-Px增加明显(P<0.01),盐酸多奈哌齐组和涤痰汤低剂量组GSH-Px含量也有增加(P<0.05).结论 通过D-半乳糖和半高脂饲料相结合构建的MCI大鼠模型可表现明显的认知能力障碍,涤痰汤能显著提高模型大鼠的学习记忆能力,降低模型大鼠TC、TG、LDL-C水平,增加T-AOC及GSH-Px含量.

    作者:彭静;刘玲;陈钢;胡继军;李博宁 刊期: 2018年第03期

  • 中药谱效关系研究思路与应用概况

    中药谱效关系结合中药指纹图谱与其相应的药效学作用,能够揭示指纹图谱与药效学相关关系,能够较为全面地反映中药质量,为中药质量控制提供了研究基础.文章从中药谱效关系的研究思路、研究方法、近年来中药谱效关系应用概况、优势与不足、总结与展望这几个方面进行综述,以期为中药质量控制提供更全面的借鉴和参考.

    作者:刘英;徐永莉;李力 刊期: 2018年第03期

时珍国医国药杂志

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