学术投稿

重组人白细胞介素24蛋白的纯化及其对胃癌细胞凋亡的影响

韩梅;陈卫昌;严苏

关键词:白细胞介素24, 胃癌细胞, 凋亡
摘要:目的纯化人白细胞介素24的原核重组表达质粒pET-21a(+)-IL-24在大肠杆菌BL(DE3)中的表达产物rhIL-24,并观察重组表达蛋白rhIL-24在体外对胃癌细胞株SGC-7901凋亡的影响.方法 IPTG诱导原核表达载体pET-21a(+)-IL-24在大肠杆菌中表达rhIL-24,经纯化、复性后作用于人胃癌细胞株SGC-7901.MTT法检测rhIL-24对细胞生长的影响,流式细胞仪检测凋亡峰,荧光染色观察细胞凋亡形态.结果 rhIL-24对体外培养的胃癌细胞SGC-7901有明显的生长抑制作用,且呈时间、剂量依赖性.rhIL-24蛋白30μg/ml作用于SGC-7901细胞24h后,流式细胞仪检测结果显示有明显的凋亡峰出现,荧光染色后显示染色质固缩,细胞核呈致密浓染或呈碎块状致密浓染.结论本实验成功纯化IL-24原核表达产物rhIL-24,对体外培养的胃癌细胞株SGC-7901有明显的生长抑制、诱导凋亡作用.
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  • COX-2在卵巢上皮性癌中的表达及临床意义

    目的研究卵巢上皮性癌中环氧化酶-2(COX-2)的表达情况.方法采用免疫组化法用COX-2特异性抗体检测57例卵巢上皮性癌、20例卵巢良性上皮性肿瘤和10例正常卵巢组织中COX-2的表达.结果卵巢上皮性癌和卵巢良性上皮性肿瘤组织中有COX-2的免疫着色,而正常卵巢组织中未见一例着色.卵巢上皮性癌中COX-2(61.40%)的阳性表达率明显高于卵巢良性上皮性肿瘤和(25.0%)正常卵巢组织(P《0.05),COX-2的表达与卵巢上皮性癌的临床分期、病理分级及腹水的多少无关(P》0.05).结论 COX-2表达上调可能与卵巢上皮性癌的发生有关,COX-2蛋白能为卵巢癌的早期诊断提供依据.

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  • Pilon骨折32例临床疗效分析

    将32例Pilon骨折,根据Ruedi-Allgower分型,分别进行了石膏外固定、切开复位解剖钢板内固定、有限内固定结合外固定治疗,同时给予术后必要的对症治疗与合理的功能锻炼,探讨Pilon骨折的治疗方法.结果:随访10~24个月,平均16个月,按照Mazur评分系统评估疗效,32例患者,优12例,良16例,中2例,差2例,优良率达87.5%.并发症:1例发生伤口感染,无深部感染;1例胫前软组织坏死,骨质裸露;1例外固定器针眼感染;2例迟延愈合.结果表明,根据骨折类型和软组织条件,选择合适的治疗方法可以取得良好的治疗效果.

    作者:魏福堂;李艳梅;张本寿;黄洪;邹吉林;徐志久 刊期: 2006年第03期

  • 急性心肌梗死介入治疗与溶栓治疗的疗效比较

    目的对比急性心肌梗死成功介入治疗及成功溶栓治疗的近期疗效和远期疗效.方法共纳入56例首发心梗患者,既往无心衰病史.随机分别接受介入治疗或溶栓治疗,均治疗成功.并在入院7.5±0.4 d时行超声心动图检查.并随访其心源性死亡事件的发生.结果介入治疗组有27例和溶栓治疗组有29例,在入院7.5±0.4 d时行超声心动图检查,左室射血分数(LVEF)介入组为(57.6±2.3)%,溶栓组为(49.9±1.9)%相比较有显著差异(P<0.01).但左室舒张末内径(LVEDD)介入组为53.42±6.28 mm,溶栓组为53.18±5.69 mm相比较无显著差异(P<0.5).在进行了平均为期548.7±48.9 d随访后发现介入组生存率为85.2%,溶栓组生存率为79.3%(P<0.5),两组的生存率分布无显著差异.结论在轻中度的急性心梗患者中,使用了普通支架的介入治疗改善急性心肌梗死后近期内的心功能明显优于溶栓治疗;但对于急性心肌梗死后的长期预后则可能无明显的优势.

    作者:陆建辉;洪小苏;徐卫亭 刊期: 2006年第03期

  • 外伤性肩关节后脱位的诊断和治疗(附6例报告)

    分析6例外伤性肩关节后脱位的诊治情况,探讨其诊断方法和临床疗效.结果:6例患者,初诊时误诊、漏诊4例.所有患者均在加拍肩关节穿胸位片或CT后确诊.误诊、漏诊4例中2例行切开复位,其余患者均闭合复位成功.随访6~24个月,闭合复位4例UCLA评分30~33 分,切开复位2例UCLA评分分别为19分和26分.提示仔细的临床查体和合适的影象学检查对诊断具有重要意义,早期闭合复位可获得良好的功能恢复.

    作者:朱立帆;杨惠林;王遥伟 刊期: 2006年第03期

  • 重组人白细胞介素24蛋白的纯化及其对胃癌细胞凋亡的影响

    目的纯化人白细胞介素24的原核重组表达质粒pET-21a(+)-IL-24在大肠杆菌BL(DE3)中的表达产物rhIL-24,并观察重组表达蛋白rhIL-24在体外对胃癌细胞株SGC-7901凋亡的影响.方法 IPTG诱导原核表达载体pET-21a(+)-IL-24在大肠杆菌中表达rhIL-24,经纯化、复性后作用于人胃癌细胞株SGC-7901.MTT法检测rhIL-24对细胞生长的影响,流式细胞仪检测凋亡峰,荧光染色观察细胞凋亡形态.结果 rhIL-24对体外培养的胃癌细胞SGC-7901有明显的生长抑制作用,且呈时间、剂量依赖性.rhIL-24蛋白30μg/ml作用于SGC-7901细胞24h后,流式细胞仪检测结果显示有明显的凋亡峰出现,荧光染色后显示染色质固缩,细胞核呈致密浓染或呈碎块状致密浓染.结论本实验成功纯化IL-24原核表达产物rhIL-24,对体外培养的胃癌细胞株SGC-7901有明显的生长抑制、诱导凋亡作用.

    作者:韩梅;陈卫昌;严苏 刊期: 2006年第03期

  • 必存对脑缺血再灌注损伤的保护作用

    目的探讨有效治疗急性脑缺血再灌注损伤的新药物.方法采用线栓法制备大鼠大脑中动脉再灌注模型,将必存溶于生理盐水,在建立模型后1 h,6 h或24 h注入大鼠股静脉中,1星期后分别断头取大鼠脑组织作病理切片并计算梗死体积.结果对照组,0.5 mg必存治疗组,1 mg必存治疗组,坏死体积依次明显减少. 结论必存对脑缺血再灌注损伤组织有明显的保护作用.

    作者:李剑伟 刊期: 2006年第03期

  • 磷脂酰肌醇3(PI3K)激酶信号途径对血小板源生长因子促肝星状细胞增殖与Ⅰ型胶原表达的影响

    目的观察磷脂酰肌醇3激酶特异性抑制剂(LY294002),对血小板源生长因子(PDGF-BB)促大鼠肝星状细胞(HSC)增殖与Ⅰ型胶原表达的影响,并探讨其作用机制.方法用不同浓度的PDGF-BB和LY294002对大鼠肝星状细胞株(HSC-T6)进行处理,MTT法检测细胞的增殖,逆转录聚合酶链反应方法(RT-PCR)检测HSC-T6内I型胶原mRNA的表达.结果 PDGF-BB在浓度1~10 ng/ml 时呈剂量依赖性地促进HSC细胞增殖(P《0.05),当浓度大于10 ng/ml 时处理组间无显著差异(P》0.05),其促增殖作用达到饱和.5 μmol/L、10 μmol/L、25 μmol/L 的LY294002均能显著且剂量依赖性地抑制PDGF-BB刺激的HSC-T6增殖(P《0.001). PDGF-BB能促进HSCⅠ型胶原mRNA表达,24 h、48 h时相对于对照组的表达量为112.2%,182.5%.LY294002能显著抑制PDGF-BB促Ⅰ型胶原表达,24 h、48 h时相对表达量为76.4%,52.6%.结论磷脂酰肌醇3激酶信号途径是调节血小板源生长因子促肝星状细胞增殖与分泌胶原的重要通道,抑制该通路可以抑制肝星状细胞增殖和胶原表达,具有抗肝纤维化的作用,对防治肝纤维化有一定的意义.

    作者:徐永锋;管洪庚;薛万江;岑建农;谷敏 刊期: 2006年第03期

  • 顽固性胸腔积液的诊治分析

    分析21例顽固性胸腔积液的病因、临床特点及处理措施.探讨顽固性胸腔积液的发病原因、临床特点及诊治方法.结果:12例症状缓解,9例治愈出院,随访症状消失,疗效满意.提示恶性肿瘤、结核、术后心功能不全、低蛋白血症、乳糜胸、二次手术等为顽固性胸腔积液发病的主要原因,及时查明病因,针对病因进行的治疗及采取胸腔闭式等必要的辅助治疗是关键.

    作者:杨华;沈振亚;翟光地;胡江文;陈一欢 刊期: 2006年第03期

  • 米索前列醇对绝经妇女取环术中软化宫颈的作用

    绝经期的妇女由于子营萎缩、子宫颈缩紧及宫内节育环放置时间较长,多种原因造成取环手术的困难和手术失败.近年来,米索前列醇在妇产科领域中得到广泛应用,取得了良好的临床效果,为避免受术者的痛苦,便于取环,我们采用米索前列醇阴道置药的方法为绝经的妇女取环,取得了良好的效果,现报道如下.

    作者:王爱芬;郭金娥;侯丹凤 刊期: 2006年第03期

  • 子宫全切除术后性心理状况调查

    子宫是女性生殖系统中的一个重要器官,在女性的精神生活中具有重要意义.子宫全切除术对妇女的日常生活来说是重大的应激事件,愈来愈多的学者认为应对子宫全切术妇女的性心理给予关注[1].了解子宫全切除术妇女的性心理状况,为该人群提供必要的心理疏导,提高夫妻生活质量,已引起人们的关注.2004年至2005年我科调查了382名子宫全切除妇女的性心理状况,现将结果报道如下.

    作者:周萍;徐惠民 刊期: 2006年第03期

  • 儿童感染幽门螺杆菌的情况分析

    使用13C-尿素呼气试验(13C-UBT)的方法对200例有症状及无症状的儿童进行幽门螺杆菌感染的检测分析.探讨儿童感激幽门螺菌后症状出现及不同年龄儿童的感染现状.结果:幽门螺杆菌在100名有症状儿童的感染率较高,为31%,而100名无症状儿童也有一定的感染率,为6%,两者存在显著性差异(P<0.01).且随着年龄的增长,幽门螺杆菌的感染率有增长趋势.提示幽门螺杆菌在儿童的总体感染率较高,感染后多数表现有消化道症状,有利于及时发现和治疗,从而避免发生严重的病变,同时应积极预防家庭内部的接触传播,减少儿童的感染率.

    作者:朱海娟;冯星;武庆斌 刊期: 2006年第03期

  • 螺钉及钢丝固定治疗儿童肘内翻畸形

    采用两枚螺钉及钢丝捆扎固定肱骨远端闭合楔形截骨两端治疗儿童肘内翻畸形10例,平均随访2年,长达4年.探讨儿童肘内翻畸形的手术治疗方法.结果:术前患侧提携角平均-25°,术后提携角平均7°,术后较术前平均改变32°,无畸形复发,神经损伤,感染等并发症的出现.10例均达到.提示螺钉及钢丝捆扎固定肱骨远端闭合楔形截骨两端能获得稳定的内固定,不易丢失矫正角度,可同时作肱骨远端截骨块的的去内旋,是安全、有效的治疗肘内翻的方法.

    作者:孙祥水;王晓东;张锡庆;王科文;朱振洪;冯林 刊期: 2006年第03期

  • TRUP术中动态观察尿道外括约肌水平预防术后尿失禁

    经尿道前列腺电切术(TRUP)术中动态观察尿道外括约肌水平.探讨术中预防医源性尿失禁的方法.结果:98例患者中,6例术后出现短暂尿失禁,很快恢复,其余术后尿控功能均正常.提示经尿道电切术中动态观察尿道外括约肌水平可有效预防术后尿失禁的发生.

    作者:陆奇男;杨斌 刊期: 2006年第03期

  • 孕妇外伤后胎盘早剥16例临床资料分析

    回顾性分析16例孕妇外伤后胎盘早剥的临床资料.探讨孕妇外伤后胎盘早剥的临床特点及诊治要点.结果:孕妇腹部外伤后出现临床症状的时间跨度大,短伤后立即出现,长伤后12 h,确诊时间为2.5 h~16 h不等.提示孕妇外伤后引起胎盘早剥并不一定马上出现临床症状,应加强监护,观察宫缩、宫底高度变化、胎心率,伤后宫缩及胎心率的监测可预测或早期发现胎盘早剥;宫底高度变化与胎盘早剥关系密切,胎盘早剥的严重度与发现胎盘早剥的时间有关.

    作者:陈卫民 刊期: 2006年第03期

  • 敌敌畏急性中毒小鼠脑ATP酶的活性检测

    目的观察小鼠敌敌畏急性中毒后脑组织各区域的Ca2+/Mg2+-ATP酶和Na+/K+-ATP酶的活性水平,探讨敌敌畏中毒对中枢神经系统的影响.方法雄性小鼠16只,随机分成中毒组和对照组,中毒组按25 mg/kg腹腔注射敌敌畏,对照组注射生理盐水.25 min后处死,分别测定大脑、小脑和脑干组织内的Ca2+/Mg2+-ATP酶、Na+/K+-ATP酶的活性水平.结果脑组织中的ATP酶的活性水平都有不同程度的降低.在小脑,敌敌畏中毒组的两种ATP酶活性分别是对照组的62.11%,47.56%.在脑干,中毒组的两种ATP酶活性分别是对照组的67.72%,64.83%.在大脑的Ca2+/Mg2+-ATP酶和Na+/K+-ATP酶活性水平有下降,但两组相比无统计学差异性.结论敌敌畏中毒引起脑组织Ca2+/Mg2+-ATP酶和Na+/K+-ATP酶活性水平降低,共同导致脑细胞内钙稳态失衡,影响了神经递质的释放.

    作者:宁宗;邝晓聪;李其斌;赵晓琴 刊期: 2006年第03期

  • rhIL-24基因抑制胃癌生长及作用机制的实验研究

    目的探讨rhIL-24蛋白体外对胃癌生长的影响及作用机制.方法用已构建成功的真核表达载体pcDNA3.0-IL24质粒转染中国仓鼠卵巢细胞CHO细胞,使其上清稳定表达rhIL-24,同时用已构建成功的原核表达载体PET21a(+)IL-24-BL-21,抽提BL-21菌中表达的rhIL-24,行SDS-PAGE电泳和Western-Blotting鉴定rhIL-24的表达,MTT法检测rhIL-24对SGC7901胃癌细胞生长的影响;Hoechst染色、流式细胞术检测CHO细胞和BL-21菌表达的rhIL-24诱导胃癌细胞凋亡;鸡胚绒毛尿囊膜试验观察rhIL-24对血管形成的影响.结果 rhIL-24对胃癌细胞的生长有明显的抑制作用;rhIL-24可诱导SGC7901胃癌细胞凋亡;rhIL-24具有抑制血管形成的作用.结论 rhIL-24蛋白有多重抗肿瘤能力,其可能的作用机制是明显抑制胃癌细胞增殖,诱导肿瘤细胞凋亡,抑制血管生成.

    作者:严苏;韩梅;谢宇锋;盛伟华;陈卫昌;杨吉成 刊期: 2006年第03期

  • ZEPHIR颈椎前路钢板治疗脊髓型颈椎病的疗效分析

    回顾性分析31例行颈椎前路减压、保留终板三面皮质骨自体髂骨植骨、Zephir半限制性钢板固定术患者的疗效;术后随访2~4年,观察临床功能、植骨融合率、手术节段椎间隙高度变化、相邻节段退变的情况.JOA评分,术后与术前差异有高度统计学意义(P<0.01).植骨融合率100%.手术节段椎间隙高度维持满意,相邻节段椎间盘无明显退变,未发生内植物和植骨并发症.提示彻底减压,保留终板的三面皮质骨自体髂骨植骨和应用动力性的Zephir钢板固定能保证脊髓型颈椎病良好的手术疗效.

    作者:姚啸生;王靖;唐天驷;杨惠林;姜为民;李洪久 刊期: 2006年第03期

  • 189例急诊外科死亡病例分析及临床意义

    对189例急诊外科死亡的病例致伤原因和特点进行分析,提出加强院前急救和建立急诊绿色通道对提高创伤救治率,降低死亡率和伤残率的重要性.

    作者:刘浩宇 刊期: 2006年第03期

  • 缺血预处理对肝线粒体的保护作用

    建立大鼠肝脏缺血再灌注模型,将24只健康雄性SD大鼠随机分为假手术、缺血再灌注、10 min缺血预处理、20 min缺血预处理4组,后两组分别以缺血前短暂缺血再灌注各10 min和20 min作预处理.采用DiOC6染色后流式细胞仪测线粒体膜电位,化学法测抗超氧阴离子自由基、ATP酶活力,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测肝细胞凋亡状态,透射电镜观察肝组织超微结构的病理形态学变化.此法用来探讨在急性肝脏缺血再灌注损伤中缺血预处理对肝细胞线粒体的保护作用及有效的缺血预处理时间.结果与缺血再灌注组相比,10 min缺血预处理组线粒体膜电位明显增高,抗超氧阴离子自由基能力明显增强,ATP酶亦明显减少,而肝细胞凋亡指数则明显下降,线粒体形态表明其肿胀损伤程度亦明显减轻;20 min缺血预处理组则变化不明显.提示10 min缺血预处理可通过上调线粒体跨膜电位,降低线粒体膜通透性;上调抗超氧阴离子自由基活力以增强肝线粒体抗氧自由基能力,减少氧自由基的合成,从而保护肝线粒体超微结构;下调ATP酶活性使ATP含量升高,电子传递功能恢复正常,从而改善肝功能,减轻肝缺血再灌注损伤;抑制肝脏缺血再灌注损伤中肝细胞凋亡的发生来保护肝线粒体.而20 min缺血预处理则不能起到保护作用.

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  • CD40配体激活抑制胃癌细胞生长机制的实验研究

    目的探讨CD40配体激活对胃癌细胞生长、增殖和凋亡的影响.方法 MTT法检测不同浓度sCD40L作用后AGS胃癌细胞株存活率,选定佳干预浓度;流式细胞术检测sCD40L佳干预浓度作用后胃癌细胞株AGS、BGC-823细胞周期和凋亡的变化.结果 sCD40L的佳干预浓度为2 μg/ml;与胃癌细胞株AGS、BGC-823共育48 h,sCD40L可使高表达CD40的AGS细胞生长抑制,细胞周期阻滞在G1期,而对CD40低表达的BGC-823细胞生长无明显影响,并且AGS、BGC-823细胞均无明显的凋亡变化.结论 sCD40L可明显抑制CD40高表达胃癌细胞的生长,其机制是使细胞周期阻滞.

    作者:庞雪芹;陈卫昌;李锐;岑建农 刊期: 2006年第03期

苏州大学学报(医学版)杂志

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