学术投稿

miR-29b的作用靶点及其对Huh7细胞增殖及凋亡的干预作用

徐海和

关键词:肝肿瘤, Huh7, Mcl-1, 细胞增殖, 细胞凋亡, miR-29b
摘要:目的:探讨miR-29b(microRNA-29b)的作用靶点及其对肝肿瘤细胞系Huh7细胞增殖及凋亡的干预作用。方法荧光定量PCR检测正常肝细胞系LO2及肝癌细胞系Huh7的miR-29b和Mcl-1表达水平。通过生物信息学分析预测Mcl-1基因是否受microRNA调控。将miR-29b模拟物通过Lipofectamine 2000顺时转染Huh7细胞,检测miR-29b对Mcl-1表达水平的影响。MTT法检测miR-29b模拟物转染对Huh7细胞增殖的影响。Annexin V/PI染色法检测miR-29b对Huh7细胞凋亡的影响。结果肝肿瘤细胞相比于正常肝细胞高表达Mcl-1(3.42依0.15比1.00依0.04,P<0.05)低表达miR-29b(0.43依0.04比1.00依0.06,P<0.05),在肝癌细胞中转染miR-29b可使Mcl-1的表达水平下降(0.37依0.03比1.03依0.07,P<0.05),转染miR-29b可抑制Huh7细胞的增殖(0.85依0.11比1.68依0.17,P<0.05)并诱导其发生凋亡[(28.4依2.10)%比(3.6依0.06)%,P<0.05]。结论 MiR-29b下调Huh7细胞Mcl-1蛋白的表达并诱导其发生凋亡。
浙江中西医结合杂志相关文献
  • 早期肠内营养对脑创伤患者内分泌功能的影响

    创伤性颅脑损伤(traumatic brain injury,TBI)是指由跌落、车祸、斗殴等创伤因素引起的颅脑损伤,具有高发病率和高死亡率的特点[1-3]。肠内营养支持可以降低颅脑损伤患者的感染率和死亡率[4]。创伤后急性期颅内多处于脑水肿反应高峰,机体呈高代谢和高分解状态,文献[5-6]表明,内分泌系统也直接或间接参与创伤后代谢和免疫反应的影响。肠内营养支持可以提高颅脑损伤患者临床疗效和预后[5,7],本研究探讨早期与晚期肠内营养支持对脑创伤患者内分泌功能的影响。

    作者:应满珍;张为民;程旭萍;吴木莹 刊期: 2015年第04期

  • 血清降钙素原联合超敏C反应蛋白对慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者病情判断的意义

    慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmo-nary disease,COPD)对老年患者的健康具有极大的危害[1]。COPD急性加重期(AECOPD)可使患者肺功能急剧恶化,严重影响患者生活质量。下呼吸道感染是AECOPD的主要诱因,细菌性感染、病毒性感染、真菌性感染均可诱发COPD急性发作,但临床表现无特异性差异[1]。因此,早期判断AECOPD的严重程度对改善患者预后及减少致残率尤为重要。近年研究[2]表明,血清降钙素原(procalciton,PCT)可以作为评价细菌感染、感染性休克的特异性指标;超敏C反应蛋白(high sensitive C reactive protein,hs-CRP)可以作为评价炎症反应程度的特异性指标[3]。本研究旨在探讨AECOPD患者PCT及hs-CRP的变化情况及其对AECOPD病情严重程度判断的临床应用价值。

    作者:蔡小琴;董桂英 刊期: 2015年第04期

  • 清肺补肾壮骨方治疗慢性阻塞性肺疾病合并骨质疏松临床观察

    骨质疏松(osteoporosis,OP)与慢性阻塞性肺疾病(chronic osteoporosisobstructive pulmonary disease, COPD)均为多发常见病[1]。COPD是一种全身气流受限性疾病,具有较高的死亡率,OP是其肺外表现之一[2]。OP是以骨量减少和骨组织微观结构退化为特征,骨的脆性增加,易骨折的一种全身代谢性骨骼疾病。中重度COPD患者容易合并OP,严重影响生活质量[3]。笔者通过中西医结合疗法治疗COPD合并OP,取得较好疗效,现报道如下。

    作者:蔡亚君 刊期: 2015年第04期

  • 小儿止泻巴布剂体外抑菌及皮肤刺激性试验

    目的:对小儿止泻巴布剂进行体外抑菌及皮肤刺激性试验,为其临床应用提供实验依据。方法采用平皿法观察小儿止泻巴布剂浸膏对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单孢杆菌的抑菌效果从而确定低抑菌浓度;应用新西兰兔完整皮肤及破损皮肤进行试验,考察小儿止泻巴布剂对新西兰兔皮肤刺激性反应。结果小儿止泻巴布剂低抑菌浓度(MIC):金黄色葡萄球菌100mg/mL,大肠埃希菌400mg/mL,铜绿假单孢杆菌800mg/mL。新西兰兔完整皮肤组多次给药后两侧皮肤无红斑水肿,破损皮肤组出现轻度红斑及轻度水肿。结论小儿止泻巴布剂有一定的抑菌作用,对新西兰兔完整皮肤无刺激性,对破损皮肤有轻度刺激性。

    作者:王京霞;陈琳;高瑞兰 刊期: 2015年第04期

  • 住院患者尿路感染细菌分布及耐药性分析

    尿路感染是住院患者常见的并发症。随着广谱抗菌药物的大量应用,细菌耐药情况日趋严重,同时也增加了临床经验性治疗的难度。本文分析我院2011—2012年住院患者尿路感染细菌学分布及耐药情况,以期为临床合理使用抗菌药物提供参考。

    作者:顾洪琴 刊期: 2015年第04期

  • 欧前胡素下调Mcl-1蛋白表达诱导人肝癌细胞HepG2凋亡实验研究

    目的:探讨欧前胡素对人肝癌细胞的抑制作用及机制。方法将人肝癌细胞系HepG2用5、10、20、40、80μM的欧前胡素处理24h或48h,以相同培养条件不加欧前胡素的HepG2细胞为对照组,MTT法检测欧前胡素治疗后HepG2细胞的增殖抑制情况;HepG2细胞用10、20、40μM的欧前胡素处理24h,通过流式细胞术和Western blot检测欧前胡素对HepG2细胞的凋亡诱导作用和Mcl-1(myeloid cell leukemia-1)的表达;在HepG2细胞中转染pcDNA-3.1-Mcl-1真核表达载体后再用欧前胡素治疗,检测欧前胡素对HepG2细胞的增殖抑制作用和凋亡诱导效应。结果10、20、40、80μM欧前胡素组增殖抑制率分别为24h:(7.2±1.7)%、(14.5±2.6)%、(37.4±3.7)%、(56.3±4.3)%;48h:(14.5±2.1)%、(23.6±3.0)%、(52.3±4.8)%、(78.3±5.9)%,与对照组(0)比较,差异均有统计学意义(P<0.05);10、20、40μM欧前胡素组凋亡诱导率分别为(3.9±0.8)%、(12.4±1.8)%、(26.9±2.5)%,与对照组(0.5±0.2)%比较,差异有统计学意义(P<0.05)。欧前胡素治疗后,HepG2细胞的Mcl-1表达水平显著下降,用pcDNA-3.1-Mcl-1真核表达载体转染HepG2细胞后,欧前胡素对HepG2细胞的凋亡诱导率较空pcDNA3.1载体转染组显著下降[(6.8±1.2)%比(25.7±2.3)%,P<0.05]。结论欧前胡素具有体外抗肝肿瘤的生物活性,其抗肿瘤效应的机制可能是通过下调Mcl-1蛋白表达从而诱导细胞凋亡。

    作者:俞方红;黄晓燕 刊期: 2015年第04期

  • 多脏器功能障碍综合征患者血浆B型利钠肽水平测定的价值

    多脏器功能障碍综合症(MODS)是指机体受到严重感染、创伤、烧伤等打击后,同时或序贯发生两个或两个以上器官功能障碍以致衰竭的临床综合征。具有高病死率、治疗高耗资和治疗成本持续增加的特点,是当前重症患者疾病发展中后期死亡的主要原因[1]。其血流动力学表现为高动力型循环“高排低阻型”,即主要表现为体循环阻力下降同时伴有心输出量正常或增加,肺循环阻力通常略有增加,右心室后负荷增高,右心室张力增高;同时炎症介质的释放可导致左右心室的功能受到明显抑制,心室射血分数下降,左心室通过增加舒张末容积以增加心搏量。血浆B型利钠肽(BNP)是心功能不全诊断和判断预后的一个十分敏感的客观指标。本研究旨在通过对MODS患者血浆BNP水平的监测分析,探讨血浆BNP水平对MODS患者严重程度及预后的预测价值。

    作者:刘钰;丁伟琪;曾俊;陈建飞 刊期: 2015年第04期

  • 41例急性毒死蜱中毒临床分析

    毒死蜱是一种低毒性的有机磷杀虫剂,随着近年来我国全面禁止生产和销售5种高毒类有机磷农药(甲胺磷、对硫磷、甲基对硫磷、久效磷和磷铵),毒死蜱作为替代品[1],其中毒患者逐渐增多,大多症状较轻,但引起呼吸衰竭甚至死亡者亦有发生。笔者收集2009年7月—2014年5月本院收治的急性毒死蜱中毒患者41例,其中12例并发呼吸衰竭予机械通气治疗,现报道如下。

    作者:胡国豪;陈灵敏 刊期: 2015年第04期

  • miR-29b的作用靶点及其对Huh7细胞增殖及凋亡的干预作用

    目的:探讨miR-29b(microRNA-29b)的作用靶点及其对肝肿瘤细胞系Huh7细胞增殖及凋亡的干预作用。方法荧光定量PCR检测正常肝细胞系LO2及肝癌细胞系Huh7的miR-29b和Mcl-1表达水平。通过生物信息学分析预测Mcl-1基因是否受microRNA调控。将miR-29b模拟物通过Lipofectamine 2000顺时转染Huh7细胞,检测miR-29b对Mcl-1表达水平的影响。MTT法检测miR-29b模拟物转染对Huh7细胞增殖的影响。Annexin V/PI染色法检测miR-29b对Huh7细胞凋亡的影响。结果肝肿瘤细胞相比于正常肝细胞高表达Mcl-1(3.42依0.15比1.00依0.04,P<0.05)低表达miR-29b(0.43依0.04比1.00依0.06,P<0.05),在肝癌细胞中转染miR-29b可使Mcl-1的表达水平下降(0.37依0.03比1.03依0.07,P<0.05),转染miR-29b可抑制Huh7细胞的增殖(0.85依0.11比1.68依0.17,P<0.05)并诱导其发生凋亡[(28.4依2.10)%比(3.6依0.06)%,P<0.05]。结论 MiR-29b下调Huh7细胞Mcl-1蛋白的表达并诱导其发生凋亡。

    作者:徐海和 刊期: 2015年第04期

  • 藏红花有效成分含量比较与相关性研究

    目的:比较藏红花有效成分含量及影响因素,为藏红花高产优质栽培与优良种质选育提供依据。方法在2010年版药典与现有文献基础上,优化藏红花有效成分含量HPLC测定方法,并测量比较11个产地藏红花中有效成分含量,用DPS软件分析经纬度、海拔与有效成分含量间的相关性。结果西红花苷-玉和西红花苷-域分别在6.236耀62.356μg/mL以及3.158耀31.584μg/mL范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系,R2分别为0.9997与0.9996,两者平均回收率分别为99.9%(RSD=1.69%,n=9)与99.4%(RSD=0.86%,n=9);11个产地藏红花中西红花苷-玉、西红花苷-域、西红花总苷含量存在显著差异(P<0.05,P<0.01);经度与西红花有效成分含量呈正相关关系,海拔、纬度与西红花有效成分含量呈负相关关系。结论本方法测定藏红花有效成分含量简便、准确、重复性好,我国引种的藏红花有效成分含量高,质量好,低纬度、高经度地区并视种质选择海拔高度区别种植藏红花有利于有效成分积累。

    作者:朱芳萍;吕伟旗;张青莲;吴春美 刊期: 2015年第04期

  • 耳鸣习服疗法治疗非急性原发性耳鸣临床观察

    耳鸣是耳科临床常见三大顽症之一。近年来耳鸣研究领域的主要进展是Jastreboff创立的耳鸣神经生理学模式及根据该学说建立的耳鸣再训练疗法[1]。我院用耳鸣习服法(TRT)配合药物治疗非急性原发性耳鸣患者71例,报道如下。

    作者:陈华君;陈柳勇 刊期: 2015年第04期

  • 槌果藤实验研究与临床应用进展

    槌果藤(capparis spinosa L.)为百花科植物,又名老鼠瓜、野西瓜、槌果藤、瓜儿菜或抗旱草。主要分布于亚洲西部、欧洲、北美和大洋洲,我国主产西北干旱地区,新疆各沙漠区分布较多,新疆假龙胆(he rb a gentianeUac,又称新疆阿帕斯)及槌果藤(capparis spinosa L)都是维吾尔医常用药,材据中医文献[1-2]记载有祛风、散寒、除湿、消肿、止痉挛、止痛之效。在我国,槌果藤的临床用药和药理研究并未成熟,为更好的利用这一资源,现对近年来国内外学者的临床和实验研究工作综述如下。

    作者:周夏娟;应旭旻 刊期: 2015年第04期

  • 积极降压或可降高血压1级患者死亡风险

    多国学者联合研究显示,对于无并发症的高血压1级患者,降压治疗或可预防卒中和死亡。论文发表于《内科学年鉴》[Ann Intern Med 2015,162(3):184]杂志。该系统性回顾和荟萃分析所纳入研究包括降压治疗协作试验(BPLTTC)和先前经系统回顾和电子数据检索确认的试验,这些试验的设计为:无心血管疾病的高血压1级(140~159mmHg/90~99mmHg)患者被随机分为接受积极(抗高血压药物或更强化的治疗策略)或对照(安慰剂或非强化治疗方案)降压治疗。以了解药物降压是否可预防高血压1级患者的心血管事件和死亡。结果为,平均血压降低约为3.6/2.4mmHg。在5年间,两组间总心血管事件、卒中、冠脉事件、心衰、心血管死亡和总死亡的比值比(OR)分别为0.86、0.72、0.91、0.80、0.75和0.78.由于不良反应事件而退出治疗者在积极治疗组更常见。

    作者: 刊期: 2015年第04期

  • 赖氨肌醇维生素B12口服液治疗小儿厌食症疗效观察

    小儿厌食症是儿科常见疾病,是指非疾病因素如喂养不当、饮食失节等引起的脾胃功能失调,致使长时间食欲不振甚至消瘦,是多种因素导致的消化功能及其调节机制受到影响而产生[1]。主要表现有厌食、拒食、腹胀、腹痛、乏力和形体消瘦等特点,各年龄阶段儿童均可发病,临床以1~6岁儿童常见。严重者易导致营养不良以及维生素和微量元素缺失,甚至影响小儿生长发育和身心健康。近年来发病率逐年增多,城市儿童发病率明显高于农村[2]。本文分析赖氨肌醇维生素B12口服液在治疗小儿厌食症中的疗效,报道如下。

    作者:周其刚 刊期: 2015年第04期

  • 锁定钢板治疗肱骨近端骨折临床观察

    肱骨近端骨折占所有骨折的4%耀5%[1],尽管大多数(85%)的肱骨近端骨折移位很少或骨折稳定,保守治疗,早期轻柔活动即可治愈[2]。但对于肱骨近端三部分、四部分和不稳定骨折还是建议采用各种形式的内固定方法进行手术治疗[3-4]。我院2010年5月—2013年3月应用肱骨近端锁定钢板治疗肱骨近端骨折22例,疗效满意,报道如下。

    作者:林全艺;丁振贝;杨维章;陈庆运;陈定崇 刊期: 2015年第04期

  • 中药穴位离子导入治疗老年原发性高血压临床观察

    据统计,我国60岁及以上老年人高血压的患病率近50%[1]。老年高血压常与多种疾病并存,若血压长期控制效果不佳,更易发生靶器官损害。老年人高血压有以下几个特点:收缩压增高,脉压差增大,血压波动大,常见血压昼夜节律异常,白大衣高血压增多,假性高血压增多[2]。老年患者肝肾功能差,长期服药,药物的不良反应增多,更易出现低血压等不良反应。寻找新的治疗途径以减少降压药种类、数量、给药次数对老年高血压患者来说意义重大。笔者应用中药穴位离子导入治疗老年高血压病,为老年高血压的治疗做出有益的探索。

    作者:沈海强 刊期: 2015年第04期

  • 圆利针密集型针刺松解配合TDP神灯照射治疗腰肌劳损89例

    慢性腰肌劳损是临床常见病,是腰骶部肌肉、筋膜、韧带等软组织损伤引起;主要表现为腰部隐隐作痛或酸痛不适,不能久坐、久站,劳累或受寒可加重;局部触诊时可及条索状物或硬结;较重者常伴有腰肌紧张性痉挛,疼痛剧烈,腰部活动明显受限,弯腰困难。笔者运用圆利针密集型针刺[1]松解配合TDP神灯照射治疗89例慢性腰肌劳损患者,取得满意的近期和远期疗效,现报道如下。

    作者:陈晖 刊期: 2015年第04期

  • 针推结合分期治疗神经根型颈椎病临床观察

    神经根型颈椎病系因颈椎退行性变导致脊神经根受到机械性压迫及炎症因子的化学性刺激而引起的,以颈肩上肢疼痛、麻木为常见的临床症状,常见于中老年人[1]。笔者临床上采用针刺与推拿辨证结合的方法,分期治疗神经根型颈椎病,取得满意的临床疗效,报道如下。

    作者:徐海娜;陈鹏;刘承浩 刊期: 2015年第04期

  • 张永华运用经方治疗失眠经验

    失眠又称不寐,是以经常不能获得正常睡眠为特征的一类病证,主要表现为睡眠时间、深度的不足,轻者入睡困难,或寐而不酣,时寐时醒,或醒后不能再寐,重者彻夜不寐,影响正常工作、生活[1]。《伤寒论》中称失眠为不得卧、不得眠。张永华教授系第一批全国优秀中医临床人才、浙江省名中医、主任中医师,从事中医内科临床工作近30年,善治失眠、焦虑、抑郁等情志病,尤善用经方治疗失眠。笔者有幸随师临证,获益匪浅,兹将张老师运用经方治疗失眠的经验介绍如下。

    作者:唐宁;赵青;张永华 刊期: 2015年第04期

  • 急性卒中患者发病2小时内使用硫酸镁不保护神经

    美国学者研究发现,在卒中症状出现2小时内,院前可以起始硫酸镁治疗且具有安全性,但并不改善卒中90天时的残疾预后。论文发表于《新英格兰医学杂志》(N Engl J Med 2015,372:528)。研究者将1700例可疑卒中患者在症状出现后2个小时内随机分配接受静脉硫酸镁或安慰剂治疗。负荷剂量由医护人员在患者到达医院前给予,并在患者到达医院后开始24小时维持输液。主要预后为90天时患者的残疾程度(经改良兰金量表评分评估,为0~6分,分值越高提示残疾程度越严重),以了解急性卒中患者院前使用硫酸镁的神经保护作用。

    作者: 刊期: 2015年第04期

浙江中西医结合杂志

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主管:浙江省卫生厅

主办:浙江省中西医结合学会 浙江省中西医结合医院