谢红兵；刘增进
目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)、乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)、同型半胱氨酸(Hcy)联合检测对中晚期肝癌患者明确诊断的价值.方法 采用酶联免疫吸附试验(EHSA)和放射免疫分析(RIA) 79例中晚期肝癌、肝病患者血清组及30例健康对照组中VEGF、Hcy和HIF-10α含量.结果 各组肿瘤标志物Hcy、HIF-1 0、VEGF检测结果显示,健康对照组患者分别为(10.5±5.6)、(22.59±2.14)、(166.8±84.2)μg/L,急性肝炎组患者分别为(202.5 ±41.5)、(65.39±6.54)、(168.0±85.3) μg/L,慢性活动性肝炎组患者分别为(218.2 ±50.6)、(58.46 ±6.50)、(170.0±87.6)μg/L,肝硬化组分别为(298.4±60.2)、(63.51±6.65)、(178.3±97.5) μg/L,中晚期肝癌组分别为(417.9 ±92.8)、(173.67±14.19)、(398.4±153.1)μg/L.中晚期肝癌患者血清中Hcy、VEGF、HIF-1α水平显著高于健康对照组和肝病患者组(t=7.418、5.131和6.438,P=0.001、0.001和0.005).各种组合检测中,Hcy+ HIF-1α+ VEGF组合的敏感性、特异性、准确性和阳性预测值均较高,分别为93.67％、87.45％、83.43％和90.12％,与Hcy+ HIF-1α、Hcy+ VEGF组和HIF-1α+VEGF组比较,差异有统计学意义(P=0.031、0.037、0.013).结论 Hcy、VEGF和HIF-1α联合检测可有效提高中晚期肝癌诊断的敏感性和准确性.
作者：张庚；刘广召；冯桂银；梁东启；袁媛 刊期： 2017年第09期
目的 观察普罗布考处理后的小鼠血清及不同浓度普罗布考体外干预对RAW264.7巨噬细胞胆固醇流出的影响,探讨普罗布考调节巨噬细胞胆固醇流出的机制.方法 16只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为2组,分别给予普通饮食或添加普罗布考(0.5％ w/w)饲料饲养4周后,收集血清,酶法测定血清脂质.以乙酰化低密度脂蛋白(Ac-LDL)和3 H-胆固醇标记RAW264.7巨噬细胞,并以不同浓度(0、10、20、50、100 μmol/L)普罗布考干预细胞,然后以上述血清介导,测定细胞胆固醇流出;收集干预后细胞,分别以反转录聚合酶链反应(RT-PCR)与Western blot检测C型1类尼曼-匹克蛋白(NPC1) mRNA和蛋白表达.结果 普罗布考干预4周后小鼠血清[(36.30±0.02)％]较对照组血清[(21.20±0.04)％]介导更多的胆固醇从巨噬细胞流出(P=0.003);不同浓度普罗布考(10、20、50、100 μmol/L比0μmol/L)剂量依赖性地增加巨噬细胞NPC1 mRNA[(0.75±0.03),(0.94±0.04),(1.18±0.06),(1.22±0.03)比(0.52±0.04),P=0.036、P=0.021、P=0.045、P=0.037]及NPC1蛋白[(0.68±0.05),(0.85±0.02),(1.16±0.04),(1.19±0.05)比(0.49±0.02),P=0.011、P=0.040、P=0.034、P=0.015]的表达量,并加速普罗布考血清诱导的胆固醇流出率[(46.10±0.03)％,(51.40±0.05)％,(55.30±0.06)％,(57.80±0.08)％比(36.30±0.02)％],50μmol/L与100μmol/L两组差异无统计学意义.结论 普罗布考干预后的小鼠血清显著促进巨噬细胞胆固醇流出.普罗布考剂量依赖性的促进巨噬细胞胆固醇流出,这可能与其增加NPC1的表达相关.
作者：罗萍；杨志远；王丽霞；杜娟娟；杜松 刊期： 2017年第09期
目的 探讨半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3抑制剂对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用.方法 45只肺缺血再灌注损伤模型大鼠随机分为模型组、低剂量组和高剂量组;同时选取15只大鼠作为假手术组.低剂量组和高剂量组分别经尾静脉注射z-VAD-FMK5 mg/kg和15 mg/kg,模型组和假手术组给予尾静脉注射等体积的生理盐水.治疗12 h后,取肺组织,测定肺组织中氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和活性氧水平(ROS)]和炎性因子水平[肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和IL-6];采用Western blot分析凋亡相关蛋白水平[凋亡诱导因子(AIF)、Caspase-3、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)和bcl-2相关X蛋白(bax)];采用原位缺口末端标记法(TUNEL)染色分析肺组织中细胞凋亡水平.结果 与对照组比较,模型组、低剂量组和高剂量组MDA和ROS水平明显增加,而SOD水平显著降低(均P=0.000).与模型组比较,低剂量组和高剂量组MDA和ROS水平明显下降,而SOD水平显著升高(均P =0.000).与假手术组比较,模型组、低剂量组和高剂量组TNF-α、IL-1β和IL-1β等炎性因子水平显著升高,而与模型组比较,低剂量组和高剂量组上述炎性因子显著下调(均P =0.000).与假手术组比较,模型组、低剂量组和高剂量组AIF、Caspase-3和bax蛋白水平显增加,而bcl-2水平显著下调;与模型组比较,低剂量组和高剂量组AIF、CaspaseG和bax蛋白水平明显下降,而bcl-2水平显著升高.与假手术组(3.43±0.67)比较,模型组、低剂量组和高剂量组肺组织细胞凋亡水平(25.32±3.21、17.39±2.97和11.33±2.56)显著升高,差异有统计学意义(均P=0.000).与模型组比较,低剂量组和高剂量组肺组织中细胞凋亡水平显著下降,差异有统计学意义(均P=0.000).与低剂量组比较,高剂量组大鼠肺组织中细胞凋亡水平下降更为显著,差异有统计学意义(P=0.000).结论 Caspase-3抑制剂z-VAD-FMK可显著降低氧化应激、炎症以及肺细胞凋亡,对肺组织起到保护作用.
作者：朱晓明；魏立；务森 刊期： 2017年第09期
关节腔内注射激素可以起到减轻骨关节炎炎症和缓解关节疼痛的作用,但反复使用激素会增加关节内感染的机会[1].我们开展了一项随机对照研究比较酮洛酸和激素进行关节腔注射治疗膝关节骨关节炎的安全性及有效性.一、材料与方法本研究纳入2015年1月至12月期间在门诊确诊为膝关节骨关节炎的患者.人选标准:患者年龄≥40岁;采用口服止痛药、理疗等其他保守治疗至少4周且无效的患者;按照KellgrenLawrence分期,Ⅱ期或者Ⅲ期膝关节骨关节炎的患者.排除标准:对研究中的任何一种药物过敏的患者;炎性关节病;6个月内接受过关节腔注射的患者.将符合入选标准的110名患者随机分为两组:A组为酮洛酸治疗组,关节腔注射酮咯酸氨丁三醇注射液1 ml(30 mg/ml)+罗哌卡因5ml(20 mg,/10 ml)+0.9％生理盐水4ml;B组为激素治疗组,关节腔注射倍他米松1 ml[(5±2) mg/ml]+罗哌卡因5ml(20 mg/10 ml) +0.9％生理盐水4 ml.
作者：时景伟；张善勇；韩青；李新宇；陈炳鹏 刊期： 2017年第09期
目的 探讨Yes相关蛋白1(YAP1)在食管癌组织中的表达及其与化疗耐受的关系,以及微小RNA(miRNA,miR)-920在YAP1表达调控中的作用.方法 免疫组织化学检测YAP1在30例食管癌组织及其正常组织中的表达,小干扰RNA(siRNA)干扰技术结合聚合酶链反应(PCR)及四唑氮化合物(MTS)实验在食管癌细胞株中检测YAP1表达与化疗敏感性的关系.流式细胞仪分选食管癌肿瘤干细胞群,结合PCR及Western blot方法检测YAP1在肿瘤干细胞的表达.siRNA干扰技术结合干细胞微球体培养检测YAP1在肿瘤干细胞活性维持中的作用.运用生物信息学软件预测靶向YAP1的miRNAs,同时利用miRNA定量PCR确定候选miRNA的表达差异.转染miRNA模拟物结合Western blot实验验证候选miRNA对YAP1靶向调节作用.后利用四唑氮化合物(MTS)方法检测miR-920在食管癌化疗中的作用.结果 YAP1在食管癌癌组织中表达(5.300 ±0.559)明显高于食管正常组织(2.200±0.327,P=0.001),干扰YAP1可增强食管癌化疗敏感性(DDP组:P=0.003,PTX组:P=0.000),YAP1在食管癌肿瘤干细胞群中表达(5.667±0.636)明显高于非干细胞群(1.267±0.176,P=0.002),miR-920在食管癌中表达降低与YAP1表达呈负相关.结论 miR-920可靶向抑制YAP1表达,增强食管癌的化疗敏感性.
作者：徐岗；王正；黄中 刊期： 2017年第09期
目的 观察微小RNA(miRNA,miR)-935在食管鳞癌组织和细胞中的表达,并探讨其对食管鳞癌细胞增殖和侵袭的影响.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测食管鳞癌组织和细胞以及正常食管鳞癌组织和细胞中miR-935的相对表达水平.将miR-935抑制剂、类似物以及阴性对照转染食管鳞癌EC1细胞,采用FQ-PCR检测转染后48 h miR-935的相对表达水平.进一步采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和Transwell小室检测不同处理组别食管鳞癌EC1细胞的增殖和侵袭能力.结果 食管鳞癌组织和细胞中miR-935的相对表达水平显著高于正常食管上皮组织和细胞,差异有统计学意义(t =8.349,P=0.000).此外,miR-935在有淋巴结转移的食管鳞癌患者中的表达水平显著高于非转移的患者,差异有统计学意义(t=4.264,P=0.000).miR035的类似物显著提高EC1细胞中miR-935的表达水平,而miR-935抑制剂显著下调EC1细胞中miR-935的表达水平.miR-935表达上调显著促进EC1细胞的增殖和侵袭,而miR-935表达下调显著抑制EC1细胞的增殖和侵袭.结论 miR-935在食管鳞癌的发生发展中发挥重要作用.
作者：金成玲；左士宇；王晓慧；刁长英；谢艺林；李晟磊；李向楠 刊期： 2017年第09期
我们通过9型腺相关病毒携带细胞周期素A2(Cyclin A2)基因(rAAV9-Cyclin A2)联合纤维蛋白胶移植进入梗死心肌内,探讨两者相结合可以促进更多的心肌细胞进入细胞周期,改善梗死后的心功能.一、材料与方法1.材料:选取雄性SD大鼠90只(购自新疆医科大学实验动物中心)、rAAV9-Cyclin A2(Virovek公司生产)、Cyclin A2抗体(SANTA公司,sc53227)、增殖细胞核抗原(PCNA,Cell Signal,2586)、H3P(Abcam,ab115152),纤维蛋白胶(上海莱士血液制品有限公司),倒置荧光显微镜(德国,EICA-DMI4000B).
作者：曹雯；马翔；于海滨；赵爱超；孟凡华 刊期： 2017年第09期
本研究旨在观察长春瑞滨(VNR)诱导肝癌细胞HepG2自噬性死亡的作用并探讨其机制.一、材料与方法噻唑蓝(MTT)法检测HepG2细胞存活率;实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2) mRNA表达;Western blot法检测Caspase-3等表达.
作者：李阳；张雅敏；崔子林；刘子荣 刊期： 2017年第09期
目的 观察间充质干细胞(MSCs)对颅脑损伤大鼠神经功能的修复作用,并探讨其作用机制.方法 采用改良Feeney法建立60只SD大鼠颅脑损伤模型,随机分为模型组、MSCs组和磷酸盐缓冲液(PBS)组.另选20只健康SD大鼠作为对照组.体外分离、培养脐带间充质干细胞后移植MSCs组,采用改良的神经功能评分(mNSS)标准于MSCs移植后1、3、7、14、21、28 d对各组大鼠神经功能进行评价;采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测各组大鼠脑组织中脑源性神经营养因子(BDNF)的mRNA水平;采用原位缺口末端标记法(TUNEL)法检测各组大鼠脑组织细胞的凋亡水平.结果 与对照组大鼠比较,模型组、MSCs组和PBS组大鼠mNSS评分增高,神经元核性蛋白(NeuN)表达下降,差异有统计学意义(P=0.000);与模型组和PBS组大鼠比较,MSCs组大鼠mNSS评分降低,NeuN表达升高,差异有统计学意义(P=0.000).与对照组BDNF mRNA水平(0.31±0.12)比较,模型组、PBS组和MSCs组BDNF mRNA水平(1.32±0.34、1.23±0.30、0.81 ±0.21)显著增加,差异有统计学意义(P =0.000).与模型组和PBS组大鼠BDNF mRNA水平比较,MSCs组大鼠BDNF mRNA水平显著下调,差异有统计学意义(P=0.014,P=0.019).与对照组大鼠脑组织凋亡水平(3.14±1.12)比较,模型组、PBS组和MSCs组大鼠脑组织凋亡水平(27.84 ±4.32、25.35±4.89、10.33 ±3.32)显著增加,差异有统计学意义(P=0.000).与模型组和PBS组大鼠脑组织细胞凋亡水平比较,MSCs组大鼠脑组织细胞凋亡水平显著下调,差异有统计学意义(P=0.000).结论 MSCs能够通过修复受损神经元,促进BDNF的分泌等机制降低颅脑损伤大鼠脑组织的凋亡水平,从而促进对颅脑损伤大鼠神经功能的修复作用.
作者：谢红兵；刘增进 刊期： 2017年第09期
目的 探讨超声支气管镜引导下经支气管针吸活检术(EBUS-TBNA)与纵隔镜诊断效能及安全性.方法 胸部肿瘤患者共326例,其中进行EBUS-TBNA检查的患者152例,包括肺癌118例,纵隔肿物34例;进行纵隔镜检查术患者174例,包括肺癌130例,纵隔肿物44例.比较两种检查方法对肺癌及纵隔肿物的敏感性、特异性及并发症的发生率.结果 以病理学诊断为金标准,EBUS-TBNA对于肺癌诊断的准确性为94.47％,敏感性为93.32％,特异性为100.00％;纵隔镜检查术的诊断准确性为95.98％,敏感性为94.62％,特异性为100.00％.两者对肺癌的诊断和分期效能差异无统计学意义(P=0.071).EBUS-TBNA对于纵隔肿物诊断的准确性为90.79％,敏感性为58.82％,特异性为100.00％;纵隔镜检查术的诊断准确性为95.40％,敏感性为81.82％,特异性为100.00％.纵隔镜对纵隔肿物的诊断效能较高(P =0.026).EBUS-TBNA较纵隔镜安全,无明显严重并发症.结论 在以肺癌为主的胸部肿瘤的精确诊断分期中,EBUS-TBNA是一种安全的新型微创诊断技术平台,具有较高的灵敏度、特异性和准确性.
作者：陈强；武焱旻；蒋峰；李明；夏文杰；刘媛媛；许林 刊期： 2017年第09期
我们比较了111例获得5年以上随访的人工膝关节置换手术患者,分别应用内轴型(MP)和后稳定型(PS)膝关节假体,随访5年以上,对比分析两者中期临床效果.一、材料与方法1.研究对象:选择2010年1月至2011年12月收治的111例膝关节骨性关节炎患者,行初次单侧人工膝关节置换手术.根据假体选择完全随机化分组为MP组和PS组.MP组49例,男15例,女34例,平均年龄64.5岁(53～ 73岁),平均体重67.7 kg(51～98 kg),膝关节内翻畸形17.3°(0～20°),屈曲畸形12.6°(0～29°);PS组62例,其中男18例,女44例,平均年龄66.1岁(58 ～77岁).平均体重65.9 kg(56 ～85 kg),膝关节内翻畸形平均15.9°(0～22°),屈曲畸形17.8°(0～33°).两组患者的年龄、体重指数、性别比例、术侧和平均手术时间等方面差异均无统计学意义.
作者：夏长所；徐浩；丁昌荣；张海宁；王昌耀；吕成昱；王英振 刊期： 2017年第09期
目的 探讨血管包绕肿瘤细胞团(VETC)结构在肝癌、结直肠癌组织及其肝内转移瘤中的表达.方法 收集50例肝癌伴肝内转移患者的组织标本,40例结直肠癌伴肝内转移患者的组织标本,使用免疫组织化学法检测各病例原发肿瘤和肝内转移瘤中VETC结构.结果 共收集肝癌样本50例,其中34例原发肝癌组织为VETC阴性,阴性率为68.00％,34例原发肝癌组织阴性者其肝内转移瘤亦为VETC阴性;16例原发肝癌组织为VETC阳性,阳性率为32.00％.在此16例中,肝内转移瘤VETC阳性7例,占原发肿瘤VETC阳性病例数的43.75％,阴性9例.收集结直肠癌样本40例,其原发肿瘤及其肝内转移瘤均为VETC阴性.结论 VETC结构是肝癌组织中常见现象,而罕见于结直肠癌及其肝转移瘤,VETC结构是肝癌肝内转移的潜在途径之一.
作者：何传超；王若梅；毛凯；张建龙；周振宇；徐鏊耀 刊期： 2017年第09期
目的 探讨卡培他滨对复发转移三阴性乳腺癌维持治疗的疗效.方法 选取我院60例复发转移三阴性乳腺癌患者,随机分为实验组和对照组各30例,实验组在治疗期间使用含有卡培他滨的联合化疗方案且治疗有效,在联合化疗结束后继续卡培他滨维持治疗至疾病再次进展,对照组在治疗有效且病情稳定后停止化疗,统计两组患者的有效率、至病情再次进展的时间、用药期间的不良反应.结果 实验组的有效率(50.0％)明显高于对照组(40.0％),差异有统计学意义(P =0.039);实验组的维持治疗时间为2.3～19.3个月,平均维持治疗时间为6.6个月,中位无进展生存期(PFS)为10.6个月.对照组至病情再次进展的时间为4.3个月,两组患者的至病情再次进展的时间差异有统计学意义(P =0.026);实验组患者在维持治疗的不良反应主要为骨髓抑制、肝肾功能损害、手足综合征、消化道反应等,36.6％的患者出现骨髓抑制,40.0％的患者出现肝肾功能损害,46.7％的患者出现手足综合征,60.0％的患者出现消化道反应.结论 卡培他滨作为复发转移三阴性乳腺癌维持治疗方法可以有效改善患者的症状,延缓病情的进展.
作者：李林；王楠；秦威；朱明智；陈卓；王芳；郭广成；熊有毅；谷元廷；李建华 刊期： 2017年第09期
目的 观察在结肠癌SW480细胞中Ca2浓度对钙周期素结合蛋白(CacyBP/SIP)的核转位及增殖、凋亡的影响.方法 采用免疫荧光染色观察不同浓度的钙离子载体(ionomycin)刺激结肠癌SW480细胞CacyBP/SIP的细胞内定位,噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞周期与凋亡.结果 在结肠癌细胞SW480中,CacyBP/SIP在细胞质表达;1μmol/L ionomycin刺激组CacyBP/SIP表达于细胞质;2μmol/L刺激组CacyBP/SIP表达于胞质和胞核;5.μmol/L刺激组CacyBP/SIP表达于胞核;10 μmol/L刺激组CacyBP/SIP重新分布于胞质和胞核.不同浓度ionomycin组与未处理组比较,结肠癌SW480细胞的存活率无明显影响((P=172.918).不同ionomycin浓度刺激组与对照组比较,对结肠癌SW480细胞的早期凋亡率[(0.747±0.049)％]和总凋亡率[(2.383±0.068)％]均无影响(P =79.618).结论 在结肠癌SW480细胞中,Ca2+浓度可以影响CacyBP/SIP核转位,但不影响细胞的增殖和凋亡.
作者：冯珊珊；杨博；刘爱琴；武婧；翟惠虹 刊期： 2017年第09期
目的 观察肝再生模型中上皮细胞黏附分子(EpCAM)和转化生长因子-β(TGF-β)的动态表达.方法 将35只雄性F344大鼠(Fisher344大鼠)随机分为假手术组、肝切除组(PH组)和2-乙酰氨基芴组(2-AAH/PH组),采用免疫组织化学染色法观察不同时间点EpCAM阳性细胞在肝组织中的增殖及分布;应用Western blot和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同时间点TGF-β和激活素受体样激酶-5(ALK-5)的蛋白表达和基因表达.结果 EpCAM阳性细胞在假手术组很难见到;PH组在术后第7天可见少量EpCAM阳性细胞,术后14 d可见阳性细胞向肝内迁移,术后21 d仅见很少量的阳性细胞;2-AAF/PH组术后7、14 d可见与PH组相似结果,但EpCAM阳性细胞明显增多且术后21 d依然可见多量的EpCAM阳性细胞.RT-PCR的结果显示:假手术组TGF-β和ALK-5三时间点的表达差异无统计学意义(TGF-β 2-ΔΔCt值:7 d:1.00±0.00、14 d:1.09±0.16、21 d:1.08±0.13,FTGF-β=0.57,PTGF-β=0.595;ALK-5 2-ΔΔCt值:7 d:1.00 ±0.00、14 d:1.10±0.14、21 d:1.07±0.16,FALK-5=0.54,P=0.610);PH组和2-AAF/PH组TGF-β和ALK-5三时间点表达差异有统计学意义(TGF-β PH组和2-AAF/PH组2-ΔΔCt值:7 d:8.66±0.72、7.79±0.58,14 d:5.36 ±0.53、4.04±0.42,21 d:7.64±0.64、6.88±0.68,FTGF-βpH=21.52,PTGF-β PH=0.002,FTGF-β2.AAF/PH=35.10,PTGF-β2-AAF/PH =0.001;ALK-5 PH组和2-AAF/PH组:7d:4.32±0.52、5.91 ±0.54,14 d:7.79 ±0.74、9.73 ±1.04,21 d:4.85 ±0.46、5.90±0.89,FALK-5PH=30.43,PALK-5 PH=0.001,FALK-52-AAF/PH=20.33,P =0.002).Western blot的结果显示:假手术组TGF-β和ALK-5三时间点的表达差异无统计学意义(TGF-β灰度值:7d:456.4±46.8、14d:454.8±47.1、21 d:458.8±55.6,FTGF-β=0.14,P=0.805;ALK6灰度值:7d:20.9±4.5、14 d:21.3±7.9、21 d:22.4 ±6.5,FALK-5=0.42,P=0.960);PH组和2-AAWPH组TGF-β和ALK-5三时间点表达差异有统计学意义(TGF-β PH组和2-AAF/PH组灰度值:7 d:1 175.2±106.5、882.6 ±83.7,14 d:780.4 ±63.9、639.6±61.3,21 d:1 067.0±91.6、816.2±83.1,FTGF-βpH=6.61,P=0.009,FTGF-β2-AAF/PH=8.06,P=0.012;ALK-5 PH组和2-AAF/PH组:7 d:72.9±7.0、110.1±13.1,14 d:90.1 ±9.4、136.9±12.5,21 d:57.8 ±5.6,91.8±9.7,FALK-5pH=14.05,P=0.005,FALK-52-AAF/PH=10.96,P=0.011).结论 在肝再生过程中,TGF-β表达呈现动态趋势并与EpCAM的表达趋势不同;TGF-β受体ALK-5的表达并不和TGF-β同步.
作者：龚先锋；徐丽红；杨宏强；郁晓峰；张洋；胡慧；王艳 刊期： 2017年第09期
目的 探讨在食管鳞癌中视网膜母细胞瘤蛋白结合锌指结构基因(RIZ1/RIZ2)表达失衡对食管鳞癌细胞凋亡的影响.方法 采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)的方法检测食管鳞癌组织及正常食管上皮组织中RIZ1及RIZ1+ RIZ2 mRNA表达水平,选取前期实验中RIZ1基因表达缺失的食管鳞癌细胞株EC109,采用脂质体转染的方法实验组转染pcDNA3.1(+)/RIZ1,对照组转染空真核表达载体pcDNA3.1(+),Real-time PCR、Western blot分别检测RIZ1 mRNA及蛋白表达水平,验证转染效率,转染成功后Real-time PCR法检测RIZ1+ RIZ2 mRNA表达水平的变化,同时采用流式细胞仪检测食管鳞癌细胞的凋亡.结果 食管鳞癌组织中RIZ1 mRNA表达水平低于正常食管上皮组织,相对表达量分别为1.00和28.10±2.30,差异有统计学意义(t=-57.758,P=0.000),而两者间RIZ1+ RIZ2 mRNA表达水平分别为1.00和1.08±0.31,差异无统计学意义(t=-1.180,P=0.249),食管鳞癌细胞株EC109转染RIZ1成功后,与对照组比较,RIZ1基因mRNA表达水平上调,相对表达量分别为10.83±1.94和1.00,差异有统计学意义(t=-11.308,P=O.000),RIZ1+ RIZ2 mRNA的表达水平未见变化,相对表达量分别为0.98 ±0.08和1.00,差异无统计学意义(t =0.581,P=0.592),转染RIZ1后食管鳞癌细胞株EC109凋亡率升高,细胞凋亡率分别为(54.97±2.33)％和(38.29±8.44)％,差异有统计学意义(t=-4.560,P=0.010).结论 食管鳞癌中存在RIZ1/RIZ2的表达失衡,这种表达失衡有可能引发细胞凋亡,参与食管鳞癌的发生、发展.
作者：崔元涛；董尚文；王元国；张鹏 刊期： 2017年第09期
目的 探讨内质膜蛋白复合体亚基6(EMC6)基因在海拉(HeLa)细胞中的自噬调解活动.方法 (1)构建3种质粒:EMC6真核表达质粒、特异性干扰EMC6质粒、空白质粒.分别将3种质粒转染HeLa细胞,筛选3组中的稳定表达细胞株.(2)用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)、Western blot检测3组质粒转染后Hela细胞中EMC6 mRNA表达结果.(3)电镜下观察HeLa细胞内自噬体;用自噬抑制剂Bafilomycin A1和3-甲基腺嘌呤(3-MA)分别作用于转染EMC6质粒的处理组、空白质粒组和HeLa组,在共焦显微镜下观察比较细胞株中绿色荧光蛋白(GFP)-微管相关蛋白1轻链3(LC3)的变化.结果 (1)Real-time PCR法检测转染不同质粒进入HeLa细胞株后,处理组、干扰组及空白质粒组各5例,2-ΔΔCt的平均值分别为3.29±0.62、0.38±0.04、1.11 ±0.20,EMC6mRNA拷贝数量在3组之间差异有统计学意义(P =0.020).(2)在转染了EMC6质粒的HeLa细胞组中可观察到自噬体形成,并观察到Bafilomycin A1作用于3组细胞后,可见GFP-LC3斑点聚集,而EMC6过表达组的LC3斑点明显较空白质粒组及HeLa组丰富.结论 过表达EMC6蛋白可使HeLa细胞内自噬体数目增加,可能使宫颈癌细胞内自噬活动增强;EMC6过表达细胞株中,磷酸肌醇3激酶(PI3K)抑制剂抑制了EMC6所诱发的自噬过程.
作者：范志勤；申明霞 刊期： 2017年第09期
目的 探讨人食管鳞癌中生长抑制因子2(ING2)的表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学检测63例食管鳞癌和30例癌旁组织中ING2蛋白表达水平,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测19例食管鳞癌组织和17例正常食管黏膜组织中ING2基因表达水平.结果 ING2在正常食管黏膜中微弱表达,而在食管鳞癌组织中显著高表达;癌组织中ING2蛋白相对表达量(10.250 ±3.792)明显高于正常食管黏膜组织(1.368±0.684),差异有统计学意义(P=0.001).ING2 mRNA表达水平显著高于正常食管组织,差异有统计学意义(t=37.310,P=0.001).结论 ING2在食管鳞癌中高表达,且与临床病理因素及预后明显相关.
作者：石佳；吴恺；张春敭；邢富臣；高凯；郭骥达；曹克鑫；齐宇 刊期： 2017年第09期
目的 探讨构建类风湿关节炎肌腱自发性断裂兔动物模型的可行性.方法 选择纯种新西兰大白兔20只,随机单盲法分成3组,A组为对照组,在构建类风湿关节炎动物模型时注射生理盐水;B组为构建动物模型组,使用抗原诱导性(AIA)方法构建动物模型;C组为肌腱炎动物模型组,通过在肌腱周围注射I型胶原蛋白构建肌腱炎动物模型.对比A组和B组兔在致炎前后的一般情况与关节变化,检测血清中白细胞介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-αα)的含量,判断类风湿关节炎动物模型是否构建成功.使用神经肌肉电刺激仪被动活动实验兔踝关节,构建肌腱自发性断裂动物模型.结果 随着免疫次数的增多,兔食欲减退、体重增长减慢、毛色稀疏发黄、活动减少;在关节腔注射鸡卵蛋白后关节严重肿胀,B组踝关节直径[(1.7±0.3)cm]、温度[(38.1±0.4)℃]与A组踝关节直径和温度明显不同(P=0.003),B组血清中IL-1含量[(168.4±21.5) ng/L]、TNF-αα含量[(408.4 ±47.5) ng/L]明显高于A组(P =0.000).通过解剖观察和病理切片组织学观察证实类风湿关节炎动物模型构建成功.进行肌肉电刺激后B组兔在5～17d逐渐出现屈趾功能障碍,解剖观察屈趾肌腱证实肌腱自发性断裂动物模型构建成功.结论 可通过肌肉电刺激类风湿关节炎动物的屈趾肌来构建类风湿关节炎肌腱自发性断裂动物模型.
作者：朱旭；吴学建；肖鹏 刊期： 2017年第09期
目的 探讨采用显微断层扫描技术(Micro-CT)采集新西兰大白兔坐骨神经断层数据,通过Mimics三维可视化软件实现兔坐骨神经内部显微结构的三维可视化.方法 取新西兰大白兔坐骨神经组织标本,A、B组分别用1％、5％ Lugol's液对其染色,显微镜下观察记录分别A、B组在0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5h时间点上神经染色情况,通过Micro-CT采集A、B组神经断层数据,观察选择其中合适的染色参数.4个标本采用Mimics 17.0软件重建兔坐骨神经神经显微立体结构.结果 A组兔坐骨神经标本在染色2.5h可获得较为真实、清晰的显微三维结构显示效果.Mimics软件观察测量提示新西兰大白兔坐骨神经主要分3组神经束,重建模型测量横截面面积平均分别为0.425、0.038、0.242 mm2.可在任意断面放大观察坐骨神经显微结构,追踪3组神经束立体行径相对固定.结论 基于断层扫描的兔坐骨神经显微结构三维可视化系统能较清晰、真实地反映兔坐骨神经内部结构,可为周围神经虚拟三维重建技术提供新方法及可行性依据.
作者：亚穆罕默德·阿力克；阿吉木·克热木；伊力扎提·伊力哈木；阿里木江·阿不来提；买买艾力·玉山；艾合买提江·玉素甫 刊期： 2017年第09期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
