许圆；周晓中；钱鸣杰；唐文
目的 观察小分子干扰RNA(siRNA)沉默转录因子E2F-1表达对小鼠精原干细胞(SSCs)凋亡的影响.方法 采用Percoll液密度梯度离心分离和流式细胞仪分选纯化SSCs进行体外培养,以脂质体法转染pSilencerk 1-E2F1至SSCs,并用实时定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blot检测E2F-1的表达水平,流式细胞仪检测siRNA干扰E2F-1表达后对SSCs凋亡的影响.结果 RT-qPCR结果实验组mRNA的2-△△Ct)值(0.32)明显低于未转染组(0.10)和阴性对照组(1.04),Westem blot显示实验组条带灰度低于未转染组和阴性对照组,流式细胞术检测显示实验组凋亡率(7.69％)低于未转染组(23.07％)和阴性对照组(24.19％),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 siRNA靶向干扰转录因子E2F-1能显著降低小鼠SSCs的凋亡率.
作者：曾汉青；朱朝辉；万锋；王进；李森；张友朋 刊期： 2014年第07期
目的 观察乳糜尿患者肾周脂肪组织淋巴管的分布规律和结构特征,为改良乳糜尿的手术方式提供解剖学及病理学依据.方法 分别收集6例尸体(对照组)及15例乳糜尿患者(乳糜尿组)手术切除的肾动静脉周围、输尿管上段、肾上腺周围及肾脂肪囊的脂肪组织,行苏木素-伊红(HE)染色和癌胚抗原M2A单克隆抗体(D2-40)免疫组织化学法观察淋巴管的形态及结构特征,检测脂肪组织中淋巴管密度(LVD)、淋巴管直径及淋巴管面积.结果 对照组肾动静脉、输尿管上段及肾上腺周围脂肪组织内均有淋巴管分布,LVD分别为1.98 ±0.73、2.14±0.73和2.04±0.56,淋巴管直径分别为(32.13±13.28)、(28.25±7.67)和(27.56±7.91) μm,淋巴管面积分别为(107 854±75 897)、(98 647 ±36 131)和(897901 ±34911)μm2;而乳糜尿患者上述区域内LVD(分别为2.97±0.91、3.10 ±0.88、2.87±0.74)、淋巴管直径[分别为(75.05 ±39.75)、(64.02±41.92) μm、(40.00±12.05) μm]及淋巴管面积[分别为(222 776±106 624)、(205 551±114 578)、(173 823±89 559) μm2]均较对照组升高且出现管腔迂曲、扩张等形态学改变,差异有统计学意义(P＜0.05);其中肾动脉和肾动静脉之间、肾静脉及输尿管上段周围的LVD高.对照组肾脂肪囊内LVD为1.46±0.22、淋巴管直径为(15.77±5.03) μm、淋巴管面积为(50 223±32 796) μm2;乳糜尿患者肾脂肪囊内LVD(1.56±0.41)、淋巴管直径[(18.02 ±6.65) μm]及淋巴管面积[(71 648±50 677) μm2]与对照组比较差异无统计学意义(JP＞0.05).组内比较显示乳糜尿组肾脂肪囊内LVD、淋巴管直径及淋巴管面积均显著低于肾动静脉、输尿管上段及肾上腺周围,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 乳糜尿的发病机制与肾动静脉、输尿管上段及肾上腺周围脂肪组织内淋巴管数量和形态学改变有关.通过外科手术结扎上述部位脂肪组织内淋巴管治疗乳糜尿是可行的,但现有手术方式存在结扎范围扩大化的可能.
作者：张银高；王行环；曾俊；罗仪；黄静宇；谭大清 刊期： 2014年第07期
目的 关节镜下关节清理术联合腔内注射玻璃酸钠(SH)治疗膝关节骨性关节炎(OA)的疗效.方法 选择2001年6月至2011年6月共采用关节镜下关节清理术(对照组,n=281)和关节镜下关节清理术加腔内注射SH(实验组,n=307)两种方法治疗OA患者共588例.结果 所有患者均经过临床随访24个月,对照组优良率为78.3％,而实验组优良率高达90.5％;按膝关节OA严重性指数评分,实验组治疗24个月后疗效明显优于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 应用关节镜清理术配合关节腔内注射玻璃酸钠治疗OA,明显提高了治疗效果.
作者：王伟；陆兴；康志刚；董昕 刊期： 2014年第07期
目的 探讨磁共振灌注加权成像(PWI)与扩散张量成像(DTI)在脑胶质瘤分级诊断中的应用价值.方法 分析我院经手术病理学证实的45例脑胶质瘤(低级别22例,高级别23例).测量平均扩散系数(ADC)、各向异性分数(FA)、相对平均扩散系数(rADC)、相对各向异性分数(rFA)、局部脑血流量(rCBF)、局部脑血容量(rCBV)、相对局部脑血流量(rrCBF)、相对局部脑血容量(rrCBV)值,应用统计学方法对肿瘤不同部位以及高低级别胶质瘤间各个指标进行差异性比较,并根据受试者操作特征(ROC)曲线确定诊断阈值和分析其敏感度及特异度.结果 45例脑胶质瘤瘤体的ADC、rCBF、rCBV值分别大于相应瘤周、大于相应对侧白质的测量值;FA瘤体＜FA瘤周＜FA对侧白质.各量化指标之间差异均有统计学意义(P＜0.05);高级别胶质瘤瘤体及瘤周的rrCBV、rrCBF分别大于低级别胶质瘤(P＜0.01),高级别胶质瘤瘤体的rADC值小于低级别胶质瘤(P＜0.01);根据ROC曲线分析,rrCBF和rrCBV的诊断阈值分别为2.749和3.058,相应的分级诊断的敏感度和特异度分别为87％、100％与91.3％、95.5％,瘤体rADC及rFA值无诊断价值.结论 脑胶质瘤的瘤体rCBF、rCBV及ADC值,可以用于胶质瘤术前分级诊断,其中,rrCBF的诊断敏感度和特异度高,rrCBF的ROC曲线下面积大.
作者：江晶晶；谈晓飞；张顺；张妍；姚义好；覃媛媛；郭东生；赵凌云；朱文珍 刊期： 2014年第07期
小肝细胞样前体细胞(SHPCs)是一种只能向肝细胞分化的单潜能肝干细胞,体外培养及体内移植均有着强大的增殖分化潜能[1-2].本研究旨在建立大鼠小肝细胞样前体细胞模型.一、材料与方法倒千里光硷(Sigma公司)溶液腹腔内注射(30 mg/kg,2次,间隔2周),第2次给药后于第5周2/3肝切除建立健康雄性Wistar大鼠SHPCs模型,改进Seglen胶原酶(0.05％,Ⅰ型胶原酶,Sigma公司)灌注方法获得肝细胞悬液,以包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒混悬液(Percoll,45％,Pharmacia公司)密度梯度离心分离纯化SHPCs,以37℃恒温、5％ CO2培养,光镜、电镜下观察,链酶亲和素-生物素-过氧化酶复合物技术进行免疫组织化学染色.
作者：张金卷；杜智；王毅军；朱争艳；李霖 刊期： 2014年第07期
目的 检测喉鳞状细胞癌患者外周血及癌组织中Th9细胞及白细胞介素(IL)-9的表达水平,探讨其与喉鳞状细胞癌患者临床病理特征的关系.方法 选择66例初治的喉鳞状细胞癌患者和40例健康志愿者.采用流式细胞仪检测外周血Th9细胞水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中IL-9表达水平.应用免疫组织化学染色分析癌旁组织及癌组织中IL-9阳性细胞的浸润程度.分析喉鳞状细胞癌患者外周血Th9细胞、血清中IL-9水平及癌组织中IL-9阳性细胞浸润程度与各临床病理参数间的关系.结果 喉鳞状细胞癌患者外周血中Th9细胞及IL-9水平分别为(2.64±0.24)％和(89.40 ±6.66) ng/L,显著高于健康对照组[(1.07±0.11)％,t=12.63,P＜0.01;(26.80±3.76) ng/L,t=14.37,P＜0.01],Ⅲ～Ⅳ期患者的Th9细胞比例及IL-9水平明显高于Ⅰ～Ⅱ期患者[(3.21±0.22)％比(2.07±0.19)％,t=8.24,P＜0.01;(104.30±6.07) ng/L比(72.90±5.37) ng/L,t=8.91,P＜0.01].喉鳞状细胞癌患者癌组织中IL-9阳性细胞浸润率为84.37％(27/32),而对应癌旁组织为21.87％(7/32),差异有统计学意义(x2=25.098,P＜0.01).外周血Th9细胞和IL-9的表达水平与喉鳞状细胞癌的临床分期、肿瘤分化程度、区域淋巴结转移明显相关(P＜0.05),与年龄、性别、原发灶部位无相关(P＞0.05).癌组织中IL-9阳性细胞浸润程度与临床分期、区域淋巴结转移明显相关(P＜0.05),与其他临床病理特征无相关(P＞0.05).结论 喉鳞状细胞癌患者外周血Th9细胞比例及血浆中IL-9水平显著升高,且与临床分期等病理指标明显相关,提示Th9细胞及IL-9参与喉鳞状细胞癌的发生发展.
作者：郭欣；吴志宇；陈春悠；王东海 刊期： 2014年第07期
目的 检测MG-63骨肉瘤细胞Ras相关区域家族1(RASSF1)基因启动子甲基化,并观察5-氮杂胞苷去甲基化对其生物学行为的影响.方法 采用亚硫酸盐测序法(BSP)检测MG-63骨肉瘤细胞RASSF1基因启动子甲基化状态,比较5-氮杂胞苷处理前后RASSF1甲基化状态、基因表达、细胞增殖曲线、细胞周期和凋亡的差异.结果 5-氮杂胞苷处理前RASSF1基因启动子第1～3、第16 CG位点甲基化率为40.0％,第4～15 CG位点甲基化率为60.0％;处理后的MG-63骨肉瘤细胞RASSF1基因启动子第1～16 CG位点甲基化率为0.正常未处理MG-63骨肉瘤细胞RASSF1基因mRNA和蛋白质表达处于低表达状态,5-氮杂胞苷处理后RASSF1基因mRNA和蛋白质表达显著增加,显著高于处理前.5-氮杂胞苷处理后的细胞增殖速度减慢,D1-D8细胞吸光度值显著低于正常未处理的细胞.5-氮杂胞苷处理后的MG-63骨肉瘤细胞Go/G1期和凋亡率显著高于处理前细胞(P＜0.05),S期、G2/M期和增殖指数(PI)显著低于处理前细胞(P＜0.05).结论 MG-63骨肉瘤细胞RASSF1基因启动子处于甲基化和表达抑制状态,5-氮杂胞苷能逆转RASSF1基因启动子甲基化状态,使基因重新表达而抑制细胞增殖并促进其凋亡.
作者：张勇；陶圣祥；刘国狮；刘鸿；肖紫春；刘雷 刊期： 2014年第07期
目的 检测芳香烃受体核易位蛋白(ARNT)高表达对肝癌细胞SMMC7721增殖、凋亡以及侵袭能力的影响.方法 构建ARNT基因稳定转染的肝癌细胞SMMC7721;细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞24、48、72 h的增殖,膜联蛋白V(Annexin V)/碘化丙锭(PI)法检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞的侵袭能力.结果 筛选获得稳定高表达ARNT的克隆细胞;Western blot 显示稳定转染ARNT的SMMC7721可明显上调ARNT蛋白的表达水平,上调倍数达2.65倍;ARNT 高表达后细胞生长速度较对照组细胞明显减慢.24、48、72 h的细胞增殖抑制率分别为(18.70±4.25)％、(26.45±3.92)％、(35.14±3.64)％;ARNT高表达后细胞凋亡明显增加,细胞总凋亡比例为(9.43±1.09)％,而对照组细胞的总凋亡比例为(4.40±0.61)％,两者差异有统计学意义(P＜0.01);Transwell实验显示表达ARNT的肝癌细胞穿膜细胞数为(29.5±6.7)个,而对照组的穿膜细胞数为(58.3±14.8)个,差异有统计学意义(t=6.873,P＜0.01).结论 ARNT能明显抑制肝癌细胞的生长、促进其凋亡,同时抑制肿瘤细胞的侵袭能力.
作者：蔡静；吴建胜 刊期： 2014年第07期
关节软骨的磨损是临床上常见的疾病,但是软骨缺乏自身修复能力,以间充质干细胞为种子细胞构建软骨组织工程为软骨的修复带来了新希望.与生物化学因素一样,力学因素也影响干细胞的增殖和向软骨细胞的分化,并在维持软骨的形态和功能上起到重要作用.细胞在体内承受着复杂的力学刺激,如压力、静水压力、张力和剪切力等,各种力又有不同的作用大小、频率和持续时间等,从而产生不同的影响.现就力学因素对间充质干细胞成软骨的影响和相关信号传导机制的研究进展做一综述.
作者：范文帅；郭常安 刊期： 2014年第07期
目的 探讨胃癌组织中微小RNA(miR)-433的表达变化及其临床意义.方法 采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测80例胃癌患者手术切除癌组织及配对癌旁组织标本中miR-433的表达水平.结果 miR-433在胃癌组织中的相对表达水平(△Ct为9.73±2.96)显著低于其配对癌旁组织中的表达(△Ct为12.25±2.07),差异有统计学意义(P＜0.05).胃癌组织中miR-433的表达水平与分化程度、临床TNM分期、肿瘤大小及淋巴结转移密切相关(P＜0.05),而与年龄和性别无相关(P＞0.05).结论 胃癌组织中miR-433的低表达可能与胃癌的发生、发展、侵袭及转移相关.
作者：顾掌生；马志红；吴巍；刘进；钟婧；蒋海根；闵丽姗；戴利成 刊期： 2014年第07期
目的 观察腺病毒介导血红素加氧酶-1(HO-1)基因对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的保护作用.方法 雄性SD大鼠分成假手术组(A组)、缺血再灌注组(B组)、AdV-rHO-1处理组(C组).A组为对照组,B、C组阻断腹主动脉30 min后,暴露大鼠脊髓分别注入AdV-EGFP、AdV-rHO-1病毒载体.各组于缺血再灌注12h、1、2、3、7d测定后肢神经功能评分、病理学、HO-1、HO-1 mRNA的表达和凋亡细胞.结果 C组后肢神经功能评分(2.83±0.75)在缺血再灌注2d后明显好于B组(1.50±0.55) (P ＜0.01).C组(35.85±6.59)HO-1表达量较A、B组明显增多(P＜0.01),C组(1.83±0.28) HO-1的mRNA表达量较A组和B组明显升高(P＜0.01).结论 腺病毒介导的HO-1基因能有效转染缺血再灌注脊髓组织,对缺血再灌注的脊髓有保护作用.
作者：周立亚；周立文；李明强；叶习红；叶繁；王雪松 刊期： 2014年第07期
目的 探讨血小板源性生长因子(PDGF)在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及其与临床病理参数的关系.方法 选择行ESCC根治切除的患者43例,取其手术切除食管病变部位的食管癌组织为ESCC组,同时选择其中25例ESCC切除标本上、下断端(距肿瘤边缘＞5 cm)的正常食管上皮作为对照组.采用免疫组织化学方法检测两组PDGF的表达,并分析其与ESCC临床病理参数的相关性.结果 ESCC组食管上皮组织PDGF表达的平均吸光度值(0.091±0.002)显著高于对照组(0.074±0.008),其差异有统计学意义(P＜0.05).PDGF的表达与淋巴结转移及TNM分期呈正相关(r =0.673、0.525,P＜0.05),与肿瘤大小及分化程度无相关(r=0.379、0.453,P＞0.05).ESCC组和对照组PDGF表达差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PDGF与ESCC的发生、发展密切相关,对ESCC的诊断、判断预后及治疗有重要参考价值.
作者：齐博；赵宝生；李汉臣；刘红山 刊期： 2014年第07期
目的 探讨雌雄大鼠脊髓损伤(SCI)后神经功能恢复的差异性和可能原因.方法 健康SPF级SD大鼠雌雄各30只,按性别分为两组:雄性大鼠组(A组)和雌性大鼠组(B组);改良Allen法在胸7节段平面制作SCI模型.于术后1、2、3、4、7d各组随机处死大鼠2只取损伤处脊髓检测超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醇(MDA)和细胞凋亡,术后1d和1、2、3、4周采用改良大鼠胸段脊髓损伤后功能评判标准(BBB评分法)对大鼠进行行为学检查评分,同时各组随机处死1只大鼠取损伤处脊髓冰冻切片,苏木素-伊红(HE)染色显微镜下观察组织结构变化.结果 (1)BBB评分:脊髓损伤后2～4周时,两组大鼠的后肢功能均出现部分恢复,至第4周,B组评分:(8.250±1.658)分,A组为:(5.580±1.443)分,差异有统计学意义(P＜0.01).(2)SOD活性变化:脊髓损伤2d时SOD活性低,A组:(24.073 ±3.220) U/ml,B组:(42.663±3.940) U/ml;随后均逐渐升高,至7d时,A组SOD活性:(93.556 ±7.138) U/ml,B组:(106.833±5.878) U/ml,在1周内A组均低于B组(P＜0.01).(3)MDA含量变化:脊髓损伤2d内两组MDA含量差异无统计学意义,至第3、4和7天时,A组MDA含量为(28.822±2.804)、(25.106±1.911)、(15.163±3.075) μmol/L;B组分别为:(24.224±2.627)、(18.377±2.416)、(10.959±2.780) μmol/L,差异有统计学意义(P＜0.05).(4)细胞凋亡:在脊髓损伤3d时达高峰,A组:(187.83±18.30)个/视野,B组:(160.67±8.34)个/视野;至7d时,A组:(84.00±10.96)个/视野,B组:(56.00±7.43)个/视野;在3、4、7d时A组细胞凋亡数明显高于B组(P＜0.01).(5)病理切片观察,损伤脊髓组织的炎症浸润、空洞形成、白质留存、瘢痕形成等方面差异有统计学意义(P＜0.05),B组优于A组.结论 雌性大鼠SCI后运动功能的恢复优于雄性大鼠;其原因可能是雌性大鼠体内相对高水平的雌激素存在,通过抗氧化作用和抑制细胞凋亡,减轻了继发性损伤.
作者：卜志勇；郑玲；李安军；涂圣旭；施永彦 刊期： 2014年第07期
目的 观察肿瘤相关巨噬细胞自噬调控后对大肠癌loVo细胞凋亡的影响.方法 使用佛波酯PMA、人重组白细胞介素(IL)-4诱导人单核白血病细胞THP-1分化为肿瘤相关巨噬细胞(TAM)后,使用流式细胞仪检测其表面CD68、CD204、CD206分子表达;分别使用一定浓度的雷帕霉素(RAD001),巴弗洛霉素(Bafilomycin a1)对TAM的自噬状态进行调控,应用磺酰尸胺(MDC)荧光染色法观察TAM自噬囊泡形成,免疫荧光检测自噬特异性微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达;利用Transwell小室将不同自噬状态的TAM与大肠癌细胞行非接触式共培养,实验分组为TAM自噬上调组、下调组、未调组及单独大肠癌LoVo细胞的空白对照组4组,各组经4Gy射线照射后分别对大肠癌细胞凋亡细胞比例、存活素(Survivn)蛋白、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)蛋白,半胱天冬蛋白酶激活剂(Smac)蛋白进行检测.结果 TAM表面CD68、CD204、CD206表达水平显著高于未经处理的THP-1细胞和只经PMA作用得到的未活化巨噬细胞.TAM自噬上调组中MDC染色的自噬囊泡数目多于自噬未调组,LC3荧光也强于自噬未调组;自噬下调组中MDC染色的自噬囊泡数目少于自噬未调组,LC3荧光强度则弱于自噬未调组.共培养体系中细胞同时接受照射处理后,膜联蛋白V/碘化丙锭(Annexin V/PI)双染检测大肠癌细胞凋亡显示:共培养组中大肠癌细胞凋亡率分别为(36.84 ±0.37)％、(43.23±1.34)％、(29.37±0.82)％,均高于对照组(27.23±0.63％)(P＜0.05);其中,TAM自噬上调组中大肠癌细胞凋亡率[(43.23±1.34)％]高于自噬下调组[(29.37±0.82)％]和自噬未调组[(36.84±0.37)％,P＜0.05].各组大肠癌细胞凋亡相关蛋白的检测结果显示:TAM自噬未调组中bcl-2表达量为0.24±0.02、上调组为0.08±0.01、下调组为0.42±0.02,均低于对照组(0.61±0.05),TAM可下调大肠癌细胞的bcl-2表达(P＜0.05);共培养组中Smac表达水平(分别为1.26±0.03、1.49±0.24、0.85±0.03)均高于对照组(0.68±0.03)(P＜0.05);共培养组中Survivin表达水平(分别为0.48±0.01、0.23 ±0.02、0.55±0.05)均低于对照组(0.80±0.05) (P ＜0.05).结论 上调TAM自噬水平可显著促进大肠癌细胞凋亡,改变大肠癌细胞凋亡相关蛋白的表达,提高射线对大肠癌细胞的杀伤作用.
作者：邵乐宁；杨晓东；邢春根；吴永友；赵奎；龚巍；钟丰云；曹建平 刊期： 2014年第07期
目的 观察辛伐他汀对猪脊髓缺血再灌注损伤(SCII)后热休克蛋白70 (Hsp70)表达的影响.方法 24头健康成年西藏小型猪,雌雄不限,体质量20～30 kg,随机分为假手术组(C组)、缺血再灌注损伤组(I/R组)和辛伐他汀实验组(Sim组),每组8头.I/R组和Sim组采用胸主动脉、锁骨下动脉阻断法造成脊髓缺血再灌注损伤模型(70 min),分离副半奇静脉,远端结扎,近端插管.I/R组在阻断过程中副半奇静脉逆灌注乳酸林格钠液(860 ml/h,1000 ml),Sim组阻断过程中副半奇静脉逆灌辛伐他汀溶液(0.25 mg/kg,1000 ml),术后口服辛伐他汀片剂80 mg/d,30 d.术后采用Tarlov下肢神经功能评分系统评估6、24、48 h神经运动功能.术后30 d,各组分别处死8头实验猪,迅速取出来L2～L5及骶段脊髓,苏木素-伊红(HE)、Nissle染色观察神经元形态学变化,免疫组织化学法检测Hsp70的表达.结果 Sim组术后24、48 h神经功能评分[(3.2±0.3)、(3.6±0.2)分]高于I/R组[(2.2±0.4)、(2.8±0.4)分],差异有统计学意义(P＜0.05).与I/R组比较,Sim组神经元形态学的损伤较轻,Hsp70表达明显增加,其积分吸光度值为296.8046±3.695 1.结论 辛伐他汀对猪脊髓缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能和诱导Hsp70的表达上调有关.
作者：丁皓；申月霞；卢聪；黄焕雷；郭惠明；陈寄梅；庄建；朱平 刊期： 2014年第07期
近年来,简单外科手术结合弹性蛋白酶诱导实验动物动脉瘤模型的研究渐渐成为热点[1].我们利用猪胰弹性蛋白酶消化大鼠右侧颈总动脉,建立与人类颅内动脉瘤形态学和病理学相似的梭形动脉瘤模型.一、材料与方法1.材料与方法:SD大鼠30只,体质量250 ～ 300 g.随机分为生理盐水对照组、实验A组和实验B组,每组10只.10％水合氯醛(0.4 ml/100 g)腹腔注射麻醉大鼠后,颈前正中切口,游离出右侧颈总动脉,用大小约5 mm×14 mm乳胶片垫于颈总动脉下,两端用1号缝合线结扎形成一长度为10 mm凹槽,注入弹性蛋白酶0.15 ～0.35 ml(1.0 U/ul),消化20 min后,吸干残留弹性蛋白酶后除去结扎线,生理盐水反复冲洗后取出乳胶片,逐层缝合皮肤.
作者：张连富；方兴根；李子付；江国权；周家浩；裴士文；徐善水 刊期： 2014年第07期
目的 观察心脏辅助装置对于急性心力衰竭(HF,简称心衰)犬血流动力学参数的影响.方法 10条健康犬,体质量25～ 35 kg,应用冠状动脉(简称冠脉)微栓塞法建立急性心衰模型,对于造模成功的犬采用双心室辅助,并在实验开始时采用1∶1的频率辅助,记录主动脉压力、心输出量等血流动力学参数.结果 冠脉微栓塞使心输出量[CO:(2.88±0.38) L/min比(1.58±0.23) L/min]、平均动脉压[MAP:(117.2±9.0) mmHg(1 mmHg =0.133 kPa)比(75.0±6.7)mmHg]等其他血流动力学参数减少(30％～50％).通过应用心脏直接辅助装置,能提高心输出量[CO:(1.58±0.23) L/min比(2.41±0.34) L/min]和平均动脉压[MAP:(75.0±6.7) mmHg比(103.8±10.0) mmHg],CO和MAP增加20％.收缩压[(93.6±8.03) mmHg比(126.8±7.8)mmHg]、舒张压[(60.4±5.0) mmHg比(87.0 ±6.1)mmHg]也相应提高,差异有统计学意义(P＜0.05).辅助前后心率变化不大[(125.4±9.0)次/分比(129.0±10.3)次/分],差异无统计学意义(P＞0.05).结论 与心脏收缩同步的心脏辅助装置对于急性心衰犬能够改善心脏的收缩能力,辅助心脏的收缩,提高其心输出量,使其血流动力学参数得以提高.
作者：刘超；李圣博；刘鸿昊；姚星星；焦周阳；文冰 刊期： 2014年第07期
目的 探讨肝再生磷酸酶-3(PRLd)在结肠癌微环境中通过肿瘤相关性巨噬细胞(TAMs)促进结肠癌细胞转移的机制.方法 将TAMs与稳转染PRL-3的结肠癌Lovo细胞(Lovo-P)进行体外共培养的方式,再通过实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)筛选出TAMs中上调的细胞因子.Western blot检测细胞因子蛋白水平.免疫荧光法检测结肠癌患者肿瘤切片中相关TAMs表达,Kaplan-Meier法绘制患者的生存曲线.结果 Real-time PCR检测结果显示,TAMs与Lovo-P细胞共培养比与Lovo-C细胞共培养后白细胞介素(IL)-6 mRNA表达明显升高(8.3±2.2)倍.Western blot检测结果显示TAMs与Lovo-P细胞共培养后IL-6表达上调180％.在共培养体系中预处理IL-6中和抗体(5mg/L及10 mg/L)后,Lovo-P细胞侵袭性下降[(220±13)个比(132±12)个比(83±7)个].免疫荧光检测结果显示结肠癌患者癌灶处肿瘤切片中TAMs与IL-6荧光重合,分布于肿瘤间质中,并且Ⅰ期患者IL-6阳性TAMs数量要少于Ⅳ期患者[(24±4)个比(56±9)个].生存曲线分析发现IL-6阳性且TAMs＞ 20个的患者生存期明显短于IL-6阳性且TAMs≤20个患者(27.3个月比12.2个月).结论 PRL-3能够通过诱导TAMs分泌IL-6,促进结肠癌细胞转移,并影响患者的预后和生存.
作者：黄汉源；许鹤洋；来伟；曾献清；张旸；陈志坚；李定文；林峰；褚忠华 刊期： 2014年第07期
我们选择纤维蛋白凝胶包埋镍网成纤维细胞复合物观察模拟体内共培养下不同孔径的大孔支架对细胞的影响.一、材料与方法1.材料:人真皮成纤维细胞取自腹部抽脂术去掉的皮肤,方法参照文献[1].2.模型制作:用聚二甲基硅氧烷(PDMS)夹持布满均一圆孔的圆形镍网边缘(直径:3.05 mm,厚度:30 μm),根据圆孔直径600、400、270、170、100 μm分为5种型号,消毒后烘干,置入12孔板中.镍网上接种密度为5×108/L的成纤维细胞后,用纤维蛋白凝胶包埋,3.5 g/L纤维蛋白原,10 IU/ml凝血酶,加入适量含有10％新生牛血清的高糖DMEM培养基,放入37℃、5％ CO2培养箱,2d换液1次.根据镍网孔径设置实验组,并分组,另设置无胶体的对照组.
作者：陈道东；沈忆新；张鹏；孙涛 刊期： 2014年第07期
目的 探讨α-突触核蛋白(SNCA)基因A53T位点突变、A30P位点突变与一个群发性帕金森病家系的关系,进而探讨该家系帕金森病的发病病因是否与遗传因素相关.方法 该家系病史特点其父为当地农药商人,他们共同特点有长期农药接触史(其中包括百草枯和有机磷农药).对该家系3例患者及3例正常成员进行系统的临床检查明确诊断原发性帕金森病后,提取该家族患者及健康人的静脉血,提取人类白细胞组DNA后,通过聚合酶链反应技术(PCR)对SNCA的4号外显子(Exon4) A53T位点及3号外显子(Exon3)上的A30P位点进行扩增,扩增后的产物经限制性内切酶反应多肽技术充分反应,限制性内切酶消化后的产物经紫外线凝胶电泳成像仪分析是否存在基因突变.结果 所有研究对象的SNCA基因Exon3经PCR扩增后的片段长度为192 bp,经特异性限制性内切酶Mva Ⅰ充分消化后,凝胶电泳成像结果为单一条带,即未发现A30P突变.SNCA基因Exon4经PCR扩增后的片段长度为216 bp,经限制性内切酶Tsp45 Ⅰ充分反应后,凝胶电泳成像结果为单一条带,即未发现A53T突变.结论 SNCA基因A30P、A53T点突变可能不是该家系患帕金森病的易感因素,而是与该家系长期接触农药相关,或与其他基因相互作用.
作者：侯健；姚亚妮；罗琴；杨新玲 刊期： 2014年第07期
中华实验外科杂志
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