胡安斌；何晓顺；付必莽；商昌珍；闵军；蔡继业
目的 体外诱导甲胎蛋白(AFP)158-166特异性T细胞,检测其对AFP+肝癌细胞的特异性杀伤能力.方法 采用流式细胞术及PCR-SSP法从20例健康志愿者中筛选基因型HLA-A0201阳性者,每例取外周血50 ml获取单核细胞,细胞因子贴壁黏附培养收获树突状细胞(DC).将DC负载HLA-A0201表位态AFP158-166后按1∶10比例与新鲜淋巴细胞混合培养、增殖,噻唑蓝法检测其对HepG2、负载和未负载AFP158-166的T2细胞的杀伤能力.结果 成熟DC表面抗原CD83、CD80和CD86阳性率分别为(81.3 ±2.4)％、(92.8±1.4)％和(70.5 ±1.9)％.诱导的T细胞在效靶比40∶1时对HepG2、负载和未负载AFP158-166的T2细胞杀伤率分别为(61.1±3.4)％、(70.6±2.4)％和(16.3 ±2.7)％.结论 人外周血体外诱导的AFP158-166特异性T细胞可杀伤AFP+ HepG2和负载AFP158-166的T2细胞.
作者：孙龙昊；章由贤；何向辉；章志翔；朱理玮 刊期： 2012年第11期
目的 通过有限元分析的方法评估人工寰齿关节置换对寰枢关节三维活动度的影响.方法 将CT扫描数据导入Mimics软件重建寰枢椎体及人工寰齿关节三维模型,去除模型中寰椎前弓、齿状突和枢椎部分椎体,模拟前路减压术,将人工寰齿关节模型装配于处理过的寰枢椎模型上.导入Ansys软件分析计算模型的三维活动度.结果 人工寰齿关节在前屈、后伸、右侧弯、右旋转状态下的位移分别为1.109、3.310、0.528、9.678 mm,活动度分别为1.6°、5.1°、4.6°和22.0°.结论 改良人工寰齿关节置换既可稳定寰枢关节又可保留寰枢关节运动.
作者：胡勇；赵红勇；袁振山；张美超；徐荣明；顾勇杰 刊期： 2012年第11期
骨肉瘤是青少年常见的恶性骨肿瘤,恶性程度高,易发生转移[1].本实验旨在检测Ether à go-go 1(EAG1)在人骨肉瘤中的表达、意义及对人骨肉瘤细胞增殖和周期的影响.
作者：吴进；吴欣宇；甘璐；王建勋；杨彤涛；周勇 刊期： 2012年第11期
目前,关于钙离子对成骨细胞增殖分化的影响已有少量研究,研究结果表明钙离子与成骨细胞活性及成骨分化基因的表达都有密切关联[1],但对骨髓基质于细胞(BMSCs)成骨分化过程的影响报道尚少.我们采用柠檬酸钙作为钙源,添加到无钙培养基中配制不同浓度的含钙培养基,检测钙离子对BMSCs增殖及成骨分化的作用.
作者：程少文；聂鹏飞；张伟；寇冬权；王伟；陈庆玉；林忠勤；彭磊 刊期： 2012年第11期
颅内动脉瘤形成的病因和机制目前仍不清楚,血管内皮细胞钙黏蛋白(VE-cadherin)在保持血管内皮细胞结构的稳定性和完整性、调节内皮细胞之间的通透性中发挥重要作用,而Src激酶参与调控VE-cadherin的磷酸化及各种细胞内信号[1].本研究应用实验性大鼠颅内动脉瘤模型模拟体内颅内动脉瘤形成过程中血管壁的损害,探讨动脉瘤形成过程中Src激酶和VE-cadherin磷酸化的表达.
作者：李美华；聂艳良；张贤华；梁尚栋 刊期： 2012年第11期
目的 观察封闭负压引流技术对创面血管化的影响.方法 制作幼猪肌腱外露创面模型2×12个,设为封闭负压引流组(VSD组)和对照组,对表达CD31的新生血管、表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的成熟血管和表达血管内皮生长因子(VEGF)的细胞数进行统计学比较.结果 第7天,VSD组CD31阳性新生血管数为(19.90±1.36)个,α-SMA阳性成熟血管数为(11.90±1.32)个,VEGF阳性新生血管数为(69.90±1.27)个,CD31 mRNA表达量为(1.543±0.072)；对照组分别为(13.20±1.02)、(8.20±1.05)、(44.20 ±0.72)个以及(0.988 ±0.031),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 封闭负压引流能加速创面血管化,肉芽覆盖肌腱,促进创面愈合.
作者：刘君；刘兴邦；陶圣祥；余国荣；胡祥 刊期： 2012年第11期
目的 探讨趋化因子受体4(CXCR4)、血管内皮生长因子(VEGF)在肺癌组织中的表达及意义.方法 应用免疫组织化学方法检测90例肺癌组织中CXCR4、VEGF的表达,包括39例伴淋巴结转移者.结果 CXCR4、VEGF蛋白在肺正常组织表达较低,在90例肺癌组织中CXCR4的阳性表达率高达61.1％ (55/90)；VEGF的阳性表达率为76.7％ (69/90).CXCR4的表达与肺癌患者的年龄、性别无明显相关,而与分化程度、TNM分期、病理类型和淋巴结转移明显相关；VEGF的表达与肺癌患者的年龄、性别和病理类型无相关,而与分化程度、TNM分期和淋巴结转移有相关性.结论 CXCR4和VEGF在肺癌组织的高表达与肺癌侵袭转移的发生和淋巴结转移有关.
作者：谢颂平；曾文慧；左涛；黄杰；范国华；董平 刊期： 2012年第11期
目的 检测Yes相关蛋白(YAP)在人胃腺癌、胃腺瘤及正常胃黏膜组织中的表达,探讨YAP对胃癌细胞增殖和转移的作用及其分子机制.方法 免疫组织化学法和实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测YAP在78例人胃腺癌、39例人胃腺瘤及46例正常人胃黏膜组织的表达.利用建立慢病毒小发夹RNA(shRNA)靶向YAP基因的胃癌SGC-7901细胞株,Western blot法检测增殖细胞核抗原(PCNA)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的蛋白表达水平.噻唑蓝(MTT)比色法和Transwell试验检测YAP下调对胃癌细胞增殖和转移的影响.结果 YAP在69.23％的胃腺癌组织中高表达,与正常胃黏膜(0.33 ±0.15)和胃腺瘤(0.42 ±0.20)比较,YAP mRNA在胃腺癌(1.74±0.46)的表达水平明显增高(P＜0.001).体外实验显示,YAP下调减少PCNA和MMP-2蛋白的表达,并抑制胃癌细胞增殖活性和转移能力.结论 YAP在人胃腺癌组织中高表达,并且YAP下调抑制胃癌细胞的增殖和转移.
作者：张靖；许志朋；朱金水；周洲；陈维雄；陈尼维 刊期： 2012年第11期
目的 探索建立3种不同类型的鼠胰腺癌动物模型,基于核磁共振代谢组学技术发现鼠及人类胰腺癌的生物标志物.方法 模型1:人胰腺癌细胞株2×106个/只接种于裸鼠皮下,建立裸鼠皮下植入人胰腺癌细胞动物模型；模型2:取成模的皮下荷瘤鼠肿瘤组织,剪成1 mm3小粒后植入裸鼠胰体尾处被膜下,建立裸鼠胰腺原位植癌动物模型；模型3:将致癌剂7,12-二甲基苯并蒽(DMBA)混悬液以10 mg/100 g注入仓鼠胰腺体部被膜下,术组乙醇饮水,建立DMBA胰腺原位诱癌动物模型.结果 裸鼠皮下植入人胰腺癌细胞动物模型组成瘤率为100％；裸鼠胰腺原位植癌动物模型组成瘤率为90％;DMBA胰腺原位诱癌动物模型成瘤率为43％ (13/30).结论 建立了成熟可靠的各种鼠胰腺癌模型.
作者：欧阳东；黄鹤光 刊期： 2012年第11期
目的 探讨白花蛇舌草诱导胶质瘤U87细胞株凋亡的作用及机制.方法 采用不同浓度的白花蛇舌草含药培养基(0、100、200 ml/L)处理U87细胞48 h,流式细胞仪检测对照组与实验组细胞的凋亡率及线粒体膜电位差异,Western blot法检测两组细胞中抗凋亡基因[B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)]和促凋亡基因(bax)的表达水平改变.结果 经100、200 ml/L白花蛇舌草处理的U87细胞凋亡率明显增加,分别为(17.31±1.36)％、(41.23±0.72)％,明显高于对照组的(8.11±1.71)％(P＜0.01),呈显著的剂量依赖性；经JC-1染色法处理后,呈绿色荧光的U87细胞比率随含药培养基浓度升高而增多,分别为(11.90±0.20)％、(34.17±2.79)％,明显高于对照组的(5.53±1.20)％(P＜0.05),提示其线粒体膜电位受药物影响而逐步递减；白花蛇舌草能显著上调促凋亡蛋白bax基因的表达并降低bcl-2/bax比率.结论 白花蛇舌草通过线粒体依赖性途径诱导人胶质瘤U87细胞的凋亡.
作者：张焱；祝新根；程祖珏；沈晓黎；郭华；毛国华；朱健明；胡尚伟 刊期： 2012年第11期
目的 观察红花对HSC-T6细胞基质分解素-1(MMP3)及其抑制因子基因表达的影响.方法 以不同浓度的红花(1.0、0.5 g/L)作用于培养的肝星状细胞株HSC-T6细胞48 h,收集细胞,提取总RNA；用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定MMP3及金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的基因表达水平.结果 MMP3基因表达水平在红花1.0、0.5 g/L两组分别为2.80±0.36、2.52±0.32,而空白对照组为2.13 ±0.30.TIMP-1基因表达水平在红花1.0、0.5 g/L两组分别为1.66±0.23、2.04±0.30,而空白对照组为4.03±0.56.结论 红花可增强HSC-T6细胞MMP3的基因表达,并显著抑制HSC-T6细胞TIMP-1的基因表达,且与剂量有关.
作者：王爱民；阴赪宏；张莉；马雪梅；耿焱；王宝恩 刊期： 2012年第11期
目的 构建大鼠腹主动脉瘤模型并观察大鼠腹主动脉瘤中骨桥蛋白(OPN)及核因子-κB(NF-κB)的表达,探讨大鼠腹主动脉瘤发生的分子机制.方法 将30只大鼠分为3组,每组10只,用酶灌注法灌注30 min构建大鼠腹主动脉瘤模型；测量动脉直径；苏木素-伊红(HE)染色及特殊染色检测主动脉的结构改变及炎性细胞浸润；免疫组织化学技术、Western blot法检测动脉组织中OPN、NF-κB及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达.结果 成功构建大鼠腹主动脉瘤模型；腹主动脉瘤组术后直径扩张率明显高于对照组(P＜0.01),并且中层弹力蛋白明显减少,炎性细胞浸润程度显著增高；免疫组织化学结果显示OPN、NF-κB及MMP-2在腹主动脉瘤组中的表达均明显增加(P＜0.05).Western blot结果同样显示OPN、NF-κB及MMP-2在腹主动脉瘤组中的表达均明显增加(P＜0.01),OPN、NF-κB及MMP-2呈正相关.结论 在大鼠腹主动脉瘤模型中,OPN可能通过NF-κB途径上调MMP-2的表达,进而加速细胞外基质的降解,终导致主动脉瘤的发生发展.
作者：童雪影；周洪莲；武亚丽；聂斌 刊期： 2012年第11期
目的 探讨乳腺癌复发/转移部位及生存与血清癌抗原15-3(CA153)、碱性磷酸酶水平(ALP)的关系.方法 分析192例晚期乳腺癌患者的血清CA153、ALP水平.结果 血清CA153、ALP水平的均值及联合检测阳性率与转移部位无明显相关；单纯骨骼/软组织/肝脏/肺脏转 移组,CA153阳性率均高于ALP(52.2％比14.3％、64.4％比7.0％、83.3％比0.0％、69.2％比0.0％),差异有统计学意义(P＜0.05)；不同病理分子分型的CA153、ALP单独及联合检测阳性率差异无统计学意义(P ＞0.05)；CA153阈值为17 U/ml时,阴性组中位无疾病进展时间(PFS)为12.0个月,阳性组为10.0个月,差异有统计学意义(P ＜0.05)；ALP水平对PFS无明显影响.结论 血清CA153、ALP水平对乳腺癌复发/转移部位可能有一定的提示意义,与病理分子分型无明显相关,CA153水平影响晚期乳腺癌患者的生存.
作者：盛雅娟；刘卫国；曹文明；王晓稼 刊期： 2012年第11期
目的 观察骨关节炎(OA)中基质金属蛋白酶(MMP)-1、3与白细胞介素-1β(IL-1β)的表达及关节软骨细胞凋亡,探讨其在OA发病机制中的作用.方法 将20只中国大白兔随机分成正常组(A组)、实验组(B组),每组10只,A组未造模,B组采用Hulth法制成OA模型,4周后取胫骨平台关节软骨进行组织病理学检查,采用免疫组织化学和原位末端标记细胞凋亡检测法分别检测关节软骨和滑膜中的MMP-1、3、IL-1β及软骨细胞凋亡指数(AI)的水平.结果 组织病理学检查可见,B组关节软骨退变程度明显重于A组,符合OA关节软骨退变特征；通过检测MMP-1、3,IL-1β和AI,A组的结果分别是21.005±9.406、18.697±8.225、0.100±0.040和14.900±3.400,B组的结果分别是56.147±22.340、46.182±20.561、0.180±0.060和25.400 ±5.200;B组MMP-1、3和AI的水平均明显高于A组(P＜0.01),B组IL-1β水平高于A组(P＜0.05).结论 MMP-1、MMP-3、IL-1β的表达及关节软骨细胞凋亡在OA发病机制中作用重要,其异常升高与OA关节软骨退变和炎症反应密切相关.
作者：胡阿威；喻爱喜；吴刚 刊期： 2012年第11期
目的 定量分析下肢动脉核因子(NF)-κB和血小板源性生长因子(PDGF)的表达,探讨其在下肢动脉硬化闭塞症患者血管壁的表达及相互关系.方法 对病例组19例终末期动脉硬化的下肢动脉和对照组3例正常下肢动脉NF-κB和PDGF的表达进行实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)分析.结果 病例组患者动脉壁NF-κB(35.42±5.69)和PDGF-A(34.38±5.80)、PDGF-B(33.95±5.92) mRNA的相对表达量均高于对照组(P＜0.05),且NF-κB与PDGF-A(r=0.926)和NF-κB与PDGF-B(r=0.925)之间均存在线性正相关(P＜0.05).结论 下肢动脉硬化闭塞症患者血管壁存在NF-κB和PDGF高表达,并且两者表达相关.
作者：张杨；张望德；李谈；宋盛晗；原标 刊期： 2012年第11期
目的 使用超声检查对轻微胸腰段骨折患者脊柱后方韧带复合体(PLC)进行评估,了解超声对脊柱PLC的诊断意义和其影像学特点.方法 对21名诊断为胸腰段骨折的患者胸腰段PLC进行超声检查,检查结果由包括2名脊柱外科医师和1名超声医师组成,对超声影像资料进行评估,同时对比相应患者超声影像与核磁影像差异.结果 21名患者韧间/棘上韧带内均发现异常回声,其中3名患者被诊断为棘上韧带断裂；85.7％的患者在损伤椎体棘突远端发现棘间韧带血肿信号,其中6名患者同时行核磁检查,结果发现超声检查的敏感度和特异度均优于核磁检查.结论 超声对脊柱PLC的检查结果清晰可靠,同时简便易行,通过对诊断标准进行详细分类,可以成为胸腰段骨折患者后方韧带符合体诊断的“金标准”.
作者：尹若峰；刘艳；赵建武；杨小玉；赵宝林；刘鹏 刊期： 2012年第11期
目的 探讨异基因骨髓注射在大鼠小肠移植中的免疫耐受作用和意义.方法 选用近交系大鼠F344/N和Wistar/A进行全小肠异位移植,实验组在异基因移植前7d取供体BMC行受体胸腺内注入,对照单纯同基因及异基因大鼠移植模型了解异基因供体骨髓在受体胸腺内注射能否减少移植后急性排斥反应的发生,观察其生存时间、病理结果及CD4、CD8、CD25的变化.结果 (1)A组移植大鼠平均存活时间为(7.33±1.03) d;B组为(43.76 ±4.57) d;C组为(55.28±7.48)d.(2)异基因大鼠异位全小肠移植术后3、7、15 d可出现典型的轻、中、重度排斥反应,而同基因组和实验组中未出现排斥反应.(3)异基因移植组术后CD4、CD25+,高于其他组(P＜0.05).而CD8的变化差异无统计学意义(P＞0.05).结论 移植术前7d异基因供体骨髓在受体胸腺内注射能显著减少小肠移植后急性排斥反应的发生,并可以抑制移植肠CD4、CD25细胞的表达.
作者：罗长江；焦作义；李继鹏；王为忠 刊期： 2012年第11期
近年来,乳腺癌的发病率明显升高[1],乳腺癌癌细胞的免疫应答调节机制备受重视.本研究旨在探讨CD4+CD25+ CD127dim/-调节性T细胞细胞在乳腺癌患者外周血中的表达及意义.一、材料与方法1.研究对象:采集遵义医学院附属医院甲状腺乳腺外科2011年7月至12月有完整病历资料病理确诊的30例女性乳腺肿瘤患者术前外周静脉血1 ml;同期两次另取2例乳癌女性患者外周静脉血10 ml.采集标本时所有患者均未行治疗,排除其他疾病干扰,静脉血以乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝.
作者：陆婧；杨伟明；姚新生；陈相彪；唐聃；王春林；贺新媛；骆礼波；石磊 刊期： 2012年第11期
目的 用纯化的人血管生成素2(Ang2)蛋白,通过噬菌体展示技术从非免疫小鼠噬菌体展示抗体库中淘选、鉴定Ang2单链抗体.方法 以纯化的人Ang2蛋白为抗原,对非免疫小鼠噬菌体展示抗体库进行富集和筛选,获得Ang2单链抗体,利用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blot法检测目的蛋白的表达并测序.结果 经过3轮富集和筛选,获得了1个能特异性识别Ang2蛋白的阳性噬菌体克隆,DNA测序表明其含有完整的单链抗体基因片段,大小约750 bp,表达蛋白相对分子质量约33.7×103；通过SDS-PAGE进一步实现Ang2单链抗体(phage-Ang2-scFv)的鉴定.结论 成功分离并鉴定人Ang2-scFv,为进一步的功能学研究奠定了基础.
作者：张中林；艾勇彪；张吉发；袁玉蜂；刘志苏；何跃明 刊期： 2012年第11期
目的 建立成人主动脉血管平滑肌细胞体外培养的有效方法.方法 无菌条件下分离成人主动脉的平滑肌层,剪成1 mm3的碎片,0.1％ Ⅰ型胶原酶预处理1h,组织块贴壁法,以含胎牛血清20％的DMEM低糖培养基培养.倒置显微镜观察培养细胞的形态学特点,免疫荧光法检测平滑肌细胞肌动蛋白(α-SMA)的表达.结果 培养至4～5d组织块边缘即有少量细胞爬出,呈长梭形,胞质丰富；培养至1～2周组织块边缘细胞融合,呈典型的“峰谷”样表现.免疫荧光染色结果显示胞质内α-SMA的表达丰富,荧光强度在(++)～ (+++).结论 胶原酶预处理组织的改良组织块贴壁法培养人主动脉血管平滑肌细胞是一种可行有效的实验方法.
作者：陆树洋；孙晓宁；洪涛；宋凯；杨守国；王春生 刊期： 2012年第11期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
