叶章群；孔德波；陈志强；郭辉；杨为民；姚林方；刘冠琳
目的 检测线粒体促凋亡蛋白(Smac)在膀胱移行上皮细胞癌(TCC)中的表达并探讨其临床意义.方法 逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学SP法分别在基因和蛋白水平检测Smac在15例正常膀胱黏膜和72例TCC中的表达.结果 Smac蛋白和mRNA在正常膀胱黏膜与分化Ⅰ级TCC中均有较强表达,两者差异无统计学意义(P＞0.05),在TCC中的表达随分级的增加都显著性减少(P＜0.01,P＜0.05).浸润性TCC中Smac蛋白和mRNA的表达都低于表浅性TCC(P＜0.01).结论 Smac在正常膀胱黏膜强表达,而在TCC中低表达,且与TCC的分级分期密切相关,检测Smac可辅助临床TCC分级、分期的判断.
作者：李恒；廖贵益；曾甫清；白杨；王竞 刊期： 2008年第03期
目的 建立一种适用于雌性大鼠尿动力学研究的新检测方法,应用该方法测定成年雌性大鼠尿动力学各项参数正常范围.方法 33只成年雌性大鼠乌拉坦腹腔麻醉,尿道内置入2根3 F输尿管导管,分别连接尿动力学检查仪压力传感器及微量注射泵,同时由肛门置入直肠测压气囊管与腹压传感器连接.应用尿动力学检查仪测定大鼠充盈期膀胱压力变化和静态尿道压力图的各项参数.结果 正常成年雌性大鼠尿动力学参数测定值如下:(1)充盈期膀胱压力参数:腹压漏尿点压(ALPP)、喷嚏漏尿点压(SLPP)、排尿压(VP)及膀胱大容量(MBV)分别为(28.06±5.85)、(23.00±5.96)、(25.39±6.23)cm H2O及(1.21±0.52)ml;(2)静态尿道压力图参数:大尿道压(MUP)、大尿道闭合压(MUCP)及功能性尿道长度(FUL)分别为(17.13±4.55)、(14.87±3.77)cm H2O及(14.23±2.64)mm.结论 这种新方法可方便地应用于雌性大鼠的尿动力学研究,更为接近临床所用的方法,因此更具可比性.
作者：胡卫锋；杜广辉；蔡丹；陈园；章慧平；袁晓奕；杨为民；叶章群 刊期： 2008年第03期
目的 观察特异性小干扰RNA(siRNA)对肝癌细胞巨噬细胞移动抑制因子(MIF)基因表达的抑制作用.方法 脂质体方法将siRNA转染肝癌细胞PLC、Hep3B.定量RT-PCR、Western blot检测MIF mRNA和蛋白、MAPK信号分子的表达.噻唑蓝(MTY)比色法、体外细胞侵袭实验检测细胞增殖和对重组基底膜(matrigel)穿透能力.结果 100 nmol/L的MIF siRNA使MIF mR-NA表达下调81.3%和89.1%,蛋白水平降低69.50%、72.31%,与对照组比较其差异有统计学意义(P均＜0.01).细胞增殖率下降16.79%和47.14%(P均＜0.05).穿透matrigel的细胞数为51.00±11.27和18.56±4.72,与对照组比较差异有统计学意义(P均＜0.05).磷酸化MAPK下调.结论 MIF siRNA有效抑制MIF表达及肝癌细胞增殖和迁移,可能部分通过抑制MAPK磷酸化起作用.
作者：李雯；夏金堂；汪谦；伍兆锋；毕熲；傅新晖 刊期： 2008年第03期
目的 探讨GRIM-19 mRNA与蛋白的表达在结直肠癌发生、发展中的意义.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学方法检测40例结直肠癌患者癌组织,正常组织中的GRIM-19 mRNA及蛋白表达情况及测序分析.结果 结直肠癌组织中的GRIM-19 mRNA和蛋白水平明显低于正常组织,GRIM-19蛋白表达在癌组织中明显低于正常组织,且GRIM-19蛋白表达水平与结直肠癌分化程度和临床分期有关(P均＜0.05).结论 GRIM-19作为一种抑癌基因和分子标志物,其表达降低及失活可能与结直肠肿瘤的发生、发展有关.
作者：龚龙波；罗学来；王晶；刘双又；龚建平；胡俊波 刊期： 2008年第03期
目的 观察胶原蛋白-硫酸肝素生物支架的生物相容性,为其应用提供生物学依据.方法 以冷冻干燥法制备胶原蛋白-硫酸肝素生物支架,将支架埋植入大鼠体内,观察大鼠炎症、肝肾功能、免疫反应及支架体内降解情况.结果 实验组大鼠血清WBC、CRP、肝肾功能、体液免疫反应与对照组比较,差异无统计学意义;伤口愈合良好;支架在大鼠体内有所吸收.结论 胶原蛋白-硫酸肝素生物支架具有良好的生物相容性,可作为神经组织工程支架材料.
作者：唐洲平；陈兴泳；谢雪微；孟祥武；唐荣华；于加省；陈劲草；朱遂强；王伟 刊期： 2008年第03期
目的 观察中国人肠道产甲酸草酸杆菌(Ox.F)草酰辅酶A脱羧酶基因(oxc)的分离、克隆及其在293细胞中的表达.方法 提取中国人肠道Ox.F的基因组DNA,PCR扩增oxc基因片段并克隆入真核表达载体pEGFP-C1,通过限制性内切酶酶切电泳和测序鉴定基因片段.将重组质粒脂质体转染至293细胞,利用RT-PCR和Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测oxc基因在真核细胞中的表达.结果 中国人肠道产甲酸草酸杆菌oxc基因全长1707 bp,与Gene Bank中的序列比较,碱基序列的同源性为93.61%,氨基酸残基序列的同源性为97.18%.重组质粒转染293细胞后24～48 h,可观察到明亮的绿色荧光,从mRNA和蛋白水平上可以检测到oxc基因在真核细胞中的表达.结论 中国人肠道产甲酸草酸杆菌中可以分离出oxc基因;中国人肠道产甲酸草酸杆菌oxc基因存在一定的变异;oxc基因可在真核细胞293细胞中表达.
作者：叶章群；孔德波；陈志强；郭辉；杨为民；姚林方；刘冠琳 刊期： 2008年第03期
目的 观察失血性休克大鼠血管扩张刺激磷蛋白(VASP)磷酸化在肠屏障功能障碍中的作用.方法 采用40只Wister大鼠,观察不同休克时相点(1、2、4 h)VASP磷酸化和肠屏障功能变化(以小肠黏膜组织形态、血浆D-乳酸含量反映),及VASP磷酸化激动剂环磷腺苷(cAMP)对休克2 h肠屏障功能的影响.结果 (1)正常组VASP磷酸化水平很低(0.021 ±0.004),休克1 h时增高(0.145 ±0.011)(P＜0.01),2 h后降低(0.108 ±0.010)(P＜0.01);休克1 h肠屏障功能变化不明显,2 h后肠屏障功能显著降低.(2)VASP磷酸化激动剂cAMP可增强休克2 h小肠上皮组织VASP磷酸化(0.169 ±0.030)(P＜0.01),减轻肠屏障功能损伤.结论 VASP磷酸化可能对失血性休克大鼠肠屏障功能有保护作用.
作者：张晔；徐竞；刘建仓；张连阳 刊期： 2008年第03期
Zhao等[1]提出了心肌缺血后处理(IPo)的概念,即在全面恢复再灌注前反复短暂多次给予再灌、停灌处理对随后长时间再灌注心肌有保护作用.
作者：白育庭；闵清；黄翠萍；李奎；高卉；查文良 刊期： 2008年第03期
目的 制备载碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)甲基丙烯酸缩水甘油酯修饰葡聚糖纳米凝胶微球,观察其对新生血管生成的诱导和促进作用.方法 采用改良乳液聚合法制备载bFGF纳米微球(bFGF-Dex-GMA-NPs),对纳米微球的外形、包封率、体外释药特征进行常规检测,建立兔后肢缺血模型后,分为以下几组(每组6只):安慰剂治疗组(注射磷酸盐缓冲液)(A组);bFGF治疗组(B组);载bFGF纳米微球组(C组),分别于治疗后7、21 d用99mTc标记的sestamibi对后肢血流进行分析,并于21 d将动物处死,取局部肌肉组织切片进行免疫组织化学染色,镜下对毛细血管计数.结果 合成的纳米微球外形圆整,无相互粘连,包封率高达80.9%,并能较好地控制bFGF的释放,持续释放时间超过25 d.后肢缺血模型治疗第7天,B组和C组能量计数分别为(130.95±14.59)、(127.60±11.36),明显高于A组(27.65±6.82)(P＜0.05),但B组和C组间差异无统计学意义(P＞0.05),第21天,C组能量计数增加到(450.69±21.06),明显高于A组(39.89±8.45)和B组(165.34±15.88)(P＜0.05).免疫组织化学染色结果显示C组毛细血管密度是(99.00±5.44)/mm2,明显高于其他两组2.00±0.59(A组)、13.00±1.35(B组)(P＜0.05).结论 载bFGF纳米微球可以控制bFGF长时间释放,对缺血组织新生血管形成有优于单纯bFGF的诱导和促进作用.
作者：邬晓臣；顾春虎；王云雅；吴红；魏旭峰；孙国成；汪静；董小超；易定华 刊期： 2008年第03期
目的 探讨多药耐药(MDR)基因产物多药耐药相关蛋白1/2(MRP1,MRP2)、谷胱甘肽S-转移酶-π(GST-π)、肺耐药相关蛋白(LRP)、DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)在胆囊癌和胆管癌中的表达及其与耐药的关系.方法 采用免疫组织化学方法(IHC)检测18例胆囊癌和36例胆管癌的上述五个指标的表达情况.结果 在胆囊癌MRPl、MRP2、GST-π、LRP、Topo Ⅱ的表达的阳性率分别72.2%、72.2%、77.8%、61.1%、83.3%,在胆管癌中表达的阳性率为86.1%、80.6%、75.0%、69.4%、91.7%,显著高于对照组的23.1%、15.4%、23.1%、15.4%、30.8%(P＜0.05).LRP的表达在胆管癌年龄＞60岁组显著高于＜60岁组(P＜0.05).之外上述指标与性别、年龄、病理分期、病理类型、分化程度、淋巴结转移无关(P＞0.05);MRP1和GST-π、MRP2在胆囊癌和胆管癌的表达具有相关性(P＜0.05).结论 MRP1、MRP2、LRP、GST-π、TopoⅡ在胆囊癌和胆管癌组织中均有不同程度的高表达,胆囊癌和胆管癌的原发性多药耐药由多个因素共同诱导.
作者：刘厚宝；金赘杰；沈振斌；童赛雄；王炳生；纪元；侯英勇 刊期： 2008年第03期
目的 观察髂静脉受压综合症对非血栓性慢性下肢静脉功能不全(CVI)发病的影响.方法 分析2002年1月至2006年3月下肢顺行静脉造影数据库,记录髂静脉受压综合症在非血栓性下肢CVI中的发生率、静脉造影特征及其主要的治疗方式.结果 1594例CVI下肢顺行静脉造影中136例诊断为髂静脉受压综合症,占左下肢非血栓性CVI的17%(136/817).下肢顺行静脉造影诊断髂静脉受压综合症的特异性较高.39例髂静脉受压综合症患者经髂静脉血管成形、支架植入术,并同时行浅静脉手术取得了较好的临床效果.结论 髂静脉受压综合症是导致左下肢CVI的重要原因之一,在治疗左下肢CVI时,应重视左髂静脉压迫的处理.
作者：陆信武；李维敏；黄英；陆民；黄新天；刘晓兵；殷敏毅；蒋米尔 刊期： 2008年第03期
我们采用人大隐静脉组织块法原代联合培养人血管内皮细胞、成纤维细胞和平滑肌细胞,对其培养、扩增条件加以摸索,对细胞进行鉴定,获得TEHVs所需的种子细胞.
作者：杨岷後；成少飞；陈长志；朱亚彬；王学宁 刊期： 2008年第03期
为探讨启动子高甲基化与纯合性缺失对死亡相关蛋白激酶(DAPK)表达的影响及其与膀胱移行细胞癌(TCCB)分期分级的关系,我们对45例TCCB患者外周血循环DNA进行DAPK甲基化程度及纯合性缺失情况分析.
作者：许凯；张旭；张军；傅斌；郎斌；吴振启；艾星；史涛坪 刊期： 2008年第03期
我们利用RNAi技术达到了特异抑制胰腺癌突变K-rasAsn12的目的,现报道如下.一、材料和方法1.材料:AsPC-1和BxPC-3细胞株购自中科院上海细胞库.pSilenCircle试剂盒购自Allele公司.
作者：孟繁杰；曹斌；蔡建辉 刊期： 2008年第03期
结直肠癌(CRC)是人类常见恶性肿瘤,大部分患者在确诊时已处于进展期或已有转移,严重威胁着人们的身心健康.
作者：盛新华；范乃军；高春芳 刊期： 2008年第03期
目的 观察半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒联合交变磁场对肝癌细胞和人肝细胞的影响.方法 将人肝癌细胞HepG2及人肝细胞L-02细胞,随机分成A1、A2组(即RPMI 1640对照组),B1、B2组(游离阿霉素),C1、C2组(半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒),D1、D2组(阿霉素纳米粒),E1、E2组(半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒),实验组每组含有0.5 mg/L或等量的阿霉素;除C1、C2组外,其他各组置交变磁场(频率为100 kHz、磁场强度为15 kA/m)中,作用30 min.通过细胞计数、Hoechst荧光染色、DNA蛋白电泳、流式细胞仪检测,观察细胞生长曲线、细胞形态、细胞凋亡及细胞周期的变化.结果 (1)E1、E2组,HepG2和L-02细胞增殖抑制作用强,DNA梯形带明显,细胞凋亡率分别达40.12%、45.3%;S期细胞分别为39.53%、53.46%,明显高于其他组(P＜0.01);(2)L-02细胞的形态改变、细胞增殖抑制、细胞凋亡率明显强于HepG2细胞(P＜0.05).结论 半乳糖白蛋白磁性阿霉素纳米粒在交变磁场介导下,对HepG2和L-02细胞产生热化疗协同增效的作用.
作者：贺连香；张阳德；何剪太 刊期： 2008年第03期
本研究旨在探讨GCS在HCC组织中的表达及与多药耐药的关系[1].一、材料与方法1.一般资料:收集2005年1月至2006年3月我院手术切除的HCC组织标本49例.
作者：熊茂明；陆震；李贺；孟翔凌；耿小平 刊期： 2008年第03期
我们通过观察Trx对兔ASCI后脊髓组织中细胞凋亡及AS活性的影响,探讨其对脊髓损伤的保护作用[1].
作者：魏福堂；夏春林；孟斌；张志明 刊期： 2008年第03期
目的 构建galeetin-9基因不同亚型的真核表达载体,观察galectin-9对结肠癌LoVo细胞体外黏附侵袭能力的影响.方法 构建galectin-9基因不同亚型的真核表达载体后,用脂质体法转染结肠癌LoVo细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法验证转染效果.LoVo细胞分别在转染galectin-9、转染galectin-9+抗体(5 mg/L)和转染galectin-9+β-L糖(30 mmol/L)条件下进行体外细胞-基质黏附实验和体外细胞侵袭实验.结果 测序结果证实载体上插入的galectin-9三种剪接体碱基序列正确,同时载体成功转染LoVo细胞.体外细胞-基质黏附实验中,转染空载体,转染galectin-9L,galectin-9M和galectin-9S组平均吸光度分别为:0.74±0.04、1.14±0.12、1.12±0.10和1.15±0.13,表明galectin-9促进LoVo细胞黏附于细胞外基质(P＜0.05).galectin-9抗体和β-乳糖可抑制该作用,但转染galectin-9L和galectin-9S LoVo细胞的黏附作用受β-乳糖抑制更明显(P＜0.05).体外侵袭实验未发现galectin-9对LoVo细胞侵袭力有影响.结论 galectin-9促进LoVo细胞与细胞外基质的黏附,这可能与结肠癌侵袭转移相关,但其三种亚型发挥作用的机制不全相同.
作者：张丰；郑民华；彭远飞；陆爱国；李健文；王明亮 刊期： 2008年第03期
目的 观察表皮生长因子(EGF)61*G/A、转化生长因子-β1(TGF-β1)-509*T/C、血管内皮生长因子(VEGF)936*T/C基因功能多态性对术后结肠吻合口瘘的影响.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测伴有和不伴有术后结肠吻合口瘘结直肠癌患者的EGF 61*G/A,TGF-β1-509*T/C,VEGF 936*T/C基因型.结果 伴有术后结肠吻合口瘘的结直肠癌患者TGF-β1-509*T/T基因型比例(0.0%)低于无术后吻合口瘘的患者(13.2%),两者差异有统计学意义(P＜0.05).伴有术后结肠吻合口瘘的VEGF 936*C/C基因型和C等位基因比例(63.9%和80.6%)低于无术后吻合口瘘的患者(82.6%和90.5%),两者差异有统计学意义(基因型χ2=5.753,P＜0.05;等位基χ2=5.275,P＜0.05).伴有术后结肠吻合口瘘的结直肠癌患者EGF 61*G/G基因型比例(25.0%)低于无术后吻合口瘘的患者(35.5%),但两者差异无统计学意义(χ2=1.391,P＞0.05).结论 TGF-β1-509*T/T基因型,VEGF 936*C/C基因型或936*C等位基因有助于减少术后结肠吻合口瘘的发生.
作者：吴国洋；王效民；Michael Keese；Till Hasenberg；J(o)rg W.Sturm 刊期： 2008年第03期
中华实验外科杂志
主管:中国科学技术协会
主办：中华医学会
