朱东明;李德春;张子祥;张克君;潘新亭
目的 探讨大鼠脊髓锥体束损伤后多唾液酸神经细胞黏附分子(PSA-NCAM)的表达及意义.方法 Wistar大鼠60只,实验组(30只)毁损胸髓T10左侧锥体束,对照组(30只)未损伤脊髓.应用免疫组织化学和Western blot检测5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)、PSA-NCAM的表达.结果 免疫组织化学染色:BrdU阳性细胞数,对照组(23.4±6.3),实验组在伤后第3天(93.1±7.6),第7天(65.1±8.6),组间差异有统计学意义(P<0.05);PSA-NCAM阳性细胞数,对照组(2.5±1.5),实验组在伤后第3天(82.1±11.4),第7天(31.1±5.2),组间差异有统计学意义(P<0.05);Western blot:蛋白表达组间差异有统计学意义(P<0.01).结论 锥体束损伤可激活自体室管膜细胞的增殖及迁移,后者具有一定的可塑性,参与脊髓的结构修复.
作者:王玉峰;王岩峰;祝勇 刊期: 2007年第09期
目的 观察大剂量甲波尼松龙对脊髓空洞前状态蛋白激酶C(PKC)活性变化的影响.方法 用新西兰兔96只制作模型,随机分为Kaolin组、MP干预组,其中后者用大剂量甲波尼松龙(30 mg/kg体重)干预.术后1、3、7、14、21 d用光镜、干湿重法和底物磷酸化法观察两组动物上颈髓病理学演变、脊髓含水量以及胞膜、胞质PKC活性.结果 与Kaolin组比较,MP干预组动物上颈髓水肿程度减轻,高峰延迟,脊髓含水量显著降低,以3 d的含水量(68.66±0.37)%和Tarlov评分(5.00±0.00)改善为明显,同时胞膜和胞质PKC活性明显下降,以7 d[(5.76±0.45)/(3.41±0.54)pmol·mg-1·min-1]和14 d[(6.21±0.40)/(3.77±0.31)pmol·mg-1·min-1]为显著,下降达50%.结论 大剂量甲波尼松龙通过抑制脊髓空洞前状态PKC移位激活、降低PKC活性发挥对空洞前状态脊髓缺血、水肿的保护作用.
作者:孙国柱;张庆俊;赵宗茂;张更申;靳洪波 刊期: 2007年第09期
新型人工心脏瓣膜的研制及改进,动物体内植入是临床前评估不可少的重要环节[1,2],家猪的解剖及凝血特性与人相近,但体重增长过快为其不足,容易造成人工瓣膜失功及瓣周漏而影响其用于体内植入的远期评估[3].为了新型人工机械瓣膜体内植入远期评估研究的需要,本研究旨在建立小型猪人工二尖瓣植入远期存活模型.
作者:李德闽;张利东;申翼;王常田;任斌辉;牛冬梅;景华;黄楠 刊期: 2007年第09期
目的 观察应用新型输送系统经胸微创封堵膜周部室间隔缺损(VSD)效果.方法 11例膜周VSD患儿,年龄11月~12岁(中位年龄3.2岁),体重(15.8±6.4)kg,接受经胸微创非体外循环室间隔缺损封堵术.根据经食道超声心动图(TEE)选择合适的封堵器类型,然后自胸骨下端3~5 cm小切口入胸,TEE引导和实时监测下穿刺右心室前壁,建立轨道,释放封堵器关闭VSD.TEE评估封堵器的位置、对主动脉瓣、房室瓣的影响以及有无残存分流.结果 11例患儿均1次封堵成功,超声引导下释放封堵器的时间为5~12 min,无残余分流和主动脉瓣反流,心电监测无明显心律失常.术后3~5 d出院,随访5个月以上无残余分流、主动脉瓣反流以及周围组织卡压.结论 应用新型输送系统经胸微创非体外循环下置入室间隔缺损封堵器是一种安全、有效的治疗方法,有较大临床推广价值.
作者:邢泉生;庄忠云;泮思林;段书华;荣佑宝;李生德;侯可峰;武钦 刊期: 2007年第09期
目的 检测Caspase家族中Caspase-3在膀胱移形细胞癌(BTCC)组织及正常膀胱组织中的表达,探讨Caspase-3的表达在膀胱癌发生发展中的意义.方法 采用免疫组织化学和实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-QPCR)方法对30例膀胱癌和15例正常膀胱组织中Caspase-3的表达进行检测.结果 免疫染色标本中,在正常膀胱组织和膀胱癌中Caspase-3的阳性表达率分别为80%和30%,两者差异有统计学意义(P<0.05).Caspase-3在膀胱癌组织中的△△CT值是正常膀胱组织的1.9274(1.1248~2.5413)倍,但病理分级之间和临床分期之间均差异无统计学意义.结论 Caspase-3表达下调导致细胞凋亡减少,可能在膀胱癌的发生发展过程中起重要作用.
作者:张学能;李叶红;王艳波;朱朝辉;刑诗安;邬喻 刊期: 2007年第09期
目的 观察坐骨神经切断后大鼠脊髓中p27kip1和Skp2的表达变化.方法 将成年SD大鼠随机分为正常对照组和实验组.对实验组实行坐骨神经切断术.用Western blot和免疫组织化学技术检测脊髓中p27kip1和Skp2的表达变化.结果 Western blot结果表明坐骨神经切断后脊髓中p27kip1表达持续下降,Skp2表达上凋.免疫组织化学结合免疫荧光双标技术显示,在正常组和实验组,p27kip1和Skp2在脊髓神经元和胶质细胞均有表达.在腹角神经元,损伤后p27kip1免疫染色减弱,Skp2增强.坐骨神经损伤前后脊髓腹角p27kip1和Skp2阳性细胞数目改变呈负相关(r=-0.6892,P<0.01).结论 坐骨神经损伤可影响脊髓中p27kip1和Skp2的表达水平及亚细胞定位,两者改变呈负相关.
作者:赵剑;史淑贤;程纯;陈梦玲;秦婧;高尚锋;沈爱国 刊期: 2007年第09期
目的 探讨载基因仿生基质材料能否调控骨髓基质干细胞(BMSCs)向成骨细胞定向分化.方法 将非病毒载体K16GRGDSPC共价接枝于新型骨基质材料聚丙交酯/乙交酯/天冬氨酸/聚乙二醇(PLGA-[ASP-PEG])构建非病毒基因转染体系.该体系与转化生长因子(TGF)-β1基因复合制备成载基因仿生基质材料pcDNA3-TGF-β1/K16GRGDSPC/PLGA-[ASP-PEG],并将兔BMSCs与其复合培养,以pcDNA3/K16GRGDSPC/PLGA-[ASP-PEG]作为对照.通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot和酶联免疫吸附测定(ELISA)检测TGF-β1基因的表达;应用碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测BMSCs的ALP活性,并通过RT-PCR检测细胞ALP、骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)和Ⅰ型胶原的表达,通过免疫荧光染色检测核心结合因子a1(Cbfa1)表达,观察BMSCs向成骨细胞方向分化的情况.结果 XPS图谱证实K16GRGDSPC被成功地接枝到PLGA-[ASP-PEG]表面.载基因仿生基质材料复合BMSCs培养结果表明,TGF-β1基因被成功地导入细胞内并表达,而且其成骨标志物(ALP、OCN、OPN、Ⅰ型胶原和Cfba1)的表达均显著高于对照组(P<0.05).结论 这种载基因基质材料既可以作为骨组织工程支架材料,又可介导外源TGF-β1基因转染BMSCs并定向调控BMSCs成骨分化.
作者:潘海涛;郑启新;郭晓东;宋玉林;袁泉 刊期: 2007年第09期
严重的半月板损伤需要进行半月板的移植,防止膝关节的退行性变.我们以猪小肠黏膜下层(SIS)作为支架材料,通过观察兔半月板纤维软骨细胞在此载体中的生长、增殖情况,评价SIS的生物相容性,为应用SIS作为支架材料构建组织工程半月板提供实验依据.
作者:王洪;赵玉鑫;杨述华;袁文旗;李艳军;朱长谋 刊期: 2007年第09期
有研究表明,神经干细胞(NSCs)移植可有助于脊髓功能的恢复[1].本实验旨在观察脊髓源性神经干细胞移植后对缺氧诱导因子(HIF)-1α和Caspase-3在脊髓损伤后表达和神经细胞凋亡的影响.
作者:訾英;卢志远;李哲;王虹;徐斌;刘军 刊期: 2007年第09期
目的 探讨P-gP、GST-π、Topo Ⅱ在脑胶质瘤中表达的相互关系以及其临床意义.方法 采用免疫组织化学技术链霉卵白素-过氧化物酶连结法(SP法)检测101例原发性脑胶质瘤组织中P-gP、GST-π和Topo Ⅱ在不同病理分级间(WHO Ⅰ级24例;Ⅱ级34例;Ⅲ级28例;Ⅳ级15例)的表达水平,评估三者间关系和临床意义.结果 P-gP、GST-π和Topo Ⅱ阳性表达率分别为62.4%、64.3%、59.4%.P-gP及GST-π表达水平在高级别(Ⅲ-Ⅳ级)胶质瘤显著高于低级别(Ⅰ~Ⅱ级)(P<0.05);Topo Ⅱ表达水平在高级别胶质瘤则显著低于低级别(P<0.05).各多药耐药因子共表达的比率分别为:P-gp+GST-π:44.6%,P-gp+Topo Ⅱ:19.8%,GST-π+Topo Ⅱ:17.8%;P-gp+Topo Ⅱ+GST-π:4.95%,两个或以上MDR基因产物共表达率为87.2%,显著高于单一基因产物表达率:P-gp(5.9%),GST-π(0.9%)及Topo Ⅱ(1.9%)(P<0.05).Topo Ⅱ阳性表达与P-gp、GST-π阳性表达呈显著负相关(P<0.01).P-gp阳性表达与GST-π阳性表达呈显著正相关(P<0.01).结论 原发性脑胶质瘤的多药耐药现象是由多个耐药因子共同参与作用的结果,多药耐药的发生在肿瘤细胞的病理分级间差异有统计学意义;同时检测三种耐药因子有助于优化临床化疗方案,提高化疗效果.
作者:梅文忠;何理盛;陈锦峰 刊期: 2007年第09期
目的 检测单核苷酸多态性(SNP)位点Arg399Gln在散发性结直肠癌患者和非癌对照组中的分布情况,分析其与散发性结直肠癌及其临床病理特征的相关性.方法 从178例肿瘤组织和非癌对照组的180例血样中提取DNA,采用Taqman探针技术检测Arg399Gln多态性表型,并用统计软件计算各基因型的比值比(OR)和95%可信区间(95%CI).结果 肿瘤组与对照组就XRCC1 Arg399Gln多态性的基因表型差异有统计学意义(P<0.05);年龄不超过60岁的患者和超过60岁的患者在该位点的基因型差异有统计学意义(P<0.05);以399Arg/Arg基因型为参照,在年龄超过50岁的人群中(OR=0.64,95%CI 0.50~0.83,P<0.05)和男性人群中(OR=0.64,95%CI 0.51~0.79,P<0.05)携带至少一个Gln等位基因可致罹患散发性结直肠癌的风险显著降低;XRCC1 399SNP与患者性别及散发性结直肠癌的发生部位、Dukes分期、浸润深度、淋巴结转移以及病理分型均无显著相关性(P均>0.05).结论 XRCC1 399SNP可能通过改变DNA的损伤修复功能,成为散发性结直肠癌的易感因素.
作者:任卓;樊军卫;周崇治;裘国强;贺林;彭志海 刊期: 2007年第09期
目的 观察通过电刺激迷走神经研究胆碱能抗炎通路对感染性休克大鼠急性肺损伤的保护作用.方法 成年雄性SD大鼠40只,随机分为4组:假CLP组(SHAM)、CLP组(CLP)、迷走神经切断组(VGX)、迷走神经电刺激组(STM),每组10只,均采用盲肠结扎穿孔法(CLP)复制感染性休克模型,VGX组CLP后行双侧颈部迷走神经离断术,STM组在CLP基础上将左迷走神经远端连接刺激电极,于CLP术毕即刻予以持续电刺激(5 V、2 ms和1 Hz)20 min.动物均连续监测平均动脉压(MAP),分别在各组模型制备完毕或电刺激后0、1、2和4 h检测血浆肿瘤坏死因子(TNF)-α含量、4 h抽动脉血行血气分析计算呼吸指数和取肺组织观察肺组织病理学变化.结果 CLP组和VGX组MAP进行性下降,STM组血压各时间点均显著高于CLP组相应值.STM组血浆TNFα含量显著低于CLP组和VGX组.4 h CLP组和VGX组pH值、PaO2、PaCO2和PaO2/FiO2显著下降(P<0.01),明显低于假CLP组和STM组(P<0.05).光镜下CLP组和VGX组肺组织损害明显重于STM组和SHAM组.结论 电刺激迷走神经通过胆碱能抗炎通路能逆转CLP致感染性休克大鼠血压下降,降低血清TNFα水平,减轻急性肺损伤所致低氧血症和肺水肿,减轻肺组织病理损害,对肺脏有保护作用.
作者:杜朝晖;王焱林;李建国 刊期: 2007年第09期
目的 观察肾钙敏感受体(CaSR)在特发性高钙尿症(IH)发病中的作用.方法 雄性遗传性高钙尿结石(GHS)大鼠和正常野生型SD大鼠各6只,相同的饮食和饲养条件下,检测各组大鼠血Ca2+、P5+、1,25(OH)2D3和连续2个24h尿Ca2+的水平,使用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测肾组织钙敏感受体mRNA表达,PCR产物纯化后进行DNA直接测序.结果 两组大鼠血Ca2+、P5+、1,25-(OH)2D3水平相似,均在正常范围内,而GHS组平均24 h尿Ca2+排泄量为正常对照(NC)组的3.36倍[分别为(2.66±0.64)、(0.79±0.06)mg/d],两组比较差异有统计学意义(t=5.82,P<0.01);GHS组CaSR mRNA平均相对吸光度(A)值为1.354±0.108,NC组为0.602±0.218,差异有统计学意义(t=6.19,P<0.01);CaSR基因第7外显子区域cDNA测序结果与Genebank(Accession:NM-016996)公布的碱基序列比较,GHS组有4只大鼠存在第3072位碱基G/A替换,使第1024位谷氨酸(Glu)变为赖氨酸(Lys),其余2只和NC组均与Genebank公布的碱基序列一致.结论 肾组织CaSR mRNA高表达及其第7外显子Glu1024Lys替换可能是特发性高钙尿症发病的分子机制之一.
作者:王少刚;席启林;叶章群;胡东亮;白剑;陈志强;杨为民;刘继红 刊期: 2007年第09期
目的 探讨分级阻断大鼠胰组织肾素-血管紧张素系统对急性胰腺炎的影响及其机制.方法 用雨蛙肽诱导大鼠急性胰腺炎模型,观察卡托普利、沙拉新及洛沙坦对大鼠胰湿重比、病理学评分、血浆AMY、MPO、MDA、NO、SOD、TNF-α及Ang-Ⅱ,胰组织MPO、MDA、NO、SOD、TNF-α及Ang-Ⅱ,免疫组织化学ABC法染色胰组织AT1、AT2的影响.结果 单用卡托普利、沙拉新、洛沙坦能降低急性胰腺炎血浆AMY、MPO、MDA、NO、TNF-α及Ang-Ⅱ,水平,升高SOD水平;降低胰组织MPO、MDA、NO、TNF-α、Ang-Ⅱ及AT1、AT2水平,升高SOD水平;但联合给药并没有进一步改善急性胰腺炎的所有指标.结论 ACE抑制剂、非选择性Ang-Ⅱ受体拮抗剂及特异性AT1阻断剂能改善急性胰腺炎时胰组织损伤程度,但联合应用无协同效果,其可能机制是阻断RAS对胰组织的胰酶过度释放、微循环障碍、氧自由基损伤、炎症介质瀑布样效应有关.
作者:胡占良;张新宇;姜明山;韩德恩 刊期: 2007年第09期
急性脊髓损伤(ASCI)后,神经细胞死亡的方式不仅仅是坏死,同时细胞凋亡广泛存在[1,2].本研究旨在探讨Fas、Caspase-3基因与细胞凋亡的关系及在脊髓损伤发生发展中的作用.
作者:高万旭;程爱国;王相利 刊期: 2007年第09期
目的 利用人细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4免疫球蛋白的重组腺相关病毒(rAAV-hCTLA4Ig)局部基因转染供肝诱导大鼠同种肝移植免疫耐受.方法 供体为DA大鼠,受体为LEW大鼠,分为以下4组:(A)同基因对照组(LEW-LEW);(B)生理盐水对照组;(C)rAAV-EGFP(增强型绿色荧光蛋白)对照组;(D)rAAV-hCTLA4Ig灌注组.大鼠原位肝移植前6周,经门静脉灌注采用血管夹闭法对供肝进行基因转染.结果 D组大鼠平均生存期显著高于C组(10.8±1.0)d及B组(11.6±1.1)d,B组与D组间,C组与D组间,生存期差异有统计学意义(P<0.01).D组血浆及移植肝中可以持续检测到hCTLA4Ig的表达.术后1周移植肝病理检查显示B组、C组均有严重免疫排斥反应,免疫组织化学显示大量CD4+、CD8+T淋巴细胞浸润;而D组仅有轻、中度炎症反应,少量CD4+、CD8+T淋巴细胞浸润.结论 移植术前6周对供肝体内经门静脉灌注采用血管夹闭技术基因转染rAAV-hCTLA4Ig可以诱导大鼠同种肝移植免疫耐受.
作者:苏志雷;韩德恩;姜明山;邰升 刊期: 2007年第09期
目的 研究细胞因子对肾癌细胞特异性抗原G250表达的影响.方法 单独或联合应用不同浓度的白细胞介素(IL)-2、干扰素(IFN)-α、IFN-γ刺激肾癌786-0细胞系,刺激24、48、96 h后,运用免疫组织化学、Western blot和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测G250抗原在肾癌786-0细胞上的表达.结果 IL-2、IFN-α、IFN-均能上调786-0细胞G250抗原表达,以IFN-γ作用强,上调作用具有浓度及时间依赖性.细胞因子联用能明显增强G250抗原表达的上调作用.结论 IL-2、IFN-α、IFN-γ能上调肾癌786-0细胞G250抗原表达,联合应用效果更大.提示细胞因子联合以G250抗原为靶点的免疫治疗有望成为晚期肾癌新的治疗途径.
作者:温儒民;郑骏年;武艺;刘俊杰;毛立军;薛松;李望;王军起;孔德领 刊期: 2007年第09期
我们通过检测良恶性胆道疾病患者胆汁中糖蛋白糖链结构的差异和胆道恶性肿瘤组织中糖基转移酶活力的改变,探讨这些变化在良恶性胆道病变中的鉴别诊断价值.
作者:刘厚宝;王炳生;陈惠黎;童赛雄;赵家宏 刊期: 2007年第09期
肺缺血再灌注(I/R)损伤是肺移植早期和心脏转流术后肺功能障碍的重要原因,临床上主要表现为肺水肿和急性呼吸衰竭[1].我们过建立兔肺缺血再灌注损伤模型,观察盐酸戊乙奎醚(长托宁)抗肺I/R损伤作用,并探讨其机制.
作者:仲崇俊;张亚年;夏春秋 刊期: 2007年第09期
目的 检测Id1 mRNA在人前列腺癌(PCa)组织中的表达,探讨Id1 mRNA的表达与临床意义.方法 用SYBR Green Ⅰ嵌合荧光法进行实时逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),检测Id1mRNA在人正常前列腺、前列腺良性增生(BPH)和PCa组织中的相对定量,分析Id1 mRNA的相对含量与PCa临床病理参数间关系.结果 Id1 mRNA在PCa组织中的含量明显高于BPH组织(P<0.01).Id1 mRNA表达量与PCa的Gleason评分有明显相关性(r=0.9995,P<0.05).Id1 mRNA表达量高者,2年内发生浸润和转移的机率提高.结论 PCa组织中Id1 mRNA表达明显增高,与肿瘤分化程度成负相关,Id1 mRNA的高表达从转录水平反映了其与前列腺癌病情进展的关系;Id1 mRNA的实时定量检测有助于从转录水平对前列腺癌进行早期诊断并初步指导预后.
作者:周荣祥;韩保健;于小玲;徐晓慧;尚芳芳 刊期: 2007年第09期