欧洁；吴红艳
目的 研究miR-145调节人肝内胆管细胞癌(ICC)细胞增殖的机制.方法 收集标本ICC癌组织和癌旁胆管组织,共38对;2种ICC细胞系:HuCCT-1和RBE;对其进行miR-145及NUAK1的表达调控.通过RT-qPCR检测miR-145和新式激酶家族1(NUAK1)的表达及两者相关性;检测细胞周期观察细胞增殖变化;荧光素酶报告基因实验确认miR-145的靶基因;Western blot观察AKT通路蛋白水平变化.结果 miR-145在癌组织的表达明显低于癌旁组织(P<0.05),NUAK1在癌组织的表达明显高于癌旁组织(P<0.05),两者具有相关性(P<0.05).miR-145过表达组和NUAK1干扰组细胞计数均明显少于对照组(P<0.05);HuCCT-1细胞系转染miR-145 mimics后,G1期的细胞数明显增加(P<0.05);野生型的荧光信号明显被抑制(P<0.05);过表达miR-145或抑制NUAK1后,pAKT和pFOXO1表达明显下降(P<0.05).结论 miR-145可能通过抑制NUAK1及其下游通路抑制ICC细胞增殖,它有可能为ICC临床诊治提供新的靶点和思路.
作者：熊新魁；杜也牧；刘雨亭；顾殿华 刊期： 2019年第01期
目的 探讨线粒体钙单向转运体调节分子1(MCUR1)在多发性骨髓瘤(MM)患者中的表达变化,观察其对MM细胞周期、凋亡的作用,初步分析其内在分子机制.方法 设瞬时转染MCUR1干涉片段1和2的人MM细胞系RPMI 8226细胞作为实验组(命名为siMCUR1-1和siMCUR1-2细胞),阴性干涉片段转染的RPMI 8226细胞(命名为siCtrl细胞)作为对照组;实时定量PCR测定MCUR1在MM患者及正常对照者骨髓单个核细胞中的表达水平;实时定量PCR和Western blot检测MCUR1沉默效果;用CCK-8法和流式细胞计量术分别测定沉默MCUR1后细胞增殖、细胞周期和凋亡,Western blot检测MCUR1沉默后p53及其下游分子表达变化.结果 与对照者相比,MCUR1在MM患者中的表达显著升高(P<0.05);MM细胞系RPMI 8226中干扰MCUR1后,与对照组相比,细胞增殖显著减慢(P<0.05),G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少,细胞凋亡比例增加;与对照组相比,干扰MCUR1组细胞内p53、BAX蛋白表达增加,BCL2、cyclin D1和cyclin E蛋白表达减少.结论 MCUR1在MM患者中表达上调,MCUR1通过抑制p53通路进而促进MM细胞增殖.
作者：牟佼；戴进前；雷小茹；宋艳萍；徐莉 刊期： 2019年第01期
目的 探讨脱氢表雄酮(DHEA)抗动脉粥样硬化(AS)的作用及其机制.方法 将人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分为对照组、ox-LDL组(30 mg/L ox-LDL)、DHEA(低或高浓度)干预组(30 mg/L ox-LDL+0.1或1μmol/L DHEA)、DHEA+全反式维甲酸(ATRA)干预组(30 mg/L ox-LDL+1μmol/L DHEA+0.01μmol/L ATRA)及DHEA组(1μmol/L).用real-time PCR和ELISA检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA及蛋白的表达.通过脂质体介导的方法将pcDNA3.1-CYP19-GFP真核表达质粒(细胞色素P450芳香酶基因)及pcDNA3.1-GFP空质粒分别转染至HUVEC,给予ox-LDL诱导及DHEA干预,用real-time PCR和ELISA检测转染细胞MMP-9 mRNA及蛋白的表达.将兔分为对照组、高脂组(口服1％胆固醇和3％猪油)、DHEA干预组(口服0.27％DHEA)、DHEA+ATRA干预组[口服0.6 mg/(kg·d)ATRA]及单DHEA组.用real-time PCR和免疫组织化学法检测兔主动脉MMP-9 mRNA及蛋白的表达.结果 ox-LDL组HUVEC MMP-9的表达较对照组明显升高(P<0.05);DHEA干预组呈浓度依赖性使MMP-9的表达明显回降(P<0.05).高脂组兔主动脉MMP-9的表达较对照组明显升高(P<0.05);DHEA干预组能明显缓解高脂组的变化(P<0.05).CYP19+ox-LDL+DHEA组较空质粒+ox-LDL+DHEA组MMP-9的表达显著降低(P<0.05).结论 DHEA能抑制高脂诱导的兔主动脉及HUVEC MMP-9的表达,过表达细胞色素P450芳香酶基因(CYP19)能增强此作用.
作者：周颖；赵敏；肖芳；李桃；李晓超 刊期： 2019年第01期
目的 探讨miR-24对人结肠癌SW620细胞CARMA3(含半胱天冬酶募集结构域的膜相关乌苷酸激酶蛋白3)的靶向调控作用及对细胞增殖的影响.方法 培养SW620细胞,用生物信息学预测miR-24和CARMA3的靶向匹配关系,并用双荧光素酶报告基因系统鉴定.Lipo3000转染miR-24模拟物后,real-time PCR检测miR-24和CARMA3 mRNA表达;Western blot检测CARMA3蛋白表达;CCK8法检测SW620细胞增殖.结果 miR-24和CAR-MA3匹配良好,miR-24能够结合CARMA3 mRNA 3'UTR,并有效抑制其表达(P<0.05).miR-24能够负向调控CARMA3表达和SW620细胞增殖(P<0.05).结论 miR-24通过靶向作用于CARMA3 mRNA 3'UTR能够负向调控CARMA3基因的表达及负向调控SW620细胞的增殖.
作者：王小英；姚宗江；李亚男；马晓峰；秦静 刊期： 2019年第01期
前列腺素E2(PGE2)是花生四烯酸的环氧合酶-2代谢产物,在不同组织中具有多种生物功效;而这些功能主要由4种特异的膜G蛋白偶联前列腺素E受体( EP1、EP2、EP3 和EP4)调控发挥作用[1]. PGE2具有抑制肺巨噬细胞释放炎性因子的作用[2] ,但究竟通过哪个EP 受体信号通路调控尚不清楚.
作者：姚懿雯；李冬 刊期： 2019年第01期
目的 β1-肾上腺素受体自身抗体(β1-AA)诱导的心肌细胞自噬降低是否参与内质网应激(ERS)相关凋亡途径的激活.方法 β1-肾上腺素受体细胞外第二环(β1-AR-ECII)抗原肽段主动免疫大鼠;亲和层析法纯化血清中的β1-AA;SDS-PAGE检测抗体纯度;Western blot检测自噬相关蛋白Beclin1、LC3和p62的表达;Western blot及免疫组化法检测内质网应激(ERS)诱导的细胞凋亡途径相关蛋白GRP78、CHOP和caspase-12的表达.结果 与对照组相比,β1-AA处理H9c2心肌细胞12和24 h后,Beclin1和LC3蛋白表达明显降低,p62蛋白表达明显增加;β1-AA作用12和24 h后,GRP78、CHOP和caspase-12蛋白表达均显著增加;3MA抑制心肌细胞自噬后β1-AA诱导的ERS相关凋亡途径进一步激活;Rapa上调心肌细胞自噬水平后可明显逆转β1-AA诱导的ERS相关凋亡途径的激活.结论 1)β1-AA可以引起心肌细胞自噬降低,并诱导ERS相关凋亡途径激活;2)自噬降低参与β1-AA诱导的心肌细胞ERS相关凋亡途径的激活.
作者：宁娜；侯晓鸿；李杨；何金玲；燕子；王晓晖；王丽 刊期： 2019年第01期
目的 观察链脲佐菌素(STZ)诱导的1型与2型糖尿病大鼠周围神经病变的区别.方法 SD大鼠分组,每组各10只,腹腔注射STZ建立1型糖尿病(T1DM)模型;高脂高糖饲养6周后按体质量35 mg/kg单次腹腔注射STZ建立2型糖尿病(T2DM)模型;设立正常对照(Con)组.检测不同时间点大鼠的体质量、血糖水平.成模8周后,电子Von Frey仪检测机械痛阈值,热水甩尾试验检测甩尾潜伏期,并取坐骨神经进行病理形态学检查.结果 成模后第1、8周,与对照组及T2DM组相比,T1DM组大鼠的体质量显著下降(P<0.01);T1DM组与T2DM组的血糖均显著高于对照组(P<0.01);DM组的甩尾潜伏期均较对照组延长(P<0.01),T2DM组较T1DM组延长更显著(P<0.05).DM组的机械痛阈值均较对照组显著降低(P<0.01),T2DM组较T1DM组降低更明显(P<0.01);DM组大鼠的坐骨神经有髓神经纤维排列紊乱,轴索肿胀或皱缩,髓鞘密度不均匀,空泡变性,部分神经纤维髓鞘脱失;T2DM组的神经损害程度较T1DM严重.结论 STZ诱导的2型糖尿病大鼠的周围神经病变程度严重于1型糖尿病大鼠.
作者：杨丹；崔雅忠；张倩；王超；张改丽；梁晓春；吴群励 刊期： 2019年第01期
目的 探讨十溴联苯醚(BDE-209)和双酚A(BPA)暴露对人胚胎干细胞系FY-hES-10体外早期神经分化中印记基因表达的影响.方法 利用添加小分子抑制剂的方法将FY-hES-10细胞系进行神经贴壁诱导,并在培养基中添加低剂量的BDE-209或/和BPA,每24 h换液1次,连续暴露11 d.收集诱导分化第11天的细胞检测nestin阳性率以及印记基因SNRPN、KCNK9、UBE3A和PEG10的表达水平.结果 BDE-209、BPA单独或联合暴露组nestin的阳性率明显低于对照组(P<0.05).印记基因SNRPN、KCNK9、UBE3A在BDE-209、BPA单独或联合暴露组表达均明显低于对照组,PEG10在BDE-2091 nmol/L和BDE-2091 nmol/L+BPA 1 nmol/L组表达明显低于对照组,而在BPA 1 nmol/L组中表达与对照组无明显区别.结论 低剂量BDE-209/BPA单独或联合暴露均有可能通过影响胚胎干细胞早期神经分化中印记基因表达从而产生神经发育毒性,BDE-209和BPA联合暴露可能加重神经发育毒性.
作者：杜丽丽；李晓梅；李秀英；唐境蔓；陈兢思；陈敦金 刊期： 2019年第01期
医学院校的民语生由于其普通话基础较差,在理论知识的学习过程中理解能力欠佳.尤其是学习《人体组织学》等形态学科时,民语生表示医学专业词汇会明显影响学习效率.笔者以问卷调查的方式收集整理新疆某高校临床医学专业学生反馈的《人体组织学》学习情况.经过分析与整理发现,教师在教学过程中,应该注意民语生的学习需求,可以利用字-图对应的方法,进一步详细讲解生僻专业词汇,以帮助民语生更好地理解和掌握医学知识.
作者：孟晓彤；赵雨欣；陈邬锦；木萨·艾麦尔；秦纹；白生宾 刊期： 2019年第01期
目的 探讨翻转课堂式教学方法在病理实验课教学中应用效果.方法 在病理实验教学中,选取第四军医大学2014级学生为对照组(60名),用传统式教学方法;另选取2015级学生为实验组(60名),用翻转课堂式教学方法.通过病理实验课作业成绩、实验课考核成绩及问卷调查了解翻转课堂式教学方法的教学效果.结果 实验组学生实验课作业成绩和实验课考核成绩明显优于对照组(P<0.05),实验组学生对翻转课堂式教学方法认可度高于对照组(P<0.05).结论 病理实验课翻转课堂式教学方法激发了学生学习兴趣,调动学生学习的积极性和主动性,提高病理实验课教学质量.
作者：王艳霞；李静；刘理礼 刊期： 2019年第01期
目的 探讨腺苷2a受体抑制剂(A2aRi)对人非小细胞肺癌细胞系A549增殖、迁移和凋亡的影响及其机制.方法 将细胞分为对照组及干预组,干预组予不同浓度的A2aRi处理;用MTT法检测细胞增殖;划痕实验检测细胞迁移;24 h后,免疫荧光观察A2aR和caspase3在细胞中表达定位;用Western blot和RT-qPCR检测A2aR、caspase3蛋白和A2aR mRNA的表达.结果 A2aRi能抑制A549细胞的增殖(P<0.01),其迁移能力减弱,A2aR红色荧光强度较对照组减弱,caspase3绿色荧光强度较对照组增强,两者均在胞质中表达.Caspase3蛋白表达增加(P<0.01),A2aR蛋白表达减少(P<0.01);A2aR mRNA表达下调(P<0.05).结论 A2aR在人非小细胞肺癌细胞系A549中高表达,A2aRi能抑制A549细胞增殖和减弱其迁移能力.
作者：邵松军；段玲弟；方海燕；袁国航；郭兵；张湘燕 刊期： 2019年第01期
目的 探讨大鼠肠微血管内皮细胞miRNAs对脂多糖(LPS)诱导的水通道蛋白1(AQP1)表达的影响.方法 用机械吹打法及胰蛋白酶消化法从大鼠空肠分离微血管内皮细胞,用免疫荧光染色鉴定细胞;用荧光实时定量PCR(RT-qPCR)检测AQP1和miRNAs的表达;miRNAs芯片分析结合在线软件筛选调控AQP1表达的miRNAs,瞬时转染miRNAs模拟体及对照序列进行进一步验证.结果 肠微血管内皮细胞vWF免疫荧光染色为阳性.用LPS(0、0.1、1和10 mg/L)处理细胞后,AQP1 mRNA表达水平随LPS浓度增加呈下降趋势,其中1和10 mg/L LPS处理细胞后AQP1 mRNA表达水平与对照组相比有明显差异(P<0.05和P<0.001);与对照组相比,LPS处理组有22个表达上调2倍以上的miRNAs及9个下调2倍以上的miRNAs;软件预测显示芯片结果中的miR-423-5p、miR-874-5p、miR-361-3p、miR-219a-5p、miR-27b-3p、miR-133b和miR-666可与AQP1启动子区互补配对;miR-874-5p、miR-361-3p、miR-133b和miR-666在LPS处理后的肠微血管内皮细胞中表达上调;转染miR-133b和miR-666模拟体后可使AQP1 mRNA表达水平下调.结论 LPS可通过上调miR-133b和miR-666表达水平,间接抑制AQP1的表达,继而影响肠黏膜通透性.
作者：赵承承；陈建泉；吕纯业 刊期： 2019年第01期
据英国《BBC新闻》( BBC NEWS) 2018-04-04报道,阿尔兹海默病一直是医学界难以攻克的难题,即使科学家们早已发现一种叫做ApoE的载脂蛋白是老年痴呆发病的主要原因之一,然而多年来的药物研发努力却常常以失败告终. 但近期科学家首次在人类细胞中扭转老年痴呆获得成功.
作者：刘晓荻 刊期： 2019年第01期
调节性B细胞(Bregs)是新近发现的B细胞子集,其在抑制肿瘤免疫和促进肿瘤细胞的增殖和转移中起重要作用.Bregs可通过分泌IL-10、IL-35和TGF-β等细胞因子抑制多种细胞亚型,从而抑制抗肿瘤免疫应答.
作者：欧洁；吴红艳 刊期： 2019年第01期
目的 探讨高氧治疗对不同日龄新生大鼠肠道干细胞(ISCs)的B-淋巴瘤莫洛尼氏鼠白血病病毒插入区-1(Bmi1)和富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体5(Lgr5)表达的影响.方法 将新生大鼠随机分为对照组和高氧组(85％O2),在不同日龄(3、7、10和14 d)将其处死,收集肠道标本,用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、免疫组织化学法和蛋白免疫印迹(Western blot)检测ISCs的Bmi1和Lgr5的表达.结果 与对照组相比,高氧组Bmi1和Lgr5的mRNA和蛋白表达水平均显著下降(P<0.05).结论 在高氧环境中新生大鼠ISCs的Bmi1和Lgr5表达水平下降,可能是高氧损伤肠道的根源.
作者：娄文静；刘冬妍 刊期： 2019年第01期
固有免疫和获得性免疫系统介导的慢性炎性反应参与高血压的发生、发展和靶器官损害过程.其中单核巨噬系统是固有免疫的重要组分,包括单核细胞、巨噬细胞和部分单核来源的树突样细胞等,可通过介导血管炎性反应、调节中枢交感神经系统和肾脏水盐代谢参与血压调节.
作者：郎珈馨；陈丽萌 刊期： 2019年第01期
目的 探讨肿瘤标志物及血管新生因子与结直肠癌临床分期及肿瘤转移的关系.方法 用电化学发光法及酶联免疫吸附法检测结直肠癌患者及同期来医院健康体检者各100例静脉血肿瘤标志物与血管新生因子水平,并分析其与肿瘤不同TNM分期及肿瘤转移之间的关系.结果 癌患者CEA、CA19-9、Ang-2、VEGF及IGF-1水平均显著高于对照组(P<0.05);不同TNM分期间CEA、CA19-9、Ang-2、VEGF及IGF-1水平有明显差异(P<0.05),随着肿瘤进展,CA19-9、Ang-2及IGF-1水平均显著升高(P<0.05),Ⅳ期CEA及VEGF水平较Ⅰ、Ⅱ与Ⅲ期显著升高(P<0.05);肿瘤转移组患者的CEA、CA19-9、Ang-2、VEGF及IGF-1水平均显著高于无转移(P<0.05).结论 结直肠癌患者存在肿瘤标志物及血管新生因子水平异常升高,其指标水平检测对评估肿瘤分期及转移预测具有重要临床价值.
作者：朱攀；雷蜜；高波 刊期： 2019年第01期
目的 观察钙蛋白酶(calpain)对机械创伤大鼠心肌细胞凋亡蛋白caspase-3和caspase-12表达的影响.方法 将大鼠分为对照组、创伤组和calpain抑制剂(MDL28170)干预组(i.p.,24 mg/kg);用Western blot检测caspase-3、caspase-12、calpain-1和calpain-2蛋白表达;用试剂盒检测caspase-3和caspase-12的活性;用real-time PCR检测calpain-1和calpain-2 mRNA表达.结果 与对照组相比,大鼠创伤后心肌细胞caspase-3和caspase-12蛋白表达和活性均升高(P<0.01),calpain-2表达上调(P<0.01);与创伤组相比,给予抑制剂MDL28170干预后,心肌细胞calpain-2表达下降(P<0.05),caspase-3和caspase-12蛋白表达和活性均明显降低(P<0.05).结论 机械创伤所引起的心肌细胞calpain-2表达上调可能是导致凋亡相关蛋白caspase-3和caspase-12表达和活性升高的重要原因.
作者：何金玲；燕子；曾先燕；李丹；宁娜；王丽；贺忠梅 刊期： 2019年第01期
目的 研究胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)对视网膜母细胞瘤细胞增殖和凋亡的影响及机制.方法 视网膜母细胞瘤细胞WERI-Rb-1转染siRNA对照和IGF-1R siRNA;RT-qPCR和Western blot检测转染后细胞中IGF-1R水平;噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖;平板克隆实验检测细胞克隆形成能力;流式细胞计量术检测细胞凋亡水平;Western blot检测细胞中活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase-3)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)和磷酸化的p38MAPK(p-p38MAPK)水平.结果 转染IGF-1R siRNA后细胞中IGF-1R mRNA和蛋白水平下降(P<0.05).转染IGF-1R siRNA后细胞增殖和克隆形成能力下降(P<0.05),细胞凋亡率及细胞中cleaved caspase-3、Bax、p-p38MAPK水平升高(P<0.05).结论 下调IGF-1R抑制视网膜母细胞瘤细胞增殖,促进视网膜母细胞瘤细胞凋亡,作用机制可能与cleaved caspase-3、Bax和p-p38MAPK有关.
作者：周小芬；蒋光愉；杨会琴 刊期： 2019年第01期
目的 探讨骨形成发生蛋白4(BMP4)对人胶质母细胞瘤细胞(U251)侵袭的影响.方法 通过转染过表达BMP4的质粒及敲低BMP4的siRNA,将U251细胞分为myc组、myc-BMP4组、siCtrl组、siBMP4组;用划痕实验、荧光定量PCR与免疫印迹技术,检测高/低表达BMP4后,细胞侵袭E-cadherin及Snail1 mRNA和蛋白表达.结果 过表达BMP4降低细胞侵袭(P<0.01),低表达BMP4增加细胞侵袭.过表达BMP4后,Snail1信号通路靶基因E-cad-herin表达量明显升高(P<0.01);低表达BMP4后,E-cadherin表达量明显降低(P<0.01);过表达BMP4时,Snail1表达量明显降低(P<0.01).结论 BMP4可以通过负性调节Snail1信号通路调节细胞侵袭.
作者：王璨；喻军华 刊期： 2019年第01期
基础医学与临床杂志
主管:北京市科学技术协会
主办：北京生理科学会
