黄浩；方向明；胡继军
目的:探讨一种修复关节软骨的有效途径.方法:自制藻酸钙载体复合软骨细胞置入DMEM培养基中,实验组加入胰岛素样生长因子Ⅰ(insulin-like growthfactor-Ⅰ,IGF-Ⅰ),体外培养4周.结果:两周内开始出现软骨样物质,以后体积增大,数量增多,质地变硬,实验组与对照组差别显著.结论:藻酸钙与软骨细胞具有良好的相容性,软骨细胞在藻酸钙载体中保持了原有特性和成软骨能力,IGF-Ⅰ能够促进软骨细胞的分化增殖,并维持软骨细胞的原有表型.
作者：杨万波；顾洁夫；徐振华；张蔚英；刘军 刊期： 2004年第04期
目的:分别使用布法罗大鼠肝细胞(buffalo rats liver,BRL)条件培养基或鼠胚成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast,MEF)饲养层体外培养,比较不同培养条件对胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)分化为心肌细胞的影响.方法:用BRL条件培养基或MEF饲养层抑制ESC分化并保持其增殖,以维甲酸(retinoic acid,RA)、二甲基亚砜(DMSO)、转化生长因子β1(TGF-β1)、激活素-A(activin-A)为分化诱导剂,组合成6种分化培养基,采用悬滴、悬浮、贴壁三步法诱导ESC分化为心肌细胞,比较各组分化比率.结果:BRL及MEF饲养层两种条件均能促进ESC增殖,6种分化条件均能使ESC分化为心肌细胞;其中以BRL条件培养基培养,TGF-β1(2ng·ml-1)、activin-A(20 ng·ml-1)及20%胎牛血清(fetus calf serium,FCS)组成的分化培养基可以使(92.8±2.2)%的ESC分化为心肌细胞,分化比率显著高于其它各组(P＜0.01).结论:以BRL条件培养基培养,TGF-β1、activin-A细胞因子组合是一种理想的ESC体外分化体系.
作者：钱海燕；李庚山；徐红新；吕菁君；蒋雯；王晶 刊期： 2004年第04期
目的:探讨二乙酰基莲心碱(Diacetyl-linesinine)对家兔心室肌细胞膜钠、钙离子通道的影响.方法:选取10只体重1.5～2.0 kg的健康新西兰大耳白兔,酶解法分离单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术观察10,30,100 μmol·L-1的二乙酰基莲心碱对心室肌细胞膜钠通道和钙通道的作用.结果:二乙酰基莲心碱浓度依赖性减少钠电流和L-型钙电流,10,30,100μmol·L-1的二乙酰基莲心碱可分别使峰值钠电流降低40.7%,78.4%和89.4%;使峰值L-型钙电流降低56.6%,65.7%和73.6%.另外,二乙酰基莲心碱可使钠通道灭活曲线左移,并可减慢钠通道灭活后的恢复过程.结论:二乙酰基莲心碱对钠电流及L-型钙电流具有浓度依赖性阻滞作用,并可作用于钠通道的失活态,这些可以部分解释其抗心律失常作用机制.
作者：曹锋；黄从新；江洪；王腾；李夏 刊期： 2004年第04期
目的:探讨生存素(survivin,SVV)在子宫腺肌瘤在位内膜、异位内膜的表达,研究以SVV为核心的细胞凋亡、血管生成机制、患者孕产次与子宫腺肌瘤发病的相关性及其作用.方法:采用免疫组化法检测子宫腺肌瘤在位内膜、异位内膜及正常对照组内膜中SVV,endoglin蛋白表达,探讨其与研究对象孕产次间的关系.结果:子宫腺肌瘤异位内膜组SVV蛋白的表达和微血管密度显著高于在位内膜组和异位内膜组(P＜0.01),SVV蛋白的表达和微血管密度均与流产次数呈正相关,且增殖期宫内膜、分泌期宫内膜SVV蛋白表达与endoglin蛋白表达呈显著相关性.结论:SVV的过度表达可能参与了子宫腺肌瘤的发病过程,以其为核心的细胞凋亡和血管生成机制与子宫腺肌瘤的发病关系密切.
作者：刘萍；罗新；史玉霞；吴秀枝 刊期： 2004年第04期
目的:研究热休克蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达与膀胱移行细胞癌临床及病理的关系.方法:采用免疫组织化学技术检测HSP70、HSP90在30例膀胱移行细胞癌和15例膀胱良性病变或正常组织中的表达情况.结果:HSP70和HSP90在膀胱移行细胞癌中阳性表达率分别为100%(30/30)和96.7%(29/30).HSPs在膀胱移行细胞癌中的阳性表达率显著高于良性病变或正常组织(P＜0.01),而且HSP70和HSP90在膀胱移行细胞癌中的表达阳性强度随肿瘤分化程度的降低而升高(P＜0.01).结论:不同类型的HSPs表达阳性强度与膀胱移行细胞癌的分化程度密切相关.测定HSPs在膀胱移行细胞癌中的表达,可以判定其分化程度,为临床判断预后及疗效,制定治疗方案提供了重要参考指标.
作者：葛名欢；张孝斌；张杰；程帆 刊期： 2004年第04期
目的:观察信号分子Shh及其受体Ptc1、Ptc2在小鼠下颌切牙牙胚形态发育晚期的基因表达,以探讨Shh信号路径在细胞分化中的作用.方法:制备昆明小鼠下颌切牙形态发育晚期标本(E18.5～P 1.5),常规HE染色观察组织形态.以Shh、Ptc1、Ptc2 cDNA为模板体外转录合成地高辛标记的cRNA探针,原位杂交法分析Shh、Ptc1、Ptc2 mRNA在牙胚中的表达与分布.结果:Shh与Ptc2 mRNA表达方式相近,在钟状期切牙唇侧的前成釉细胞和中间层细胞呈阳性表达.Ptc1 mRNA在钟状期切牙唇侧的前成釉细胞、中间层细胞及成牙本质细胞均呈阳性表达.结论:在切牙牙胚形态发育晚期,Shh可能通过自分泌途径和旁分泌途径,参与了唇侧成釉细胞和成牙本质细胞分化.
作者：张露；孙志军；王志峰；华方；张旗；陈智 刊期： 2004年第04期
目的:观察端粒酶抑制剂AZT联合60Coγ-射线对人脑胶质瘤细胞U251端粒酶活性及细胞存活的影响,探讨AZT的放射增敏作用.方法:实验分4组:A、空白对照组;B、放射组;C、加药组;D、加药放射组.用克隆形成分析法观察AZT对U251细胞放射敏感性的影响,通过拟合生存曲线计算放射增敏比SERD0、SERDq、SERSF2.用端粒重复序列扩增(telomeric repeat amplification protocol,TRAP)-PCR-ELISA方法检测端粒酶活性的动态变化.结果:照射前经0.8 mmol·L-1AZT处理24 h明显降低了2 Gy γ-射线照射后U251细胞的存活分数,SERD0、SERDq、SERSFM2分别为1.294,1.25和1.365;表明AZT具有放射增敏的作用(P＜0.05).端粒酶活性分析显示A、B、C、D组细胞的端粒酶活性分别为1.563±0.022,1.923±0.188,1.057±0.126,1.209±0.153,各组之间差异均有显著性(P＜0.05).结论:AZT能明显抑制2 Gy照射诱导的U251细胞端粒酶活性升高,并显著增加U251细胞的放射敏感性;AZT的放射增敏作用可能与端粒酶活性受抑制有关.
作者：戴静；周福祥；肖创映；刘诗权；潘东风；骆志国；周云峰 刊期： 2004年第04期
目的:观察补肾壮骨方对实验性骨质疏松大鼠骨密度(BMD)、白细胞介素6(IL-6)骨表达的影响,进一步探讨补肾壮骨方抗骨质疏松的作用机理.方法:使用补肾壮骨方对切除卵巢的雌性成年Wistar大鼠进行不同剂量的药物治疗,并与正常对照组、模型组和尼尔雌醇治疗组的大鼠进行了对比,采用免疫组化的方法,检测并比较各组骨组织IL-6骨表达.结果:补肾壮骨方各剂量组和尼尔雌醇组可使骨质疏松大鼠的股骨、腰椎和全身的骨密度明显增加,且骨组织中IL-6的阳性表达明显弱于模型组,有统计学意义(P＜0.05).结论:补肾壮骨方抗骨质疏松的作用可能是通过减弱骨组织中的IL-6表达,增加骨密度来发挥作用的.
作者：颜灿群；陈友香；夏振信 刊期： 2004年第04期
目的:探讨过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)基因第5外显子L162V(CTT→GTT)多态性与2型糖尿病(T2DM)的关系.方法:采用多聚酶联反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法对湖北地区100例T2DM患者及80例正常对照者PPARα基因L162V多态性进行研究.结果:在T2DM患者和正常对照者中未发现PPARα基因L162V变异.结论:PPARα基因L162V多态性与湖北地区T2DM不相关.
作者：张颖；雷红；邓幼平 刊期： 2004年第04期
目的:观察全反式视黄酸点眼对兔角膜新生血管的影响.方法:32只日本大白兔随机分成A、B、C、D 4组,每组8只兔(8只眼),制成角膜碱烧伤模型.治疗组(A、B、C组)伤后即分别滴用15,30及60 mg·L-1的全反式视黄酸滴眼,对照组(D组)滴赋形剂,裂隙灯观察角膜新生血管的生长情况并计算伤后第6,9,12,15,18,21,25,28 d的角膜新生血管面积.连续用药28 d后处死兔并取下角膜做组织病理学检查.结果:伤后B组和C组角膜新生血管开始出现的时间明显较A组和D组延长,且角膜新生血管生长面积均明显较A组和D组减少,组织病理学检查显示CNV面积与角膜后膜和炎性细胞数均有明显相关性.结论:局部应用全反式视黄酸对由碱烧伤引起的兔角膜新生血管的生长有明显的抑制作用.
作者：姚骏；艾明；蔡明高；邢怡桥；郑红梅 刊期： 2004年第04期
目的:了解左旋-精氨酸(L-arginine)对糖尿病(DM)鼠肾脏的影响并初步探讨其机制.方法:将实验大鼠分3组,正常对照组(A组)8只;DM组(B组)8只;DM 4周后+0.5%L-arginine组(C组)8只.观察8周.结果:第1周末开始,B、C组Ccr和UAE较A组明显升高,B、C组之间无显著差异;尿NO2-/NO3-第1,2周B、C较A组明显升高,B、C组之间无显著差异,第8周B、C组较A组降低,但C组较B组升高.第8周末肾脏病理变化为,B组肾小球系膜区增宽,肾小球毛细血管基底膜弥漫性增厚,系膜及基质PAS阳性物增多,但C组上述变化明显较B组轻.ABC染色Laminin阳性物可见B组肾小球系膜区弥漫性增宽,肾小管基底膜阳性物呈宽带状沉积,而C组肾小球系膜区稍宽,肾小管基底膜阳性物呈线状沉积,y2检验P＜0.05.B、C组肾皮质NO2-/NO3-与PAS阳性物灰度值呈直线正相关.结论:糖尿病肾病进程中内源性NO表现为初期的升高到发展中的下降趋势.内源性NO生成增多是导致糖尿病肾病早期肾小球高灌注、高滤过的重要原因之一,在糖尿病肾病发展中补充小剂量L-arginine能减轻肾小球基底膜的增厚和基质的增生,延缓肾小球硬化,对肾脏起保护作用.
作者：程晖；贾汝汉 刊期： 2004年第04期
目的:研究电刺激迷走神经对感染性休克大鼠肝脏炎性反应的影响.方法:采用盲肠结扎穿孔法(cecal ligation and puncture,CLP)复制感染性休克模型.取成年雄性SD大鼠20只,随机分为4组:假CLP组、CLP组、迷切组、电刺激组.刺激方法是将左迷走神经远端连接刺激电极,于CLP术毕即刻持续电刺激(5 V、2 ms和1 Hz)20 min.各组动物均行颈总动脉置管连续监测平均动脉压,用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血浆TNF-α水平,肝脏组织HE染色观察病理组织学变化情况.结果:CLP术后平均动脉血压进行性下降,血浆TNF-α水平含量显著升高(各P＜0.01),肝脏组织发生明显的炎性病理改变;与CLP组比较,电刺激组动物平均动脉压下降幅度减轻,血浆TNF-α含量显著降低(各P＜0.01),肝组织炎性病理改变减轻.结论:电刺激迷走神经能缓解CLP致感染性休克大鼠的进行性血压下降,降低血清TNF-α含量,减轻肝组织病理损害,对肝功能有潜在的保护作用.
作者：胡正芳；李建国；杜朝晖；周青；贾宝辉 刊期： 2004年第04期
目的:为比较珊瑚颗粒和羟基磷灰石(HA)颗粒在即刻种植愈合过程中的作用.方法:应用国产羟基磷灰石涂层种植体植入犬股骨中,在种植体周围骨缺损中分别植入HA和珊瑚颗粒,并设空白对照而成3组,进行比较观察,术后2,3,4个月处死动物,通过X线检查及扫描电镜观察标本.结果:植入植骨材料充填种植体周围骨空隙后,术后4个月,种植体和骨组织结合紧密,珊瑚颗粒几乎完全降解吸收,而HA颗粒基本无变化,未植入植骨材料的空白对照组,4个月时颈部尚有部分骨组织缺损.结论:即刻种植体周骨缺损大于1 mm以上应植入植骨材料.作为植骨材料,珊瑚颗粒较HA颗粒有更好的骨引导活性,能降解吸收为骨组织替代,而HAG不能吸收,影响骨改建.
作者：丁俊清；吕晓春；程祥惠；杨碧玉；雷志敏；周海孝；李俊；段春枝；张远芳；王丽红 刊期： 2004年第04期
目的:通过检测人不同乳腺瘤细胞株的端粒酶活性及其2 Gy的存活分数(SF2)的相关性,探讨端粒酶活性是否能成为检测肿瘤细胞放射敏感性的一个指标.方法:8株人不同肿瘤细胞株(Hep-2、Hela、U251、ZR-75-30、MCF-7、MDA-MB-435S、T-47-D、F539-1590)在指数增长期留取细胞,然后分别用TRAP-ELISA检测其端粒酶活性,克隆形成实验检测其放射敏感性参数SF2.结果:8株人乳腺癌细胞株端粒酶活性各不相同(P＜0.01),其中ZR-75-30端粒酶活性检测呈阴性,余7株细胞端粒酶活性检测呈阳性,SF2亦不相同(P＜0.01),但端粒酶活性与SF2之间无明显的直线相关关系(P=0.341).结论:8株人不同肿瘤细胞株的端粒酶活性及其放射敏感性各不相同,但其端粒酶活性不能成为检测其放射敏感性的指标.
作者：潘东风；周福祥；谢丛华；刘诗权；彭纲；戴静；骆志国；肖创映；周云峰 刊期： 2004年第04期
目的:探讨宫内发育迟缓(IUGR)幼鼠是否出现中枢神经系统功能障碍及其可能的机制.方法:SD雌性大鼠随机分为对照组和模型组,每组12只.模型组于妊娠第5～20 d,采用被动吸烟法建立大鼠胎儿IUGR模型.根据IUGR诊断标准,将幼鼠分为IUGR组与对照组.称量1,7,14,21,30日龄幼鼠脑组织重量.于23日龄开始连续6 d Morris水迷宫试验,29日龄开始消极回避试验,测试幼鼠的学习记忆能力.采用Western Blotting技术及RT-PCR技术检测经过学习记忆测试后30日龄幼鼠海马NMDA受体NR1亚基蛋白及mRNA表达情况.结果:①各日龄IUGR组幼鼠脑组织重量均低于对照组,差异有显著性(P＜0.05).②Morris水迷宫试验中,训练第2～6 d IUGR组幼鼠平台潜伏期均高于对照组,差异有显著性(P＜0.005).③消极回避试验中,IUGR组幼鼠所需电击次数为(7.8±1.2)次,明显高于对照组(P＜0.001).24 h后保持潜伏期为(238.2士11.5)s,明显低于对照组(P＜0.001).④IUGR组幼鼠海马NMDA受体NR1亚基蛋白相对表达量为0.377 7±0.076 7,明显低于对照组(P＜0.001);NR1亚基mRNA相对表达量为0.246 6±0.060 8,明显低于对照组(P＜0.001).结论:①IUGR幼鼠可出现脑发育障碍及学习记忆能力下降.②NMDA受体NR1亚基表达下降可能是IUGR幼鼠中枢神经系统功能障碍的重要机制之一.
作者：周雯慧；周春；张元珍；王燕 刊期： 2004年第04期
目的:探讨外伤性脑室内出血的发病机制、治疗及预后.方法:对39例外伤性脑室内出血患者治疗经过及临床资料进行了观察和分析.结果:伤后半年随访,根据GOS预后评分标准,愈后良好19例,中残6例,重残及植物状态5例,死亡9例.结论:受伤瞬间脑室压力改变引起室管膜下血管破裂出血,以及附近脑实质内血管破裂出血,是外伤性脑室内出血的主要原因;双侧侧脑室尿激酶+生理盐水冲洗、亚低温治疗及高氧液治疗是外伤性脑室内出血治疗的积极有效措施;患者的年龄、入院时意识、脑室内积血的及时排出、并发症是影响预后的主要因素.
作者：楚胜华；袁先厚；陈卫国；江普查；郭国炳 刊期： 2004年第04期
目的:探讨过敏性哮喘病人和正常人外周血单个核细胞(PBMC)来源树突状细胞(dendritic cell,DC)产生IL-12的差异,及其对TH1/Th2平衡的影响.方法:分别取缓解期哮喘患者(哮喘组)和正常人(对照组)外周血经Ficoll和不连续密度梯度离心法获取贴壁细胞,经GM-CSF和IL-4体外培养为不成熟DC(iDC),加入LPS刺激使其发育为成熟DC(mDC).另取脐血同上方法获得非贴壁细胞,分别加CD4单抗和CD45RA单抗及磁珠分离得到初始T淋巴细胞(Th0).两组mDC分别和Th0共培养,通过ELISA法检测mDC分泌的IL-12和T淋巴细胞(TC)分泌的IFN-γ和IL-4的含量.结果:①哮喘组PBMC来源DC产生IL-12 P70及其亚单位P40均较对照组显著减少(P均＜0.01).②DC及其IL-12致Th0分化,哮喘组TC释放IL-4较对照组显著增多(P＜0.01);相反,IFN-γ较对照组减少(P＜0.05).③哮喘组和对照组IL-12 P70和IFN-γ之间均呈正相关关系(分别P＜0.01,P＜0.05);两组IL-12 P70和IL-4均呈负相关关系(P均＜0.01).结论:由于哮喘病人DC功能缺陷,产生IL-12减少导致Th2优势分化,从而使Th1/Th2平衡向Th2倾斜,合成IL-4增多和IFN-γ减少,后者是哮喘发生的重要机制之一.
作者：毛光宇；杨炯；胡克；陈宏斌；张莉 刊期： 2004年第04期
目的:探讨阿糖胞苷对体外培养的宫颈癌细胞(Hela细胞)端粒酶活性的影响.方法:采用PCR-ELISA法检测经阿糖胞苷处理前后的Hela细胞株端粒酶活性的改变.结果:经阿糖胞苷处理后,Hela细胞的生长受到抑制,端粒酶活性明显降低.结论:阿糖胞苷对Hela细胞具有生长抑制作用,其抗肿瘤作用的机理可能与抑制肿瘤细胞的端粒酶活性有关.
作者：黄浩；方向明；胡继军 刊期： 2004年第04期
目的:调查适宜钙饮食对老年男性骨质疏松的影响及与钙调节激素间的相关性.方法:测定95例适宜钙饮食的老年男性及25例青年男性的骨密度,检测钙调节相关激素.统计各组间相关性.结果:与青年对照组比较,正常钙饮食和充足阳光照射的老年男性随年龄增加出现骨质疏松和骨量减少,钙调节激素特点为老年人骨质疏松组与青年组比较:hCT、TE2、TTT、IGF-1均明显降低,而hPTH、25-OH-VD无差异.结论:老年人正常钙饮食可抑制hPTH升高,充足光照可避免25-OH-VD减低,但不可避免的发生hCT、IGF-1、TTT、TE2随年龄增加而降低.故老年男性骨质疏松发病可能与年龄增加相关激素的变化密切相关.
作者：吴伏娜；米涌；钟紫茹 刊期： 2004年第04期
目的:探讨Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)所致的角膜炎中基质金属蛋白酶(MMPs)mRNA的表达.方法:雌性BalB/c小鼠眼角膜接种HSV-1(KOS株)以诱发单纯疱疹性角膜炎(HSK).收集正常角膜及感染后第2,7,14 d的感染角膜,应用RT-PCR技术检测基质金属蛋白酶-2,基质金属蛋白酶-9(MMP-2,MMP-9)的mRNA表达.结果:除正常角膜MMP-9 mRNA为阴性表达其他各组均获得阳性目的片断.感染后第2 d MMP-2 mRNA表达较正常组差异没有显著性(P＞0.05),感染后第7 d MMP-9 mRNA表达与第2 d的表达差异没有显著性(P＞0.05),其他各组差异均有显著性意义(P＜0.01)且大体上呈随感染天数增加表达增高的趋势.结论:在实验性HSK中存在基质金属蛋白酶mRNA的表达且MMP-2,MMP-9的mRNA高表达参与了角膜溃疡、角膜新生血管的形成等病变的发生.
作者：曹婷；邢怡桥；杨燕宁；彭坤 刊期： 2004年第04期
武汉大学学报（医学版）杂志
主管:中华人民共和国教育部
主办：武汉大学
