丁俊清;吕晓春;程祥惠;杨碧玉;雷志敏;周海孝;李俊;段春枝;张远芳;王丽红
目的:通过检测人不同乳腺瘤细胞株的端粒酶活性及其2 Gy的存活分数(SF2)的相关性,探讨端粒酶活性是否能成为检测肿瘤细胞放射敏感性的一个指标.方法:8株人不同肿瘤细胞株(Hep-2、Hela、U251、ZR-75-30、MCF-7、MDA-MB-435S、T-47-D、F539-1590)在指数增长期留取细胞,然后分别用TRAP-ELISA检测其端粒酶活性,克隆形成实验检测其放射敏感性参数SF2.结果:8株人乳腺癌细胞株端粒酶活性各不相同(P<0.01),其中ZR-75-30端粒酶活性检测呈阴性,余7株细胞端粒酶活性检测呈阳性,SF2亦不相同(P<0.01),但端粒酶活性与SF2之间无明显的直线相关关系(P=0.341).结论:8株人不同肿瘤细胞株的端粒酶活性及其放射敏感性各不相同,但其端粒酶活性不能成为检测其放射敏感性的指标.
作者:潘东风;周福祥;谢丛华;刘诗权;彭纲;戴静;骆志国;肖创映;周云峰 刊期: 2004年第04期
目的:为比较珊瑚颗粒和羟基磷灰石(HA)颗粒在即刻种植愈合过程中的作用.方法:应用国产羟基磷灰石涂层种植体植入犬股骨中,在种植体周围骨缺损中分别植入HA和珊瑚颗粒,并设空白对照而成3组,进行比较观察,术后2,3,4个月处死动物,通过X线检查及扫描电镜观察标本.结果:植入植骨材料充填种植体周围骨空隙后,术后4个月,种植体和骨组织结合紧密,珊瑚颗粒几乎完全降解吸收,而HA颗粒基本无变化,未植入植骨材料的空白对照组,4个月时颈部尚有部分骨组织缺损.结论:即刻种植体周骨缺损大于1 mm以上应植入植骨材料.作为植骨材料,珊瑚颗粒较HA颗粒有更好的骨引导活性,能降解吸收为骨组织替代,而HAG不能吸收,影响骨改建.
作者:丁俊清;吕晓春;程祥惠;杨碧玉;雷志敏;周海孝;李俊;段春枝;张远芳;王丽红 刊期: 2004年第04期
目的:分别使用布法罗大鼠肝细胞(buffalo rats liver,BRL)条件培养基或鼠胚成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast,MEF)饲养层体外培养,比较不同培养条件对胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)分化为心肌细胞的影响.方法:用BRL条件培养基或MEF饲养层抑制ESC分化并保持其增殖,以维甲酸(retinoic acid,RA)、二甲基亚砜(DMSO)、转化生长因子β1(TGF-β1)、激活素-A(activin-A)为分化诱导剂,组合成6种分化培养基,采用悬滴、悬浮、贴壁三步法诱导ESC分化为心肌细胞,比较各组分化比率.结果:BRL及MEF饲养层两种条件均能促进ESC增殖,6种分化条件均能使ESC分化为心肌细胞;其中以BRL条件培养基培养,TGF-β1(2ng·ml-1)、activin-A(20 ng·ml-1)及20%胎牛血清(fetus calf serium,FCS)组成的分化培养基可以使(92.8±2.2)%的ESC分化为心肌细胞,分化比率显著高于其它各组(P<0.01).结论:以BRL条件培养基培养,TGF-β1、activin-A细胞因子组合是一种理想的ESC体外分化体系.
作者:钱海燕;李庚山;徐红新;吕菁君;蒋雯;王晶 刊期: 2004年第04期
目的:研究电刺激迷走神经对感染性休克大鼠肝脏炎性反应的影响.方法:采用盲肠结扎穿孔法(cecal ligation and puncture,CLP)复制感染性休克模型.取成年雄性SD大鼠20只,随机分为4组:假CLP组、CLP组、迷切组、电刺激组.刺激方法是将左迷走神经远端连接刺激电极,于CLP术毕即刻持续电刺激(5 V、2 ms和1 Hz)20 min.各组动物均行颈总动脉置管连续监测平均动脉压,用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测血浆TNF-α水平,肝脏组织HE染色观察病理组织学变化情况.结果:CLP术后平均动脉血压进行性下降,血浆TNF-α水平含量显著升高(各P<0.01),肝脏组织发生明显的炎性病理改变;与CLP组比较,电刺激组动物平均动脉压下降幅度减轻,血浆TNF-α含量显著降低(各P<0.01),肝组织炎性病理改变减轻.结论:电刺激迷走神经能缓解CLP致感染性休克大鼠的进行性血压下降,降低血清TNF-α含量,减轻肝组织病理损害,对肝功能有潜在的保护作用.
作者:胡正芳;李建国;杜朝晖;周青;贾宝辉 刊期: 2004年第04期
目的:探讨一种修复关节软骨的有效途径.方法:自制藻酸钙载体复合软骨细胞置入DMEM培养基中,实验组加入胰岛素样生长因子Ⅰ(insulin-like growthfactor-Ⅰ,IGF-Ⅰ),体外培养4周.结果:两周内开始出现软骨样物质,以后体积增大,数量增多,质地变硬,实验组与对照组差别显著.结论:藻酸钙与软骨细胞具有良好的相容性,软骨细胞在藻酸钙载体中保持了原有特性和成软骨能力,IGF-Ⅰ能够促进软骨细胞的分化增殖,并维持软骨细胞的原有表型.
作者:杨万波;顾洁夫;徐振华;张蔚英;刘军 刊期: 2004年第04期
目的:探讨阿糖胞苷对体外培养的宫颈癌细胞(Hela细胞)端粒酶活性的影响.方法:采用PCR-ELISA法检测经阿糖胞苷处理前后的Hela细胞株端粒酶活性的改变.结果:经阿糖胞苷处理后,Hela细胞的生长受到抑制,端粒酶活性明显降低.结论:阿糖胞苷对Hela细胞具有生长抑制作用,其抗肿瘤作用的机理可能与抑制肿瘤细胞的端粒酶活性有关.
作者:黄浩;方向明;胡继军 刊期: 2004年第04期
目的:研究热休克蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达与膀胱移行细胞癌临床及病理的关系.方法:采用免疫组织化学技术检测HSP70、HSP90在30例膀胱移行细胞癌和15例膀胱良性病变或正常组织中的表达情况.结果:HSP70和HSP90在膀胱移行细胞癌中阳性表达率分别为100%(30/30)和96.7%(29/30).HSPs在膀胱移行细胞癌中的阳性表达率显著高于良性病变或正常组织(P<0.01),而且HSP70和HSP90在膀胱移行细胞癌中的表达阳性强度随肿瘤分化程度的降低而升高(P<0.01).结论:不同类型的HSPs表达阳性强度与膀胱移行细胞癌的分化程度密切相关.测定HSPs在膀胱移行细胞癌中的表达,可以判定其分化程度,为临床判断预后及疗效,制定治疗方案提供了重要参考指标.
作者:葛名欢;张孝斌;张杰;程帆 刊期: 2004年第04期
目的:应用兔冠脉前降支结扎缺血再灌模型,观察万爽力对顿抑心肌能量代谢及功能的影响并分析其可能机制.方法:18只日本大耳白兔随机分为对照组、心肌顿抑组和万爽力组.结扎兔冠脉左前降支20 min,再灌360 min,观察血流动力学、抗氧化酶、脂质过氧化物、血清游离脂肪酸、乳酸以及心肌组织ATP含量和超微结构的变化.结果:①万爽力可缓解顿抑心肌收缩舒张功能明显降低;②万爽力可抑制顿抑组血清游离脂肪酸(FFA)、乳酸(LD)、丙二醛(MDA)水平明显升高,超氧化物歧化酶(SOD)活性明显下降;③顿抑组心肌组织ATP含量较对照组明显下降,万爽力可升高顿抑心肌组织ATP含量(P<0.01);④万爽力可减轻顿抑心肌损伤.结论:万爽力对顿抑心肌功能与能量代谢的恢复作用与其直接参与心肌细胞脂肪酸代谢有关.
作者:姜黎;任江华;曹茂银 刊期: 2004年第04期
目的:研究苦参碱(matrine,Mat)诱导血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作用的小鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblast,CFB)凋亡及相关调控蛋白表达的影响.方法:不同浓度苦参碱作用于体外培养AngⅡ作用的小鼠心肌成纤维细胞,利用倒置显微镜、PI/Hoechst 33342双染结合荧光显微镜技术观察细胞形态;流式细胞术检测其凋亡率、细胞周期及凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达的改变;采用Western Blotting检测Caspase-3蛋白的表达.结果:不同浓度Mat处理Ang Ⅱ作用的小鼠心肌成纤维细胞24 h,可见到染色质浓缩、边集、碎裂;凋亡率随浓度的升高而升高;细胞周期分析显示G1升高,S期下降,G2/M期无明显变化;,Bcl-2的表达量减少;Bax的表达量增加且呈剂量效应;Western Blotting检测显示Caspase-3活化.结论:Mat诱导AngⅡ作用的小鼠心肌成纤维细胞凋亡且呈剂量效应,其机制可能与降低Bcl-2、升高Bax、增强Caspas-3活性有关.
作者:周成慧;欧阳静萍;周艳芳;胡迎春;杨海鹭;徐怡 刊期: 2004年第04期
目的:探讨宫内发育迟缓(IUGR)幼鼠是否出现中枢神经系统功能障碍及其可能的机制.方法:SD雌性大鼠随机分为对照组和模型组,每组12只.模型组于妊娠第5~20 d,采用被动吸烟法建立大鼠胎儿IUGR模型.根据IUGR诊断标准,将幼鼠分为IUGR组与对照组.称量1,7,14,21,30日龄幼鼠脑组织重量.于23日龄开始连续6 d Morris水迷宫试验,29日龄开始消极回避试验,测试幼鼠的学习记忆能力.采用Western Blotting技术及RT-PCR技术检测经过学习记忆测试后30日龄幼鼠海马NMDA受体NR1亚基蛋白及mRNA表达情况.结果:①各日龄IUGR组幼鼠脑组织重量均低于对照组,差异有显著性(P<0.05).②Morris水迷宫试验中,训练第2~6 d IUGR组幼鼠平台潜伏期均高于对照组,差异有显著性(P<0.005).③消极回避试验中,IUGR组幼鼠所需电击次数为(7.8±1.2)次,明显高于对照组(P<0.001).24 h后保持潜伏期为(238.2士11.5)s,明显低于对照组(P<0.001).④IUGR组幼鼠海马NMDA受体NR1亚基蛋白相对表达量为0.377 7±0.076 7,明显低于对照组(P<0.001);NR1亚基mRNA相对表达量为0.246 6±0.060 8,明显低于对照组(P<0.001).结论:①IUGR幼鼠可出现脑发育障碍及学习记忆能力下降.②NMDA受体NR1亚基表达下降可能是IUGR幼鼠中枢神经系统功能障碍的重要机制之一.
作者:周雯慧;周春;张元珍;王燕 刊期: 2004年第04期
目的:将蓝舌病毒湖北株(BTV-HbC)做为一种具有潜在性治疗效能的生物制剂来治疗MA782肿瘤.方法:首先用BTV-HbC病毒感染体外培养的MA782细胞.同时将MA782细胞接种于小鼠皮下,复制出了小鼠荷MA782肿瘤的动物模型,然后将BTV-HbC病毒直接进行瘤体注射.结果:小鼠荷MA782肿瘤的明显退缩,和体外处理的结果是一致的.结论:证实了BTV-HbC病毒是一种有效的治疗恶性肿瘤的新型生物制剂.
作者:罗翔;董长垣;郭淑芳;邓靖;卢莉莉;黎莉 刊期: 2004年第04期
目的:探讨多平面经食管超声心动图(MTEE)在Amplatzer封堵器封堵继发孔型房间隔缺损(ASD)中的应用价值.方法:应用MTEE筛选符合封堵条件的24例ASD患者行导管封堵术.在超声和X线引导下,以ASD伸展径加0~4 mm为标准,选择相应型号的封堵器,导管送封堵器至缺损处,依次释放左房面伞、腰部及右房面伞,观察位置合适时撤出导管,完成手术.结果:24例患者均成功的进行了封堵,所有患者术中及术后均无并发症,术后即刻无残余分流.MTEE测量的ASD大直径显著小于ASD伸展径[(20.2±5.6)mm vs(24.5±5.4)mm,P<0.01],平均相差4 mm.所有患者术后24 h、1个月及3个月经胸超声检查均无残余分流及其它并发症.结论:MTEE指导Amplatzer封堵器导管介入治疗继发孔型ASD是一种安全、有效的监测方法,其在病例选择、选择封堵器型号及放置封堵器过程中起重要的作用.
作者:尹家保;吕瑾玉;陈明;杨浩;宋庆安;王庆捷;谢华 刊期: 2004年第04期
目的:探讨外伤性脑室内出血的发病机制、治疗及预后.方法:对39例外伤性脑室内出血患者治疗经过及临床资料进行了观察和分析.结果:伤后半年随访,根据GOS预后评分标准,愈后良好19例,中残6例,重残及植物状态5例,死亡9例.结论:受伤瞬间脑室压力改变引起室管膜下血管破裂出血,以及附近脑实质内血管破裂出血,是外伤性脑室内出血的主要原因;双侧侧脑室尿激酶+生理盐水冲洗、亚低温治疗及高氧液治疗是外伤性脑室内出血治疗的积极有效措施;患者的年龄、入院时意识、脑室内积血的及时排出、并发症是影响预后的主要因素.
作者:楚胜华;袁先厚;陈卫国;江普查;郭国炳 刊期: 2004年第04期
目的:探索新生儿窒息的因素及其交互效应.方法:随机抽取5 000例新生儿资料进行回顾性分析,统计处理采用Logistic回归分析法.结果:建立了新生儿窒息概率的回归预测方程,求得各因素的发生比率.结论:羊水Ⅲ°污染、早产、低体重儿、妊高征、臀位与新生儿窒息高度相关,以上多个因素新生儿窒息的发生比率大于4,是新生儿窒息的危险因素;但除羊水Ⅲ°污染和低体重儿的交互效应外,其余各种交互效应均不显著.
作者:罗春芳 刊期: 2004年第04期
目的:探讨生存素(survivin,SVV)在子宫腺肌瘤在位内膜、异位内膜的表达,研究以SVV为核心的细胞凋亡、血管生成机制、患者孕产次与子宫腺肌瘤发病的相关性及其作用.方法:采用免疫组化法检测子宫腺肌瘤在位内膜、异位内膜及正常对照组内膜中SVV,endoglin蛋白表达,探讨其与研究对象孕产次间的关系.结果:子宫腺肌瘤异位内膜组SVV蛋白的表达和微血管密度显著高于在位内膜组和异位内膜组(P<0.01),SVV蛋白的表达和微血管密度均与流产次数呈正相关,且增殖期宫内膜、分泌期宫内膜SVV蛋白表达与endoglin蛋白表达呈显著相关性.结论:SVV的过度表达可能参与了子宫腺肌瘤的发病过程,以其为核心的细胞凋亡和血管生成机制与子宫腺肌瘤的发病关系密切.
作者:刘萍;罗新;史玉霞;吴秀枝 刊期: 2004年第04期
目的:总结分析急性主动脉夹层的临床特征,并探讨其早期、无创、安全、便捷的诊断方法及急救措施.方法:分析22例突然发病,表现为胸部或后背部剧烈的、撕裂样疼痛,应用一般方法不能缓解疼痛患者.在急救室乙床边运用彩色多普勒超声心动图检查,结合心电图表现,心肌酶学迅速明确了诊断.结果:参照Stanford临床分型,A型16例,B型6例,16例A型中有5例内膜剥离血肿扩展至主动脉弓、降主动脉、腹主动脉及髂动脉.结论:急性主动脉夹层患者因其病变部位及内膜撕裂剥离、血肿扩延累及主动脉节段不一致,临床早期表现各异,我们体会:早期应用超声心动图于床旁检查,结合心电图、心肌酶学改变,可迅速做出诊断,具有安全、快捷、无创、省时的优点,对指导诊疗具有重要意义.
作者:陈忠庆;陆庆生;夏利 刊期: 2004年第04期
目的:研究口腔正常粘膜、粘膜白斑及鳞癌组织中细胞凋亡及Ki-67蛋白表达及其意义.方法:用TUNEL法检测口腔粘膜白斑和鳞癌中细胞凋亡,用免疫组化SP法检测细胞Ki-67蛋白表达,并计算其细胞凋亡率及细胞增殖率.结果:在正常粘膜单纯增生性白斑-不典型增生性白斑-鳞癌过程中,随病变的发展,其细胞凋亡率呈下降趋势(分别为3.55%,3.45%,3.34%及2.38%).细胞增殖率呈上升趋势(分别为29.45%,29.66%,31.30%及31.56%).相邻病变类型两两比较.细胞凋亡率在不典型增生性白斑与鳞癌中的差异有高度显著性(P<0.01);细胞增殖率在单纯增生性白斑与不典型增生性白斑相比中,差异有高度显著性(P<0.01).结论:提示口腔粘膜白斑,尤其是不典型增生性白斑如出现较低的细胞凋亡率和/或较高的细胞增殖率,应注意癌变的可能性.
作者:陈一峰;陈新明;刘铭球;唐志姣;王敏 刊期: 2004年第04期
目的:探讨二乙酰基莲心碱(Diacetyl-linesinine)对家兔心室肌细胞膜钠、钙离子通道的影响.方法:选取10只体重1.5~2.0 kg的健康新西兰大耳白兔,酶解法分离单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术观察10,30,100 μmol·L-1的二乙酰基莲心碱对心室肌细胞膜钠通道和钙通道的作用.结果:二乙酰基莲心碱浓度依赖性减少钠电流和L-型钙电流,10,30,100μmol·L-1的二乙酰基莲心碱可分别使峰值钠电流降低40.7%,78.4%和89.4%;使峰值L-型钙电流降低56.6%,65.7%和73.6%.另外,二乙酰基莲心碱可使钠通道灭活曲线左移,并可减慢钠通道灭活后的恢复过程.结论:二乙酰基莲心碱对钠电流及L-型钙电流具有浓度依赖性阻滞作用,并可作用于钠通道的失活态,这些可以部分解释其抗心律失常作用机制.
作者:曹锋;黄从新;江洪;王腾;李夏 刊期: 2004年第04期
目的:探讨Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)所致的角膜炎中基质金属蛋白酶(MMPs)mRNA的表达.方法:雌性BalB/c小鼠眼角膜接种HSV-1(KOS株)以诱发单纯疱疹性角膜炎(HSK).收集正常角膜及感染后第2,7,14 d的感染角膜,应用RT-PCR技术检测基质金属蛋白酶-2,基质金属蛋白酶-9(MMP-2,MMP-9)的mRNA表达.结果:除正常角膜MMP-9 mRNA为阴性表达其他各组均获得阳性目的片断.感染后第2 d MMP-2 mRNA表达较正常组差异没有显著性(P>0.05),感染后第7 d MMP-9 mRNA表达与第2 d的表达差异没有显著性(P>0.05),其他各组差异均有显著性意义(P<0.01)且大体上呈随感染天数增加表达增高的趋势.结论:在实验性HSK中存在基质金属蛋白酶mRNA的表达且MMP-2,MMP-9的mRNA高表达参与了角膜溃疡、角膜新生血管的形成等病变的发生.
作者:曹婷;邢怡桥;杨燕宁;彭坤 刊期: 2004年第04期
目的:了解左旋-精氨酸(L-arginine)对糖尿病(DM)鼠肾脏的影响并初步探讨其机制.方法:将实验大鼠分3组,正常对照组(A组)8只;DM组(B组)8只;DM 4周后+0.5%L-arginine组(C组)8只.观察8周.结果:第1周末开始,B、C组Ccr和UAE较A组明显升高,B、C组之间无显著差异;尿NO2-/NO3-第1,2周B、C较A组明显升高,B、C组之间无显著差异,第8周B、C组较A组降低,但C组较B组升高.第8周末肾脏病理变化为,B组肾小球系膜区增宽,肾小球毛细血管基底膜弥漫性增厚,系膜及基质PAS阳性物增多,但C组上述变化明显较B组轻.ABC染色Laminin阳性物可见B组肾小球系膜区弥漫性增宽,肾小管基底膜阳性物呈宽带状沉积,而C组肾小球系膜区稍宽,肾小管基底膜阳性物呈线状沉积,y2检验P<0.05.B、C组肾皮质NO2-/NO3-与PAS阳性物灰度值呈直线正相关.结论:糖尿病肾病进程中内源性NO表现为初期的升高到发展中的下降趋势.内源性NO生成增多是导致糖尿病肾病早期肾小球高灌注、高滤过的重要原因之一,在糖尿病肾病发展中补充小剂量L-arginine能减轻肾小球基底膜的增厚和基质的增生,延缓肾小球硬化,对肾脏起保护作用.
作者:程晖;贾汝汉 刊期: 2004年第04期