姜黎;任江华;曹茂银
目的:研究苦参碱(matrine,Mat)诱导血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)作用的小鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblast,CFB)凋亡及相关调控蛋白表达的影响.方法:不同浓度苦参碱作用于体外培养AngⅡ作用的小鼠心肌成纤维细胞,利用倒置显微镜、PI/Hoechst 33342双染结合荧光显微镜技术观察细胞形态;流式细胞术检测其凋亡率、细胞周期及凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达的改变;采用Western Blotting检测Caspase-3蛋白的表达.结果:不同浓度Mat处理Ang Ⅱ作用的小鼠心肌成纤维细胞24 h,可见到染色质浓缩、边集、碎裂;凋亡率随浓度的升高而升高;细胞周期分析显示G1升高,S期下降,G2/M期无明显变化;,Bcl-2的表达量减少;Bax的表达量增加且呈剂量效应;Western Blotting检测显示Caspase-3活化.结论:Mat诱导AngⅡ作用的小鼠心肌成纤维细胞凋亡且呈剂量效应,其机制可能与降低Bcl-2、升高Bax、增强Caspas-3活性有关.
作者:周成慧;欧阳静萍;周艳芳;胡迎春;杨海鹭;徐怡 刊期: 2004年第04期
目的:将蓝舌病毒湖北株(BTV-HbC)做为一种具有潜在性治疗效能的生物制剂来治疗MA782肿瘤.方法:首先用BTV-HbC病毒感染体外培养的MA782细胞.同时将MA782细胞接种于小鼠皮下,复制出了小鼠荷MA782肿瘤的动物模型,然后将BTV-HbC病毒直接进行瘤体注射.结果:小鼠荷MA782肿瘤的明显退缩,和体外处理的结果是一致的.结论:证实了BTV-HbC病毒是一种有效的治疗恶性肿瘤的新型生物制剂.
作者:罗翔;董长垣;郭淑芳;邓靖;卢莉莉;黎莉 刊期: 2004年第04期
目的:探讨生存素(survivin,SVV)在子宫腺肌瘤在位内膜、异位内膜的表达,研究以SVV为核心的细胞凋亡、血管生成机制、患者孕产次与子宫腺肌瘤发病的相关性及其作用.方法:采用免疫组化法检测子宫腺肌瘤在位内膜、异位内膜及正常对照组内膜中SVV,endoglin蛋白表达,探讨其与研究对象孕产次间的关系.结果:子宫腺肌瘤异位内膜组SVV蛋白的表达和微血管密度显著高于在位内膜组和异位内膜组(P<0.01),SVV蛋白的表达和微血管密度均与流产次数呈正相关,且增殖期宫内膜、分泌期宫内膜SVV蛋白表达与endoglin蛋白表达呈显著相关性.结论:SVV的过度表达可能参与了子宫腺肌瘤的发病过程,以其为核心的细胞凋亡和血管生成机制与子宫腺肌瘤的发病关系密切.
作者:刘萍;罗新;史玉霞;吴秀枝 刊期: 2004年第04期
目的:评估肾通注射液对急性肾衰竭(简称ARF)家兔肾血流量的影响,并初步探讨其机制.方法:健康雄性大耳白兔40只,随机分为正常组、模型组、肾通治疗组和丹参治疗组(每组各10只).后3组用50%甘油生理盐水15 ml·kg-1在双后下肢肌肉注射,分别于造模后第24,48和72 h观察各组肾血流动力学、肾功能及血、肾局部内皮素(ET-1)、一氧化氮(NO)的变化.结果:与正常组相比,模型组肾血流量(RBF)和内生肌酐清除率(Ccr)明显降低(P<0.01),血浆和肾局部ET-1上升,NO下降,有显著性差异(P<0.01).肾通组RBF和Ccr明显高于模型组,肾局部ET-1明显降低,同时NO上升.肾通组与丹参组相比,疗效无明显差别(P>0.05).结论:肾通注射液可增加实验性ARF家兔的肾脏血液供应,改善微循环,提高RBF和Ccr,保护肾功能,调节ET-1和NO水平,而ET-1和NO水平改变是肾通注射液的重要作用机制之一.
作者:夏明珠;吕金雷;宋恩峰;吴克华;杨益寿 刊期: 2004年第04期
目的:观察全反式视黄酸点眼对兔角膜新生血管的影响.方法:32只日本大白兔随机分成A、B、C、D 4组,每组8只兔(8只眼),制成角膜碱烧伤模型.治疗组(A、B、C组)伤后即分别滴用15,30及60 mg·L-1的全反式视黄酸滴眼,对照组(D组)滴赋形剂,裂隙灯观察角膜新生血管的生长情况并计算伤后第6,9,12,15,18,21,25,28 d的角膜新生血管面积.连续用药28 d后处死兔并取下角膜做组织病理学检查.结果:伤后B组和C组角膜新生血管开始出现的时间明显较A组和D组延长,且角膜新生血管生长面积均明显较A组和D组减少,组织病理学检查显示CNV面积与角膜后膜和炎性细胞数均有明显相关性.结论:局部应用全反式视黄酸对由碱烧伤引起的兔角膜新生血管的生长有明显的抑制作用.
作者:姚骏;艾明;蔡明高;邢怡桥;郑红梅 刊期: 2004年第04期
目的:探讨食管鳞癌中Smad4、TβRⅡ及P21wafl的表达特点及其意义.方法:80例食管鳞癌样本常规石蜡切片行Smad4、TβR Ⅱ、P21wafl免疫组织化学染色.结果:Smad4、TβRⅡ、P21wafl的表达在食管癌组织学分级Ⅰ级、癌细胞未浸至深肌层和淋巴结无转移的组织样本中阳性率明显高于组织学分级Ⅲ级、癌细胞浸至深肌层或浆膜层和淋巴结有转移的组织样本,差异均有显著或极显著意义(P<0.05).结论:Smad4、TβRⅡ、P21wafl与食管鳞癌的发生发展及生物学行为有关,随病理分期、细胞分级增高阳性表达率降低.
作者:李本辉;毛志福;吴智勇;王志强 刊期: 2004年第04期
目的:回顾39例大面积脑梗塞的临床特点和处理方法.方法:回顾性分析39例急性大面积脑梗塞的临床诊治过程.结果:39例存活25例,存活率64.1%,均遗留偏侧瘫痪,生活不能自理,其中5例呈植物生存状态;死亡14例.结论:早期诊断,及时选择适宜的治疗方案是对大面积脑梗塞患者抢救的关键.
作者:袁波;童晓欣;张海鸥;邹文;吴军;张季声 刊期: 2004年第04期
目的:旨在观察通络益气法治疗急性脑梗塞的临床疗效,并初步探讨其作用机制.方法:本文选择急性脑梗塞患者62例,随机分为通络益气组和活血化瘀组,治疗前后分别测定患者血浆内皮素(ET)、一氧化氮(NO)及血液流变学指标,并与正常健康人群作对照研究.结果:急性脑梗塞发作时,患者血浆ET、NO水平明显升高(P<0.01),治疗后ET下降,NO升高,ET/NO下降,而通络益气组的下降程度明显高于活血化瘀组(P<0.01),同时患者全血粘度、血浆粘度及血小板聚集率等均较治疗前下降(P<0.01).结论:通络益气法治疗急性脑梗塞的主要作用机制在于改善血管内皮功能,抑制ET的生成,解除血管痉挛,降低血粘度,增加脑血流量,保护缺血性脑组织的损伤.
作者:王晓红;崔华 刊期: 2004年第04期
目的:探讨二乙酰基莲心碱(Diacetyl-linesinine)对家兔心室肌细胞膜钠、钙离子通道的影响.方法:选取10只体重1.5~2.0 kg的健康新西兰大耳白兔,酶解法分离单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术观察10,30,100 μmol·L-1的二乙酰基莲心碱对心室肌细胞膜钠通道和钙通道的作用.结果:二乙酰基莲心碱浓度依赖性减少钠电流和L-型钙电流,10,30,100μmol·L-1的二乙酰基莲心碱可分别使峰值钠电流降低40.7%,78.4%和89.4%;使峰值L-型钙电流降低56.6%,65.7%和73.6%.另外,二乙酰基莲心碱可使钠通道灭活曲线左移,并可减慢钠通道灭活后的恢复过程.结论:二乙酰基莲心碱对钠电流及L-型钙电流具有浓度依赖性阻滞作用,并可作用于钠通道的失活态,这些可以部分解释其抗心律失常作用机制.
作者:曹锋;黄从新;江洪;王腾;李夏 刊期: 2004年第04期
目的:研究热休克蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达与膀胱移行细胞癌临床及病理的关系.方法:采用免疫组织化学技术检测HSP70、HSP90在30例膀胱移行细胞癌和15例膀胱良性病变或正常组织中的表达情况.结果:HSP70和HSP90在膀胱移行细胞癌中阳性表达率分别为100%(30/30)和96.7%(29/30).HSPs在膀胱移行细胞癌中的阳性表达率显著高于良性病变或正常组织(P<0.01),而且HSP70和HSP90在膀胱移行细胞癌中的表达阳性强度随肿瘤分化程度的降低而升高(P<0.01).结论:不同类型的HSPs表达阳性强度与膀胱移行细胞癌的分化程度密切相关.测定HSPs在膀胱移行细胞癌中的表达,可以判定其分化程度,为临床判断预后及疗效,制定治疗方案提供了重要参考指标.
作者:葛名欢;张孝斌;张杰;程帆 刊期: 2004年第04期
目的:通过检测人不同乳腺瘤细胞株的端粒酶活性及其2 Gy的存活分数(SF2)的相关性,探讨端粒酶活性是否能成为检测肿瘤细胞放射敏感性的一个指标.方法:8株人不同肿瘤细胞株(Hep-2、Hela、U251、ZR-75-30、MCF-7、MDA-MB-435S、T-47-D、F539-1590)在指数增长期留取细胞,然后分别用TRAP-ELISA检测其端粒酶活性,克隆形成实验检测其放射敏感性参数SF2.结果:8株人乳腺癌细胞株端粒酶活性各不相同(P<0.01),其中ZR-75-30端粒酶活性检测呈阴性,余7株细胞端粒酶活性检测呈阳性,SF2亦不相同(P<0.01),但端粒酶活性与SF2之间无明显的直线相关关系(P=0.341).结论:8株人不同肿瘤细胞株的端粒酶活性及其放射敏感性各不相同,但其端粒酶活性不能成为检测其放射敏感性的指标.
作者:潘东风;周福祥;谢丛华;刘诗权;彭纲;戴静;骆志国;肖创映;周云峰 刊期: 2004年第04期
目的:探讨外伤性脑室内出血的发病机制、治疗及预后.方法:对39例外伤性脑室内出血患者治疗经过及临床资料进行了观察和分析.结果:伤后半年随访,根据GOS预后评分标准,愈后良好19例,中残6例,重残及植物状态5例,死亡9例.结论:受伤瞬间脑室压力改变引起室管膜下血管破裂出血,以及附近脑实质内血管破裂出血,是外伤性脑室内出血的主要原因;双侧侧脑室尿激酶+生理盐水冲洗、亚低温治疗及高氧液治疗是外伤性脑室内出血治疗的积极有效措施;患者的年龄、入院时意识、脑室内积血的及时排出、并发症是影响预后的主要因素.
作者:楚胜华;袁先厚;陈卫国;江普查;郭国炳 刊期: 2004年第04期
目的:探讨宫内发育迟缓(IUGR)幼鼠是否出现中枢神经系统功能障碍及其可能的机制.方法:SD雌性大鼠随机分为对照组和模型组,每组12只.模型组于妊娠第5~20 d,采用被动吸烟法建立大鼠胎儿IUGR模型.根据IUGR诊断标准,将幼鼠分为IUGR组与对照组.称量1,7,14,21,30日龄幼鼠脑组织重量.于23日龄开始连续6 d Morris水迷宫试验,29日龄开始消极回避试验,测试幼鼠的学习记忆能力.采用Western Blotting技术及RT-PCR技术检测经过学习记忆测试后30日龄幼鼠海马NMDA受体NR1亚基蛋白及mRNA表达情况.结果:①各日龄IUGR组幼鼠脑组织重量均低于对照组,差异有显著性(P<0.05).②Morris水迷宫试验中,训练第2~6 d IUGR组幼鼠平台潜伏期均高于对照组,差异有显著性(P<0.005).③消极回避试验中,IUGR组幼鼠所需电击次数为(7.8±1.2)次,明显高于对照组(P<0.001).24 h后保持潜伏期为(238.2士11.5)s,明显低于对照组(P<0.001).④IUGR组幼鼠海马NMDA受体NR1亚基蛋白相对表达量为0.377 7±0.076 7,明显低于对照组(P<0.001);NR1亚基mRNA相对表达量为0.246 6±0.060 8,明显低于对照组(P<0.001).结论:①IUGR幼鼠可出现脑发育障碍及学习记忆能力下降.②NMDA受体NR1亚基表达下降可能是IUGR幼鼠中枢神经系统功能障碍的重要机制之一.
作者:周雯慧;周春;张元珍;王燕 刊期: 2004年第04期
目的:分别使用布法罗大鼠肝细胞(buffalo rats liver,BRL)条件培养基或鼠胚成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast,MEF)饲养层体外培养,比较不同培养条件对胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)分化为心肌细胞的影响.方法:用BRL条件培养基或MEF饲养层抑制ESC分化并保持其增殖,以维甲酸(retinoic acid,RA)、二甲基亚砜(DMSO)、转化生长因子β1(TGF-β1)、激活素-A(activin-A)为分化诱导剂,组合成6种分化培养基,采用悬滴、悬浮、贴壁三步法诱导ESC分化为心肌细胞,比较各组分化比率.结果:BRL及MEF饲养层两种条件均能促进ESC增殖,6种分化条件均能使ESC分化为心肌细胞;其中以BRL条件培养基培养,TGF-β1(2ng·ml-1)、activin-A(20 ng·ml-1)及20%胎牛血清(fetus calf serium,FCS)组成的分化培养基可以使(92.8±2.2)%的ESC分化为心肌细胞,分化比率显著高于其它各组(P<0.01).结论:以BRL条件培养基培养,TGF-β1、activin-A细胞因子组合是一种理想的ESC体外分化体系.
作者:钱海燕;李庚山;徐红新;吕菁君;蒋雯;王晶 刊期: 2004年第04期
目的:探讨侧脑室注射催产素(oxytocin,OT)对大鼠左背侧海马CA1神经元诱发放电的影响以及OT与阿片受体之间可能的相互作用.方法:应用细胞外记录单位放电技术,通过电刺激坐骨神经诱导神经元诱发放电.结果:侧脑室分别注射1,10和100ng·(5μl)-1OT使海马CA1神经元诱发放电频率明显降低,剂量依赖关系明显,OT对CA1神经元诱发放电的抑制作用可被侧脑室预先注射催产素受体拮抗剂d(CH2)5-OVT 200ng·(2.5μl)-1所阻断;侧脑室注射纳洛酮1μg·(2.5 μ1)-1可明显减弱OT 10 ng·(5 μl)-1的作用.结论:OT通过激活OT受体可抑制海马CA1神经元对外周传入电信号的反应,中枢内阿片受体在其中也起着重要作用.
作者:陈静芳;胡祁生;胡胜娣;邹祖玉;王海梅 刊期: 2004年第04期
目的:探讨Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)所致的角膜炎中基质金属蛋白酶(MMPs)mRNA的表达.方法:雌性BalB/c小鼠眼角膜接种HSV-1(KOS株)以诱发单纯疱疹性角膜炎(HSK).收集正常角膜及感染后第2,7,14 d的感染角膜,应用RT-PCR技术检测基质金属蛋白酶-2,基质金属蛋白酶-9(MMP-2,MMP-9)的mRNA表达.结果:除正常角膜MMP-9 mRNA为阴性表达其他各组均获得阳性目的片断.感染后第2 d MMP-2 mRNA表达较正常组差异没有显著性(P>0.05),感染后第7 d MMP-9 mRNA表达与第2 d的表达差异没有显著性(P>0.05),其他各组差异均有显著性意义(P<0.01)且大体上呈随感染天数增加表达增高的趋势.结论:在实验性HSK中存在基质金属蛋白酶mRNA的表达且MMP-2,MMP-9的mRNA高表达参与了角膜溃疡、角膜新生血管的形成等病变的发生.
作者:曹婷;邢怡桥;杨燕宁;彭坤 刊期: 2004年第04期
目的:观察ICR小鼠胚胎及出生后的睾丸内生殖细胞在不同阶段的发育情况,了解雄性生殖细胞分化、发育和成熟的过程.方法:采用半薄切片甲苯胺蓝染色法,对雄性胚胎第13,16,18 d和出生后第1,3,7,10,15,19d、4,6周及成年(8周)睾丸生殖细胞进行观察.结果:原始生殖细胞向精原细胞的演化经历了一个分散-居中-分散靠边的过程.出生后第7 d,支持细胞达到一个增殖高峰;出生后第10 d,原始生殖细胞出现一个增殖高峰;出生后第10 d,间质细胞达到一个增殖高峰;出生后第15 d,出现初级精母细胞;出生后第4周,产生精子细胞,同时间质细胞出现另一个增殖高峰并保持在一个高水平;出生后第6周,开始有精子出现.结论:当精原细胞大量增殖和生成精子细胞与精子时,生殖细胞可能需间质细胞提供大量激素相辅助;支持细胞在支持生精细胞、促进生精细胞转位及精子生成过程中起了一定作用.
作者:卢晅;周新华 刊期: 2004年第04期
目的:探讨一种修复关节软骨的有效途径.方法:自制藻酸钙载体复合软骨细胞置入DMEM培养基中,实验组加入胰岛素样生长因子Ⅰ(insulin-like growthfactor-Ⅰ,IGF-Ⅰ),体外培养4周.结果:两周内开始出现软骨样物质,以后体积增大,数量增多,质地变硬,实验组与对照组差别显著.结论:藻酸钙与软骨细胞具有良好的相容性,软骨细胞在藻酸钙载体中保持了原有特性和成软骨能力,IGF-Ⅰ能够促进软骨细胞的分化增殖,并维持软骨细胞的原有表型.
作者:杨万波;顾洁夫;徐振华;张蔚英;刘军 刊期: 2004年第04期
目的:比较3种桩核系统修复喇叭形根管的牙根修复后的抗折性及其折断模式.方法:30个完整的上颌中切牙,在根管治疗后,沿釉牙骨质界弧形顶点冠方2 mm切除牙冠,将根管上1/3敞开形成喇叭形根管,样本随机分成3组:A组,铸造桩核金属全冠修复;B组,玻璃纤维树脂核全冠修复;C组,成品不锈钢平行螺纹桩树脂核全冠修复.样本固定于MTS810测试机上,与牙体长轴呈135°加载,测试折断强度并观察折断模式.结果采用方差分析.结果:铸造桩核修复抗折强度高[(763.86±86.38)N],其次是成品螺纹桩树脂核修复[(619.91士118.89)N],玻璃纤维树脂核组小[(405.54±111.86)N],统计学分析差异具有显著性.结论:铸造桩核树脂核修复后抗折强度高,玻璃纤维树脂核修复低,但后者折断模式有利于重新修复,而前者通常无法再行修复.
作者:郭泽清;程祥荣;黄翠;陈磊;周蕾 刊期: 2004年第04期
目的:观察信号分子Shh及其受体Ptc1、Ptc2在小鼠下颌切牙牙胚形态发育晚期的基因表达,以探讨Shh信号路径在细胞分化中的作用.方法:制备昆明小鼠下颌切牙形态发育晚期标本(E18.5~P 1.5),常规HE染色观察组织形态.以Shh、Ptc1、Ptc2 cDNA为模板体外转录合成地高辛标记的cRNA探针,原位杂交法分析Shh、Ptc1、Ptc2 mRNA在牙胚中的表达与分布.结果:Shh与Ptc2 mRNA表达方式相近,在钟状期切牙唇侧的前成釉细胞和中间层细胞呈阳性表达.Ptc1 mRNA在钟状期切牙唇侧的前成釉细胞、中间层细胞及成牙本质细胞均呈阳性表达.结论:在切牙牙胚形态发育晚期,Shh可能通过自分泌途径和旁分泌途径,参与了唇侧成釉细胞和成牙本质细胞分化.
作者:张露;孙志军;王志峰;华方;张旗;陈智 刊期: 2004年第04期