喻晓
目的体外实验探讨人类巨细胞病毒(HCMV)与细胞表面硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(HSPGs)结合后对人类白细胞抗原Ⅰ(HLA-Ⅰ)表达的影响.方法流式细胞仪检测不同干预条件细胞表面HLA-Ⅰ的表达.免疫组织化学法检测不同干预条件细胞内HCMV pp65蛋白的表达.结果流式细胞仪检测的结果表明人胚肺成纤维细胞(HELF)表面HLA-Ⅰ的表达HCMV感染组低于对照组;紫外线灭活HCMV(UvHCMV)组高于对照组;肝素和氯酸钠干预HELF细胞后再用UV-HCMV感染的HELF细胞,其表面HLA-Ⅰ的表达低于UV-HCMV组.免疫组织化学法检测结果显示:HCMV感染HELF 24 h,HCMV pp65蛋白呈阳性表达;UV-HCMV感染HELF 24 h,HCMV pp65蛋白呈阴性表达.结论 HSPGs可能参与影响HLA-Ⅰ在HCMV感染的HELF细胞表面上的表达,对HCMV逃避宿主的免疫监视起间接调节作用.
作者:何超蔓;闻良珍 刊期: 2004年第01期
目的探讨体重指数(BMI)正常的多囊卵巢综合征(PCOS)与胰岛素抵抗(IR)之间的关系.方法 对53例PCOS患者按BMI分为正常体重PCOS组(PCOS Ⅰ组,BMI<24 kg/m2)31例与超重/肥胖PCOS组(P-COSⅡ组,BMI≥24 kg/m2)22例,同时选取BMI正常的非PCOS妇女30例为对照组,采集静脉血检测空腹血清胰岛素(FINS)和空腹血糖(FPG),稳态模式评估法(HOMA)的胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)评价胰岛素抵抗程度.结果①PCOS Ⅰ组FINS、黄体生成素(LH)、睾酮(T)水平及HOMA-IR值高于对照组,差异有极显著性意义(P<0.01);②PCOSⅡ组FINS水平和HOMA-IR值高于PCOS Ⅰ组,差异有极显著性意义(P<0.01);③LH水平和BMI与HOMA-IR值显著相关,但前两者与HOMA-IR不存在交互影响(均P>0.05);IR在PCOS患者中的暴露率显著高于对照组.结论 BMI正常的PCOS患者存在IR;肥胖可加重PCOS的高胰岛素血症和IR;IR为PCOS发病的独立重要危险因素.
作者:李旻;邱红玉;孙永玉;李红发 刊期: 2004年第01期
目的研究错配修复基因hMLH1和hMSH2在不同肾组织中的表达水平及其对肾癌预后的预测.方法 采用免疫组织化学方法检测71例肾癌组织及其癌周正常组织,31例肾良性病变组织石蜡标本中hMLH1、hMSH2的表达水平,同时收集所有标本的详细病理学资料,将蛋白表达水平与病理结果进行对比.结果hMLH1和hMSH2的表达水平在肾良性病变中均明显高于癌组织和癌周正常组织,在高分化肾癌中均明显高于低分化肾癌,1年内无复发组显著高于1年内复发组;hMSH2在无转移组中的表达显著高于有转移组,而hMLH1在有无转移组的表达差异无显著性意义.结论 hMLH1、hMSH2两种修复蛋白在肾癌和肾良性病变组织中的表达水平有明显差异,且与肿瘤分化程度和肿瘤复发密切相关;hMSH2与肾癌转移有关,hMLH1与转移的关系不明显.hMSH2和hMLH1蛋白表达水平对肾癌预后有一定的预测作用.
作者:徐伟;刘成倍;王祥林;庞桂建;毕新生 刊期: 2004年第01期
目的了解重症病毒性肝炎患者肝组织Ⅰ型前胶原mRNA、血小板衍生生长因子-1(PDGF-1)mRNA及Ⅰ、Ⅳ型胶原蛋白的表达情况,探讨重症病毒性肝炎纤维化发生的分子机制.方法将重症病毒性肝炎肝组织标本20例,非肝病患者肝组织6例,用原位杂交法检测肝组织Ⅰ型前胶原和PDGf-1 mRNA的表达,用免疫组化法观察肝组织Ⅰ、Ⅳ型胶原蛋白的沉积、分布和含量,用天狼红染色观察肝组织总的胶原含量.结果与正常肝组织相比,重症病毒性肝炎患者的肝组织Ⅰ型前胶原和PDGF-1 mRNA的表达显著增加,Ⅰ、Ⅳ型胶原蛋白大量沉积.PDGF-1mRNA的表达与Ⅰ型前胶原mRNA的表达呈显著正相关,和总的胶原含量,Ⅰ、Ⅳ型胶原蛋白的表达也呈显著正相关,Ⅰ型前胶原mRNA的表达和Ⅰ型胶原蛋白的表达呈显著正相关.结论 PDGF-1 mRNA与Ⅰ型前胶原mRNA表达的增加是导致肝组织胶原蛋白合成增加,重症病毒性肝炎发展成肝纤维化乃至肝硬化的原因之一.
作者:张志安;黄元成;石淑仙 刊期: 2004年第01期
目的评价羟基喜树碱对人肝癌BEL-7402细胞的细胞毒性.方法将羟基喜树碱以不同终浓度作用于人肝癌BEL-7402细胞.用MTT比色法观察其细胞毒性,荧光显微镜、透射电镜检测凋亡细胞的形态改变并记数凋亡指数,流式细胞仪定量分析细胞凋亡率.结果羟基喜树碱以剂量依赖的方式抑制BEL-7402细胞的生长;荧光显微镜和透射电镜观察到细胞皱缩、核质浓缩、核碎裂、细胞起泡以及凋亡小体形成等凋亡特征性的形态学改变;流式细胞仪直方图上可见亚二倍体峰;以浓度为12.5、25、50、100、200μg/ml的羟基喜树碱处理48 h后,细胞凋亡率分别为(14.68±2.17)%、(21.24±3.76)%、(31 54±4.58)%、(40.21±5.26)%和(48.35±6.70)%,与对照组(2.09±0.42)%比较差异均有极显著性意义(P<0.01).结论羟基喜树碱既能抑制人肝癌BEL-7402细胞增殖,又能诱导其凋亡,显示出较强的细胞毒性.
作者:李军尧;唐忠志 刊期: 2004年第01期
目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、热休克蛋白70(HSP70)在脑出血灶周脑组织中的表达及其意义.方法应用免疫组织化学技术检测37例脑出血灶周脑组织中HIF-lα、HSP70的表达.结果 37例脑出血灶周脑组织中HIF-1α阳性率为40.5%,其中出血量>60 ml者HIF-lα阳性率为88.9%,与其他出血量者(30~45 m1,46~60 ml比较差异有显著性意义(P<0.05).HIF-1α表达与血肿作用时间明显相关,随着出血后手术时间的推迟而增加(P<0.05).HIF-1α与HSP70的表达呈正相关(n=15,r=0.82,P<0.01).结论脑出血后HIF-1α的表达与出血量及血肿作用时间相关,为判断脑出血灶周缺血半暗带的存在提供了依据;HSP70有神经细胞保护及抑制凋亡的作用.
作者:唐洲平;郭守刚;彭岚;朱遂强;方思羽;张苏明 刊期: 2004年第01期
目的从细胞凋亡的角度探讨老年慢性特发性血小板减少性紫癜(ITP)的发病机制.方法用流式细胞仪检测了8例老年人慢性ITP患者治疗前后T淋巴细胞(CD3+)、B淋巴细胞(CD19+)Fas蛋白和Fas-L蛋白的表达.结果治疗前T淋巴细胞的Fas蛋白表达明显低于正常(P<0.01),Fas-L蛋白表达明显高于正常(P<0.01);B淋巴细胞的Fas和Fas-L蛋白表达与正常对照相比差异无显著性意义.经治疗血小板恢复正常的患者T淋巴细胞的Fas蛋白表达上调和Fas-L蛋白表达下调,与治疗前相比差异有极显著性意义,与正常对照相比差异无显著性意义.结论治疗前老年慢性ITP患者体内Fas/Fas-L途径介导的T淋巴细胞凋亡异常,经治疗后T淋巴细胞的Fas蛋白表达上调,有助于抗原活化的B淋巴细胞的凋亡.
作者:高清平;杨年兰;陈友华;敖绪斌;陈伦华 刊期: 2004年第01期
目的研究铝对大鼠海马CA3区诱发电位的抑制作用与胆碱能、GABA系统的关系.方法实验用SD大鼠68只,单个脉冲刺激穿通纤维(PP),记录海马CA3区诱发的群体峰电位(PS).待PS稳定后,向海马cA3区微量注射药物,观察铝对海马CA3区诱发电位的影响及某些中枢递质对铝抑制PS效应的影响.结果①海马CA3区局部微量给予0.5 mol/L AlCl3,记录的PS幅值1 min时下降幅度达峰值,为给药前的(33.8士11.0)%(n=6).AlCl3的这种抑制作用持续120 min.②预先CA3区微量注入1×10-9 mol/L Tacrine(胆碱酯酶抑制剂),1 min后再注入AlCl3,结果1~30 min内拮抗了AlCl3抑制PS幅值的效应(n=8),给予1×10-8 mol/L Tacrine(n=6),则拮抗作用延长至60 min,而给予1×10-10 mol/L Tacrine(n=6),拮抗作用在3~5 min弱于1×10-9mol/L组.③海马cA3区先给予1×10-3mol/L Bicuculline,1 min后再注入AlCl3,在1~20 min内Bicuculline部分减弱了AlCl3的作用(n=9).结论一定浓度的铝可抑制海马CA3区的诱发PS幅值;Tacrine能拮抗这种作用,且可能与剂量有关,提示铝的抑制作用可能与损害了ACh递质系统有关;应用GABAA受体阻断剂Bicuculline也使铝对PS抑制效应减弱,表明铝对PS的抑制也可能部分通过GABA途径起作用.
作者:胡剑峰;肖鸿美;李艾 刊期: 2004年第01期
目的研究甲基化抑制剂5-氮-2′-脱氧胞苷对胆管癌细胞株生长周期及凋亡的影响,初步探讨其应用于临床治疗的可能性.方法应用MTT法检测不同浓度的5-氮-2′-脱氧胞苷对胆管癌细胞株QBC939存活率的影响,应用流式细胞术检测5-氮-2′-脱氧胞苷对QBC939细胞生长周期及凋亡率的影响.结果 5-氮-2′-脱氧胞苷在浓度为0.5μmol/L时即可以抑制胆管癌细胞QBC939的增殖,24 h半数致死量为5.0 μmo1/L,细胞周期中处于G0/G1期的细胞比例增多,凋亡的发生率增高,而且以上作用与药物浓度及作用时间在一定范围内呈正相关.结论 5-氮-2′-脱氧胞苷可能通过消除某些抑癌基因的启动子甲基化状态,使其重新表达而抑制胆管癌细胞的生长,并促进其凋亡.
作者:唐启彬;孙华文;邹声泉 刊期: 2004年第01期
目的介绍一种高灵敏度的DNA甲基化分析方法,即巢式甲基化特异性PCR法(nested-MSP,nMSP),探讨该方法佳应用条件,并用该法分析新鲜癌组织、石蜡包埋组织及肿瘤患者血清中p16基因启动子的甲基化状态.方法将基因组DNA变性成为单链,用亚硫酸氢盐修饰单链DNA,所有未甲基化的胞嘧啶被转变为尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶则不变.设计针对甲基化和非甲基化等位基因的特异引物,进行巢式PCR扩增,后经凝胶电泳检测目的片段.结果在3种类型的标本中都检测出了p16基因启动子的甲基化,比普通的甲基化特异性PCR法具有更高的灵敏度.结论巢式甲基化特异性PCR是一种灵敏度高、特异性强的甲基化检测方法,可广泛应用于不同类型标本基因启动子甲基化分析.
作者:姚群峰;康新江;郝巧玲;唐朝晖;周宜开 刊期: 2004年第01期
目的探讨经鼻蝶入路显微手术脑脊液鼻漏的预防和修补方法.方法将改良经鼻蝶显微手术用于200例鞍区病变,其中150例为大或巨大垂体腺瘤,术前合并脑脊液鼻漏4例,1例外伤性脑脊液鼻漏,通过治疗观察并进行围手术期评价.结果发现脑脊液漏可在手术中和手术后出现,通过术中的预防措施及术后的及时处理可以得到治愈.结论经鼻蝶入路显微手术为鞍区病变术中和术后预防和修补脑脊液鼻漏的良好方法.
作者:董芳永;舒凯;万锋;雷霆;胡文安 刊期: 2004年第01期
目的比较2种工艺制备的补肾益气活血汤治疗小鼠胚胎着床障碍的疗效,评价工艺的合理性.方法将妊娠小鼠随机分成4组,从妊娠第1 d开始,传统组、改进组分别灌服不同工艺制备的补肾益气活血汤,模型组、正常组则灌服等量生理盐水,除正常组外,其余3组小鼠于第3、4 d每天皮下注射吲哚美辛溶液(44 mg/kg)2次,各组于第5d各取3只小鼠制作子宫切片,观察子宫内膜腺体上皮、间质及血管的组织形态和超微结构,于第8d,观察胚胎着床率和着床位点数.结果传统组组织形态与模型组相似,而改进组则与正常组相似;改进组胚胎着床率和着床位点数明显高于模型组(P<0.05),且胚胎着床率高于传统组.结论改进工艺制备的汤剂作用效果明显高于传统工艺制备的汤剂.
作者:徐丽君;龚萍;黄光英;陆付耳 刊期: 2004年第01期
目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIf-1α)反义寡核苷酸对乙型肝炎病毒x蛋白(HBx)诱导的人肝癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)表达的抑制作用.方法用编码HBx基因全长的pHA-HBx质粒转染肝癌HepG2细胞;Western Blot方法鉴定HBx基因的整合和表达;用转染后的细胞建立表达HBx的裸鼠人肝癌模型.实验组用HIF-la反义寡核苷酸作肿瘤组织内注射,对照组以相同体积的生理盐水作瘤体注射,观测不同时间点裸鼠肿瘤的生长状况.采用免疫组织化学染色方法检测肿瘤组织中HIF-1α、VEGF表达水平和微血管密度.结果 HBx基因成功整合入肝癌HepG2细胞基因组并表达;实验组经反义寡核苷酸处理后肿瘤体积和重量均低于对照组,两组间差异有显著性意义(P<0.05);实验组肿瘤组织中HIIF-1α表达下调;实验组肿瘤组织中VEGF表达为(21.6±6.7)%,低于对照组的(78.6±10.2)%(P<0.01),微血管密度为19.75±7.38,低于对照组的36.64士12.25(P<0.01).结论 HIIF-1α反义寡核苷酸肿瘤组织注射可以抑制肝癌组织中HBx诱导的VEGF表达,抑制表达HBx的肿瘤生长.
作者:李东华;陈孝平;张万广;王海平;裘法祖 刊期: 2004年第01期
目的体外研究氟、硒对人肝细胞DNA损伤的影响.方法体外培养的人肝细胞分别接触一定剂量的氟和(或)硒12 h后,用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测人肝细胞DNA的损伤率.结果氟组人肝细胞DNA损伤率明显高于对照组和氟+硒组(均为P<0.05),硒组DNA损伤率与对照组相比,差异无显著性意义(P>0.05).结论体外氟可导致人肝细胞DNA损伤,适量的硒对氟所致DNA损伤有一定的拮抗作用.
作者:夏涛;邓淑凯;王爱国;陈学敏 刊期: 2004年第01期
目的探讨氧化修饰的低密度脂蛋白(ox-LDL)是否诱导培养的平滑肌细胞表达血管细胞粘附分子1(VCAM-1).方法采用原位杂交和免疫组化的方法检测ox-LDL刺激后,原代培养小鼠主动脉中膜平滑肌细胞表达VCAM-1 mRNA和蛋白的情况.结果 ox-LDL作用后,平滑肌细胞VCAM-1 mRNA经原位杂交显色,细胞平均吸光度(A)值为0.200 5±0.019 0,与对照组(0.144 6±0.005 5)相比差异有极显著性意义(F=137.12,P<0.01).平滑肌细胞VCAM-1蛋白表达经免疫组化显色后,细胞平均吸光度值为0.129 5±0.024 0,较对照组(0.068 7士0.008 5)亦有所增加,方差分析显示差异有极显著性意义(F=94.58,P<0.01).结论 ox-LDL能够诱导动脉中膜平滑肌细胞表达高水平的VCAM-1 mRNA和蛋白,从而在动脉粥样硬化斑块形成过程中起重要作用.
作者:杨丽敏;瞿智玲;宗义强 刊期: 2004年第01期
目的探讨胚胎玻璃化冷冻技术的临床应用效果.方法运用玻璃化冷冻技术保存75例患者的397个胚胎,复苏13例69个胚胎,并根据患者的情况进行胚胎移植.结果 69个胚胎中,丢失3个,存活26个,存活率为39.4%.复苏后8例患者因胚胎质量差未移植,另外5例患者共移植了14个胚胎,其中1例获得单胎妊娠,分娩1名健康女婴.结论玻璃化冷冻技术简便、经济,并能够有效地冻存人类早期胚胎,可成为胚胎冷冻方法的另一个选择.
作者:王俊霞;朱桂金;魏玉兰 刊期: 2004年第01期
我院1990年~2002年共收治因肠石阻塞肠腔,导致完全或不完全肠梗阻4例,现报告如下.
作者:喻晓 刊期: 2004年第01期
目的探讨影响辅助生殖技术(ART)手术成功率的临床因素.方法回顾分析1994年到2002年2014个ART手术中,患者的年龄、病因、手术方式和获卵数对辅助生殖技术成功率的影响.结果①女性年龄是影响试管婴儿妊娠率的独立因素,随着年龄的增长,不仅获卵数和可移植的胚胎数下降,而且胚胎质量降低,导致妊娠率降低和流产率升高;②男性因素不孕和附睾或睾丸穿刺取精行卵母细胞内单精子注射手术的妊娠率较高,而原因不明不孕症的妊娠率较低,但都可能与年龄的影响有关;③获卵数超过30个,虽然患者年轻,妊娠率反而下降,其原因不明.结论女性年龄是影响ART手术成功率的重要因素,在比较分析其它因素时都必须首先排除年龄的影响.
作者:朱桂金;靳镭;章汉旺;刘群;李舟;魏玉兰 刊期: 2004年第01期
目的研究氯胺酮对小鼠吗啡戒断症状和脊髓星形胶质细胞活性的影响.方法昆明种小鼠30只,随机分为5组(n=6),A组:皮下剂量递增法给药建立吗啡依赖模型;B组:对照组,给予等容积的生理盐水;C、D、E3组:吗啡用药均同A组,后一次吗啡注射30 min后分别腹腔注射0、8、16 mg/kg氯胺酮.观察纳络酮催瘾后戒断症状的改变;用免疫组化方法测定各组脊髓星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫反应阳性产物的变化.结果与C组相比,D组可缓解吗啡戒断症状(P<0.05),而E组则明显缓解(P<0.01);D组和E组吗啡戒断所致的体重下降显著减轻(P<0.01).脊髓GFAP免疫反应阳性产物表达相对面积,A组与B组比较,D、E组与C组比较差异均无显著性意义(均为P>0.05).结论氯胺酮可缓解小鼠吗啡戒断症状,脊髓星形胶质细胞GFAP活性可能未参与介导吗啡依赖和戒断反应.
作者:项红兵;田玉科;孙怡 刊期: 2004年第01期
目的探讨老年患者机械瓣膜替换术后合理抗凝治疗.方法将129例患者分为2组,A组年龄≥65岁(30例),B组年龄<65岁(99例),随访2~79个月,比较不同年龄组在不同抗凝强度下血栓栓塞和出血发生率,观察抗凝效果.结果随访期间共发生与抗凝有关的出血16例,血栓栓塞6例,其中A组分别为4例(13.3%)和2例(6.7%),B组12例(12.1%)和4例(4.0%).死亡4例(3.1%),A组1例(3.3%),B组3例(3.0%).在同一抗凝水平下,A、B两组血栓栓塞和出血发生率差异无显著性意义,抗凝治疗期间国际标准化比值(INR)长时间低于1.65或高于2.50者,血栓栓塞和出血发生率高于INR 1.65~2.50水平者.结论老年患者机械瓣膜替换术后维持INR为1.65~2.50,可有效减少抗凝并发症.
作者:郑向阳;杜心灵;张凯伦;胡志伟;罗军;蓝鸿均 刊期: 2004年第01期