学术投稿

幽门螺杆菌Lpp20真核表达重组体的构建及其表达鉴定

刘志杰;邱宏;周秀萍;李秀萍

关键词:幽门螺杆菌, 真核表达重组体, Lpp20
摘要:目的 构建含幽门螺杆菌(Hp)Lpp20基因的真核表达重组体,并鉴定其在Hela细胞中能否有效表达,为进一步开展Lpp20核酸疫苗与该蛋白的生物学功能的研究打下基础. 方法 抽提Hp标准菌株26695基因组DNA,应用聚合酶链式反应(PCR)技术从基因组DNA扩增Lpp20基因,经过一系列酶切、连接反应将其克隆人真核表达载体pcDNA3.1(+),转人大肠杆菌,筛选阳性克隆,通过PCR和酶切反应鉴定;用脂质体法将构建好的重组载体pcDNA3.1(+)- Lpp20转染Hela细胞,通过免疫细胞化学法及Western印迹法检测其在Hela细胞中表达的Lpp20蛋白. 结果 成功扩增出长约528bp的Lpp20基因,测序结果表明扩增出的Lpp20基因与HpLpp20序列一致,PCR和酶切鉴定结果证实Lpp20基因正确克隆人真核表达载体pcDNA3.1(+),并经免疫细胞化学法和Western印迹法检测到重组体可在Hela细胞中有效表达. 结论 成功构建了Lpp20基因的Hp真核表达重组体,并检测到其在Hela细胞中可表达出免疫反应性良好的蛋白,为进一步探索其免疫作用及生物学功能奠定了基础.
实用预防医学杂志相关文献
  • 尿路感染产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的检测及耐药性分析

    目的 探讨尿路感染患者中大肠埃希菌耐药性及产超广谱β-内酰胺酶的情况,为临床用药提供参考.方法 用半自动微生物分析仪和纸片扩散法(Kindy- Bauer法)检测大肠埃希菌及其对20种常用抗生素的耐药情况.采用纸片扩散法检测大肠埃希菌产ESBLs情况. 结果 2008年3月-2011年3月尿路感染住院患者尿标本中分离出的591株大肠埃希菌中有327株产ESBLs,检出率为55.33%,产ESBLs大肠埃希菌对青霉素类抗生素耐药率高达90%以上,对复方磺胺耐药率为84.71%,对头孢菌素类抗生素的耐药率为84.40%~98.78%,对喹诺酮类抗生素耐药率为67.89% ~68.81%,对氨基糖苷类耐药率为16.82%~60.86%.而不产ESBLs大肠埃希菌对青霉素类抗生索耐药率仅为39.77%~70.45%,对复方磺胺耐药率为64.02%,对头孢菌素类抗生素的耐药率为8.71%~37.88%,对喹诺酮类抗生素耐药率为40.53%~42.05%,对氨基糖苷类耐药率为7.95%~45.45%.产ESBLs大肠埃希菌对除呋喃妥因外的19种常见抗生素的耐药性显著高于不产ESBLs大肠埃希菌(P<0.05). 结论 湖南省人民医院尿路感染住院患者尿标本中分离出的大肠埃希菌对20种常用抗生素耐药的主要原因是产ESBLs.细菌耐药性监测对临床合理使用抗生素有重要指导意义.

    作者:吴智勇;陈玮;黄瑛 刊期: 2011年第09期

  • 微卡辅助治疗新涂阳肺结核疗效分析

    目的 观察和评价微卡联合常规化疗药物治疗新涂阳肺结核的疗效. 方法 302例新涂阳肺结核患者被随机分为治疗组和对照组,每组各151例,治疗组给予2HRZE/4H3R3加用微卡菌苗治疗6个月,对照组只用2HRZE/4H3R3治疗6个月,观察治疗后肺部病灶吸收率、痰菌阴转率、微卡治疗不良反应情况. 结果 治疗2、4、6月末时,治疗组病灶吸收率明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).治疗组和对照组2、3、5、6月末时,治疗组痰菌转阴率明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).接受微卡治疗无严重不良反应. 结论 微卡联合常规化疗药物治疗新涂阳肺结核病人可显著增强常规化疗效果,有助于病灶吸收好转、痰菌转阴,且有较好的安全性,可作为新涂阳肺结核的辅助治疗.

    作者:权彩风;陈冰;李曼丽 刊期: 2011年第09期

  • 复方苦参注射液对晚期非小细胞肺癌患者生活质量影响

    目的 探讨复方苦参注射液对晚期非小细胞肺癌患者生活质量影响. 方法 将唐山市人民医院2010年1月-2011年1月应用复方苦参注射液治疗的136例晚期非小细胞肺癌患者的临床资料进行回顾性分析,136例患者采用复方苦参注射液20 ml加入生理盐水250 ml中静脉滴注,每天1次,连用2周,每3周重复,共计3~9个治疗周期,根据WHO标准评价患者近期疗效,采用肺癌生活质量量表对患者生活质量进行评价. 结果 ①136例患者均可评价疗效,其中CR 0例,PR 6例(4.4%),SD27例(19.9%),PD 103例(75.7%).客观缓解率4.4%,疾病控制率24.3%.②治疗前后症状,功能状态和整体生活质量评分的均值改变(P<0.05). 结论 复方苦参注射液可以改善晚期非小细胞肺癌患者症状,提高生活质量.

    作者:王洪娟;王建华;杨俊泉;赵凯;李义慧;张爱静 刊期: 2011年第09期

  • 腹腔镜骶前神经切断术治疗子宫内膜异位症合并痛经35例的疗效观察

    目的 探讨腹腔镜骶前神经切断术治疗子宫内膜异位症合并痛经患者的临床疗效. 方法 选取2009年1-11月期间浏阳市妇幼保健院收治的子宫内膜异位症合并痛经患者72例,随机分成两组:观察组35例,接受腹腔镜骶前神经切断术;对照组37例,接受腹腔镜病灶切除术.所有患者均术后随访18个月经周期,现比较两组患者的手术疗效. 结果 观察组的手术时间、住院时间显著短于对照组,术中出血量显著少于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).观察组术后3、6、12、18个月的痛经缓解效果均显著优于对照组,两组比较差异有统计学意义(P均<0.05).结论 腹腔镜骶前神经切断术治疗子宫内膜异位症合并痛经具有恢复快、术中创伤小等优点,且疗效显著,值得临床上推广与应用.

    作者:罗国辉 刊期: 2011年第09期

  • 常德市2007-2009年新涂阳肺结核治疗队列分析

    目的 了解常德市2007-2009年新涂阳肺结核治疗转归情况,为肺结核的预防控制提供相应对策. 方法 收集常德市2007-2009年中国疾病预防控制信息系统等有关报表资料,按《中国结核病防治规划实施工作指南》等标准进行统计分析.结果 常德市2007 - 2009年7 866例登记新涂阳肺结核中,治疗2月末痰涂片阴转7471例,阴转率94.98%,3月末痰涂片阴转7 584例,阴转率96.41%,治愈7 112例,治愈率90.41%,完成疗程405例,完成疗程率5.15%,失败26例,失败率0.33%.总体治愈率90%.各年份间的治疗3月末痰涂片阴转情况、结核死亡率、非结核死亡率、治疗失败率和不良反应率差异均无统计学意义(P>0.01).各年份之间的治疗2月末痰涂片阴转情况不太相同,治愈率有所下降(X2= 10.77,P<0.01),而完成疗程率在上升(x2=63.57,P<0.01). 结论 通过建立一种有效的医生-病人-家庭-全社会参与长期有序的协作机制,大力开展健康教育.结核病防治是一项社会化的公共卫生服务工作,对新涂阳肺结核的治疗具有不间断性和长期性,要关注患者的治疗依从性[3].需要加强治疗中的督导管理,尤其是合并有其它疾病、有药品不良反应、在多地流动、经济贫困与文化滞后等患者的管理,还有耐药/难治性耐药病例的管理.在按照《工作指南》标准方案进行一线抗痨治疗、统一管理的前提下,可以根据患者体质、其它疾病、习惯、生活劳动环境等情况给予个性化的中西医辅助治疗.

    作者:扬小红;宋江林 刊期: 2011年第09期

  • 应用标准化效应指数评价中学生艾滋病健康教育模式研究

    目的 探索开展中学生HIWAIDS健康教育干预模式的效果. 方法 在深圳宝安区随机抽取8所中学学校,随机分为干预组和对照组(各4所),对干预组进行每月一次(共持续4个月)的HIV/AIDS宣传教育,对对照组采用由其自然发展,不作任何形式的干预.在干预前后对所有对象各进行一次不记名问卷调查,并以“标准化效应指数”方法评价健康教育干预效果. 结果 通过经验回顾与总结,提出了一套“引导+协助+自发型”互动式的自我可持续发展新模式”.通过为期4个月的干预,干预组艾滋病相关知识总知晓率为-73.76%,对照组为52.33%(P<0.01),除行为领域外,对中学生改变HIV/AIDS掌握程度有较明显效果,其标准化效应指数分别为0.84、1.95、-0.24和1.64,均属效果较大范围. 结论 采用标准化效应指数法进行中学生艾滋病健康教育模式效果评价研究是合理有效的.

    作者:吴泰顺;彭慧;陈兵;李苑;周小涛;詹志强;马智超;黄振宇 刊期: 2011年第09期

  • 双酚A与健康的关系

    双酚A(BPA)作为一种环境雌激素,广泛应用于日常生活的各个领域,而且其可通过多种途径(主要食物)进入人体.因此双酚A对人类健康的影响逐渐引起广泛关注和重视.目前,双酚A对生殖系统的研究较为广泛,过量暴露双酚A可引起雄性哺乳动物性腺发育不良,也会对雌性哺乳动物的卵巢和乳腺等造成严重危害;近一些新的研究发现双酚A对脑及行为的发育也有很大影响;双酚A对心血管疾病,2型糖尿病及肥胖等疾病的影响也有一些报道.我国对BPA的研究刚刚起步,本文对双酚A的代谢与暴露情况以及对人体健康影响的新观点和进展进行如下综述.

    作者:王丹妮;贾丽红 刊期: 2011年第09期

  • 异丙酚和异氟烷对肺癌根治术患者围术期血浆细胞因子的影响

    目的 探讨异丙酚和异氟烷麻醉对肺叶切除术肺癌患者围术期血浆细胞因子的影响. 方法 选择择期行肺叶切除术肺癌患者38例,随机分为异丙酚组和异氟烷组,每组19例.两组均于麻醉前(T0)、麻醉后切皮时(T1)、单肺通气60 min(T2)、膨肺后60 rain(T3)、术后1h(T4)、4 h(T5)、24 h(T6)采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清肿瘤坏死因子(TNF -α)、IL-6、IL-8、IL- 10的浓度. 结果 两组TNF -α、IL-6、IL-8、IL- 10浓度在单肺通气60 min时均明显上升,TNF-α、IL-6和IL-8浓度于术后1h达到高峰,IL- 10浓度于术后4h达到高峰.A组术后1、4、24h时间点IL- 10的水平均明显高于B组(P<0.05);B组单肺通气60 min至术后4h各时点的TNF -α、IL-6和IL-8浓度增加幅度均明显高于A组(P<0.05). 结论 异丙酚和异氟烷均能促进肺癌根治术患者产生致炎性和抗炎性细胞因子,且异丙酚较异氟烷有明显的抑制炎症作用.

    作者:邢翠燕;吴明毅 刊期: 2011年第09期

  • 中老年体检人群慢性病及指标异常流行病学分析

    目的 探讨中老年体检人群慢性病、指标异常检出情况及分布特征和相关的影响因素. 方法 选取中老年体检者资料9 226份.分析体检者高血压病、糖尿病、肥胖或体重超标、高血脂、心电图异常及脂肪肝的检出率,分析在不同性别年龄体检者慢性病发病及指标异常的发生情况及其构成. 结果 9 226名中老年体检者慢性病及指标异常检出率为74.33%,其中男性体检者检出率为70.24%,女性体检者检出率为78.35%,女性体检者慢性病及指标异常检出率高于男性体检者.45~65岁年龄组检出率为69.51%,65~岁年龄组体检者检出率为79.11%,45~65岁年龄组慢性病及指标异常检出率低于65~岁组.将性别及年龄纳为影响因素对6种慢性病及指标异常进行回归分析,结果显示:性别及年龄因素与6种慢性病及指标异常检出具有相关关系. 结论 中老年居民慢性病发病率较高,老年人是慢性病发病的主要群体,年龄偏大及女性因素能增加慢性病患病风险.

    作者:程翠;高敏;叶冬青 刊期: 2011年第09期

  • 依达拉奉联合复方麝香注射液治疗急性脑梗死96例疗效观察

    目的 观察依达拉奉联合复方麝香注射液治疗急性脑梗死的疗效. 方法 选择2008年1月-2010年12月医院收治的急性脑梗死患者96例,随机分为治疗组和对照组,在治疗前后对患者进行神经功能缺损评分和日常生活能力评价,统计分析不同处理对急性脑梗死疗效的差别. 结果 治疗2周后,治疗组神经功能缺损评分和日常生活能力改善均显著高于对照组(P<0.05),治疗后两组显效率和总有效率比较差异有统计学意义(P<0.05). 结论 依达拉奉联合复方麝香注射液可明显改善急性脑梗死患者神经功能评分和生活能力评分.

    作者:李忠杰 刊期: 2011年第09期

  • 肩锁关节脱位两种内固定手术方法的疗效分析

    目的 比较肩锁钩钢板与克氏针内固定治疗肩锁关节脱位的临床疗效. 方法回顾性分析比较锁骨钩钢板治疗肩锁关节脱位32例与克氏针张力带治疗28例的治疗效果及并发症. 结果60例经12~18个月随访,平均13个月.按照肩锁关节脱位评分系统标准,两组治疗优良率分别为100%和85.71%.经卡方检验,两组之间疗效差异有统计学意义(P<0.05),且锁骨钩钢板固定组在治疗效果及并发症发生率上明显优于克氏针组. 结论锁骨钩钢板治疗肩锁关节脱位具有固定确实,不损伤关节,可以早期功能锻炼等优点,值得推广.

    作者:王春利 刊期: 2011年第09期

  • 用Excel合成多批号试剂的质控图

    目的 探讨将多批号数据绘制到同张质控图上,以便能对较长时期的检验质控数据进行直观回顾性分析的方法. 方法 以不同批号酶免试剂测定HBsAg质控品为例,对多批号数据进行百分比化,使在Excel上生成按日期顺序排列的一张含多批号试剂的质控图. 结果 多批号数据质控图直观、明了,与原始图各点分布、位置及走势一致.结论 本法解决了对较长时期室内质控进行直观回顾性分析的问题,可供各级医院、血站等实验室参考.

    作者:吕岳峰;罗志红;宋学辉;彭海波;谭梅娟;张裕;张志 刊期: 2011年第09期

  • 肌钙蛋白Ⅰ与不稳定型心绞痛患者预后关系研究

    目的 探讨心肌肌钙蛋白I(cTnI)对于不稳定型心绞痛和急性心肌梗死的诊断价值,为临床治疗提供参考.方法 将高碑店市医院随机收集到的临床诊断为不稳定型心绞痛(80例)的病例作为观察组,无心血管疾病的健康者100例作为对照组,治疗前对两组检测的cTnI值进行比较,同时观察不稳定型心绞痛不同预后患者的cTnI值. 结果 在治疗前,观察组血cTnI水平明显高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).经过治疗后,显效24例(30%),有效32例(40%),无效24例(30%),总有效率为72.0%.同时显效与有效患者的cTnI值明显小于无效患者(P<0.05).结论 cTnI作为近年来发展起来的检测心肌损伤的高能指标,可以作为不稳定型心绞痛早期诊断的特异性指标,同时也可以作为其预后判断的标志,值得推广应用.

    作者:葛晓丽 刊期: 2011年第09期

  • 2006-2009年湖南省桶装饮用水微生物检验结果分析

    目的 了解湖南省桶装饮用水卫生微生物污染状况,分析其饮用安全性. 方法 按国家饮用水检测标准方法对桶装纯净水、饮用水、矿泉水进行菌落总数、大肠菌群、致病菌、霉菌和酵母菌的实验室培养与检测,应用SPSS 15.0统计学软件分析不同饮用水总合格率之间的差异,并对抽检样品与送检样品的合格率进行比较. 结果 147份桶装饮用水合格率为65.3%,不合格指标以菌落总数为主;2006 - 2009年不同饮用水之间总合格率差异有统计学意义(X2=22 48,P<0.01);送检样品合格率为76.5%,高于抽检样品合格率51.5%,差异有统计学意义(X2=10.1,P<0.05).结论 加大力度对桶装纯净水进行卫生监督监测工作,找出关键控制点,是抓好桶装饮用水卫生质量的关键.

    作者:刘建琪;王岚;刘运芝;张林青;杨烈;贾华云;胡旃;张红 刊期: 2011年第09期

  • 肺癌患者围手术期应用临床护理路径的效果评价

    目的 探讨肺癌患者国手术期应用临床护理路径的效果. 方法 100例需要手术治疗的肺癌患者随机分为两组,对照组50例给予常规护理,观察组50例应用临床护理路径进行健康教育.比较两组住院天数、术后并发症发生率、健康教育知识掌握情况以及患者满意度. 结果 观察组住院天数、术后并发症发生率均低于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);观察组健康教育知识掌握情况、患者满意度均高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05). 结论 临床护理路径在肺癌患者围手术期中的应用可以缩短患者的住院日减少术后并发症,促进患者的康复,同时提高了患者对健康教育知识的掌握以及患者对护理工作的满意度,有利于护患关系和谐发展,值得临床上广泛推广.

    作者:方坤;杨春;杨明 刊期: 2011年第09期

  • 2229例张家港市居民主要慢病及相关行为危险因素调查

    目的 了解张家港市部分居民慢病患病情况及其相关行为危险因素的流行状况. 方法 按照抽样原则确定调查对象,统一进行问卷调查、体格检查,测量血压以及检测空腹血糖. 结果 调查对象中慢病患病率(按病例数计算)71.02%,高血压患病率高(37.28%),其次是糖尿病(6.51%),高血压知晓率、治疗率、控制率分别为62.21%、76.02%和27.47%,糖尿病知晓率为65.52%,治疗率77.89%.肥胖率达到10.00%,男性吸烟率较高,为65.36%.结论 慢病特别是高血压、糖尿病正在严重威胁居民的身体健康,肥胖、吸烟等行为危险固素在人群中存在水平较高,需要采取综合性防控措施来逐步降低慢病的危害.

    作者:邱晶;姚敏芳 刊期: 2011年第09期

  • 广西桂林市14岁以下儿童死因分析

    目的 了解2007 - 2010年桂林市14岁以下儿童死因构成、死因顺位、具体死因情况,为制定相应的预防控制措施提供科学依据. 方法 对桂林医学院附属医院死因监测点2007 - 2010年14岁以下儿童死亡监测资料进行统计分析. 结果 2007 - 2010年死亡儿童数共有156人,其中男童占68.6%,女童占31.4%;感染性、母婴及营养缺乏性疾病和慢性非传染性疾病两大疾病为儿童的主要死因,占总死因的92.15%. 结论 应做好孕产妇系统管理、儿童保健系统管理工作,预防儿童传染病和伤害,同时加强产前诊断和遗传咨询,做好出生缺陷的筛查和预防以降低14岁以下儿童死亡的发生.

    作者:黄兆胜;马维红 刊期: 2011年第09期

  • 液相色谱串联质谱分析生活饮用水中灭草松和2,4-滴

    目的 建立高效液相色谱-电喷雾串联四级杆质谱(LC-ESI- MS/MS)快速测定生活饮用水中灭草松和2,4-滴的方法. 方法 水样经高速离心后,应用高效液相色谱-电喷雾串联四级杆质谱仪多离子反应监测定量法检测灭草松和2,4-滴. 结果 灭草松在0.25~8.0 μg/L的线性范围中,相关系数=0.9992,2,4-滴在1.0~~30.0 μg/L,相关系数=0.9999.该方法对灭草松和2,4 -滴的低检出限分别为0.02和0.04μg/L,低定量限分别为0.054和0.12 μg/L.通过对高、中、低三个浓度加标测试,灭草松和2,4-滴的回收率在96.5%~~103.5%之间,精密度在0.5%~4.0%之间. 结论 方法操作简便、快速、灵敏度高、定量准确,满足测定生活饮用水中灭草松和2,4-滴的要求.

    作者:张艳 刊期: 2011年第09期

  • 我国大米、蔬菜中铅镉污染监测的研究进展

    铅和镉作为联合国粮农组织(FAO)和世界卫生组织(WHO)公布的人体毒性强的3种重金属(铅、镉、汞)中的两种,广泛地分布并存于自然界中,是环境中常见的化学毒物,易造成食品重金属的污染[1].

    作者:李林艳;朱明元 刊期: 2011年第09期

  • 非霍奇金淋巴瘤组织中核因子KB的表达及临床意义

    目的 探讨核因子κB(NF-κB)在非霍奇金淋巴瘤(NHL)组织中的表达,分析其与肿瘤发生和发展的关系.方法 采用免疫组织化学PV- 9000法检测56例NHL标本、30例淋巴结反应性增生组织中NF- κB的表达. 结果NHL组的NF-κB阳性表达率为67.9%,显著高于对照组(30.0%),相比较差异有统计学意义(P<0.05);NF-κB阳性表达水平随NHL的恶性程度增加、临床分期进展而逐渐升高(P<0.05),而在不同的年龄组和免疫分型之间阳性表达差异无统计学意义(P>0.05). 结论 NF-κB在NHL组织中呈高表达,NF-κB表达与NHL发生和发展密切相关.

    作者:陈锦文;翁德胜;郭国威 刊期: 2011年第09期

实用预防医学杂志

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主管:中华人民共和国卫生部

主办:中华预防医学会 湖南省预防医学会