王慧敏;欧阳涓;滕军旗;陈培松;姜傥
目的 研究严重烧伤早期应用间歇性血液滤过(IHF)联合血液灌注流(HP)防治脓毒症的临床效果.方法 选取2013年3月至2015年12月于惠州市中心人民医院入院治疗的烧伤患者50例,随机分为研究组(n=25)及对照组(n=25).对照组按常规方法进行治疗,研究组在此基础进行IHF+HP治疗(伤后4、6、8、11d).记录两组患者伤后4、6、8、11、15 d的体温(BT)、心率(HR)和呼吸频率(BPM);白细胞数量(WBC)、中性粒细胞(NEUT)、尿素氮(BUN);白细胞介素-1 (IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及高迁移率簇蛋白-1(HMGB-1);LPS和PCT.结果 研究组伤后4、6、8、11、15 d的HR、WBC、BUN、IL-1、TNF-α、HMGBI、LPS和LCT均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组除伤后4d外,其余天数BPM均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组除伤后6d外,其余天数BT明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组除伤后8d外,其余天数IL-6均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 IHF+HP的治疗方案对严重烧伤患者是可行有效的,能够防治脓毒症的发生.
作者:方向京;朱飞滨 刊期: 2016年第06期
目的 探讨损伤控制性复苏方案院前救治重症创伤性凝血病的效果及对患者凝血功能的影响,为临床治疗提供参考.方法 选取2012年12月至2014年12月湖北省当阳市人民医院诊治的重症创伤性凝血病患者320例,根据复苏方法随机分为观察组和对照组,每组160例.对照组患者给予传统的复苏方案进行院前救治,观察组患者给予损伤控制性复苏方案救治.观察并记录两组患者在相应救治方案干预后的低体温时间、凝血功能障碍时间、酸中毒时间、住院时间及死亡率.结果 两组患者在相应复苏方案干预后,观察组患者的低体温时间、凝血功能障碍时间、酸中毒时间分别为(9.3±1.2)、(13.5±5.6)、(15.4±4.7)h,显著低于对照组患者的(20.2±1.9)、(31.3±12.2)、(30.1±5.8)h,差异有统计学意义(t值依次为61.354、16.773、24.901,均P<0.05);观察组患者的住院时间、疾病死亡率均低于对照组,差异有统计学意义(t=13.022、x2=6.850,均P<0.05).结论 重症创伤性凝血病患者给予损伤控制性复苏方案院前救治,可以显著提高患者的治疗效果,且安全有效,值得临床推广.
作者:李刚;张希洲 刊期: 2016年第06期
目的 应用改良小室法在裸鼠体内构建出有正常组织结构的皮肤和毛发.方法 应用16.5 d小鼠胚胎的表皮细胞、成纤维细胞和Ⅰ型鼠尾胶原蛋白构建毛囊重建模型.首先在裸鼠背部做直径1.0 cm的圆形创面,将小室固定于创面上;然后,在小室内加入成纤维细胞和Ⅰ型鼠尾胶原蛋白混合悬液形成真皮层,等待胶原凝固后加入表皮细胞形成表皮层.对照组采用传统小室法,16.5 d小鼠胚胎的表皮细胞和成纤维细胞混匀后加入裸鼠体内构建好的小室中.结果 实验组和对照组在第10天拆除小室后创面皮肤均得到修复,两组无明显差异.拆除小室1周后,实验组在创面上形成均匀分布的毛发,对照组毛发呈现不均匀分布.拆除小室1个月后可观察到实验组和对照组创面均能够形成大量毛发.通过HE染色及免疫荧光检测发现改良小室法所构建的皮肤拥有正常的组织结构及完整的毛囊结构.结论 改良小室法能够构建出有正常组织结构的皮肤组织,是一个高效稳定的毛囊重建模型.
作者:何伟;云子轩;胡葵葵 刊期: 2016年第06期
目的 了解广州市布鲁氏菌病流行特征,为制定布鲁氏菌病防控措施和策略提供科学依据.方法 运用描述性流行病学方法对广州市近年布鲁氏菌病发病资料进行分析.结果 广州市自2006年有病例报告以来,2006-2014年累计报告布鲁氏菌病患者156例,无重症及死亡病例.病例报告数逐年上升,各年份发病率差异有统计学意义(x2=59.04,P<0.01).患者中白云区54例,占34.62%,其次为海珠区、越秀区和荔湾区,分别为26、19和17例;病例分布无明显的季节性;其中男性89例,女性67例;年龄小的3个月,大82岁,其中40~59之间占55.77%;从事畜牧业职业68人(43.59%),退休及家务待业38人(24.36%),其他职业50人.结论 广州市布鲁氏菌病疫情趋于活跃并呈上升趋势,职业人群出现聚集性感染,城市居民发病明显增多.
作者:张豪;许聪辉;任文锋;刘小宁;陈守义 刊期: 2016年第06期
目的 评价我国人群基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因C-1562T多态性与缺血性脑卒中的关系.方法 对2015年11月前公开发表的关于中国人缺血性脑卒中MMP-9基因C-1562T多态性的病例对照研究进行Meta分析.结果 共纳入8个病例对照研究.Meta分析结果表明,MMP-9基因C-1562T多态性与中国人缺血性脑卒中的发病相关,差异有统计学意义(等位基因模型:0R=1.47,95%CI:1.25~1.74,P<0.01;显性遗传模型:0R=1.37,95% CI:1.14~1.65,P<0.01).敏感性分析显示结果稳定,倒漏斗图及Begg检验提示存在发表偏倚可能性小.结论 MMP-9基因C-1562T多态性与中国人缺血性脑卒中相关,可能是缺血性脑卒中发病的危险因素.
作者:刘旭;李瞿;张健;朱瑞霞;何志义 刊期: 2016年第06期
目的 运用荧光PCR溶解曲线法快速检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药突变,并将其与传统药敏试验进行比较,从而评价其敏感性、特异性及应用价值.方法 收集南通市第六人民医院2014年45株结核分枝杆菌临床分离株,运用荧光PCR溶解曲线法和传统药敏法分别检测其对利福平和异烟肼的耐药性,评价两种方法检测的一致性.结果 以传统药敏试验为金标准,荧光PCR溶解曲线法检测利福平耐药突变的灵敏度90.0%(9/10)、特异度93.9%(31/33)、阳性预测值81.8%(9/11)、阴性预测值96.9%(31/32)、符合率93.0%(40/43),其中有2例出现不均一突变,判为敏感;检测异烟肼耐药突变的灵敏度80.0%(12/15)、特异度96.4%(27/28)、阳性预测值92.3%(12/13)、阴性预测值90.0%(27/30)、符合率90.7%(39/43).与传统药敏有很好的一致性.传统药敏试验和荣光PCR溶解曲线不符合的12株菌株经测序分析,结果荧光PCR溶解曲线法与测序结果保持高度一致性(除20、21号).结论 荧光PCR溶解曲线法能够快速、准确地检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药突变,并且有很好的灵敏性和特异性,可用于耐药结核分枝杆菌临床快速筛查.
作者:徐费凡;顾德林;瞿梅;施军卫 刊期: 2016年第06期
目的 构建害嗜鳞螨(Lepidoglyphus destructor)过敏原Lepd2的原核表达系统,获得Lepd 2的重组纯化蛋白.方法 通过双酶切pUC-Lep 2质粒,获取基因Lepd2,并结合高保真PCR获取去信号肽基因rLep d 2,连接载体pET44a并转入表达菌株Rosetta;利用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)和蛋白免疫印迹法分别进行诱导表达与鉴定;用盐酸胍溶解包涵体并进行透析复性;使用Strep Ⅱ亲和填料来纯化目的蛋白.结果 构建了Rosetta-rLep d 2的原核表达体系;rLep d 2蛋白在菌体内主要表达形式为包涵体,通过透析复性和亲和纯化获得了高纯度的rLepd2蛋白.结论 获得的重组rLep d 2蛋白可为下一步评价其过敏原性提供研究材料.
作者:关志澳;何颖;邹泽红;陶爱林 刊期: 2016年第06期
目的 探讨蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子(CIP2A)和c-myc在喉癌组织中的表达水平并分析二者间的相关性.方法 采用免疫组化SP法检测40例喉癌标本(包括10例对应癌旁正常组织),20例喉乳头状瘤和15例喉黏膜白斑中CIP2A的表达,检测40例喉癌标中c-myc的表达,结合病理资料进行分析.结果 CIP2A在喉癌组织中的表达明显高于喉粘膜白斑、喉乳头状瘤及癌旁正常组织(P<0.05),且与肿瘤的T分级、临床分期、组织分化程度及淋巴结转移有关(P<0.05).c-myc在喉鳞癌组织的表达明显高于癌旁正常组织(P<0.01).Spearman等级相关分析显示,CIP2A与c-myc在喉鳞癌组织中的表达呈正相关(r=0.409,P<0.05).结论 CIP2A与c-myc具有协同作用,共同参与喉癌的发生发展过程,CIP2A蛋白可能是喉癌靶向治疗的一个新靶点.
作者:陈翠霞;杨小敏;祝晓芬;罗铮铮;杨燕珍;付佳 刊期: 2016年第06期
目的 建立在肝组织内含双链环状乙型肝炎病毒(HBV)基因组DNA的小鼠模型.方法 用PCR扩增HBV单拷贝线状基因组,将PCR产物转染Huh7、HepG2以及293T细胞,以ELISA检测培养细胞上清中的HBsAg和HBeAg;用尾静脉高压水动力法将PCR产物注射C57BL/6J小鼠,以免疫组化检测小鼠肝组织中的HBcAg,ELISA检测小鼠血清中的HBsAg、HBeAg.细胞转染以及小鼠体内实验均用质粒pAAV-HBV1.2作为阳性对照.结果 HBV基因组PCR产物转染Huh7、HepG2以及293T细胞均可分泌表达HBsAg和HBeAg,其中HBeAg的检测值分别为质粒pAAV-HBV1.2转染细胞的88.7%、79.9%和53.7%;PCR产物注射小鼠后,肝组织检测到HBcAg,血清中检测到HBsAg和HBeAg,HBsAg和HBeAg长持续时间分别为59 d和38 d,血清中HBsAg和HBeAg水平以及持续时间与质粒pAAV-HBV1.2注射的小鼠总体相似.结论 建立了一种新的HBV转基因小鼠模型,该模型制备方法简单,并且肝组织内存在与HBV cccDNA类似的HBV基因组.
作者:狄弘玮;彭浩然;王世杰;戚中田;赵平 刊期: 2016年第06期
目的 分析红细胞分布宽度(RDW)与急性冠脉综合征(ACS)冠脉病变严重程度及远期预后的相关性.方法 选取2013年1月至2014年12月于惠州市第一人民医院接受住院治疗的206例急性冠脉综合征患者作为研究对象,根据患者的冠脉造影结果及是否存在心肌酶学变化分为ACS组(n=130)以及对照组(n=76),对比两组各生化指标、远期心血管不良事件发生情况、并对相关因素行Logistic回归分析.结果 ACS组患者在肌钙蛋白(cTnI)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、心脏左室射血分数(LVEF)、左心房内径(LVED)等生化指标上均与对照组相差较大,且差异均有统计学意义(P<0.05).ACS组RDW、NT-ProBNP高于对照组,差异均有统计学意义[(12.98±0.54)% vs.(12.26±0.41)%,(490.21±100.48) ng/ml vs.(49.08± 10.46)ng/ml,P<0.05)];ACS组心力衰竭的发生率远高于对照组(7.69% vs.1.32%),且心血管不良事件的总发生率也显著大于对照组(13.85% vs.2.63%),差异均有统计学意义(P<0.05).经Logistic回归分析,NT-ProBNP、LDL-C、ApoB以及RDW均是急性冠脉综合征病重的独立危险因素.结论 红细胞分布宽度与急性冠脉综合征冠脉病变严重程度呈正相关性.
作者:新怡康 刊期: 2016年第06期
目的 建立利用酵母表达系统获得有较高激酶活性的弓形虫棒状体蛋白(ROP18)激酶的表达纯化方法.方法 利用PCR技术从弓形虫基因组DNA扩增弓形虫ROP18基因,通过Gateway系统将ROP18基因克隆到酵母表达载体pEGH-A中.将表达载体pEGH-A-ROP18转化至Y258酵母菌株中并诱导表达,表达产物纯化后通过SDS-PAGE进行纯度鉴定;后通过激酶活性实验对纯化的重组蛋白进行激酶活性鉴定.结果 构建了弓形虫ROP18激酶重组表达质粒pEGH-A-ROP18和pEGH-A-ROP18-KD,并成功在酵母表达系统表达弓形虫ROP18重组蛋白,其分子量约为8.2×104 Mr,SDS-PAGE蛋白电泳显示为单一条带,并具有较高的激酶活性.结论 利用酵母细胞表达系统成功表达并纯化了有激酶活性的弓形虫ROP18蛋白激酶.
作者:侯永恒;郝桃方;廖婉琴;杨兆收;潘爱华;吴忠道;周兴旺 刊期: 2016年第06期
目的 探讨12~18岁儿童住院病种分布及各病种的疾病负担,为卫生资源的合理配置提供科学依据.方法 从中山市妇幼保健院病案室的医院病案系统中导出2003-2012年住院患儿(12~18岁)病案首页信息.按照2003-2007和2008-2012两个时间段分析各系统疾病以及主要病种构成的差异.以2010-2012年数据为基础,对各主要病种的平均住院日和费用进行聚类分析,探讨不同病种的疾病负担.结果 中山市妇幼保健院2003-2012年收治12~18岁住院儿童1 099例,ICD-10(国际疾病分类第十次修订)编码诊断共2 045条记录.排在前3位的系统疾病为呼吸系统疾病(449例,占21.96%),原位肿瘤、血液系统疾病(346例,占16.92%),消化系统疾病(254例,占12.42%).排在前5位的单病种为地中海贫血(7.04%)、急性上呼吸道感染(6.45%)、支气管肺炎(5.62%)、贫血(4.99%)、系统性红斑狼疮(4.21%).2008-2012年相对2003-2007年,呼吸系统疾病构成比显著下降(30.17%下降至20.57%);原位肿瘤、血液系统疾病构成比显著上升(8.81%上升至18.29%),肌肉和骨骼系统和结缔组织疾病构成比显著上升(1.36%上升至5.49%).对各病种按照平均住院日和费用进行聚类分析,可分为两类,一类病种特点为住院时间短、费用低,为常见病、多发病,包括地中海贫血、急性上呼吸道感染、系统性红斑狼疮等;二类病种特点为住院时间长、费用高,发病率低,包括胸腔积液、低渗透性和低钠血症、感染性休克等.结论 对于12~18岁儿童,呼吸系统疾病,原位肿瘤、血液系统疾病,消化系统疾病是近十年来主要住院病种.部分病种构成比变化趋势明显.各病种平均住院日和费用差异较显著,根据聚类分析,可分为一类病种和二类病种.
作者:舒建义;林翠兰;陈昂 刊期: 2016年第06期
目的 探讨雌激素和雌、孕激素联合应用所致大鼠子宫肌瘤后的免疫功能变化及其机制.方法 选取SPF级雌性SD大鼠90只,编号后采用随机数字表法分为空白组、雌激素组和雌+孕激素组各30只,采用苯甲酸雌二醇对雌激素组和雌+孕激素组进行肌肉注射连续3个月(0.2 mg/只,3次/周),雌+孕激素组在造模3个月后加用黄体 酮1.5 mg/只肌注(2次/周,连续1个月).观察比较三组大鼠子宫组织平滑肌厚度、子宫重量、卵巢重量,以及E2水平、ER评分、DR评分,测定T细胞亚群.结果 子宫组织平滑肌厚度值雌+孕激素组>雌激素组>空白组且组间差异均具有统计学意义(P<0.05).雌+孕激素、雌激素组大鼠的子宫重量在造模第3个月、4个月较空白组显著的增加(P<0.05)、卵巢重量较空白组显著的降低(P<0.05).雌+孕激素、雌激素组大鼠的E2水平、ER评分、PR评分显著高于空白组(P<0.05),雌+孕激素组的E2水平、ER评分、PR评分显著高于雌激素组(P<0.05).雌+孕激素、雌激素组大鼠的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平显著低于空白组(P<0.05)、CD8+显著高于空白组(P<0.05),雌+孕激素组的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平显著低于雌激素组(P<0.05).结论 雌激素和雌、孕激素联合应用所致大鼠子宫肌瘤模型免疫功能显著低下,激素受体水平可能是其主要影响因素之一.
作者:肖发菊;李金燕;黄爱华 刊期: 2016年第06期
目的 分析B-Lynch缝合术与垂直子宫缝合术对于难治性产后出血的疗效.方法 收集2013年9月至2015年2月于云浮市中医院进行分娩的36例难治性产后出血患者作为观察对象.根据不同的手术止血方式分为观察组(n=20)和对照组(n=16).观察组产妇应用B-Lynch缝合术治疗,对照组产妇应用垂直子宫缝合术治疗.结果 观察组产妇术后24 h及术中出血量均低于对照组产妇,差异有统计学意义(P<0.05).观察组产妇手术治疗时间、下床活动时间、住院治疗时间均低于对照组产妇,差异均有统计学意义(P<0.05).观察组产妇的产褥并发症发生率少于对照组产妇,而子宫保留率高于对照组,且观察组产妇产后6周月经复潮率高于对照组产妇,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 B-Lynch缝合术用于难治性产后出血效果显著,能有效提高产妇子宫保留率,且并发症发生率低.
作者:蔡雪梅 刊期: 2016年第06期
目的 探讨噻托溴胺联合正压无创呼吸机通气治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并慢性呼吸衰竭的临床疗效.方法 收集2008年1月至2013年1月邢台市第三医院收治的62例COPD合并慢性呼吸衰竭患者,随机分为噻托溴胺对照组(n=18,给予噻托溴胺吸入)、无创通气对照组(n=18,给予无创呼吸机治疗),治疗组(n=26,给予噻托溴胺联合无创呼吸机治疗).观察治疗前后三组患者血气分析(PaO2、PaCO2、pH)、肺通气功能(FEV1、FEVl/FVC)指标的变化以及住院时间.结果 三组患者治疗后的动脉血气、肺功能检查较治疗前明显改善(P<0.05),且治疗组改善情况优于两个对照组(P<0.05),住院时间亦较对照组缩短(P<0.05).结论 无创呼吸机通气联合噻托溴胺可作为COPD合并呼吸衰竭的常规治疗手段.
作者:张永红;刘红红;李爱军;董世荣 刊期: 2016年第06期
目的 分析儿科急性上呼吸道感染门诊患者抗菌药物使用价值,探讨抗菌药物的应用合理性.方法 采取回顾性研究方法,选择河北北方学院附属第一医院2011年11月至2014年11月呼儿科急性上呼吸道感染的急诊患者的处方一共1 300张,采用SPSS12.0统计学软件进行统计分析.结果 选取的1 300张处方中,患者使用抗菌药物的处方有1 020张(78.46%);其中有28种抗菌药物,一共使用1 200次.其中常使用的抗菌素类是以下几种:头孢菌素类、头孢素类以及阿奇霉素类.使用单一的抗菌药物有1 015例,概率为78.08%;有203例是2种抗菌药物一起使用;其中有100例口服抗菌药物者,其概率为49.26%(100/203);其他药物有82例,其概率为6.30%.有1 000例静脉注射者,其概率为76.92%(1 000/1 300).排名在前9位的抗菌素用药天数为2 010 d,分布范围在3.1~6.5 d,用药的次数为1 021次;药物利用指数(DUI)值分布在0.89~1.36,平均DUI值为(1.01±0.04).结论 医院内儿科急性上呼吸道感染门诊患者抗菌药物使用价值比较高,使用的范围也比较合理.
作者:王静静 刊期: 2016年第06期
目的 探讨内分泌腺来源的血管内皮生长因子(EG-VEGF)在多囊卵巢综合征(PCOs)患者中的表达变化及其临床意义.方法 选取54例多囊卵巢综合征卵巢组织标本(PCOS组)、40例正常卵巢组织标本(正常组),采用免疫组化法(SP)检测两组标本中EG-VEGF和血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况.结果 PCOS组卵巢组织标本中EG-VEGF、VEGF光密度值分别为(0.179 4±0.008 5)、(0.176 3±0.009 0),均显著高于正常组的(0.163 8±0.007 2)、(0.162 9±0.008 7),差异均有统计学意义(P<0.05).PCOS组卵巢组织标本中EG-VEGF、VEGF的阳性表达分布与正常组比较差异均有统计学意义(P<0.05),PCOS组卵巢组织标本中EG-VEGF、VEGF的阳性表达率显著高于正常组(P<0.05).结论 EG-VEGF在多囊卵巢综合征患者中的表达水平显著升高,其过表达可能与PCOS患者血管生成有关.
作者:杜亚萍;杨慧 刊期: 2016年第06期
目的 探讨短暂性脑缺血发作(TIA)患者血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)动态变化及其临床意义.方法 选取在医院接受治疗的短暂性脑缺血发作患者50例,为观察组.选取同期健康体检患者50例为对照组,检测短暂性脑缺血发作患者在入院24h内和入院5d时血清NSE水平.根据神经功能缺失症状持续时间将50例观察组分为短症状组(小于等于6h)和长症状组(6 h以上),观察不同神经功能缺失症状持续时间与NSE关系.结果 观察组在入院24 h时,NSE为(24.65±3.23)μg/L,入院5 d NSE为(19.42±2.78)μg/L;对照组在入院24h时,NSE为(14.65±2.33)μg/L,入院5 d NSE为(14.65±2.33) μg/L.观察组在入院24 h时,NSE水平明显高于对照组,入院5d后,NSE水平与入院时比较有明显下降,但仍高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).长症状组在入院24 h时,NSE为(29.63±2.27)μg/L,入院5 d NSE为(24.43±2.43)μg/L;短症状组在入院24 h时,NSE为(21.64±2.24) μg/L,入院5dNSE为(14.45±2.64)μg/L.两组患者在入院5 d NSE水平均有明显下降,但是长症状组在入院25 h和入院5d时NSE水平均明显高于短症状组,差异有统计学意义(P<o.05).结论 短暂性脑缺血发作患者血清NSE明显升高,且随神经功能缺损时间呈正相关,对疾病的诊断和预后具有提示作用.
作者:王栋华;刘云诗;邓燕 刊期: 2016年第06期
目的 探讨水中分娩对母婴感染的影响.方法 选取行水中分娩的产妇160例,随机抽取同期160例传统经阴道分娩者(传统分娩组)作为对照.两组新生儿娩出后取咽及耳拭子作病原微生物培养,并于出生后2d抽血查血常规和C反应蛋白(CRP);两组产妇于分娩2d后抽血查血常规、CRP和降钙素原(PCT);并观察母婴感染相关的临床表现.结果 两组母婴感染临床表现比较差异无统计学意义(P>0.05).传统分娩组产妇WBC为(9.65±3.16)×109,CRP为(37.32±10.13) mg/L,PCT为(0.06±0.05) ng/ml,而水中分娩组产妇WBC为(9.31±3.25)×109,CRP为(35.57±9.54) mg/L,PCT为(0.06±0.03) ng/ml,两组比较差异无统计学意义(P>0.05).传统分娩组新生儿WBC为(11.48±3.54)×109,CRP为(6.42±1.74)mg/L,而水中分娩组新生儿WBC为(11.39±2.50) ×109、CRP为(6.68±1.52)mg/L,两组比较差异无统计学意义(P>0.05).水中分娩组咽拭子阳性18例,耳拭子阳性27例;传统分娩组咽拭子23份阳性,耳拭子32份阳性,两组咽耳拭子病原微生物培养阳性率差异无统计学意义(P>0.05).结论 水中分娩并未增加母婴感染.
作者:李志彬;宁伟瑛;彭军;麦静仪;缪士霞 刊期: 2016年第06期
目的 建立以液态芯片为检测手段的快速、高通量的铜绿假单胞菌多重耐药基因监测技术平台,探索建立能够常规应用于临床并解决现行临床表型测定局限性的分子生物学技术.方法 针对铜绿假单胞菌中常见的OPRD2、TEM、OXA10、AAC3、AAC6、VIM、VEB、IMP共8个耐药基因序列进行分析,依次对这8个耐药基因设计多重PCR扩增引物和序列特异的核酸探针,选取临床鉴定的含各耐药基因的耐药菌株作为阳性参比品进行检测工艺优化,进行铜绿假单胞菌多重耐药基因液态芯片监测平台的研发.结果 初步建立了铜绿假单胞菌多重耐药基因液态芯片监测平台,组装了铜绿假单胞菌多重耐药检测液态芯片试剂盒1套.选择了8株含各耐药基因铜绿假单胞菌阳性菌株,用组装的试剂盒重复检测10次,耐药基因检测阳性率为100%,各耐药基因检测信号间无交叉,灵敏度、特异度以及重复性都很好.利用此平台进行了一定数量的临床标本检测分析.从检测结果来看,40份标本中,18份标本耐药基因阳性,其中含多耐药基因的标本有9份,占50%.18份阳性标本的耐药基因与耐药表型分析结果一致.结论 此监测平台是将一种多重扩增技术和芯片技术-悬浮阵列技术相结合的方法,具有特异性高、可组合筛查、检测通量高的优势.
作者:孙青菊;苑同业;王军;姜美娟;刘金凤;梁冰 刊期: 2016年第06期