夏冒李;李娟;吴婧;朱俊卿;陈湘南
目的 探讨高分辨率熔解曲线法(HRM)检测中国5种常见β-地中海贫血突变的可行性.方法 应用HRM法检测中国5种常见β-地中海贫血突变,检测结果为纯合子的标本进行基因测序验证.结果 HRM法能准确区分-28(c.-78A>G)、Codon17 (c.52A>T)、Codons41/42 (c.126_129delCTTT)、Codons71/72 (c.216_217insA)及IVS-Ⅱ-654(c.316_197C>T)的纯合、杂合突变以及野生型标本,测序结果与HRM法检测结果一致.结论 HRM法检测中国5种常见β-地中海贫血突变具有简便、快速、灵敏度高等优点,有望成为临床尤其是产前诊断领域β-地中海贫血突变筛查的优选方法.
作者:陈汉彪;尹爱华;张彦;何天文 刊期: 2013年第05期
目的 研究新生鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后自噬水平的变化规律,通过对Caspase-3的检测探讨自噬水平变化对细胞凋亡的影响.方法 将实验动物分为假手术组、模型组、3-甲基腺嘌呤组及雷帕霉素组,采用Rice法建立HIBD模型,3-甲基腺嘌呤组及雷帕霉素组于造模后0.5 h腹腔注射3-甲基腺嘌呤及雷帕霉素.应用免疫组织荧光化学法检测损伤侧大脑海马及皮层组织自噬相关蛋白Beclin 1的表达,Western-blot法检测Beclin 1表达变化规律,免疫组织化学法检测各组Caspase-3的表达.结果 免疫组织荧光化学检测结果显示,缺氧缺血性脑损伤后能激活自噬现象发生.Western-blot检测结果显示,HIBD后2 h Beclin 1蛋白表达开始增加,24 h达到高峰,持续到168 h.免疫组织化学检测结果显示,3-甲基腺嘌呤组时间点Caspase-3阳性表达显著升高,雷帕霉素组Caspase-3阳性表达显著下降.结论 新生大鼠HIBD模型能激活自噬现象发生,自噬水平增高可抑制细胞凋亡,自噬水平降低可增加细胞凋亡.
作者:梁云凤;李宏;方素珍;周细中;杜江 刊期: 2013年第05期
目的 评价匹多莫德对体外细胞培养弓形虫的抑制作用.方法 在96孔板中采用Hela细胞培养稳定表达绿色荧光蛋白的弓形虫RH株速殖子,实验设匹多莫德用药组、磺胺甲(噁)唑(SMX)用药组、SMX+匹多莫德联合用药组以及未用药对照组,观察比较绿色荧光弓形虫速殖子给药后48、72、96 h和120 h的增殖情况及活虫数.结果 与未用药组比较,SMX 1 mg/ml (P<0.01)、0.5 mg/ml(P<0.01)和0.25 mg/ml (P<0.01)剂量组在各时间点均可显著抑制弓形虫速殖子的增殖;匹多莫德25 μg/ml (P<0.05)、12.5 μg/ml (P<0.05)和6.25 μg/ml (P<0.05)剂量组均可一定程度地抑制弓形虫速殖子的增殖;SMX (0.25 mg/ml)+匹多莫德(25 μg/ml)活虫数低,与SMX 1 mg/ml单独使用对弓形虫速殖子的抑制作用相近(P=0.311).结论 匹多莫德具有一定的体外抑制弓形虫速殖子增殖的作用;匹多莫德与SMX联合应用既能降低SMX用量又能有效抑虫.
作者:赵莹;吕芳丽 刊期: 2013年第05期
目的 评价黄芪注射液联合ACEI或ARB类药物治疗2型糖尿病肾病Ⅲ期的有效性及安全性.方法 根据Cochrane协作网系统评价方法,检索中文期刊全文数据库(1979-2012)、中国生物医学期刊引文数据库(1994-2012)、万方数据库(1982-2012)、维普中文期刊数据库(1989-2012)等,全面收集符合标准的随机对照试验(RCT),采用Jadad量表评价文献质量,应用RevMan 5.1软件进行Meta分析.结果 共纳入20篇RCT文献,共计1 348例DN Ⅲ期患者.Meta分析结果显示,黄芪注射液与ACEI或ARB类药物联用,在降低DN Ⅲ期患者.24 h尿微量白蛋白排泄率(24 h ALBU)、24 h尿蛋白定量(24 h TPU)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹血糖(FPG)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)方面优于单用ACEI或ARB类药物,纳入的文献均未报道黄芪注射液的不良反应.结论 与单用ACEI或ARB类药物相比,黄芪注射液与ACEI或ARB类药物联合应用治疗DN Ⅲ期效果更好,且无明显的不良反应.由于纳入文献质量较低,还有待大样本、高质量、多中心、随机、双盲的对照试验来证实.
作者:刘玉;周琳;肖雅;罗仁;赵晓山 刊期: 2013年第05期
目的 了解江门市手足口病(HFMD)发病的危险因素,为制定有效的防控措施提供科学依据.方法 2011年7-8月,选择常住江门且临床诊断为手足口病的非重症患儿62例和未患过手足口病的儿童126名,采用病例对照研究方法,利用自制问卷,调查分析手足口病的影响因素.结果 单因素分析结果显示,大门口10 m范围内可见垃圾、大门口视野可见苍蝇、卫生间使用情况、近两周邻居/玩伴患病以及发病前两周医疗机构暴露情况可能是手足口病发病的危险因素;母亲文化程度可能是发病的保护性因素.多因素分析结果显示,手足口病发病影响因素为发病前两周医疗机构暴露(OR=24.982,P<0.05)、大门口10 m范围内可见垃圾(OR=5.246,P=0.002)、大门口视野可见苍蝇(OR=1.565,P=0.004)和卫生间使用情况(OR=2.373,P=0.006).结论 在江门市预防HFMD重点应加强健康宣教以改善不良卫生环境,同时应采取隔离病例等有效措施减少交叉感染.
作者:杨玉芳;王立华;陈茂余;洪海波;许坚锋;刘鹰航 刊期: 2013年第05期
目的 探讨补中益气丸对乳腺癌化疗相关性疲劳的作用及其机制.方法 将小鼠随机分为正常(NC)组和待处理组.将待处理组小鼠建成荷4T1乳腺癌小鼠模型,并将其随机分为肿瘤对照(TC)组、紫杉醇(PTX)组、补中益气丸(BZYQ)组、补中益气丸+紫杉醇(BZYQ+PTX)组.BZYQ 1.5 g/kg灌胃给药,每天1次;PTX 10 mg/kg腹腔注射,每2天1次.给药21 d,观察小鼠体重、肿瘤体积、力竭游泳时间指标的变化,并检测肌肉SOD、MDA水平.结果 与实验开始前比较,给药后第3周时NC组和BZYQ+PTX组小鼠的体重明显增加(P<0.05).与TC组比较,给药第9d开始,BZYQ+PTX组小鼠的肿瘤体积明显变小(P<0.05),给药第18d时,PIX组小鼠的肿瘤体积变小(P<0.05);BZYQ+PTX组和PTX组两组小鼠的瘤重均变小(P<0.05~0.01).与NC组比较,PyTX组小鼠的平均力竭游泳时间则在给药后第1、2、3周均明显下降(P<0.05~0.01),PTX+BZYQ组小鼠的平均力竭游泳时间仅在给药第1周时下降(P<0.01),第2、3周时较PTX组小鼠明显延长(P<0.01).与TC组比较,PTX组SOD值明显降低,而BZYQ+PTX组的SOD值较PTX组明显升高;PTX组MDA浓度明显升高,而BZYQ+PTX组的MDA浓度较PTX组明显降低.结论 补中益气丸可能通过抑制氧化应激损伤发挥抗乳腺癌化疗相关性疲劳的作用.
作者:欧阳明子;谭为;刘艳艳;黄颖;肖雅;程静茹;罗仁;赵晓山 刊期: 2013年第05期
目的 探讨脂多糖(LPS)刺激脐静脉内皮细胞表达程序性死亡因子配体1 (PD-L1)与C-JUN氨基末端激酶(JNK)信号通路的关系.方法 体外培养脐静脉内皮细胞,按2× 107/ml种植在6孔培养板中,在无血清培养基中静止24h后随机分成阴性对照组、LPS组及SP600125+LPS组,其中阴性对照组不加干预因素;LPS组先用DMSO(0.1%V/V)作用1h,再用LPS(1.0 μg/ml)刺激24 h;SP600125+LPS组先用SP600125(20 μmol/L)作用1h后再用LPS刺激24 h,Western-blot测定各组PD-L1及P-JNK蛋白表达.结果 SP600125 +LPS组PD-L1蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);而SP600125+LPS组和对照组PD-L1蛋白表达与LPS组比较均明显减少,差异均有统计学意义(P<0.05).SP600125+ LPS组细胞P-JNK蛋白表达与对照组和LPS组比较均减少,差异有统计学意义(P<0.05).结论 LPS可能通过JNK信号通路调控脐静脉内皮细胞表达PD-L1.
作者:龙日;刘映峰;严全能;吕自明;缪绯;梁欣伟 刊期: 2013年第05期
目的 探讨氧化性低密度脂蛋白(oxLDL)对肝细胞内脂肪积累及SIRT1-LXR信号通路的影响.方法 实验分为对照组、高脂(HF)组、oxLDL组、HF+oxLDL组和能量限制(CR)组.将HepG2细胞培养于DMEM培养基中,培养48 h后用油红O染色法定性观察和测定各组OD值、细胞内脂肪积累,并用RT-PCR法检测各组SIRT1、肝X受体(LXR)及其靶基因ATP结合盒转运蛋白G1 (ABCG1)的表达水平.结果 与对照组比较,HF组、oxLDL组和HF+oxLDL组细胞内脂肪含量均增加(P<0.05),CR组脂肪含量下降(P<0.05).oxLDL组与对照组比较,SIRT1、LXRα和ABCG1 mRNA表达均增加,其中SIRT1和LXRα差异有统计学意义;HF组SIRT1和LXRα表达与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),而ABCG1显著降低(P<0.05);HF+oxLDL组LXRα和ABCG1表达均显著降低(P<0.05),而SIRT1与对照组比较差异无统计学意义;CR组LXRα和ABCG1表达均显著增加(P<0.05),然而SIRT1与对照组比较差异无统计学意义.结论 oxLDL可能会促进脂肪肝的形成.
作者:黄正亮;郭貔;周小辉;傅玉才 刊期: 2013年第05期
目的 研究NLRP3、IL-33在脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症模型中的表达及格列本脲对其表达的影响.方法 培养RAW264.7巨噬细胞,将其分为空白对照(A)组、NLRP3抑制剂格列本脲预处理+LPS(B)组,LPS模型(C)组;B、C组采用LPS刺激RAW264.7巨噬细胞建立炎症模型,B组在LPS刺激前30 min给予格列本脲处理,空白对照组只给予培养基培养.采用蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测细胞中NLRP3蛋白的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清中1L-33的含量;四氮唑盐(MTT)法测定各组细胞的增殖能力.结果 C组中NLRP3蛋白表达均高于A组、B组(均P<0.05),B组NLRP3蛋白表达高于A组(P<0.05).C组IL-33含量比A、B组高(P<0.05),A组和B组之间差异无统计学意义.MTT试验中C组细胞增殖率高于A组、B组(P<0.05),而A、B组差异无统计学意义.结论 NLRP3、IL-33在LPS诱导RAW264.7的巨噬细胞中表达升高,而格列本脲干预后可抑制NLRP3的表达及IL-33的分泌.
作者:梁海梅;于化鹏;夏虎;易丽;方泽葵;李忠丽 刊期: 2013年第05期
目的 探讨脂多糖(LPS)诱导人气道上皮细胞半胱氨酸天冬氨酸酶-1(Caspase-1)的表达情况.方法 体外培养人气道上皮细胞,将其随机分为阴性对照组、LPS组及Caspase-1特异性抑制剂(Ac-YVAD-cmk) +LPS组(简称cmk+LPS组).采用四氮唑盐(MTT)法测定各组细胞的增殖能力;实时荧光定量RT-PCR检测各组细胞Caspase-1mRNA的表达水平;Western-blot测定各组细胞Caspase-1蛋白的表达;ELISA法检测各组细胞上清液白介素1β(IL-1β)水平.结果 3组细胞增殖差异无统计学意义(P>0.05);LPS组Caspase-1 mRNA的表达水平较cmk+LPS组和对照组增高,3组间差异有统计学意义(P<0.05); LPS组Caspase-1蛋白的表达明显高于对照组和cmk+LPS组,3组间差异有统计学意义(P<0.05);LPS组IL-1β水平高于对照组和cmk+LPS组,3组间差异有统计学意义(P<0.05).结论 NLRP3炎症复合体诱导的Caspase-1活化参与人气道上皮细胞LPS的致敏过程,并促进下游IL-1β的生成.
作者:席云祝;于化鹏;樊慧珍;邓火金;夏虎;龚雨新;蔡绍曦 刊期: 2013年第05期
目的 调查本地区儿童肠滴虫病的临床特点.方法 选择9例住院肠滴虫病患儿,分析其临床表现和血常规、大便常规、病原学检查、生化检查结果及治疗与转归情况.结果 9例患儿大便镜检均见到滴虫(+/HP~+++/HP),8例患儿伴有大便性状的改变.8例经过常规药物处理后好转,1例加用灭滴灵治疗后好转.结论 本地区肠滴虫病的儿童多为5岁以下,临床症状较轻,治疗效果较好.
作者:伊鹏;古力娜尔喀斯木;艾克热木江;艾孜提艾力;刘虹 刊期: 2013年第05期
目的 分析惠州市生产加工环节食品质量状况,为提出有针对性的卫生监管措施提供依据.方法 对惠州市2007-2012年质量计量监督检测所抽检的生产加工食品的检验数据进行分类、对比,分析影响质量的因素.结果 2007-2012年间,抽检生产加工食品21 891批次,其中合格18 356批次,批次合格率为83.85%;食品标签合格率为95.26%,食品内在质量合格率为88.59%.食品内在质量不合格的原因主要是微生物指标超标,不合格率为6.03%;其次为理化指标,不合格率为5.04%;理化及微生物指标均不合格率为0.34%.食品种类中,豆制品、蔬菜制品和饮料的不合格率较高.结论 惠州市生产加工环节食品质量总体良好,但仍应加强微生物指标的监测,并提高食品标签的规范程度.
作者:邓晖;陈清 刊期: 2013年第05期
目的 探讨TIP30在脑胶质瘤中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学法检测70例脑胶质瘤病人石蜡病理切片中TIP30蛋白表达,并分析其表达与临床病理特征之间的关系;同时,采用RT-PCR方法检测16例脑胶质瘤新鲜组织中TIP30基因的含量.结果 TIP30蛋白在36例(51.4%)脑胶质瘤标本和8例(88.9%)正常脑组织标本中的表达差异有统计学意义(P=0.04).TIP30的表达与患者的年龄、性别无关,与脑胶质瘤的病理类型、分级和肿瘤大小相关(P<0.05).单因素分析结果显示,TIP30阳性表达的脑胶质瘤病人总生存时间长于阴性表达组(P=0.003).RT-PCR结果亦表明,脑胶质瘤中TIP30基因含量低于正常脑组织(P=0.001).结论 TIP30在脑胶质瘤中表达下调,可能充当抑癌基因的角色,同时也可能是脑胶质瘤病人重要的预后指标之一.
作者:胡莹莹;刘新会;罗荣城 刊期: 2013年第05期
目的 探讨线粒体DNA对模拟日光照射诱导凋亡的作用.方法 实验分照射组和假照射组,照射组以3.39J/cm2+ 177 mJ/cm2的剂量照射Rho206细胞和143B细胞,假照射组作同样处理但不照光.6h时检测活性氧簇(ROS)产量;16 h后观察其细胞形态,检测凋亡率.结果 照射组Rho206细胞、143B细胞的凋亡率和ROS的产量与假照射组比较明显上升,差异有统计学意义(P<0.05),照射组Rho206细胞的凋亡率和ROS的产量与143B细胞的凋亡率和ROS的产量比较明显下降(P<0.05),而假照射组两细胞凋亡率和ROS的产量比较差异无统计学意义.结论 线粒体DNA缺失细胞对模拟日光照射诱导的凋亡作用的抵抗可能与ROS生成减少有关.
作者:陈胡林;刘仲荣;何威;王儒鹏;范秀针;朱英杰;赵敏玲 刊期: 2013年第05期
目的 探讨心肌营养素1 (CT-1)在缺血后适应中对心肌细胞的保护作用机制及参与的信号通路.方法 选择H9C2乳鼠心肌细胞株,实验分为对照组、缺氧复氧组、缺氧后适应组、缺氧后适应+CT-1组、缺氧后适应+CT-1+Akt阻断剂组、缺氧后适应+CT-1+二甲基亚砜组,MTS法检测细胞的存活率,流式细胞仪检测细胞的凋亡率,Western-blot检测Akt蛋白表达,Q-PCR检测Bad mRNA的表达.结果 缺氧复氧组较对照组细胞凋亡率明显增加,存活率降低,缺氧后适应组细胞比缺氧复氧组凋亡率低,存活率增加,缺氧后适应+CT-1组细胞比缺氧后适应组凋亡率进一步降低,存活率进一步增加,Akt磷酸化蛋白水平明显升高,Bad mRNA表达下调,加入Akt阻滞剂(A6730)后,这种保护作用被抑制.结论 心肌营养素1参与激活Akt信号通路协同缺氧后适应减轻缺氧复氧对心肌细胞的损伤,对心肌细胞起保护作用.
作者:赵鑫;缪绯;周贻军;刘映峰 刊期: 2013年第05期
过去的十几年全球在艾滋病的预防和控制方面取得了巨大成就,但是艾滋病仍然是全球一个严重的公共卫生问题,目前尚无安全、有效的抗HIV疫苗和特效治疗AIDS的药物,未来将可能仍是引起人群严重死亡的疾病之一.本文总结了近年来艾滋病的不同治疗途径,以及新近发现的一种整合素α437在HIV感染过程中的作用.
作者:王雪雯 刊期: 2013年第05期
目的 评价类风湿关节炎(RA) 2010ACR/EULAR分类标准(简称2010标准)与1987ACR诊断标准(简称1987标准)的诊断效能.方法 回顾性分析2009年5月至2011年6月期间南方医科大学南方医院门诊和住院的114例早期关节炎患者.分别以患者一年内使用甲氨蝶呤/来氟米特治疗、一年时风湿专科医生判断为RA作为诊断RA的“金标准”,评价两种分类标准的诊断效能.结果 2010标准与1987标准敏感性分别为0.87和0.63(甲氨蝶呤/来氟米特使用标准)、0.91和0.76(风湿专科医生判断标准);特异性分别为0.67和0.81(甲氨蝶呤/来氟米特使用标准)、0.56和0.92(风湿专科医生判断标准);两种标准ROC曲线下面积(AUC)分别为0.89和0.86(甲氨蝶呤/来氟米特使用标准)、0.87和0.92(风湿专科医生判断标准).按风湿专科医生判断标准,1年时39例非RA患者基线期符合2010标准的有17例(43.6%),分别为未分化关节炎(n=7)、银屑病关节炎(n=5)、干燥综合征(n=2)、系统性红斑狼疮(n=1)、自限性关节炎(n=2);1年时39例非RA患者基线期符合1987标准的有3例,均为银屑病关节炎.按风湿专科医生判断标准,基线期符合1987标准的60例RA患者有4例不符合2010标准,其血清学均正常.结论 运用2010标准有利于RA的早期诊断;2010标准可能将其他关节炎和部分结缔组织病误分类为RA,对分类为RA的患者临床需加强随访;使用2010标准过程中结合1987标准可减少血清学正常的RA的漏诊风险.
作者:夏冒李;李娟;吴婧;朱俊卿;陈湘南 刊期: 2013年第05期
目的 观察人脐静脉内皮细胞株ECV-304对金黄色葡萄球菌(S.aureus)感染的反应.方法 常规方法制备金黄色葡萄球菌悬液,以1∶1、1∶10和1∶100的感染复数感染ECV-304细胞1、3、6、12 h和24 h后,估算细胞吞噬细菌数,采用Hoechst33258染色,DNA ladder及细胞凋亡相关因子RT-PCR检测细菌感染后细胞凋亡情况.结果 金黄色葡萄球菌感染复数越高,细胞内吞噬的活细菌数越多.金黄色葡萄球菌感染导致ECV-304细胞发生凋亡,凋亡具有时间依赖性,随着感染时间的延长,凋亡小体增多,DNA片段也随之增多.抗凋亡细胞因子Bcl2 mRNA表达量随着感染时间的延长下降,而促凋亡细胞因子Bax和Caspase-3表达量增多.结论 金黄色葡萄球菌感染ECV-304细胞后,通过下调抗凋亡细胞因子Bcl2、上调促凋亡细胞因子Bax和Caspase-3诱导细胞凋亡.金黄色葡萄球菌感染内皮细胞的可能致病机制为临床治疗提供了实验依据.
作者:熊传银;罗庆华;胡汉斌;毕爱芬;裴德翠 刊期: 2013年第05期
目的 获得重组幽门螺杆菌(H.pylori)脂蛋白(rLpp20),并研究其在血清学诊断中的应用价值.方法 应用重组质粒pGEX-6P-2/Lpp20在大肠杆菌(E.coli)BL21中表达,并进行GST亲和层析纯化,用Western-blot检测纯化产物(rLpp20)的免疫反应性;以rLpp20为包被抗原建立EMSA法对200份患者血清标本进行特异性IgG抗体检测,并与幽门螺杆菌-IgG抗体检测试剂盒法进行比较.结果 成功表达的rLpp20(43 000 Mr),纯化产物可被幽门螺杆菌多克隆抗体及阳性血清识别;成功建立了以rLpp20为包被抗原的间接ELISA法,其灵敏度为91.0%,特异度为100%.与试剂盒法比较,两者的符合率为95.5%.结论 Lpp20具有良好的免疫反应性,能与幽门螺杆菌阳性血清特异性结合,有望应用于幽门螺杆菌血清学诊断.
作者:靖吉芳;张艳 刊期: 2013年第05期
非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的发病率逐年增多,但其发病机制尚未完全阐明.目前较为成熟的阐释是“二次打击”学说,该学说中涉及氧化应激机制.氧化应激在NAFLD发病过程中所起到的作用近年来也日益被关注.本文就氧化应激在NAFLD损伤机制中的作用进行综述,以期能加深对NAFLD发病机制的了解.
作者:林秋香;周冬生;梁志清 刊期: 2013年第05期