高涛；赖学文；莫惠飞；杨艳芳
目的 构建携带人甲状旁腺相关激素(PTHLH)基因的慢病毒表达载体pGC-FU/PTHLH.方法 酶切载体pGC -FU,根据人PTHLH基因合成特定引物,扩增目的基因片段,将其克隆到pGC-FU质粒(含EGFP基因)上,菌落PCR鉴定及测序分析重组载体,使用Lipofectamine 2000诱导转染pGC-FU、pHelper 1.0和pHelper 2.0载体三质粒进入293T细胞包装慢病毒,并用带PTHLH的慢病毒感染293T细胞和鼻咽癌CEN1细胞确认慢病毒包装是否成功.结果 菌液PCR产物琼脂糖凝胶电泳鉴定显示,与理论预计值阳性转化子735 bp,阴性转化子198 bp基本相吻合；PCR鉴定阳性的克隆进行测序和比对分析,结果完全匹配,进一步鉴定载体构建成功.分别将质粒包装系统共转染293T细胞,包装产生空白对照慢病毒( pGC- FU)和过表达PTHLH的慢病毒(pGC-FU /PTHLH);或用携带PTHLH和EGFP基因的病毒上清感染CNE1细胞,48 h后,倒置荧光显微镜下观察293T和CNE1细胞,均可见绿色荧光,转染成功.结论 成功构建携人PTHLH基因慢病毒表达载体,为进一步研究PTHLH基因在鼻咽癌转移中的作用及鼻咽癌发病分子机制奠定了基础.
作者：樊英；李佳；陈靖；黄仲曦；姚开泰 刊期： 2012年第03期
目的 比较不同鼻咽癌细胞株在鸡胚尿囊膜模型上促进血管生成能力的差异.方法 选用6日龄鸡胚,开窗后分别种植5-8F、6-10B及CNE-2三种鼻咽癌细胞株,三种细胞株细胞数为2×106/鸡胚者各一组,细胞数为5×105/鸡胚者各一组,另一组为对照组(PBS),每组10个鸡胚.孵育6日后,统计分析新生血管数及血管面积/鸡胚面积比.结果 种植细胞数为5×105/鸡胚时,5-8F、6-10B细胞部分鸡胚有移植瘤形成,CNE-2细胞鸡胚均未见成瘤.种植细胞数为2× 106/鸡胚时,三种鼻咽癌细胞株均可100％成瘤,其新生血管数依次递减,分别为(38.7±2.50)、(33.5±4.43)、(29.7±2.71),差异有统计学意义(P＜0.05)；血管面积/鸡胚面积比分别为(22.2±2.18)％、(18.7±2.45)％、(16.9±2.62)％,均高于对照组的(9.5±1.86)％,差异有统计学意义(P＜0.05),且5-8F面积比高于其他两种细胞株(P＜0.05).结论 鼻咽癌5-8F、6-10B及CNE-2三种细胞株在鸡胚尿囊膜模型上血管生成能力依次减弱,实验研究可根据实际情况选用.
作者：林少雄；李湘平；鲁娟；梁碧君；刘雄 刊期： 2012年第03期
目的 通过对贫困山区肺结核患者实施交通补助后的患者治疗依从性的研究,探讨提高贫困山区肺结核患者治愈率的有效途径.方法 选取重庆市国家级贫困县WX县作为实施区县,连续选择200例新确诊初治涂阳肺结核患者,对患者实施适当的交通补助,以评价实施交通补助的效果.结果 在课题干预前后,患者治疗2月末随访查痰率由63.1％提高到96.0％,痰菌阴转率由59.0％提高到88.5％,治疗5月末随访查痰率由95.9％提高到98.5％,患者随访按时取药率由65.4％提高到99.5％,差异均有统计学意义(P＜0.05).患者治疗5月末痰菌阴转率由95.9％提高到96.0％,治疗6月末随访查痰率由97.7％提高到99.0％,6月末痰菌阴转率由96.8％降低到96.0％,患者治愈率由96.8％降低到96.0％,以上数据比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 为肺结核患者提供交通补助有助于提高患者按时取药和查痰的比例,但要真正确保患者规则服药,达到治愈目的,需要结合其他措施综合实施.
作者：汪清雅；熊鸿燕；刘英 刊期： 2012年第03期
抗寄生虫和抗风湿联合治疗可有效治疗钩虫性消化道出血,并缓解类风湿关节炎症状.本文从临床症状与体征、实验室诊断、临床治疗及治疗效果等方面,分析经纤维胃镜检查与粪便病原学检查诊断的类风湿关节炎患者合并钩虫感染病例1例,现报告如下.
作者：张鑫；李静；李娟；李华 刊期： 2012年第03期
目的 比较冠心病患者和健康人血清中胎盘生长因子(PIGF)水平,探讨其与冠心病、冠脉病变程度、心肌损伤的相关性.方法 采用ELISA法测定87例冠心病患者(冠心病组)及61例健康人(对照组)血清的PIGF水平,分析血清PIGF水平与冠心病的相关性；将冠状动脉造影结果与血清PIGF水平进行比较,分析血清PIGF水平与冠心病患者冠脉病变支数及Gensini冠脉病变积分之间的相关性；以cTnI 0.03 ng/ml和0.1 ng/ml为分界值,将冠心病组分成冠心病Ⅰ组、Ⅱ组和Ⅲ组,比较各组之间血清PIGF水平.结果 冠心病组血清PIGF水平为(11.55±3.10)ng/ml,高于对照组的(5.81±2.21)ng/ml,差异有统计学意义(P＜0.05).血清PIGF水平与冠脉病变支数和Gensini冠脉病变积分均无相关性(P＞0.05).冠心病Ⅱ组和冠心病Ⅲ组血清PIGF水平分别为(13.12±2.45)、(14.62±3.25)ng/ml,与冠心病Ⅰ组的(9.10±2.31) ng/ml比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 血清PIGF水平与冠心病、心肌受损之间存在相关性,PIGF水平与冠脉梗塞的严重程度的相关性需进一步研究.
作者：林勇平；曾翠云；孟艳辉；刘忠民 刊期： 2012年第03期
目的 评价中医药分型论治偏头痛的效果.方法 采用多中心、随机对照方法进行临床研究.选取偏头痛患者194例,随机分为三组:肝阳证组91例,口服颅痛饮为基础方加减治疗,后服养血清脑颗粒；痰浊证组36例,口服半夏白术天麻汤为基础方加减治疗,后使用二陈丸或正天丸；血瘀证组67例,口服桃红四物汤为基础方加减治疗,后使用中成药正天丸.疗程均为16周,停药后12和24周各随访1次,观察治疗前后头痛各项指标.结果 三组头痛发作天数治疗后4周、治疗后16周的组间差异有统计学意义(P=0.038和P=0.012)；三组发作次数只有治疗后16周的组间差异有统计学意义(P=0.044)；总持续时间治疗后4周、治疗后16周的组间差异有统计学意义(P=0.034和P=0.005);三组在中医证候疗效方面的有效率分别为84.62％、80.00％和88.33％,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 肝阳证以颅痛饮为基础方、痰浊证以半夏白术天麻汤为基础方、血瘀证以桃红四物汤为基础方加减治疗均能明显改善偏头痛患者的临床症状,并起到一定的预防治疗作用.
作者：谢炜；洪雨；范穗强；孟春想；梁一超；张宝玲 刊期： 2012年第03期
目的 构建大树突状细胞(hDCs)信号传导通路抑制因子1(SOCS1)基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体.方法 根据人树突状细胞SOCS1基因(NM-0037),筛选出一个靶序列,设计并合成包含正反义靶序列的互补单链寡核苷酸,与经BamH和Xho酶切后的慢病毒载体质粒pRNA-Lenti-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)(含U6启动子和EGFP)连接产生pRNA-Lenti-SOCS1-EGFP慢病毒重组质粒,与慢病毒包装混合物共转染293T细胞,包装产生慢病毒,收集病毒上清,采取系列稀释法测定慢病毒滴度.然后转染hDCs,通过荧光显微镜观察细胞转染情况,利用荧光实时定量PCR和Western blot检测干扰组、阴性对照组、空白对照组SOCS1的表达情况.结果 将目的序列成功连接到载体上,并经测序分析证实载体构建成功.荧光实时定量PCR及Western blot检测显示慢病毒重组质粒感染hDCs后,与空白对照组及阴性对照组比较,siRNA组mRNA和SOCS1蛋白的表达量显著降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 构建的pRNA-Lenti-SOCS1-EGFP慢病毒载体可有效地抑制hDCs的SOCS1的表达,为进一步研究DCs增强抗肿瘤免疫应答效应奠定基础.
作者：涂微；阮健；罗荣城；吕成伟 刊期： 2012年第03期
目的 制备肠出血型大肠埃希菌(EHEC) O157:H7 EspF蛋白多克隆抗体并初步纯化.方法 生物信息学方法分析EHEC O157:H7 EspF蛋白的柔韧性、亲水性、表面可能性及抗原表位,选取1条由15个氨基酸残基组成的多肽为半抗原,在其C端偶联钥孔血蓝蛋白(KLH),免疫新西兰大白兔制备抗血清.ELISA测定抗血清效价,免疫印迹法鉴定其特异性,辛酸-硫酸铵法初步纯化抗血清,SDS-PAGE检测抗体纯度.结果 选择EspF蛋白抗原指数高的肽段72-TPSRPAPPPPTSGQA- 86 (0.506)为半抗原,合成抗原多肽经高效液相色谱鉴定,纯度为95.78％,经质谱分析其分子量为1 563.76 Mr,与目的多肽分子量一致；加强免疫3次后,EHEC O157:H7 EspF蛋白的抗血清效价达1∶2048 000;该血清对EHEC O157:H7野生株和espF突变株(△espF)的EspF蛋白均有特异性,并经辛酸-硫酸铵法获得一定纯度的抗体.结论 成功地制备了效价高、特异性强的EHEC O157:H7 EspF蛋白多克隆抗体.
作者：周莹；赵素慧；韦耀；王春晖；张其威；万成松 刊期： 2012年第03期
目的 研究嘌呤受体P2x7在小胶质细胞炎症反应中的作用.方法 通过分子克隆的方法构建pCDNA3.1-P2x7重组质粒,构建成功后经测序确认质粒序列无误,通过Lipo2000转染小胶质细胞株BV-2细胞,采用PCR方法测定BV-2细胞内P2x7的表达,Western blot法测定P2x7和Cox-2的蛋白表达.结果 细胞经重组质粒转染成功后,pCDNA3.1-P2x7组P2x7和Cox-2蛋白表达水平分别为(4.21±0.13)％和(2.60±0.05)％,高于pCDNA3.1组的(2.61±0.05)％和(1.62±0.04)％,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 通过过表达P2x7受体,能引起小胶质细胞的激活,提示可进一步引发炎症反应.
作者：王珏；唐亚梅；周俊宜 刊期： 2012年第03期
目的 研究人用狂犬病纯化疫苗(RV)对妊娠期Th 1/Th2类细胞因子谱的影响.方法 对所有可疑狂犬病毒暴露者进行RV的全程接种,在接种RV的第0、14、45天时采血并分离外周血单个核细胞与RV进行培养,采用ELISA法检测抗狂犬病病毒抗体,体外培养检测淋巴细胞增殖能力,CBA法检测细胞培养上清液中Th1类细胞因子:干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-2(IL-2)以及Th2类细胞因子:IL-4、IL-5、IL-10的水平.结果 17例暴露者于RV全程注射后17 d(第45天)抗体检测阳性；RV刺激后,暴露者第45天淋巴细胞增殖能力明显高于第0天(P＜0.05)；当RV刺激后,暴露组第14天、第45天产生IL-2、IL-4、IL-5的含量显著高于未刺激组及暴露组第0天水平(P＜0.05).结论 妊娠期注射RV在刺激机体产生体液免疫的同时,可以有效地诱导Th1/Th2类细胞因子的产生.
作者：孟瑞琳；谭小华；黄琼；刘芳兰；王凤岩 刊期： 2012年第03期
目的 探讨深圳市体检人群不同性别、年龄组代谢综合症(MS)诊断及其相关危险因素流行病学分布特点.方法 按照2004年中华医学会推荐诊断标准,对收集到的8 884名体检人员的体重、身高、血压、空腹血糖及血脂进行不同性别、年龄组MS诊断及其相关危险因素流行病学分布特点分析.结果 MS患病人数1 412,总患病率为15.89％,其中男性患病率为19.98％,女性患病率为11.52％,患病率在50岁之前,男性明显高于女性,61岁以后女性高于男性,差异均有统计学意义(P＜0.05).高血压患病率男女分别为21.90％、15.17％,高空腹血糖患病率男女分别为7.10％、4.73％,高甘油三酯(TG)患病率男女分别为44.32％、22.10％,高BMI患病率男女分别为39.07％、18.32％,均为男性高于女性,差异有统计学意义(P＜0.05).高甘油三酯血症、肥胖患病率高;各代谢危险因素间有相关性(P＜0.001).结论 深圳市体检人群MS患病率高,特别是青年男性、老年女性,主要危险因素为高甘油三酯血症、肥胖.
作者：王红卫；蔡永江；刘颜；黄志平；朱青云；曹菊秀；朱翠凤 刊期： 2012年第03期
目的 了解安溪县2010年手足口病的疫情流行特征,为制定有效防控策略和应对措施提供依据.方法 利用《疾病监测信息报告管理系统》监测报告卡信息,用SPSS18.0软件包进行统计分析.结果 2010年全县报告手足口病283例,报告发病率为25.87/10万,无重症病例和死亡病例,聚集性病例1起.病例报告多的是市级医疗机构,占48.1％.从发病到诊断间隔时间中位数为2.46 d.疫情呈散发趋势,构成比以龙涓(13.78％)和官桥(7.77％)较高,发病率以福田(110.10/10万)和桃舟(58.08/10万)较高,兰田构成比(0.4％)和发病率(3.83/10万)均低.发病率男女性别比例为2.41∶1,0～3岁高发(84.45％),以散居儿童(89.00％)为主.每个月均有病例报告,11和12月发病少,9月多,全年以4-5月和8-9月为发病高峰,呈双峰分布.结论 应提高基层医疗单位对手足口病的诊治能力和群众防病及就医意识,加强重点地区和重点人群的防控.
作者：吴炳疆 刊期： 2012年第03期
目的 观察加巴喷丁复合吗啡预防性镇痛对大鼠慢性压迫坐骨神经(CCI)后导致的机械缩足阈变化以及脊髓背角肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响.方法 随机选择重量(180±20)g的成年雄性SD大鼠24只,分为假手术组(S组)、模型组(M组)、预防性镇痛组(P组)和常规镇痛组(N组).观察不同方式给药的模型组和对照组大鼠的行为学变化.术后10 d分离脊髓通过免疫组化检测TNF-α水平的变化.结果 术前各组大鼠机械痛阈差异无统计学意义,与M组相比,手术后各时段S、P、N组都存在不同程度的改变,差异均有统计学意义(P＜0.05)；P、N组TNF-α的积分光密度均值(IOD)水平分别为(0.2185±0.01980)、(0.2301±0.01386),与M组的(0.2902±0.01325)比较明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 加巴喷丁复合吗啡对大鼠采用预防性镇痛有较好的效果,可显著降低CCI后导致的机械痛阈,降低TNF-α在脊髓背角的表达.
作者：张晓晨；刘红；万朝权；朱燕燕；杨幸怡；阳桂香；成建定；李朝晖 刊期： 2012年第03期
目的 评价胸腔镜手术患者围术期应用氟比洛芬酯复合舒芬太尼静脉镇痛联合肋间神经阻滞的多模式镇痛效果和不良反应.方法 40例胸腔镜手术病人随机分成多模式组(A组)和传统组(B组),每组各20例.A组于麻醉诱导前连接镇痛泵行PCIA,术中持续输注2 ml/h,并于切皮前进行一次罗哌卡因肋间神经阻滞；B组于术毕连接镇痛泵行PCIA.观察两组的术后镇痛效果和不良反应.结果 与B组比较,A组术后48 h内各时点静止及咳嗽状态时的VAS评分明显下降(P＜0.05)；A组48 h舒芬太尼消耗量、PCA总按压次数及总有效按压次数分别为(105.13±1.78) μg、(5.35±2.06)和(3.82±2.17),均较B组的(120.45±1.34) μg、(12.39±2.25)和(9.67±1.83)明显下降,差异有统计学意义(P＜0.05)；A组恶心呕吐发生率亦较B组低(P＜0.05).结论 胸腔镜手术实行围术期多模式镇痛的效果优于传统术后静脉镇痛方法,其不良反应发生率亦较低.
作者：高涛；赖学文；莫惠飞；杨艳芳 刊期： 2012年第03期
目的 通过对广州地区登革热媒介蚊虫白纹伊蚊携带登革病毒情况的监测,探讨传播媒介对该地区登革热流行特征的影响.方法 采集广州市各区新旧疫点附近的白纹伊蚊幼虫及成蚊,提取蚊虫总RNA,用登革病毒特异引物经实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)进行病毒核酸检测.结果 2008年以来共检测白纹伊蚊标本658批,合计12 348只,平均每批检测18.8只蚊虫,未检测出登革病毒核酸.结论 广州地区白纹伊蚊自然种群携带登革病毒水平较低.
作者：江毅民；王玉林；严子锵；胡志刚；李成玲；杨智聪 刊期： 2012年第03期
霍乱是由霍乱弧菌引起的急性肠道传染病,系国际检疫传染病,也是我国法定管理的甲类传染病[1].霍乱疫情主要发生在沿海地区,多因生食或食用加工不彻底的海产品引起[2],现报告因食用田螺感染霍乱的病例1例.1病例摘要孙某,女,53岁,天津市蓟县杨津庄镇大保安镇村农民.2010年7月30日凌晨1时,孙某出现剧烈腹泻症状,米泔样粪便,至凌晨5时30分腹泻10余次,伴有呕吐.
作者：司福德；郝俊伟；张磊 刊期： 2012年第03期
目的 探讨敏感型心肌钙蛋白T( hs-cTnT)对早期诊断急性心肌梗死(AMI)的临床应用价值.方法 应用发光免疫法分别测定67例AMI患者和58例非AMI患者,同一份血清标本作标准型心肌钙蛋白I(cTnI)和hs-cTnT检测.结果 标准型cTnI检测AMI患者的敏感度和特异性分别为68.7％和53.4％,hs-cTnT为74.6％和51.7％.hs-cTnT检测的接受者操作特征(ROC)曲线下面积(AUC)和诊断灵敏度分别为0.659和70.2％,均高于标准型cTnI检测的0.639和59.7％；标准型cTnI检测的佳cutoff值为0.035μg/L,hs-cTnT检测为0.0125 μg/L.结论 应用hs-cTnT早期诊断AMI的准确性和灵敏度优于标准型cTnI的检测.
作者：黄小媛；廖军；汤勇才 刊期： 2012年第03期
目的 探讨能量限制对环磷酰胺处理大鼠卵巢的保护作用.方法 将48只10周龄大鼠随机分为对照组、能量限制组、环磷酰胺组、能量限制加环磷酰胺组.观察各组动物的动情周期,实验结束时称取卵巢重量,并进行卵巢组织形态学观察及卵泡计数,测定血清雌二醇、促黄体生成素、促卵泡生成激素评估卵巢储备功能.结果 经环磷酰胺处理的大鼠出现精神萎靡、体重下降、动情周期逐渐消失,卵巢体积缩小,颗粒细胞变性、坏死,各期卵泡数均明显减少,闭锁卵泡数增加(P＜0.01).能量限制组大鼠卵巢的原始卵泡数比对照组明显增多(P＜0.01),窦状卵泡数减少(P＜0.01).能量限制加环磷酰胺组的原始卵泡和初级卵泡数比环磷酰胺组明显增多(P＜0.01),且卵巢组织受损程度较单用环磷酰胺轻.环磷酰胺处理组大鼠血清雌二醇显著低于对照组和能量限制组,促黄体生成素和促卵泡生成素水平则显著高于对照组和能量限制组(P＜0.01).结论 能量限制模型可以抑制原始卵泡的的转化使其数量明显增多,并可以适度减轻化疗造成的结构与功能损伤,使卵巢保留有一定储备功能.
作者：向延芳；傅玉才；许锦阶；栗丽；林旋豪；陈晓纯；罗丽莉 刊期： 2012年第03期
目的 探讨中药复方镇眩汤治疗梅尼埃病的机制.方法 采用阻塞前庭导水管的传统方法造模,分为镇眩汤高、中、低剂量组,西药组、模型组和假手术组,观察大鼠用药前后听觉诱发电位听觉阈值的变化及大鼠内耳水通道蛋白1表达的影响.结果 模型组与假手术组用药前听阈值分别为(54.21±7.91)和(40.03 ±6.75) dBL,差异有统计学意义(P＜0.05)；用药后镇眩汤高剂量组听阈值为(41.27±6.58) dBL,模型组为(56.31±7.64)dBL,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).与模型组比较,西药组、镇眩汤高剂量组、中剂量组、假手术组水通道蛋白1表达差异均有统计学意义(P＜0.05)；与假手术组比较,低、中剂量组水通道蛋白1差异有统计学意义(P＜0.05),而高剂量组与西药组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 镇眩汤对大鼠内耳水通道蛋白1的调节作用可能是治疗梅尼埃病的机制之一.
作者：陈晓明；陈宝田；葛鑫宇 刊期： 2012年第03期
目的 了解深圳市宝安区学校、幼儿园传染病防制工作及卫生保健人员的基本情况,为规范学校传染病防制工作提供依据.方法 采用分层抽样的方法,选取宝安区各类中小学、托幼机构共计80所进行问卷调查.结果 所调查的学校均设有医务室及专职的卫生保健人员,传染病防制的各项制度方面比较健全,各项防控工作均有开展.卫生保健人员中位年龄33.7岁;男女性别比为1∶7.33;学历构成以大专(44％)和中专/高中(44％)为主；职称多为无职称(42.7％)和初级职称(40％)；从事卫生防病工作平均年限为2.36年；50.7％的人员认为目前的工作超负荷；仅24％的人员对目前的收入水平满意.结论 深圳市宝安区学校传染病防治工作管理水平有待提高,卫生保健人员性另 、职称、学历等结构不合理,政府部门应加强人员的技能培训,切实提高人员的收入,以优化和稳定卫生保健队伍.
作者：陈兵；赵萍；吴泰顺；马智超；陈亿雄；周小涛；任海燕 刊期： 2012年第03期
热带医学杂志
主管:广东省科学技术协会
主办：广东省寄生虫学会 中华预防医学会
