学术投稿

抗伏马菌素B1单克隆抗体的制备及鉴定

陈建玲;李文学;董志宁;陈雯;朱伟

关键词:伏马菌素B1, 杂交瘤细胞株, 单克隆抗体
摘要:目的 建立抗伏马菌素B1(FB1)的单克隆杂交瘤细胞株,制备抗FB1的单克隆抗体(McAb).方法 采用FB1-KLH偶联物小剂量长周期免疫BALB/c小鼠后,采用细胞融合方法获得分泌抗FB1的杂交瘤细胞株,采用多次亚克隆的方法建立了4株稳定分泌抗FB1抗体的杂交瘤细胞株.腹水诱生法获得大量McAb,采用抗体亚类测定试剂盒鉴定抗体的亚类,SDS-PAGE测定抗体分子量,McAb的特异性和灵敏度用间接竞争抑制ELISA.结果 免疫小鼠血清检测结果显示经过5次免疫后血清的效价稳定在1×10-6,经过4次亚克隆后建立4株稳定分泌抗FB1抗体的杂交瘤细胞株,获得腹水,纯化抗体,抗体亚类属于IgG2a类,轻链为κ轻链和重链的相对分子质量分别是55 000和32 000,ELISA检测抗体特异性显示可与FB1发生特异性反应,采用此抗体建立间接竞争抑制ELISA方法的线性范围在2~500 ng/ml.结论 制备了特异性和灵敏度较高的抗FB1单克隆抗体,为建立伏马菌素免疫学检测方法打下良好基础.
热带医学杂志相关文献
  • 流动人口肺结核患者跨区域管理综合干预措施成效分析

    目的 评价综合干预措施在流动人口肺结核患者跨区域管理中的作用和效果,为今后相关政策的制定提供科学依据.方法 对比分析实施综合干预措施前(2007年10月至2009年9月)和实施综合干预措施后(2009年10月至2011年9月)转出患者的主动告知率、到位率、代管率和完成治疗率,并通过深入访谈方式了解患者未到位治疗原因和转入地结防机构拒绝代管的原因.结果 综合干预措施实施后,提前告知率、到位率、代管率和完成治疗率均大幅提升,分别从干预前的54.0%、58.1%、27.0%和80.6%提高到干预后的82.6%、79.6%、68.4%和95.6%,差异有统计学意义(P<0.05).结论 流动人口肺结核患者跨区域管理综合干预措施成效显著,值得推广和借鉴.政府仍需对该项工作加强规范管理力度.

    作者:郭旭君;王健;朱闵敏;钟涛;吴国华;卢俊江 刊期: 2012年第09期

  • 2143例0~12岁儿童血清碱性磷酸酶结果探讨

    目的 探讨2143例0~12岁儿童血清碱性磷酸酶(ALP)的结果.方法 应用SIEMENS DimensionRxL Max全自动生化分析仪检测2 143例来本院体检的0~12岁儿童血清ALP,对所得的数据进行统计学处理.结果 儿童血清ALP值在3~岁、9~岁和10~岁组男女性别间差异有统计学意义(P<0.05),其余组男女性别间差异均无统计学意义.儿童血清ALP值在1~岁、10~岁、11~12岁年龄组间差异有统计学意义(P<0.05),而其他年龄组之间差异无统计学意义(P>0.05).结论 0~12岁儿童血清ALP水平显著高于成人.儿童时期血清ALP水平与其年龄和性别相关,应根据不同性别、年龄的儿童相应的发育情况给予不同的参考范围.

    作者:穆迎娟;李忠信;郑小玲 刊期: 2012年第09期

  • 广州市中专生的抑郁状况及影响因素分析

    目的 了解广州市中专生抑郁情绪的发生情况并探讨可能的影响因素,为其心理健康教育及咨询提供依据.方法 应用Zung ’s抑郁自评量表(SDS)及自制抑郁相关因素调查表对224名广州市某职业学校学生进行调查.结果 SDS总标准分为(47.92±9.50),抑郁检出率为42.0%;非条件Logistic回归分析结果为和父母一起居住是抑郁的保护因素(OR=0.259),学习成绩差、家庭经济困难是抑郁的危险因素(OR=1.783、1.896);抑郁状况在1周内感到孤独的天数、是否想过离家出走、是否想过自杀等方面的分布差异均有统计学意义(P<0.05).结论 广州市中专生抑郁较严重,可通过让学生和父母一起居住、改善由学习成绩差及家庭经济困难带来的心理负面影响以降低其抑郁情绪的发生.

    作者:白卢皙;卢次勇;汪慧;洪令瑶;杨杏芬 刊期: 2012年第09期

  • 2009-2011年广州市番禺区水产品污染状况分析

    目的 分析番禺区水产品污染状况,为食品安全监管提供依据.方法 在番禺区各水产交易市场、肉菜综合市场和餐饮单位随机采集鲜活鱼(淡水鱼、海水鱼)、虾蟹、贝类、冰鲜、生吃水产品等水产品进行重金属、抗生素、农药、致病菌、肝吸虫等项目检测.结果 各类水产品均存在镉超标,总超标率为5.2%.虾蟹类镉平均含量为0.516 mg/kg,高含量为14.300 mg/kg;贝类、海水鱼、淡水鱼的镉超标率分别为4.5%、3.7%、2.5%.铅合格率为99.5%,汞和无机砷均未超标.部分水产品中检出四环素、土霉素、金霉素超标,超标率在8.3%~14.3%.各类水产品中六六六、DDT的含量均未超标.冰鲜水产品中甲醛合格率为98.1%.222份水产品中副溶血性弧菌检出率为18.5%(41/222),其中检出率高的是虾蟹类为41.7%,贝类为33.3%.淡水鱼、海水鱼、虾蟹类、贝类等4类水产品的副溶血性弧菌检出率差异有统计学意义(P<0.05),淡水鱼与海水鱼的副溶血性弧菌检出率差异无统计学意义(P>0.05).所有样品均未检出沙门菌和霍乱弧菌.生吃水产品未检出致病菌和肝吸虫.结论 番禺区水产品镉污染情况较为突出,水产品中副溶血性弧菌检出率较高,水产养殖和销售中存在不按规定使用抗生素的情况.

    作者:林东明;吴利楠;麦洁梅;张琪;杨福荣 刊期: 2012年第09期

  • 金黄色葡萄球菌肠毒素A基因的克隆及原核表达

    目的 从分离培养的金黄色葡萄球菌中提取肠毒素A(SEA)基因,亚克隆入表达载体pET-28a(+),诱导融合蛋白的表达,为肠毒素A应用研究奠定基础.方法 根据GenBank中SEA的序列,设计一对特异性引物,以金黄色葡萄球菌DNA为模板PCR扩增SEA,纯化DNA进行BamH Ⅰ 、Xhol Ⅰ双酶切鉴定及测序鉴定,并与做相应酶切的pET-28a(+)连接,转化大肠杆菌BL21,并对质粒进行双酶切鉴定及基因序列分析,用IPTG诱导融合蛋白的表达,His标签单克隆抗体进行免疫印迹验证融合蛋白的表达.结果 以金黄色葡萄球菌DNA为模板,成功扩增了SEA基因,基因大小为774 bp,重组PET-28a(+)-SEA双酶切鉴定可见目的片段,测序结果显示SEA在正确读框中,序列比对分析显示其与相关报道核苷酸序列一致性达99.9%.经IPTG诱导后,SDS-PAGE可见pET-28a(+)-SEA/BL21在相应分子量(约30 000 Mr)条带大量表达,免疫印迹能检测到目的蛋白条带,说明其与His标签融合表达.结论 克隆了金黄色葡萄球菌SEA基因,并成功在大肠杆菌BL21中融合表达,为肠毒素A应用研究奠定了基础.

    作者:周帅;杨镒宇;张妙莲;关锐梨;邓秋连;谢永强;容莉莉;邓力;周珍文 刊期: 2012年第09期

  • 贝氏柯克斯体毒力相关基因芯片对其他胞内寄生菌基因组DNA检测结果分析

    目的 用建立的贝氏柯克斯体毒力相关基因芯片研究贝氏柯克斯体与其致病性相似的专性胞内寄生菌(立克次体、埃立克体、新立克次体),以及与其密切相关的兼性胞内寄生菌(巴通体和肺炎军团菌)等病原菌的毒力基因的差异.方法 贝氏柯克斯体国际标准株-九里株作为本研究参考株,从全基因序列中选取166个毒力及毒力相关基因进行PCR扩增,纯化后的产物制备基因芯片.采用双色荧光标记,待测DNA(即用于分析的各菌株基因组DNA)用Cy5标记,贝氏柯克斯体九里株参照基因组DNA用Cy3标记.芯片杂交后,采用软件GenePix Pro4.1,辅助以软件Excel,进行图片处理和数据分析.结果 芯片的166个基因片段中有165个存在于所有贝氏柯克斯体属的6个分离株中,另一锚定蛋白( AnkI)基因(CBU1213)仅存在于九里株及Grita株;立克次体属的5株菌株均与CBU1631和CBU1125杂交;埃立克体属的3种菌株与新立克次体属的3种菌株均含有基因CBU1125;东方属的1株菌株具有基因CBU1449,而巴通体属的菌株,军团菌和大肠杆菌与基因芯片均无杂交.结论 贝氏柯克斯体种内基因组具有高度保守性,它的专性细胞内寄生菌的毒力相关基因与胞外寄生菌的毒力相关基因有非常显著差异.

    作者:王世斌;赵建忠;董晓根 刊期: 2012年第09期

  • 大剂量甲氨蝶呤治疗儿童急性淋巴细胞白血病血药浓度和不良反应分析

    目的 监测大剂量甲氨蝶呤(HD-MTX)在治疗儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)过程中的血药浓度,分析HD-MTX排泄延迟以及不良反应发生的规律,为临床个体化给药提供依据.方法 采用回顾性分析的方法,收集ALL患儿47例,使用HD-MTX化疗108例次,采用FPIA法动态监测患儿MTX的血药浓度,并观察排泄延迟和不良反应发生的规律.结果 HD-MTX排泄延迟68例,24 h MTX浓度>10.0 μmol/L 5例,48 h MTX浓度>1.0 μmol/L 30例,72 h MTX浓度>0.1 μmol/L 33例,HD-MTX的不良反应包括皮肤黏膜损害、胃肠道反应、肝肾功能损害以及发热和骨髓抑制.结论 MTX的消除过程存在个体差异性,HD-MTX化疗过程需要在血药浓度监测下实施,才能大程度降低不良反应的发生,提高治疗效果.

    作者:黎小妍;徐乐加;曲彩红;符燕;刘珠英 刊期: 2012年第09期

  • 2011年宁波市食用紫贻贝引起的腹泻暴发疫情分析

    目的 掌握宁波市2011年5月腹泻暴发疫情的流行特征,查明危险因素并控制疫情蔓延.方法 描述此次疫情三间分布的流行特征,电话调查暴发期间报告的88例病例和88例对照,对调查结果采用病例对照研究的方法进行危险因素研究和剂量反应关系分析.结果 宁波市2011年5月19~26日出现腹泻暴发疫情,报告病例主要分布在鄞州和海曙区,年龄以20~59岁为主,男女性别比为1.1∶1,病例职业主要为农民和散居儿童;食用綮贻贝是引起此次疫情的危险因素( OR=11.33,95%CI:5.18~25.14),发病随着暴露水平增强而增加(x2=43.81,P<0.01).结论 此次腹泻暴发疫情可能因食用含有贝类毒素的紫贻贝引起,应加强监测,阻止有毒贝类上市是防止此类事件再次发生的有效手段,减少赤潮发生是预防此类疾病的根本措施.

    作者:李晔;杨天池;张胜良 刊期: 2012年第09期

  • 食物中毒中分离的副溶血性弧菌的分子分型研究

    目的 运用脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术研究深圳市罗湖区2005-2007年食物中毒事件中分离获得的49株副溶血性弧菌的分子流行情况.方法 样品采用荧光PCR与传统分离培养同时检测,对分离获得的副溶血性弧菌阳性菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE),BioNumerics软件对图谱进行聚类分析.结果 49株副溶血性弧菌中,有12株不能分型,其余36株副溶血性弧菌分离株大致可分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ3个群,相同血清型的菌株其PFGE型大致相同,同一起食物中毒的菌株间有较高的相关性.结论 罗湖区副溶血性弧菌食物中毒存在流行克隆株,PFGE分子分型技术在食物中毒追踪溯源方面有重要提示性作用.

    作者:卓菲;赵洁玲;文凤兰;杨贵清;龙冬玲 刊期: 2012年第09期

  • 抗广州管圆线虫噬菌体抗体库的构建及初步筛选

    目的 以广州管圆线虫感染的小鼠脾细胞为源,构建抗广州管圆线虫抗体库,并筛选可用于广州管圆线虫病早期诊断的目的抗体.方法 提取感染广州管圆线虫的小鼠脾细胞RNA,并逆转录合成cDNA第一链,PCR扩增出抗体轻链和重链基因,将轻、重链基因先后连接到表达载体pComb3上,转化大肠杆菌XLI-Blue,构建组合文库.用广州管圆线虫排泄分泌抗原(EsAg)作为筛选抗原,进行富集筛选,用ELISA法鉴定阳性克隆.结果 成功构建了小鼠抗广州管圆线虫噬菌体抗体文库,库容为2.32×106,滴度为1.7×1013cfu/ml.筛选到了抗广州管圆线虫排泄分泌抗原特异性抗体克隆5株,用过氧化物酶标记的抗M13抗体进行初步鉴定,具有一定的特异性.结论 构建的抗广州管圆线虫噬菌体抗体库达到了要求,为研制广州管圆线虫金标诊断试剂盒奠定了基础.

    作者:于彦杰;詹希美;陈婧;何蔼;杨萧;李卓雅 刊期: 2012年第09期

  • 2009-2011年重庆市输入性血吸虫病监测及SWOT分析

    目的 分析2009-2011年重庆市输入性血吸虫病的监测结果,为进一步制订和调整血吸虫病防治的目标和重点提供理论依据.方法 应用描述流行病学方法,分析重庆市2009-2011年市级血吸虫病监测点血吸虫病的流行情况;应用SWOT法分析血吸虫病疫情监测工作所处的内部和外部环境,并提出相应的策略和措施.结果 2009-2011年共调查流动人口4 591人,疫区返乡和疫区来渝人员的血清阳性率分别为2.49%(76/3048)和1.04%(16/1 543),差异有统计学意义(x2=11.06,P<0.05);不同年份间疫区返乡人员血清学阳性率比较差异有统计学意义(x2=6.82,P<0.05).不同年份间疫区来渝人员血清学阳性率比较差异有统计学意义(x2=0.85,P>0.05).重庆市血吸虫病疫情监测工作所面临的优势和机会分别为监测内容不断深入和政府支持,所面临的劣势和威胁分别为缺乏长期完善的监测机制和当前严峻的血防形势.结论 重庆市血吸虫病防治工作依然严峻,应更进一步加强血吸虫病防治工作,不断提高血防工作能力.

    作者:李珊珊;陈亚林;吴成果 刊期: 2012年第09期

  • 中药治疗冠心病室性早搏随机对照试验的系统评价

    目的 评价中药治疗冠心病室性早搏的有效性和安全性.方法 根据Cochrane协作网系统评价方法,全面检索中国期刊全文数据库(CNKI,包库)、维普中文期刊数据库(VIP)、万方学术期刊全文数据库、中国生物医学文献服务系统(CBM)、中国生物医学期刊引文数据库(CMCI/CMCC整合版)、以及中医药、中西医结合在线数据库.筛选文献,评价质量,提取资料,并用RevMan5.1软件进行Meta分析.结果 纳入8篇随机对照试验,1 306例患者,所有试验改良Jadad质量评分≥4分.室性期前收缩疗效:参松养心胶囊优于美西律[RR=1.39,95%CI( 1.14,1.69),P=0.001],参松养心胶囊优于心律宁[RR=1.37,95%CI (1.18,1.69),P<0.0001].中医证候疗效:参松养心胶囊优于心律宁[RR=1.34,95%CI( 1.21,1.49),P<0.001],复脉颗粒优于美西律[RR=2.17,95% CI( 1.37,3.43),P=0.001].心电图疗效:参松养心胶囊优于心律宁[RR=1.48,95%CI (1.15,1.90),P=0.002].不良反应共13例,主要为恶心、食欲不振等胃肠道症状,未发现肝、肾功能异常.结论 参松养心胶囊等中药能有效地改善冠心病室性期前收缩,而且安全可靠.

    作者:周凤华;黄志勇;陈磊;娄林洁;贾钰华 刊期: 2012年第09期

  • 人类胚胎体外培养细菌污染12例分析

    目的 分析胚胎体外培养细菌污染的发生原因及预防措施.方法 对中山大学附属第一医院生殖中心10年来胚胎体外培养中发生的12例细菌污染资料进行回顾分析.结果 胚胎体外培养污染中,所有培养液滴有污染5例,部分液滴有污染3例,接触配子及胚胎的液滴污染有4例,培养液滴常见的细菌为大肠埃希菌,污染的来源可能为患者生殖道、手术操作、培养环境及培养操作等.结论 严格操作规程,改善培养环境,可能有效减少人类胚胎体外培养中的细菌污染.

    作者:李俐琳;李穗萍;林雯青;方丛 刊期: 2012年第09期

  • 社区儿童感染乙型肝炎病毒危险因素病例对照研究

    目的 分析儿童乙型肝炎病毒(HBV)感染的危险因素,为降低其感染率提供依据.方法 采取多阶段随机抽样方法抽取1~20岁常住儿童及青少年,对其乙肝疫苗接种情况及主要乙肝感染危险因素等进行问卷调查,并采集静脉血检测乙肝血清学指标,按是否感染HBV分为病例组和对照组,进行单因素分析并拟合多因素Logistic回归模型.结果 366名调查对象中感染HBV 70例,感染率为19.12%;经单因素和多因素分析,密接者HBsAg状况、乙肝疫苗接种史、出生地点是影响儿童感染HBV的危险因素.结论 当前降低HBV感染率的工作重点在于发现HBsAg阳性孕妇并建议其到较好的医院分娩,同时改善卫生状况较差的地区特别是农村儿童乙肝疫苗接种状况.

    作者:杨波;潘捷云;王军 刊期: 2012年第09期

  • 2974例血液内科住院患者医院内感染临床分析

    目的 分析血液内科患者发生医院内感染的原因,控制医院内感染发生率,提高医院管理质量.方法 采用回顾性调查方法对2010年1-12月本院血液内科2 974例住院患者发生医院内感染情况进行统计分析.结果 2974例住院患者中发生医院内感染164例,发生率为5.51%,其中以白血病和再生障碍性贫血病人尤高,感染率分别达9.66%和8.63%.感染部位以呼吸道多见,其构成比为44.51%,尤其在冬春季高发呼吸道感染.感染病原菌以革兰阴性杆菌为主.单因素分析提示医院内感染率随病人年龄、住院时间、侵袭性操作、放化疗和抗生素使用的增加而增高.结论 血液内科是医院内感染发生的高危科室之一,必须加强监管,有效地减少医院内感染的发生.

    作者:谢宁;梁宸源;郭斌;黄义山;廖涛 刊期: 2012年第09期

  • 应用QF-PCR技术对3075例常见染色体非整倍体快速产前诊断结果分析

    目的 对3075例产前诊断标本进行常见染色体非整倍体快速产前诊断的结果进行回顾性分析,探讨分析荧光定量PCR (QF-PCR)在快速产前诊断常见染色体非整倍体中的临床应用价值.方法 采用QF-PCR技术对样本进行21、18、13、X及Y染色体非整倍体诊断,并与核型分析结果进行比较.结果 QF-PCR均正确检出38例21、18、13、X及Y染色体非整倍体,无假阳性结果;同时亦正确检出1例18-三体嵌合样本,但是漏诊了3例涉及21和性染色体异常的嵌合体.对于体外培养失败的样本,可将QF-PCR作为培养失败的样本一个补充.结论 QF-PCR技术能够在48~72 h内快速、准确地诊断21、18、13、X及Y染色体非整倍体,此技术在快速产前诊断常见非整倍体方面具有重要临床实用价值,可弥补核型分析带来的不足,可以大程度地缓解孕妇及其家人的焦虑.

    作者:卢建;杜丽;李海霞;何天文;兰菲菲;郭莉;傅文婷;尹爱华 刊期: 2012年第09期

  • 地表水中肠道病毒检测结果分析

    目的 了解某地地表水中EV71、CoxA16等人肠道病毒的污染情况.方法 选择某地1个污水处理厂和1条河流(上、下游)作为采样对象,每月采集未经处理的污水和上、下游河水各1份,经过滤、浓缩后进行人肠道病毒核酸检测.结果 36份水样中,肠道病毒检出率为52.77%;其中EV71阳性检出率为44.44%,CoxA16阳性检出率为16.66%,其它肠道病毒的检出率亦高达36.11%.夏季地表水体中的肠道病毒阳性率(100.00%)显著高于其它季节(37.03%)(P<0.00).污水中各类肠道病毒的检出率与河水中肠道病毒的检出率差异无统计学意义(P>0.05).地表水中肠道病毒的检出率与当地手足口病、手足口病重症及肠道传染病(甲乙丙类)的发生无相关(P>0.05).结论 地表水中肠道病毒的污染严重,有必要开展进一步的研究了解肠道病毒经水传播的风险.

    作者:谭惠玲;刘春平;刘凤仁;刘渠;李水明;李刚;陈应坚;叶伟雄 刊期: 2012年第09期

  • 探索MAGE-A3和AKAP-4在非小细胞肺癌中的表达及意义

    目的 检测癌睾丸抗原(CTA) MAGE-A3 、AKAP-4在非小细胞肺癌(NSCLC)的表达及意义.方法 应用间接酶免疫组化技术检测MAGE-A3、AKAP-4在45例肺癌组织中的表达情况,分析其与组织类型及淋巴结转移的相关性.结果 45例标本中MAGE-A3、AKAP-4在NSCLC中的敏感度分别为62.2%和73.3%,联合两种抗原可显著提高敏感性,为91.1% (P< 0.05);MAGE-A3 、AKAP-4在鳞癌中的表达率显著高于腺癌,与性别、年龄、淋巴结有无转移不相关.结论 MAGE-A3、AKAP-4是较好的NSCLC辅助诊断指标,联合应用两种蛋白可提高诊断敏感性.

    作者:韩秀晶;林云恩;向波;范婷婷;赵晶晶;廖伟娇 刊期: 2012年第09期

  • 伊蚊传播登革病毒媒介效能的研究进展

    登革热是一种蚊媒传染病,近年来其发病人数不断上升、流行范围不断扩大.传播登革病毒的媒介主要是白纹伊蚊和埃及伊蚊,本文对伊蚊传播登革病毒媒介效能的研究进展进行了综述.

    作者:张浩;王春梅;周元平;陈晓光 刊期: 2012年第09期

  • 广州市天河区1995-2010年艾滋病疫情分析

    目的 分析广州市天河区1995-2010年艾滋病(AIDS)疫情,探讨防控策略.方法 根据艾滋病综合防治信息系统的信息,用描述性流行病学方法对天河区的艾滋病疫情进行分析.结果 天河区1995年报告首例艾滋病病毒(HIV)感染者,至2010年底累计共报告HIV感染者223人,AIDS病人110人,死亡17人.近3年报告数增加较快,共报告201例,占总报告数的60.4%;全区21个街道均有HIV/AIDS报告,以棠下街多,占14.7%(49/333);年龄小3岁,大99岁,以青壮年为主,占91.9%;男性251人,女性82人,性别比为3.07:1;感染途径以异性性传播为主,占36.3%(121/333),男男同性传播占25.2%(84/333),注射毒品占16.2%(54/333);户籍以广东省为主,占53.5%(178/333).结论 天河区艾滋病报告数近3年呈快速增加,性传播为主要传播途径.

    作者:文建华;张宏;吴莉萍;朱琳;陈武;卢洁莹 刊期: 2012年第09期

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主管:广东省科学技术协会

主办:广东省寄生虫学会 中华预防医学会